探究家兔的有机磷磷酸酯类中毒和解救实验

探究家兔的有机磷磷酸酯类中毒和解救实验

周远利,罗进康,王大英,张楚渝,季雨

(贵阳医学院临床2010级F班第二实验室第6组，贵州贵阳 550004)

摘要：目的1．观察实验动物在有机磷酸酯类中毒时的症状。2．根据阿托品、解磷定对有机磷酸酯类中毒的解救效果，分析两药的解毒原理。方法选用一只健康家兔，先观察记录正常家兔的呼吸频率、瞳孔大小、唾液分泌、大小便失禁、肌张力以及肌震颤情况，注射一定量的敌敌畏后，对比上述正常的指标以便具体了解中毒症状；然后给家兔静脉注射一定量阿托品进行解救，并观察记录如上相同的指标，即对比了解阿托品的解救效果，过一定时间后，再给家兔注射一定量的碘解磷定，观察记录同样的指标，同样的对比了解碘解磷定的解救效果。结果静脉注射1%的敌敌畏后，家兔的瞳孔缩小，唾液分泌增加，有肌颤，大小便次数增加，显得很烦躁；给予阿托品解救后，中毒情况有所改善，瞳孔明显扩大，唾液分泌减少，仍有肌颤和兴奋的表现；给予碘解磷定后，肌震颤消失。结论：阿托品和碘解磷定对于有机磷酸酯类中毒的症状具有明显改善作用，可用于有机磷农药中毒的解救。

关键词敌敌畏；阿托品；碘解磷定敌敌畏（dichlorvos）又名DDVP，学名O,O-二甲基-O-(2,2-二氯乙烯基)磷酸酯，为难逆性抗胆碱酯酶药，是有机磷杀虫剂的一种，分子式C4H7Cl2O4P。工业产品均为无色至浅棕色液体，纯品沸点74℃（在133.322Pa下）挥发性大，室温下在水中溶解度1%，煤油中溶解度2%～3%，能溶于有机溶剂，易水解，遇碱分解更快。毒性大，急性毒性LD50值：对大白鼠经口为56～80mg/kg，经皮为75～210mg/kg。阿托品（atropine）是从植物颠茄、洋金花或莨菪等提出的生物碱，也可人工合成。天然存在于植物中的左旋莨菪碱很不稳定；在提取过程中经化学处理得到稳定的消旋莨菪碱，即阿托品，其硫酸盐为无色结晶或白色结晶性粉末，易溶于水，为阻断M胆碱受体的抗胆碱药，能解除平滑肌的痉挛(包括解除血管痉挛，改善微血管循环）；抑制腺体分泌；解除迷走神经对心脏的抑制，使心跳加快；散大瞳孔，使眼压升高；兴奋呼吸中枢。用于抢救感染中毒性休克、有机磷农药中毒、缓解内脏绞痛、麻醉前给药及减少支气管粘液分泌等治疗。碘解磷定（Pralidoxime Iodide）无臭，味苦；遇光易变质。在水或热乙醇中溶解，在乙醇中微溶，在乙醇中不溶。熔点220～227℃（分解）。能溶于水（1：20）。水溶液稳定，在碱性溶液中易破坏。有时可引起咽痛及腮腺肿大，注射过速可引起眩晕、视力模糊、恶心、呕吐、心动过缓、严重

者可发生阵挛性抽搐，甚至抑制呼吸中枢，引起呼吸衰竭。在体内迅速被分解而维持时间短故根据病情必须反复给药。在碱性溶液中易水解为氰化物，故忌与碱性药物配伍。粉剂较难溶，溶时可加温（40～50℃）或振摇。应避光贮存。为最早应用的AChE复活药。该药水溶性较低，水溶液不稳定，久置可释放出碘。本品对不同有机磷酸酯类中毒疗效存在差异，如对内吸磷、马拉硫磷和对硫磷中毒疗效较好，对敌百虫、敌敌畏中毒疗效稍差，而对乐果中毒则无效。

前言急性有机磷中毒病例增多，急性有机磷中毒AChE活性及ACh变化的相关性中毒起因和程度各异，临床上暴露出不少问题。一是AChE活性恢复较慢与体征不符，在疗效观察、临床用药，治愈指标上难以量化参考；二是部份中毒患者对阿托品耐受量增加，在酶活性持续低下时易造成用药失控而中毒。急性中毒急性中毒发病时间与毒物品种、剂量和侵入途径密切相关。经皮肤吸收中毒，一般在接触2-6d扣发病，口服毒在10min至2h 内出现症状。一旦中毒症状出现后，病情迅速发展。所以即使的抢救尤为重要。

1．材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物健康家兔，体重

2.3kg，雌雄不限。由贵阳医学院动物培养中心提供。

1.1.2 主要仪器5ml注射器3支（抽取肝素、阿托品和碘解磷定用）、1ml注射器1支（抽取敌敌畏）、5号

针头4个、三通管一个，胶布，木夹

子一个，婴儿秤1台、瞳孔测量尺一把、滤纸、绳子。

1.1.3 主要试剂 1％敌敌畏、0.05％硫酸阿托品、

2.5％碘解磷定、肝素。

1.2 方法

1.2.1实验动物准备选择合适健康家兔，并称重。

1.2.2 实验操作

1.2.2.1 观察指标：呼吸频率、瞳孔大小(mm)、唾液分泌(用湿润4×5cm 滤纸计数)、大小便次数(用湿润4×5cm 滤纸计数) ，肌张力，肌震颤。按上述观察指标，实验前观察动物正常活动情况。

1.2.2.2 将家兔固定，连接三通管建立静脉通道，并注射1ml敌敌畏：先用肝素润洗三通管并将三通管里面注满肝素以备用，再将三通管平行进针插入小兔的耳缘静脉，并用胶布和木夹子固定，然后将准备好的敌敌畏打入三通管并用肝素冲洗，将残留在三通管的敌敌畏全部冲入血液中。按照上述指标，观察并记录中毒症状。

1.2.2.3 给药解救：在中毒症状出现后，瞳孔明显缩小时，立即耳缘静脉注射0.05％硫酸阿托品4ml,观察中毒症状缓解情况，5min后再耳缘静脉注射2.5％碘解磷定4ml/kg,观察中毒症状缓解情况。

2.结果

用药顺序

呼吸频率

瞳孔大

小（mm）

唾液分

泌情况

（张）

大小便失禁

肌张力肌震颤

次／min 左右大（颗）小（张）

用药前117 6 6 0 6 10 正常无1%敌百虫— 3 3 2 13 10 无有0.2%阿托品—7 6 1 ——无有2.5%碘解磷定— 5 5 ————无

3．讨论

有机磷农药(有机磷酸酯类)为难逆性抗胆碱酯酶药，主要用作农业杀虫剂和化学战争毒剂。进入体内后能抑制胆碱酯酶活性，造成Ach在体内大量堆积而产生一系列中毒症状(包括M样、N 样及中枢神经系统症状)。中毒机制[1]：有机磷酸酯类+ACHE→磷酰化ACHE(难逆性结合)→抑制ACHE的活性→ACH大量积聚→中毒症状（M症状如使心血管抑制（包括心率减慢，血管舒张，心传导减慢等）；平滑肌兴奋,收缩力加强（主要表现在胃肠道平滑肌上，使胃肠蠕动加强,造成恶心，呕吐，腹泻，大小便失禁, 还可使泌尿道平滑肌蠕动增加，膀胱逼尿肌收缩，使膀胱最大自主排空压力增加，降低膀胱容积，同时膀胱三角区和外括约肌舒张，导致膀胱排空）；瞳孔缩小；腺体分泌增加等效应。N样症状：神经节兴奋，骨骼肌兴奋，不自主肌束抽搐，震颤。中枢症状：表现为先兴奋，不安，继而出现惊厥，后转为抑制，出现意识模糊，延髓呼吸神经中枢抑制等。解毒机制：①阿托品为M受体阻断药，能迅速解除M样症状[2]，但是对于N样症状与中枢神经样症状的效果较差。②碘解磷定为胆碱酯酶复活药：⑴碘解磷定+磷酰化ACHE→ACHE （恢复活性）+磷酰化碘解磷定（无毒，从尿排出）；⑵碘解磷定+游离的有机磷酸酯类→磷酰化碘解磷定（无毒，从尿排出）。碘解磷定主要缓解的是N样症状和中枢神经症状[3]。由实验结果判断，在给予阿托品进行解救之后，瞳孔大小，唾液分泌情况以及大小便情况都有明显的改善，而肌肉颤动却并没有得到缓解，家兔仍然很兴奋，只有在给予碘解磷定之后，兔子的肌肉震颤有明显改善。因此，在解救有机磷农药中毒的患者时，应将两者合用，效果会更好。

此次实验以失败而告终，家兔因

抢救无效而死亡。由于抢救比较及时，能观察到部分解救缓解情况，但可能

是由于给予阿托品和碘解磷定药量不