梅毒螺旋体抗体检测_灰区_设置的探讨
TP-ELISA法检测梅毒特异性抗体灰区内结果分析
TP-ELISA法检测梅毒特异性抗体灰区内结果分析李亦君;陈雪;蒋瑞心【期刊名称】《中国实用医药》【年(卷),期】2016(011)016【摘要】目的：分析酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测梅毒螺旋体(TP)特异性抗体时,检测数据在灰区范围内的结果。
方法15181份血清标本经ELISA 法筛查梅毒特异性抗体,以临界值(cutoff)±20%为灰区即吸光度/临界值(s/co)在0.8~1.2区间内,0.8~1.0为低值灰区,1.0~1.2为高值灰区,初筛吸光度(OD)值在灰区的标本应用TP明胶颗粒凝集试验(TPPA)法进行确认。
结果15181份标本中有96份标本数值落在灰区内,96份中低值灰区59份,高值灰区37份。
15181份标本最终确认为阳性233份,阳性率为1.53%(233/15181),其中灰区内标本确认阳性25份,占灰区标本的26.04%(25/96),占总阳性标本的10.73%(25/233)；71份确认阴性,占灰区标本的73.96%(71/96)。
灰区内标本进行 TPPA复检25份阳性中,低值灰区8份,占灰区阳性数的32.00%(8/25),高值灰区17份,占灰区阳性数的68.00%(17/25)。
低值灰区 TPPA稀释度为1∶80、1∶160、1∶320、1∶640、1∶1280时标本数分别为3、2、1、0、2份,高值灰区标本数分别为6、4、3、2、2份。
结论 ELISA 法检测TP抗体, OD值处于灰区的,不能单纯以高于cutoff值判定阳性,低于cutoff 值作为判定阴性的标准,应该进行TPPA复检。
%ObjectiveTo analysis detection data in gray zone of treponema pallidum (TP) specific antibody by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA).MethodsELISA was applied to detect TP specific antibody in 15181 serum samples, and cutoff±20% as gray zone. In absorbance/cutoff (s/co) as 0.8~1.2, low value gray zone was0.8~1.0 and high value gray zone was 1.0~1.2. Treponema pallidum particle assay (TPPA) was applied to confirm samples with gray zone optical delnsityin preliminary screening.ResultsThere were totally 96 samples with value in gray zone among 15181 samples. Among the 96 cases, 59 cases were in low value gray zone and 37 cases in high value gray zone. There were 233 confirmed positive cases among 15181 cases, with positive rate as 1.53% (233/15181), including 25 confirmed positive cases in gray zone, accounting for 26.04% (25/96) in gray zone and 10.73% (25/233) in all positive cases, and 71 confirmed negative cases, accounting for 73.96% (71/96) in gray zone. Reexamination by TPPA showed 25 positive cases in gray zone, with 8 cases in low value gray zone, accounting for 32.00% (8/25) in gray zone, and 17 cases in high value gray zone, accounting for 68.00% (17/25) in gray zone. Under TPPA dilution as 1∶80, 1∶160, 1∶320, 1∶640, 1∶1280, sample counts were respectively 3, 2, 1, 0, 2 in low value gray zone and 6, 4, 3, 2, 2 in high value grayzone.ConclusionIn ELISA detection of TP antibody, positive and negative can not be singly determined by gray zone OD value and cutoff value, thus TPPA is necessary in reexamination.【总页数】3页(P10-11,12)【作者】李亦君;陈雪;蒋瑞心【作者单位】101100 北京中医药大学东直门医院东区检验科;101100 北京中医药大学东直门医院东区检验科;101100 北京中医药大学东直门医院东区检验科【正文语种】中文【相关文献】1.化学发光免疫法检测梅毒特异性抗体结果分析 [J], 张迎梅;徐小平;杨玉芹;胡玲2.TP-ELISA法检测老年人梅毒螺旋体抗体特异性分析 [J], 李卓园;李金万3.TP-ELISA、TPPA法检测梅毒抗体的结果分析 [J], 景彩霞;庞秋霞4.应用TP-ELISA(一步法)检测梅毒螺旋体抗体结果分析 [J], 周兆华;王庆丰;顾庆华5.TP-CMIA法与TP-ELISA法检测献血者梅毒螺旋体特异性抗体的效果比较 [J], 祝宇姝因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
梅毒螺旋体特异性抗体检测灰区范围分析
梅毒螺旋体特异性抗体检测灰区范围分析报告阴性结果;Anti-TP S/CO值>9，报告阳性结果。
对Anti-TP S/CO值1～9的患者，再行RPR复检。
RPR阳性时，报告阳性结果;RPR阴性时，采用TPPA进行复检。
对RPR与TPPA检测结果不一致的样本以WB确证实验结果为准。
1.2.2 梅毒實验室确证实验对以上所有462例样本，采用WB确证实验判断最终结果。
结果判读如下：当印迹膜上出现1条及以上相对分子质量为47 000、45 000、17 000或15 000的特异性条带时，结果判断为阳性;当无显色带或仅出现非特异条带时，结果判断为阴性。
所有检测结果均以WB确证实验为金标准。
1.2.3 假阳性比率假阳性率计算按照如下公式，即假阳性率=假阳性人数/金标准阴性人数。
按照CMIA检测梅毒螺旋体特异性抗体S/CO值，划分为1～3、>3～6和>6～9之间3个区间，计算假阳性率。
根据假阳性率的比较，进一步分析S/CO值在>6～7、>7～8和>8～9各区间假阳性率的分布特点。
1.3 统计学方法采用SPSS 18.0软件进行统计分析。
计量资料采用均数±标准差（x±s）表示，计数资料组间比较采用χ2检验，以P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果2.1 梅毒实验室诊断逆向检测流程结果：CMIA检测梅毒螺旋体抗体患者25 190例，Anti-TP S/CO值9患者123例，报告阳性结果。
CMIA检测灰区范围样本462例，其中181例患者确证阳性，281例确证阴性。
综上，阳性患者共计304例，阴性患者24 886例，假阳性281例。
总阳性率为1.21%（304/25 190），假阳性率为1.13%（281/24 886）。
2.2 CMIA检测S/CO值1～3、>3～6和>6～9区间假阳性率比较按照CMIA检测S/CO值1～3、>3～6和>6～9三个区间划分，三组假阳性率比较，差异均有统计学意义（χ2 = 78.41，P 2.3 CMIA检测S/CO值在>6～7、>7～8和>8～9区间假阳性率比较按照CMIA检测S/CO值>6～7、>7～8和>8～9三个区间划分，三组假阳性率比较差异有统计学意义（χ2 = 20.15，P 3 讨论近年来，由于术前和产前筛查的需要，以及性行为导致的梅毒发病率上升趋势等原因，梅毒的实验室检测标本量逐年增加[8]。
梅毒螺旋体抗体检测法原理
梅毒螺旋体抗体检测法原理
梅毒是一种通过性接触传播的疾病，由梅毒螺旋体（Treponema pallidum）引起。
梅毒螺旋体抗体检测法是一种常用的诊断梅毒的
方法，其原理基于检测患者体内产生的抗体来判断是否感染了梅毒
螺旋体。
该检测方法主要分为两种，非特异性试验和特异性试验。
非特
异性试验包括梅毒螺旋体血凝试验（TPPA）和梅毒螺旋体颗粒凝集
试验（MHA-TP），这些试验可以快速筛查出患者是否感染了梅毒螺
旋体。
而特异性试验则包括梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）和梅毒螺旋体荧光抗体试验（FTA-ABS），这些试验可以确
认患者是否真正感染了梅毒螺旋体。
在进行梅毒螺旋体抗体检测时，首先需要采集患者的血液样本，然后将样本与梅毒螺旋体抗体相关的试剂进行反应。
如果患者感染
了梅毒螺旋体，其体内会产生特定的抗体，这些抗体会与试剂中的
抗原结合，形成抗原-抗体复合物。
通过观察这些复合物的形成情况，就可以确定患者是否感染了梅毒螺旋体。
梅毒螺旋体抗体检测法的原理简单而有效，可以帮助医生及时
诊断梅毒感染，从而采取相应的治疗措施。
然而，需要注意的是，梅毒螺旋体抗体检测法也存在一定的假阳性和假阴性情况，因此在进行诊断时需要综合考虑患者的临床症状和检测结果，以确保准确诊断梅毒感染。
总之，梅毒螺旋体抗体检测法是一种重要的梅毒诊断方法，其原理基于检测患者体内产生的抗体来判断是否感染了梅毒螺旋体。
通过该检测方法，可以及时发现患者的感染情况，为患者提供及时有效的治疗。
ELISA检测梅毒螺旋体抗体影响因素探讨
ELISA检测梅毒螺旋体抗体影响因素探讨ELISA检测梅毒螺旋体抗体是1种敏感性高、特异性强、重复性好的实验诊断方法，但在实际操作中的影响因素较多，本站自2009年采用ELISA法检测梅毒螺旋体抗体以来，对试验的影响因素进行了分析，现就比较常见的影响因素作一些探讨。
1 标本的影响因素1.1外源性因素包括标本溶血、标本被细菌污染、标本保存时间过长、标本凝固不全和乳糜血等。
标本溶血对ELISA的影响主要是反应孔对溶血血清中的血红蛋白的非特异性吸附和溶血时细胞内液对血清的稀释作用。
Hb具有类过氧化酶活性，其作用与辣根过氧化物酶类似，如果反应孔非特异吸附：Hb而残留，则可催化底物显色，使本底吸光度值升高甚至造成假阳性。
当标本中抗体浓度与吸光度值呈线性关系时才会因溶血的稀释作用使吸光度值下降；当标本中抗体浓度近临界值时，可能造成假阴性。
标本的污染菌体可能含有内源性辣根过氧化物酶，可使试验出现非特异性显色，使结果出现假阳性。
标本在冰箱中保存过久，血清中IgG可聚合成多聚体，AFP可形成二聚体，在用间接法测定中会导致本底过深，甚至造成假阳性。
冰冻保存的标本反复冻融产生机械剪切力对标本中的蛋白等分子有破坏作用，可引起假阴性结果。
标本凝固不全的血清中含有部分纤维蛋白原，如将其加入微孔中，在ELISA测定过程中仍可以形成肉眼可见的纤维蛋白块，易使结果呈假阳性。
乳糜血中的乳糜微粒会吸附于反应孔壁，可能造成非特异吸附，致使结果出现假阳性。
1.2 内源性因素包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体等。
在类风湿患者及正常人血清中，常含有较高或不同浓度的类风湿因子(RF)，其一般为IgM型，亦有IgG和IgA型，具有与变性IgG产生非特异结合的特点，因为在ELISA测定中，其可与固相上包被的特异抗体IgG以及随后加入的酶标的特异抗体IgG结合，从而出现假阳性结果。
补体在固相酶免疫测定中，来自哺乳动物的固相抗体和酶标二抗均有激活人补体系统的功能。
ELISA_灰区_范围的设定对献血者血液检测安全和血源保护的意义_陈洪生
2 结果（ 表 1 － 2）
表 1 8 284 份献血者标本 ELISA 检测结果统计 （ n，% ）
HBsAg 抗-HCV 抗-HIV 抗-TP 合计
“灰区”总数 25（ 0. 30） 15（ 0. 18） 2（ 0. 02） 18（ 0. 22） 60（ 0. 72）
“灰区”验证阴性数 19（ 0. 23） 12（ 0. 14） 0（ 0. 00） 16（ 0. 19） 47（ 0. 57）
ELISA 法因操作简单、灵敏度高、成本低廉而适用于大 批量血液标本检测［2］，但是它也存在着缺陷，如容易受外部 环境影响出现 假 阳 性 和 假 阴 性，造 成 检 测 的“灰 区”。“灰 区”存在的原因包括 1） 标本因素： 或标本保存时间过长、温 度过高，或标本中含有一些干扰物质，如重度溶血、乳糜、黄 疸、类风湿因子或混有血袋保存液，或标本中的病毒载量水 平较低，处于窗口期、急性感染期、恢复末期，或由于标本中 的某些病毒变异可能会逃避 ELISA 法的序列设计等，都可能 造成对检测的影响； 2） 试剂因素： 各厂家 ELISA 法试剂盒的 灵敏度、包被的基因序列与纯度不同，试剂盒运输、保存条件 不达标，造成对检测的差异或对试剂有效性的影响； 3） 人为 因素： 加样误差、温育时间不够或太长、洗板次数不够或过 多、显色温度不够或过高等等，由于检验操作人员的自身业 务素质、技能水平及组成不同而会对检测产生影响； 4） 环境 因素： 温度、湿度对检测的影响，不同厂家的仪器对检测的影 响，实验室的基础设施及实验条件对检测的影响等。如果不
设定“灰区”范围，可能会造成假阳性或者弱阳性漏检（ 表 1 － 2） ，然而“灰区”范围设定过小仍无法保障血液安全，过大 容易造成血液浪费； 所以“灰区”范围的设定取决于各S / CO≤1 的标本作为“灰区”范围。
酶免法测定中“灰区”的设置
灰OD均值=0.06 S=0.019
阳性标本
OD均值=1.50 S=0.550
0
0.08 0.11
吸光度
灰区设定方法建议
根据自己实验室情况，建立自己实验室的灰区范围。 灰区范围暂定：CUTOFF值±20%。仍然会导致灰区范围测定结果不确定性， 这种情况要结合临床和确证试验。
酶免法检测中“灰区”的设定
孙文鲜
定性测定
只提供两种反应结果的检测方法 阳性/阴性、有或无、 有反应/无反应 定性免疫检验项目敏感性、特异性要求 筛查试验：敏感性＞95% 诊断试验：敏感性和特异性>95% 确认试验：特异性>98%
临界点或值 cut off
概念：在定性试验中，临界点是指检测反应 的某一点，低于此检测反应点的定性检测结 果被判定为阴性，而高于此点则被判定为阳 性。
注1:不精密度的存在使得这一区间内的检测结果并非始终一致。 注2：字母C是浓度的缩写，下标（5,50或95）表示阳性结果的百分率。 注3：C5即仅有5%被检样品可被判定为阳性时的分析物浓度，C95即有95%被检 样品可被判定为阳性时的分析物浓度。
临界点或值 cut off
100%
阳 性 90% 结 80% 果 百 70% 分 60% 比 50%
灰区范围区间计算
按“灰区”范围设定cut off±20%计算： cut of值=NC1+0.1=0.118 OD值灰区范围：0.0944~0.1416 S/CO值灰区范围：
0.0944/0.118~0.1416/0.118=0.8~1.2
40%
30%
20%
10%
00%
C5
CUTOFF C50
00%
10%
酶联免疫吸附法检测梅毒抗体试验灰区结果分析
作者简介：董旭才，男，初级检验师，主要从事免疫学研究。 △ 通讯作者，Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｈｚ３２８＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ。
· ６００ ·
国际检验医学杂志２０１４年３月第３５卷第５期 Ｉｎｔ Ｊ Ｌａｂ Ｍｅｄ，Ｍａｒｃｈ ２０１４，Ｖｏｌ．３５，Ｎｏ．５
· ５９８ ·
国际检验医学杂志２０１４年３月第３５卷第５期 Ｉｎｔ Ｊ Ｌａｂ Ｍｅｄ，Ｍａｒｃｈ ２０１４，Ｖｏｌ．３５，Ｎｏ．５
·检验技术与方法·
酶联免疫吸附法检测梅毒抗体试验灰区结果分析
董 旭 才 ，刘 昕 阳 ，张 婧 ，王 蔓 ，李 鸾 ，张 惠 中 △ （陕西省西安市唐都医院检验科，陕西西安 ７１００３８）
毒螺旋体明胶凝集试验（ＴＰＰＡ）进行验证。按疾病及年龄段分组，统计各组抗梅毒抗 体 灰 区 率。 结 果 ５０ ２８８ 例 血 清 样 本，经 过
ＴＰ－ＥＬＩＳＡ 法初筛灰区结果为６１例。不同年龄段造成的灰区率６１岁以上 年 龄 段 最 高。 结 论 ＴＰ－ＥＬＩＳＡ 检 测 仍 存 在 一 定 的 假
５０ ２８８例血 清 样 本，经 过 ＴＰ－ＥＬＩＳＡ 法 初 筛 灰 区 结 果 为 ６１例。６１例不同的疾病及年龄 段 的 灰 区 率 见 表 １、２。 其 中 被 ＴＰＰＡ 确认为阳性的标本有 ２ 例，占 ４．９％ （２／６１）。 这 两 例 均 出现玫瑰斑疹，为２期梅毒。２例灰区结果 ＲＰＲ 及 ＴＰ－ＥＬＩＳＡ 稀释结 果 见 表 ３（见 《国 际 检 验 医 学 杂 志 》网 站 主 页 “论 文 附
Ｄ－二 聚 体 是 血 浆 交 联 纤 维 蛋 白 降 解 产 物 ，是 纤 维 蛋 白 降 解 产物中最小片段，升高显示血栓存在，Ｌｏｗｅ［４］指出 Ｄ－二聚体是 观察纤溶效果最有价值的指标，较早的文献［５］报 道 Ｌｉａｔｅｓｔ定 量检测 Ｄ－二聚体作为肺栓塞诊断指标，其敏感度为１００％。
酶联免疫四项检测结果灰区与窗口期感染的关系
酶联免疫四项检测结果灰区与窗口期感染的关系陈静;李帮芬;先秀;欧燕萍【摘要】目的探讨酶联免疫吸附试验检测志愿无偿献血标本酶联免疫(简称酶免)四项(乙型肝炎表面抗原、丙型肝炎病毒抗体、人类免疫缺陷病毒抗体及梅毒螺旋体抗体)检测结果灰区与窗口期感染的相关性.方法收集2012年1月至2013年9月泸州地区志愿无偿献血者的献血标本58 152例,以灰区范围检测值/临界值(S/CO)在0.6~1.0的献血者为研究对象,该人群进一步献血的检验结果为确证试验结果 .结果 2 342例灰区研究对象半年后在血液检测管理系统中查询,有再献血记录的597例,其中合格331例,占55.44%,不合格266例,占44.56%.以合格的331例为对照组,不合格的266例为观察组,2016年12月31日查询,对照组酶免四项检测结果 2例阳性,观察组9例阳性,差异有统计学意义(χ2=8.83,P<0.05).结论酶免四项检测结果灰区范围的血液存在窗口期感染的风险,实验室设置合适的灰区范围是保证安全输血的重要措施,也是防止发生窗口期感染的重要手段之一.%Objective To investigating the relationship between the gray area of four-index detection results(HBsAg,anti-HCV antibody,anti-HIV antibody and anti-TP antibody) by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) and the window period infection in voluntary blood donors.Methods A total of 58 152 blood samples from voluntary blood donors in Luzhou area from January 2012 to September 2013 were collected.The donors with the grey area of S/CO 0.6-1.0 served as the research subjects.The further donation detection results were the confirmatory test.Results A total of 2 342 grey area research subjects were inquired in the blood detection and management system after half a year.Among 597 cases of again blooddonation,331 cases were qualified,accounting for 55.44%,unqualified blood was in 266 cases,accounting for 44.56%;with 331 qualified cases as the control group and 266 unqualified cases as the observation group,the inquiring on December 31,2016 showed that in ELISA 4-item detection,2 cases in the control group were positive and 9 cases in the observation group were positive,the difference was statisticallysignificant(χ2=8.83,P<0.05).Conclusion The blood in the grey area of the 4-index detection results by ELISA has a risk of window period infection,and setting a appropriate gray area range in laboratory is an important measure to ensure the safety of blood transfusion,and also one of the most significant means to prevent window period infection.【期刊名称】《检验医学与临床》【年(卷),期】2017(014)017【总页数】3页(P2554-2556)【关键词】灰区;酶免四项;窗口期;确证试验【作者】陈静;李帮芬;先秀;欧燕萍【作者单位】四川省泸州市中心血站检验科 646000;四川省泸州市中心血站检验科 646000;四川省泸州市中心血站检验科 646000;四川省泸州市中心血站检验科646000【正文语种】中文临床输血的重要任务是保证血液输注的安全性。
梅毒螺旋体抗体测定及临床意义
梅毒螺旋体抗体测定及临床意义作者：关园园解丽娜翁立姝来源：《家庭心理医生》2014年第01期摘要：目的：探讨人体血清中梅毒螺旋体抗体检测及临床意义。
方法：收集临床上100例梅毒患者用酶联免疫法进行血清标本检测。
结果：用酶联免疫法检测梅毒螺旋体抗体具有灵敏度高、特异性好。
结论：酶联免疫法检测人血清中梅毒螺旋体抗体。
适用于血液的筛查及临床梅毒螺旋体抗感染的辅助诊断。
关键词：梅毒；酶联免疫法；临床意义Abstract： Objective： To study the detection of human serum Treponema pallidum antibody and its clinical significance. Methods： 100 clinical cases of syphilis patients with enzyme linked immunosorbent assay for serum samples. Results： the detection of Treponema pallidum antibody has the advantages of high sensitivity， good specificity by enzyme linked immunosorbent assay. Conclusion： the detection of human body antibody enzyme linked immunosorbent assay in the serum of syphilis. Auxiliary diagnostic screening for blood and clinical anti infection of Treponema pallidum.Key words： Syphilis； ELISA； Clinical significance【中图分类号】R446.11 【文献标识码】B 【文章编号】1672-8602（2014）01-0201-01梅毒是由梅毒螺旋体引起的慢性、系统性性传播疾病。
梅毒螺旋体特异性抗体检验
窗口期问题
梅毒螺旋体特异性抗体在感染后一段时间内才可检测到，因此存在窗 口期，可能导致漏诊。
抗体检测无法区分既往感染与现症感染
抗体检测只能证明曾经感染过梅毒，无法确定是否为现症感染。
检验方法的局限性
目前使用的检验方法可能无法检测到所有类型的梅毒螺旋体抗体，影 响检测的准确性。
在疗效观察和复发监测中的应用
疗效观察
在治疗过程中定期进行梅毒螺旋 体特异性抗体检验，可观察治疗
效果和病情变化。
复发监测
抗体阳性转阴后再次出现阳性， 提示梅毒复发，需及时采取治疗
措施。
评估预防效果
通过比较预防干预前后抗体阳性 率的变化，可评估预防措施的效
果。
04
检验的限制与展望
检验的限制
假阳性结果
05
结论
对梅毒螺旋体特异性抗体检验的认识
梅毒螺旋体特异性抗体检验是诊断梅毒的重要手段，通过检测人体内是否存在梅毒 螺旋体抗体来判断是否感染梅毒。
该检验具有较高的敏感性和特异性，能够准确反映人体内梅毒螺旋体的存在情况， 为临床诊断和治疗提供依据。
梅毒螺旋体特异性抗体检验在梅毒的早期诊断、治疗效果评估和预后判断等方面具 有重要意义。
抗体滴度与疾病分期
根据抗体滴度可以将梅毒分为早期和 晚期，有助于评估疾病进程和治疗方 案。
03
梅毒螺旋体特异性抗体检验的 应用
在临床诊断中的应用
诊断早期感染
梅毒螺旋体特异性抗体检 验在感染后数周内即可呈 阳性，有助于早期诊断梅 毒感染。
鉴别诊断
对于临床表现不典型或与 其他性传播疾病相似的病 例，梅毒螺旋体特异性抗 体检验有助于鉴别诊断。
梅毒螺旋体特异性抗体检测灰区范围分析
假阳性率为0.020%,三组比较差异有统计学意义(P＜0.05)o结论化学发光法检测梅毒螺旋体特异性抗体，在
拟定灰区范围内，假阳性率随S/CO值升高呈现降低趋势。灰区范围宜设定为S/CO值1~70 ［关键词］化学发光法;梅毒螺旋体抗体;灰区；假阳性率
冲图分类号］R514
［文献标识码］A
［文章编号］1673-7210(2019)06(3)-0151-04
区患者462例(1.83%)。其中S/CO值1-3患者234例，假阳性率为0.74%；S/CO值＞3~6患者109例，假阳性率 0.27%；S/C0值＞6~9患者119例，假阳性率0.12%,三组比较差异有统计学意义(P＜ 0.05)。选取假阳性率较低的
S/CO值＞6~9组患者比较,S/CO值＞6~7时假阳性率为0.072%,S/CO值＞7~8时假阳性率为0.024%,S/CO值＞8~9时
方法收集解放军总医院第五医学中心2016年2月-2018年5月采用化学发光法检测梅毒螺旋体特异性抗体，
样品吸光度与临界值的比值(S/CO)为1~9(拟定灰区)的患者，以梅毒实验室逆向检测流程及免疫印迹法结果为 金标准，评价化学发光法检测灰区的假阳性率。结果采用化学发光法检测梅毒螺旋体抗体患者25 190例，灰
Analysis of grey area of Treponema pallidum specific antibody detection
ZHA 0 Jing BIAN Chengrong LI Boon WANG Han Clinical Laboratory Medical Center, the Fifth Medical Center, General Hospital of PLA, Military Clinical Laboratory Diagnostic Center for Infectious Diseases, Beijing 100039, China ［Abstract］ Objective To investigate the grey area of Treponema pallidum specific antibody detected by chemilumines cent immunoassay, and improve the validity and accuracy of syphilis laboratory diagnosis. Methods The patients with cut-off (S/CO) value 1 to 9 (assumed grey area) of Treponema pallidum specific antibody detected by chemiluminescent immunoassay from February 2016 to May 2018 were collected from the Fifth Medical Center in General Hospital of PLA. The false positive rate of chemiluminescent immunoassay in grey area was evaluated by using the methods of re verse detection process of syphilis laboratory and the results of immunoblotting as gold standard. Results A total of 25 190 cases were detected by chemiluminescent immunoassay, and 462 cases (1.83%) were observed within grey area. The false positive rate was 0.74% in 234 cases with S/CO values ranging from 1 to 3, 0.27% in 109 patients with S/CO values ranging from greater than 3 to 6, and 0.12% in 119 patients with S/CO values ranging from greater than 6 to 9. There was a significant difference among three groups (P ＜ 0.05). Comparison of S/CO values in greater than 6 to 9 pa tients with lower false positive rate, the false positive rate of S/CO value greater than 6 to 7 was 0.072%, the false posi tive rate of S/CO value greater than 7 to 8 was 0.024%, the false positive rate of S/CO value greater than 8 to 9 was 0.020%, and the difference between three groups was statistically significant (P ＜ 0.05). Conclusion In the assumed grey area, when the specific antibody of Treponema pallidum is detected by chemiluminescent immunoassay, the false positive rate showes a decreasing trend with the increase of S/CO value. The gray area should be set to S/CO value of 1 to 7. ［Key words］ Chemiluminescent immunoassay; Treponema pallidum specific antibody; Grey area; False positive rate
抗-HCV 结果分析及灰区范围设置的探讨
抗-HCV 结果分析及灰区范围设置的探讨闵少菊;刘念;赵强;谭玉洁【摘要】Objective Analyse the results of hepatitis C virus antibody (HCV‐Ab)screening by ELISA ,and discuss the necessity of setting gray zone range of ELISA .Methods A retrospective analysis was made on HCV‐Ab screening results of 34 942 cases ,and then compared the relationship between HCV‐Ab and HCV‐RNA ,clinical con‐firmed hepatitis C .Finally ,in order to explore the necessity of setting laboratory gray zone range by ELISA ,we col‐lected the samples whose S/CO value w as in the range of0 .4 to 2 .0 ,retested by different manufacturers reagents and detected its HCV‐RNA .Results HCV‐Ab positive screening rate was 0 .61% and the highest rate was in the group of 31 to 50 years old;the rate of men was higher than women′s an d the difference was statisticallysignificant(P<0 .05) .When the sample′s S/CO≥10 .0 ,there was high degree of compliance between HCV‐Ab and HCV‐RNA de‐tection ,simultaneously ;the same results arose between HCV‐Ab and clinical confirmed hepatitis C when the sample′s S/CO≥3 .8 .Gray zone sample detection rate was 0 .38% ,and the retested rate was still 0 .20% and 0 .05% by two reagents and double holes detection .Conclusion In different regions ,gender and age ,there are differences HCV‐Ab positive screeni ng rate;when they use ELISA method to test sample′s S/CO value is greater ,the detection rate of HCV‐RNA is higher ,HCV‐Ab positive result and clinical confirmed hepatitis C are more conform .When the samples ofHCV‐Ab screening result falls in the gray zo ne range ,we should retest them and detect their RNA ,in order to re‐duce laboratory missed or false positive generation .%目的：分析酶联免疫吸附试验（ELISA ）筛查丙型肝炎病毒抗体（抗‐HCV ）结果，探讨实验室 ELISA中灰区范围设置的必要性。
酶联免疫吸附法检测梅毒抗体试验灰
医学食疗与健康 2022年9月上第20卷第25期·影像学及诊断检验·酶联免疫吸附法检测梅毒抗体试验灰区结果分析和 灰区范围设置的探讨王书华（南京市溧水区人民医院检验科，江苏 南京 211200）【摘要】目的：探讨ELISA检测梅毒抗体灰区范围设置对灰区合理设置及提高ELISA诊断符合率的意义。
方法：设置ELISA灰区范围并取中位数设为低值灰区和高值灰区，观察不同灰区值范围内梅毒抗体阳性检出率。
结果：灰区范围0.8＜S/CO＜1.2区间内标本双试剂反应性率低于0.6＜S/CO＜1.0区间内标本双试剂反应率，差异比较有统计学意义（P＜0.05）；高值灰区样本阳性检出率明显高于低值灰区样本阳性检出率，差异比较有统计学意义。
结论：设置灰区有助于提高诊断效果，采用联合方法检测灰区区间样本能有效降低漏诊率和误诊率，对梅毒早期明确诊断及治疗具有重要意义。
【关键词】梅毒抗体；梅毒螺旋体；灰区范围；高值灰区；低值灰区【中图分类号】R446.61 【文献标识码】A 【文章编号】2096-5249（2022）25-0138-04梅毒为临床常见慢性系统性性传播疾病，由梅毒螺旋体感染所引起，依据传播途径不同可分为获得性梅毒和胎传梅毒两种，有隐性和显性之分，其中以获得性显性梅毒最为常见，依病变进程不同分早期（Ⅰ～Ⅱ期）和晚期（Ⅲ期）两种。
青霉素类抗菌药物是现阶段临床治疗梅毒的首选药物，由于不同分期患者疗程及预后存在差异，故临床对于本病主张早诊断、早治疗[1]。
目前监测梅毒螺旋体感染的血清学方法主要是酶联免疫吸附试验（Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA），对梅毒抗体都有很好的检测能力，试验的灰区结果容易造成假阳性又是引起误诊的主要因素。
对灰区的标本进行进一步的检测，防止出现假阳性，在梅毒早期临床诊断中具有重要意义。
但受检测条件、试剂灵敏性等因素影响，ELISA检测中常有光密度值接近临界值的结果，这些数据就是常说的灰区结果。
ELISA检测TP抗体灰区设置的探讨
ELISA检测TP抗体灰区设置的探讨谭艳;李媛;韩晓芳【期刊名称】《国际检验医学杂志》【年(卷),期】2018(039)005【摘要】目的探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)检测苍白密螺旋体(TP)抗体灰区设置的必要性,设置合理的灰区区间.方法通过研究2016年1-12月内蒙古自治区人民医院检验科ELISA检测TP抗体的标本共87 342例,选取S/CO值在0.5～7.0范围内的样本进行梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)检测,对结果进行统计分析.结果334例TP抗体ELISA初检258例阳性,76例阴性,经TPPA检测后209例阳性,125例阴性,差异有统计学意义(P＜0.05).将334例样本按不同S/CO值范围分为0.5～1.0、＞1.0～2.0、＞2.0～4.0、＞4.0～7.0 4组,4组S/CO值范围的ELISA初检与TPPA检测结果符合率分别为96.05％ (73/76)、56.10％(46/82)、78.13％(50/64)、98.21％(110/112).结论以95％的符合率为标准得出ELISA检测TP S/CO值的灰区范围为＞1.0～4.0.设置合理的灰区,降低检测成本和工作量,有效提高检测结果的准确性.【总页数】3页(P613-615)【作者】谭艳;李媛;韩晓芳【作者单位】内蒙古自治区人民医院检验科,内蒙古呼和浩特010017;内蒙古自治区人民医院检验科,内蒙古呼和浩特010017;内蒙古自治区人民医院检验科,内蒙古呼和浩特010017【正文语种】中文【中图分类】R446.6【相关文献】1.ELISA检测抗-HCV抗体灰区设置的探讨2.探讨ELISA法检测乙型肝炎病毒核心抗体灰区的设置3.TP-ELISA法检测梅毒特异性抗体灰区内结果分析4.献血者ELISA法检测梅毒抗体灰区设置的合理性探讨5.献血者ELISA法检测梅毒抗体灰区设置的合理性探讨因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
ELISA法抗HIV检测设置灰区的意义分析
ELISA法抗HIV检测设置灰区的意义分析黄小娟;仝非;李晓东;辛艳泓【期刊名称】《西北国防医学杂志》【年(卷),期】2018(039)007【摘要】Objective:To explore the necessity of establishing grey zone in the detection of HIV antibody by ELISA, and to provide evidence for clinical blood test.Methods:The relationship between the test results of Western Blottest and Nucleic acid amplification test of179 volunteerdonors′samples which were reactive to anti-HIV reagents (ELISA, grey zone) were statistically analyzed.All the volunteer donors′samples were colle ctted in the Lanzhou blood center of the PLA during 2011-2016.Results:A total of 179 specimens were detected by WB and 1 specimens was uncertainty, the band was gp160, and later follow-up found that the results was positive.37 specimens were detected by NAT and 1 specimens were positive, and the results of these two methods indicate that the positive specimen is not the same blood donor.Conclusion:There are two meanings in establishing grey zone in the detection of HIV antibody by ELISA.On the one hand, it can avoid leakage and reduce the probability of serious social adverseevents caused by the transmission of AIDS through blood transfusion, on the other hand, it also causes the waste of valuable blood resources due to human factors.%目的:探讨ELISA法在无偿献血者HIV抗体检测中设置灰区的必要性, 为临床血液检测提供依据.方法:选择179例ELISA法抗HIV检测灰区阳性的无偿献血标本, 统计学分析献血者的人群特征、WB确证结果和部分标本的NAT 检测结果, 以及3种检测结果之间的关系.结果:ELISA初筛灰区阳性的179例标本, 经WB验证后确认178例为阴性, 1例为不确定, 其条带为gp160, 后期随访结果转为阳性;37例灰区标本通过NAT检测, 发现1例为阳性.两种方法验证为阳性的标本非同一献血者.结论:ELISA法HIV检测灰区阳性一方面可以避免漏检, 降低经输血传播艾滋病而造成严重社会不良事件的概率, 但另一方面, 也可导致血液资源的浪费.【总页数】4页(P476-479)【作者】黄小娟;仝非;李晓东;辛艳泓【作者单位】解放军兰州总医院输血科,甘肃兰州 730050;解放军兰州总医院输血科,甘肃兰州 730050;解放军兰州总医院输血科,甘肃兰州 730050;解放军兰州总医院输血科,甘肃兰州 730050【正文语种】中文【中图分类】R512.9【相关文献】1.ELISA法检测HBsAg的灰区设置思路研究 [J], 黄启强;张子茵;谢炳龙;张津;林思强2.探讨利用测量不确定度评估ELISA法检测抗HEV-IgM实验中灰区设置的适用性[J], 杨宇生3.ELISA法检测抗-HIV灰区设置的探讨 [J], 王桂喜;汪道法4.献血者ELISA法检测梅毒抗体灰区设置的合理性探讨 [J], 王玲玲; 朱传凤; 陆荣; 王凯5.献血者ELISA法检测梅毒抗体灰区设置的合理性探讨 [J], 王玲玲;朱传凤;陆荣;王凯因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
如何正确判读免疫检测灰区探讨
如何正确判读免疫检测灰区探讨摘要】目的：我们的实验室如何去规范操作酶联免疫检测，是我们实验室应该做的一件大事，不认真对待灰区的出现，就会引发和滋生错误的报告发生。
灰区应该有一个可操作性“规定”，在没有一个统一规定的情况下，实验室就无法做好工作。
方法：通过165296例酶联免疫检测，总结出来灰区出现如何处理的路子-方法。
结果：根据总结的方法完成制度管理和SOP文件，按照执行这些方法和文件，让我们在灰区出现时能够正确处理，近两年来，我们按照科室制定的制度执行操作，没有在灰区的问题上出现误差和失误。
【关键词】灰区；免疫；复检【中图分类号】R446【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）14-0354-02酶联免疫检测，这个定性试验，经过多年的实验室应用，为检验事业的发展、为免疫性疾病患者解决了不可磨灭的功劳，也为医务工作者争得了名誉。
但对于检验工作者，也带来了一些不好解决的难题—灰区[1] [2] [3]问题；酶联免疫检测结果报告，按照相关规定，只能出具阴性或者阳性报告，模棱两可的报告确实难倒了检验工作者。
用ELISA方法检测的各种免疫试验，如乙肝两对半、丙型肝炎、艾滋病、丁肝、戊肝、ANA、甲肝等，都存在着灰区的问题，我们如何在工作上，对这个问题进行分析处理，我们做了这方面的研究分析。
1.对象与方法1.1 研究对象选择2012年至2014年，两年在我院的乙肝表面抗原58997例、丙型肝炎抗体检测49234例、艾滋病抗体检测49076例、丁型肝炎抗体581例、戊型肝炎抗体检测669例、甲型肝炎抗体检测4112例，ANA2597人次，检测样本共计165296例。
1.2 方法其中乙肝两对半是用达安的时间分辨检测的，灰区相对要少些；ANA采用欧蒙酶联免疫检测试剂盒；其他项目全部采用北京万泰的酶联免疫检测试剂盒。
2.结果通过两年的检测，共检测出灰区169例，其中乙型肝炎表面抗原39例，采用的是时间分辨检测，检测灰区值最高0.58，最低0.43。
人类免疫缺陷病毒抗体检测“灰区”设置的探讨
疫 印迹 确 证 为 阳性 ３例 ， 不确 定 １例 。结 论
确证 ， 对 减 少 ＨＩ Ｖ 抗 体 阳性 漏检 具有 重要 的 临床 意 义 。
【 关 键 词 】 ＨＩ Ｖ抗体 ； 灰 区； 酶联 免 疫 吸 附 试验
Ｄ ＯＩ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｉ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ６ ７ ２ ． ９ ４ ５ ５ ． ２ ０ １ ５ ． ２ ２ ． ０ １ ５ 文献标志码 ： Ａ 文章 编 号 ： １ ６ ７ ２ — ９ ４ ５ ５ （ ２ ０ １ ５ ） ２ ２ — ３ ３ ３ ２ — ０ ２
２１ Ｏ ＯＯ ４。 Ｃｈｉ ｎａ）
［ Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ］ Ｏｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｔｏ ｓ ｅ ｔ ｔ ｈ ｅ ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｔ ｉ ｆ ｉ ｃ ａ ｎ ｄ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｌ ｇ ｒ ａ ｙ ａ ｒ ｅ ａ ｒ ａ ｎ ｇ ｅ ｏ ｆ ＨＩ Ｖ ａ ｎ ｔ ｉ ｂ ｏ ｄ ｙ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｂ ｙ ＥＩ Ｉ Ｓ Ａ
ｆ ｏ ｒ ｒ ｅ ｄ ｕ ｃ ｉ ｎ ｇ ｔ ｈ ｅ ｍｉ ｓ ｓ ｅ ｄ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｒ ａ ｔ ｅ ｏ ｆ ＨＩ Ｖ ａ ｎ ｔ ｉ ｂ ｏ ｄ ｙ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ． Ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ Ｔｈ ｉ ｒ ｔ ｙ ｓ ｅ ｒ ｕ ｍ ｓ ｐ ｅ ｃ ｉ ｍｅ ｎ ｓ ｗｉ ｔ ｈ ｔ ｈ ｅ ｃ ｒ ｉ ｔ ｉ ｃ ａ ｌ
【 摘要】 目的 通过 酶 联 免 疫 吸 附试 验 （ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ） 检 测人 类免疫缺 陷病毒 （ ＨＩ Ｖ） 抗体 ， 旨在 设 置 科 学 、 合理的
ＨＩ Ｖ 抗 体 检 测 的“ 灰 区， ， 范围， 减 少 ＨＩ Ｖ 抗 体 阳性 的 漏检 率 。方 法 采 用 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 对 吸 光 度 值 川盘界 值 （ ｓ ／ ｃ ｏ ） 介 于 大于 ０ ． ８ ～＜ １ ． ２的 ３ ０例 临界 值 患者 血 清 进 行 ＨＩ Ｖ 抗 体检 测 ， 以此 Ｓ ／ Ｃ Ｏ值 ， 设置“ 灰 区” 范围； 对于ｓ ／ ｃ ｏ 介 于灰
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应 答 比 率低 ( 尸 形 态 的 C DS
少 (p
=
.
0 《X刃
.
)
;
在 干 扰素抗 病毒 患 者组
,
有 应 答组 患 者
二
.
,
肝 小 叶 内正 常
r
+
细 胞 ) 的 数量 比无应 答组 患 者 高 ( 尸
2
0 028
)
,
而 C5 D 7 细 胞 的 数量 有应 答 组 比 无应 答 组
0
0
)
背景
明确
。
基线 肝穿 状 态及 肝 内
。
特异性
CD
+
T
细胞 的 功 能 与不 同抗病 毒 治疗应 答 的 关 系还 不 是 很
,
方法
我 们 回顾性 分析 了 3 6 例 应 用 干 扰素或 核 昔 类似物抗 病毒 治疗 超过 2 4 周 的慢 性 乙 型 病 毒 性
肝 炎患 者抗 病毒 基线 时肝 穿情 况
, ,
.
,
,
对 比肝 小 叶
一
.
0 7 18
,
尸
=
0
17 2
,
)
。
结论
基线 肝 脏病 理炎症 纤 维 化状 态 和
C DS
十
C DS
,
C5 D7
一
的 双 染 色 可 能对 抗 病 毒 应 答 有 一 定 评 估 价
T
值
这 种 小 叶 内泡 沫 状 的
。
表 达形态
,
可 能是
HBV
特 异性
细胞 功 能耗 竭 的 一 种表 现
。 ,
阳性 细胞 表 达
+
而
在 正 常肝组 织 内没 有这 种表 达 ( 3 例肝 内胆 管结石 术后 正 常肝 组 织 部 分 ) 这 种 带有 泡 沫形 态 C D S
=
在 核 昔类 似 物抗 病 毒 治疗 的
细 胞 ) 表 达组 细 胞 ( 无泡 沫
者
应 答 比 例 比无 泡 沫 ( 正 常 形 态 的 C D S
。
在 核 昔类 似物抗 病 毒毒 患 者组
二
.
t 通 过 肝组 织 M e
a i v
评分分析
=
,
发现 l G 期 的患 者 应
.
S 期 的患 者 应 答 比率 高压 2 答 比率 高 于 2 S 期患 者 ( p 0 0 4 7) G 期患 者 ( 尸 0 0 2 9 ) l C D 5 7 C D S C D C D S 内 与 的 表达 发现 核昔 类 似物组 无应 答患 者 中 7 与 5 的 相关 性 ( r P 二
该3 6 例慢 性 乙 型 肝 炎 患 者抗 病 毒前 均 排 除合 并其 他 疾 病
C
6
个月 内
。
未 用 其他 药 物 清 学 转换
,
。
我们 在肝 穿组 织 中应 用
。
D 和 CD S 5 7 的 免 疫组 化 双 染 方 法
AL T
一
,
及
2 10 9
G
,
z r a
ym
e
一
B
的单 染 方 法
e
抗 病 毒 的 应 答标 准 是 抗病 毒治疗 2 4 周内
通过
EUSA
。 一 , 。 ” ” , 。 一 ,
,
定 性 试 验检 测 梅 毒 螺 旋 体 特 异 性 抗 体 ( T P )
8 例处 于 灰 区 的 血清 样 本 经 T P P 以 ) 进 行 确认 结 果 共有 1 A 试 验 确 认 为 阳 性 的有 7 例 结论 T P E H S A 检 测 仍 存在 一 定 的假 阴 性 设定 合 理 的 灰 区 范 围 对 灰 区 的 样 本进 行 确 认 试 验 对减 少
,
其 性 质还
需 要 进 一 步 研究
.
2
6
梅 毒 螺 旋 体 抗 体检 测
白夷
,
”
灰区
”
设 置 的探 讨
顾 平清
,
高玲娟
1 0004 2
, ” ”
南 京 市 妇 幼 保 健 院 检 验科 目的
法
,
筛
,
探讨 P T 检测 灰 区 的 设 置 方 E S A 以 减 少弱 阳性 标本 漏 检 方 法 用 梅毒 酶 联 免 疫 吸 附 法 ( 仰 IL 3 份 血 清样 本 进 行 初 ) 对 340 1 A 区 的 甲 和 对 于吸 光 度 值 ( ) 介 于 灰 标本 再 进 行 苯胺 红不 加 热 血 清试 验 梅 毒螺 旋体 明 胶 凝 集试 验
(T P
梅 毒螺 旋 体抗 体漏 检具有 重 要 的 临 床 意 义
。
3 33
水平 正 常
的 染色
,
,
HBv D N A
水 平超 过
或者 出 现
抗原的 血
,
其 余 为 无应 答
结果
C DS
+
通过
细胞
,
CD 8
我 们 发 现 在某 些 基线 抗 病毒 的 慢 性 乙 型 肝 炎 患 者
CD S
的 肝 小叶 内 有 泡 沫 样形 态 的
患者 中
,
有 的慢 性 乙 肝 患 者 肝 小 叶 无泡 沫 状 的
.
5
丁玉平
’
,
肝 穿 病 理 及 肝小 叶 内
邹志 强
,
,
DS
龙波
,
,
的 表 达 对抗 病 毒 应 答 的预 测 意 义
许 爱玲
.
于 吉广 ’
.
,
于红 2
,
郑媛
,
,
,
,
郭砚 梅
,
,
宋戈’
,
贾伟
’
,
方 雨晴
,
,
王 贵强
’
1
北 京 大 学第一 医 院 感 染 疾 病 科
HBV
2
山
东省 烟 台 市 传 染病 医 院