植物组织培养知识点归纳
植物组培知识点总结
植物组培知识点总结一、植物组织培养的基本原理1. 植物细胞的再生能力植物细胞具有再生能力,通过植物组织培养技术,可以利用这种再生能力实现植物无性繁殖和遗传改良。
2. 植物生长调节物质的作用通过植物生长调节物质的添加,可以调控植物细胞、组织和器官的生长和分化,实现植物组织培养的目的。
3. 培养基的配制培养基是植物组织培养的基础,其成分的配制对于植物的生长和再生有着重要的作用。
二、植物组织培养的应用1. 植物无性繁殖利用植物组织培养技术,可以实现植物无性繁殖,包括离体茎段培养、愈伤组织培养、悬浮细胞培养等方法。
2. 植物遗传改良通过植物组织培养技术,可以实现植物的遗传改良,包括突变选育、重组DNA技术等方法。
3. 植物真种繁殖利用植物组织培养技术,可以实现植物的真种繁殖,包括种子培养、乳母细胞培养等方法。
4. 植物无菌播种通过植物组织培养技术,可以实现植物的无菌播种,可以提高播种的成活率和生长速度。
5. 植物快速繁殖通过植物组织培养技术,可以实现植物的快速繁殖,可以节省时间和成本,提高繁殖效率。
三、植物组织培养的培养技术1. 植物组织的获取植物组织培养的第一步是获得植物组织,可以通过切取植物茎、叶、根等组织,或者通过离体芽、离体胚等方式获得植物组织。
2. 培养基的配制培养基是植物组织培养的基础,其成分的配制对于植物的生长和再生有着重要的作用,可以根据不同的需要调整培养基的成分。
3. 植物组织的培养条件植物组织培养需要一定的培养条件,包括光照、温度、湿度、氧气等条件,不同植物对培养条件的要求有所不同,需要根据具体情况进行调控。
4. 植物组织的再生在适当的培养条件下,植物组织可以实现再生,包括愈伤组织的形成、植物器官的再生等过程,需要注意再生过程中的微生物污染和植物器官的发育。
5. 植物组织的分化植物组织培养过程中,需要注意植物组织的分化,包括根、茎、叶等植物器官的分化,可以根据需要调控植物组织的分化方向。
植物组织培养复习重点
组培复习材料一、名词解释1、培养基:是离体植物(外植体)赖以生长、分化的基础,是根据植物的需求,人工配制的含有各种营养成分的营养液。
2、液体培养:把细胞或生物体的一部分,置于液体培养基中使其发育,并不断振荡,使之均匀地在悬浊液中进行培养的一种方法。
3、种子培养:是成熟种子和发育不全的未成熟种子的无菌培养。
4、叶培养:从母体植株上将叶组织(包括叶原基在内)切下,放在无菌的人工条件下使其生长发育形成植株的技术。
5、热处理脱毒:在一定范围内,用高温处理可部分或完全钝化植物组织中的某些病毒而不伤害或很少伤害植物本身的脱毒方法。
6、花药培养:是把花粉发育到一定阶段的花药接种到培养基上,来改变花粉的发育程序,使其分裂形成细胞团,进而分化成杯状体,然后再生植株,或形成愈伤组织,由愈伤组织再分化成植株。
7、连续培养:是利用特别的培养容器进行大规模细胞培养的一种培养方式。
(培养过程中,不断注入新鲜培养基,排掉等体积用过的培养基,或者抽取悬浮培养物,使培养物的营养物质得到不断补充,从而保持其恒定体积的培养。
——8、分批培养:指把细胞分散在一定容积的培养基中进行培养,建立单细胞培养物的培养方式。
(细胞生长在固定体积的培养基中,当主要营养物质耗尽时,细胞的分裂和生长即停止。
)二、简答题1、MS培养基特点。
答:MS培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的,其特点是无机盐和离子浓度较高,是较稳定的离子平衡溶液,具有高含量的氮、钾,尤其是硝酸盐用量大,还有一定数量的铵盐,其养分的数量和比例合适,不需要添加更多的有机附加物,就能满足植物组织对矿质营养的要求,加速愈伤组织和培养物的生长,当培养物就不转移时仍可维持其生存。
目前应用最广泛。
2、植物组培生产特点。
答:①和传统的生产方式相比,具有不占耕地、生产不受季节限制而且能够整年连续进行、不受灾害性天气和病虫害影响的特点;②具有人为可控性,可采用更适合于植物生长的“培养基”代替土壤提供养分和生长调节物质;③具有很高的生产效率。
植物组织培养复习资料
植物组织培养复习资料一、名词解释。
(每个3分,共24分)1、植物组织培养:在无菌和人工控制的环境条件下,利用适当的培养基,对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养,使其再生细胞或发育成完整植株的技术。
又称植物离体培养。
2、细胞的全能性:指植物体的任何一个有完整细胞核的活细胞都具有该植物的全套遗传基因和产生完整植株的潜在能力。
3、脱分化:离体培养条件下生长的器官、组织、细胞,经过细胞分裂或不分裂而恢复分生状态,形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞过程。
4、外植体:从活体植物上切取下来,用以进行离体培养的那部分组织或器官。
5、单细胞培养:对分离的到的单个细胞进行培养,诱导其分裂增殖,形成细胞团,再通过细胞分化形成芽、根等器官或胚状体,直至长成完整植株的技术。
6、胚状体:亦称体细胞胚。
指在组培过程中,由植物体细胞所形成的类似于合子胚的结构。
它具有根、茎结构,能够一次性形成再生植株。
7、平板培养:是将悬浮培养的细胞接种到未固化的薄层培养基中,使其与培养基充分配合,再倒入培养皿中进行培养的方法。
8、人工种子:指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽,被包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中,从而形成能发芽出苗的颗粒状。
9、次生代谢产物:指植物生长发育正常运行的非必需的小分子有机化合物,其产生和分布通常有种属、器官、组织以及生长发育时期的特异性。
10、再分化:细胞经过脱分化形成的愈伤组织再次分化,进行器官形成,产丛生芽或胚状体,形成完整植株的过程。
11、无病毒苗:指不含该种植物主要危害病毒的苗木。
二、不定项选择1、培养室里的湿度一般保持在____C_____.A 30~40%;B 50~60%;C 70~80%;D 80~90%2. 下列不属于生长素类的植物激素是____A D____。
A Kt;B IAA;C NAA;D ZT3. 影响培养基凝固程度因素有_______A B C D__.A 琼脂的质量好坏;B 高压灭菌的时间;C 高压灭菌的温度;D 培养基的PH4. 活性炭在组织培养中的作用有_______ABC_。
组培知识点总结
组培知识点总结一、组织培养的定义及原理组织培养是一种无菌条件下,通过营养培养基为载体,结合适当条件使细胞或组织在体外生长、分化的生物技术方法。
它是一种通过控制培养条件(包括培养基成分、温度、湿度、光照等)来调控细胞或组织的生长与分化的技术手段。
组织培养的成功依赖于对培养细胞或组织的营养需求和生长特性有所了解,通过提供适宜的培养条件,促进其生长和分化。
二、组织培养的分类根据培养的细胞或组织的来源,组织培养可以分为植物组培和动物组培两大类。
1.植物组培植物组培是指利用植物的组织、细胞等在无菌条件下进行培养,促进其生长、分化和再生的技术。
植物组培可以分为植物器官培养、胚胎培养、愈伤组织培养、植物细胞悬浮培养等多种类型。
2.动物组培动物组培是指对动物体内的细胞或组织在无菌条件下进行培养,促进其生长、增殖和分化,主要包括动物组织培养、动物细胞培养等。
三、组织培养的应用领域由于组织培养技术具有操作简单、时间短、成本低等优点,因此在植物学、生物学、医学等领域得到了广泛的应用。
1.植物组培的应用(1)植物育种。
利用植物组织培养技术,可以实现无性系的繁殖、筛选和改良。
比如,在农业上可以利用植物组培技术进行无性系育种、快速繁殖、病毒、真菌和细菌病害的抗性的筛选。
(2)植物生物技术。
通过植物组培技术,可以实现植物的再生和转基因的导入,以及对植物的基因编辑等,为植物生物技术的研究和应用提供了重要的手段。
2.动物组培的应用(1)生物医学研究。
通过动物组织培养和动物细胞培养技术,可以进行动物细胞的分离、培养和扩增,从而为生物医学研究提供了重要的研究材料,并在体外实验模型中得到了广泛的应用。
(2)生物药物研发。
利用动物细胞培养的技术,可以实现重组蛋白的大规模生产,为生物制药的研发提供了重要的技术支持。
(3)细胞治疗。
利用动物干细胞和其它动物细胞培养技术,可以实现疾病治疗的干细胞移植和细胞治疗等,为医学临床治疗提供了新的思路和手段。
植物组织培养学复习总结
植物组织培养学复习总结一、名词解释:继代培养:根据培养过程,将从植物体上分离下来的部分进行第一次培养,称初代培养,以后将培养物转移到新的培养基上继续,则统称继代培养。
固体培养:根据培养基物理状态,把加入琼脂使培养基呈固体状态的培养,称固体培养。
液体培养:根据培养基物理状态,不加入琼脂而培养基呈流体状态的培养,称液体培养。
脱分化:由高度分化的植物组织或器官产生愈伤组织的过程,就称为植物细胞的脱分化。
再分化:从愈伤组织再生出小植株的过程被称为再分化。
驯化现象:植物组织经长期继代培养要加入生长调节物质,其后加入少量或不加入生长调节物质就可以生长,这种现象称为“驯化”现象。
衰退现象:除了驯化以外,长期继代培养德望材料也会逐渐衰退,丧失形态发生能力,具体表现在生长不良,再生能力和增殖率下降等。
花粉和花药的培养:是指花粉在培养基上改变其正常发育和机能,不经受精而发生细胞分裂,由单个花粉粒发育成完整植株的技术。
外植体:从植物体上分离下来的用于离体培养的材料。
看护培养法:把单个细胞置于一块活跃生长的愈伤组织(也称看护愈伤组织)上培养,在愈伤组织和培养的细胞之间,用一片滤纸相隔。
离体保存:将组织和细胞培养中的外植体或试管苗贮存在使其抑制生长、缓慢生长或无生长的条件下,达到长期保存的方法就是离体保存。
二、填空题和判断改错题:超净工作台:一般由鼓风机、滤板、操作台、紫外光灯和照明灯部分组成。
室内温度通常要求250C左右。
糖类的作用:在培养基中糖类除了作为碳源和能源外,还具有维持培养基一定渗透压作用。
MS培养基特点:无机盐的浓度高,有加速愈伤组织生长的作用,能满足植物组织对矿质营养的要求。
N6培养基是1974年由我国的朱至清等为水稻等禾谷类作物花药培养而设计。
1971年,Haccius提出胚状体的标准:(1)胚状体具有极性,(2)在组织学上,胚状体微管组织的分布“Y”字形。
生长素是体细胞胚胎发生起重要作用的培养基成分。
植物组织培养
(3)肌醇 又叫环己六醇,在糖类的相互转 化中起重要作用。 使用浓度:一般为lOOmg/L。 作用:适当使用肌醇,能促进愈 伤组织的生长以及胚状体和芽的形 成。对组织和细胞的繁殖、分化有 促进作用,对细胞壁的形成也有作 用。
(4)氨基酸 (almino acide) 作用:蛋白质的组成部分,也是一种有机氮化 合物。是很好的有机氮源,可直接被细胞吸收利用。 种类:最常用的是甘氨酸,其他的如精氨酸、 谷氨酸,谷酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、丙氨酸等 半胱氨酸及多种氨基酸的混合物(水解酪蛋白、水 解乳蛋白)等。
(11)再分化 经脱分化的组织或细胞在一定 的培养条件下可又转变为各种 不同细胞类型的能力。 (12) 分化培养 经过脱分化阶段的外植体(形 成愈伤组织),转移到另一培 养基上分化出芽(或小球茎) 或胚时,则称为分化培养,所 用的培养基为分化培养基。
(13) 增殖培养 已分化芽、小球茎或无性幼胚再继续进行增殖,即
1. 培养条件可人为控制,周年生产
植物组织培养中的植物材料完全是在人为提供的 培养基及小气候环境下生长的,摆脱了大自然中 四季、昼夜气温频繁变化及灾害性气候等外界不 利因素的影响,且条件均一、对植物生长极为有 利。因此植物组织培养不受气候和季节的限制, 可周年进行生产。
2. 生长周期短,繁殖速度快
植物组织培养可根据不同植物、不同器官、不同 组织的不同要求而提供不同的培养条件,满足其 快速生长的要求,缩短培养周期。一般20~30d就 完成一个繁殖周期.每一繁殖周期可增殖几倍到几 十倍,甚至上百倍,植物材料以几何级数增加。
3. 管理方便,可实现工厂化生产
植物组织培养是在人为的提供一定温度、光照、 湿度、营养和植物生长调节剂等条件下进行的, 不受自然界中病、虫、杂草等有害生物危害,生 产微型化、精细化、高度集约化,重复性强,便 于标准化管理和自动化控制,真正实现了种苗的 工厂化生产。与田间栽培、盆栽等相比,省去了 中耕除草、浇水施肥、病虫防治等一系列繁杂劳 动,可大大节省人力、物力及田间种植所需要的 土地。
植物组织培养知识点归纳
植物组织培养知识点归纳一、植物组织培养的概念植物组织培养就是在无菌和人工控制的环境条件下,利用适当的培养基,对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养,使其再生细胞或完整植株的技术。
这就像是给植物细胞来了一场单独的“特训”,让它们在脱离母体的情况下也能茁壮成长呢。
二、植物组织培养的原理这背后的原理是植物细胞的全能性哦。
简单来说,就是每个植物细胞都像是一个潜在的小魔法师,都具备发育成完整植株的能力。
不过呢,在正常情况下,这种能力被抑制了,而我们通过组织培养的手段,就可以把这种能力释放出来。
三、植物组织培养的基本过程1. 外植体的选择与消毒外植体就是我们从植物体上取下来用于培养的部分,可以是叶片、茎段、根尖等。
就像我们挑选参加比赛的选手一样,要选健康、有活力的。
选好之后,还要对它进行消毒,把上面的病菌都除掉,不然就会影响后面的培养啦。
2. 初代培养把消毒后的外植体接种到初代培养基上。
初代培养基里有各种营养成分,像氮、磷、钾这些大量元素,还有铁、锰、锌等微量元素,以及一些植物生长调节剂,就像是给外植体准备的营养大餐。
在这个阶段,外植体会开始分化,可能会长出愈伤组织。
愈伤组织就像是一团白白嫩嫩的小肉球,是一团未分化的薄壁细胞。
3. 继代培养当愈伤组织长到一定大小后,我们要把它转移到新的培养基上,也就是继代培养基。
这个过程就像是给植物宝宝换个更大更好的“房子”,让它有更多的空间和营养继续生长。
在继代培养中,愈伤组织可能会继续分化,形成芽或者根。
4. 生根培养当我们看到有芽长出来后,就可以把它转移到生根培养基上了。
生根培养基里的植物生长调节剂的种类和浓度会有所调整,目的就是让小芽长出健康的根系。
根系就像是植物的脚,有了脚,植物才能稳稳地站在土壤里(这里是培养基里啦)。
5. 移栽驯化当植物在培养基里长出了完整的根系和茎叶后,就可以把它从无菌的环境中移栽到普通的土壤里了。
不过,这个过程可不能太突然,要先让植物适应一下外界的环境,就像我们从空调房突然走到炎热的户外,也需要一点时间适应呢。
植物组织培养知识点总结
堂清日结31、原生质是细胞内生命物质的总称。
原生质层指的是细胞膜和液泡膜以及两层膜之间的细胞质。
去掉细胞壁的植物细胞就是原生质体,所以一个动物细胞就相当于一个原生质团。
2、原生质层的融合过程体现了细胞膜的流动性。
3、植物体细胞融合的实质:原生质体的融合,植物体细胞融合完成的标志:细胞壁的再生。
新细胞壁的产生与细胞内高尔基体相关。
4、植物组织培养中愈伤组织的形成是细胞分裂的结果。
5、植物细胞工程通常所采用的技术手段:植物组织培养技术和植物体细胞杂交技术。
6、植物体细胞杂交的过程:1)酶解法去除细胞壁,获得原生质体2)利用物理或者化学法诱导原生质体的融合3)再生细胞壁,获得杂种细胞。
4)利用植物组织培养技术,通过脱分化和再分化获得杂种植物。
7、微型繁殖技术:也叫快速繁殖技术即快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。
该技术与传统繁殖技术相比,具有:①繁殖速度快;②“高保真”(因为是无性繁殖);③不受自然生长季节的限制(因为在具有一定人工设施的室内生产)等特点。
堂清日结41、作物脱毒材料:分生区细胞作物脱毒方法:进行植物组织培养作物脱毒结果:获得脱毒苗脱毒苗的特点:不会或极少感染病毒。
2、人工种子的组成:胚状体(或不定芽或顶芽或腋芽)+人工薄膜;要获得人工种子,需将离体的器官、组织或细胞培养至再分化阶段。
3、人工种皮中应具有的有效成分:适量的养分、无机盐、有机碳源、农药、抗生素、有益菌等,为了促进胚状体的生长发育,还可以向人工种皮中加入植物生长调节剂。
4、单倍体育种原理:染色体变异方法:花药离体培养采用的技术:植物组织培养技术优点:后代无性状分离、明显缩短育种年限突变体的利用育种原理:突变(基因突变、染色体变异)优点:能够产生新性状植物体细胞杂交育种原理:染色体变异优点:克服远缘杂交不亲和的障碍5、植物组织培养中易获得突变体的原因:培养的细胞一直处于分生的状态,易受培养条件和外界压力(如射线、化学物质等)的影响。
【K12学习】植物组织培养知识点归纳
植物组织培养知识点归纳第一章1、植物组织培养:是指在离体条件下,利用人工培养基对植物的器官、组织、细胞、原生质体等进行培养,使其长成完整植株2、外植体:在植物组织培养中,活体植物上提取下来的、接种在培养基上的无菌细胞、组织、器官等均称为外植体。
3、愈伤组织:指在人工培养基上外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。
4、应用一、农业上的应用1. 种苗快速繁殖 (rapid propagation)2.无病毒苗(virus free)的培养3.在育种上的应用(breeding) 倍性育种,缩短育种年限,杂种优势明显;克服远缘杂交的不亲合性和不孕性;保存种质创造变异二、在遗传学、分子生物学、细胞生物学、组织学、胚胎学、基因工程、生物工程等方面的应用。
用于基因工程技术创造植物新种质。
用于植物生长发育理论研究,包括生理学、病理学、胚胎学和细胞与分子生物学等。
三、利用组织培养材料作为植物生物反应器第二章1、细胞全能性:指任何具有完整的细胞核的植物细胞都拥有形成一个完整植株所必须的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。
2、细胞分化:指导致细胞形成不同结构,引起功能或潜在的发育方式改变的过程。
3、脱分化:指离体条件下生长的细胞、组织或器官逐渐失去原来的结构和功能而恢复分生状态,形成无组织结构细胞团或愈伤组织的过程。
4、再分化:指脱分化的细胞重新恢复分化能力,形成具有特定结构和功能的细胞、组织、器官甚至植株的过程。
5、植物组织培养中常遇到的问题以及解决措施一、污染及防治:1、真菌污染后,如果已形成孢子,则必须经高压灭菌后扔掉。
但若是细菌污染,只要及时发现,将材料上部未感菌的部分剪下转接,材料仍可使用。
2、用抗生素等杀菌药剂的处理,会影响植物材料正常生长。
二、褐变及防止选择合适的外植体合适的培养条件使用抗氧化剂连续转移三、玻璃化问题及其防止增加培养基溶质水平,降低培养基水势;减少培养基含氮化合物用量;增加光照;增加容器通风,进行CO2施肥,对减轻试管苗玻璃化现象有明显作用;降低培养温度,进行变温培养,有助于减轻试管苗玻璃化现象发生;降低培养基细胞分裂素含量,加入适量脱落酸。
植物组织培养复习
植物组织培养复习1、概念:组织培养:利⽤植物离体器官、组织或细胞(包括原⽣质体),在适宜的⼈⼯培养基上和⽆菌条件下进⾏培养,使其⽣长、增殖、进⽽发育形成⼩植株的⽅法。
也称之为离体培养(In vitro culture)。
愈伤组织:原指植物在受伤后,于伤⼝表⾯形成的⼀团薄壁细胞。
在组织培养中,指在⼈⼯培养基上由外植体长出来的⼀团⽆序⽣长的薄壁细胞。
外植体:由活植物体上切取下来的可以⽤于组织培养的组织或器官2、为什么说愈伤组织是最为常见的培养⽅式?原因:⼤部分组织培养经历callus再⽣途径长出植株;callus可以⽤于悬浮培养和原⽣质体培养。
3、组织培养的类型有哪些?a按培养⽅法:固体培养、液体培养、看护培养、微室培养、包埋培养等b按培养过程:初代培养、继代培养4、组织培养在园艺业(农业)上的应⽤有哪些?a倍性育种:花药培养、胚乳培养b突变体筛选:愈伤组织培养c创造新种质:细胞融合d克服胚败育:胚培养e植物性药物和⽣物制品的⽣产5、在组织培养技术的发展中做出巨⼤贡献的⼈。
6、⼀个正规的组织培养实验室应具备哪些基本仪器?有何⽤途?烘箱,冰箱,灭菌锅,超净⼯作台,酸度计,摇床,显微镜,天平,培养箱。
玻璃器⽫,微孔过滤器,细胞计数器,接种⽤具。
7、⼀个正规的组织培养实验室应具备哪些房间?洗涤室(区),制备室(区),灭菌室(区),贮放室(区),操作室(区),培养室(区),观察室(区),药品室(区)8、详细叙述组织培养过程中的基本技术规程洗涤,灭菌,⽆菌操作~9、培养基的类型有哪些?a按性质分:基本培养基,完全培养基b按状态分:固体培养基,液体培养基10、培养基的主要成分有哪些?各有何作⽤?a⽆机营养成分:⼤量元素(氮,磷,钾,钙,镁,硫)微量元素(硼、锰、锌、钼、铜、钴、氯、铁)b有机营养成分:含氮有机物(维⽣素、氨基酸)碳源和能源,植物激素c其他成分:活性炭,琼脂,抗⽣素,缓化剂11、配制培养基的基本步骤及注意事项有哪些?选择,配置(取样,加成分,测PH)12、什么是⼈⼯种⼦?有哪些特点与优点?⼈⼯种⼦:(artificial seeds)亦称体细胞种⼦。
知识点总结:植物细胞工程
植物细胞工程知识点清单一、植物组织培养1、理论基础(原理):细胞全能性2、全能性概念:具有某生物发育所需全部遗传信息的细胞,都具有发育成完整体的潜能。
3、过程:外植体—脱分化—愈伤组织—再分化—丛芽、不定根—新植株4、相关概念及实验注意事项①外植体:离体植物器官、组织、细胞②愈伤组织:高度液泡化,无固定形态的薄壁细胞。
全能性高,分化程度低③外植体消毒:70%酒精30s—无菌水冲洗—次氯酸钠30min—无菌水冲洗④取材:选取形成层部位⑤脱分化:23~26℃,避光⑥再分化:将愈伤组织转接到分化培养基,光照下培养⑦生长素/细胞分裂素:比值高—促进生根;比值低—促进发芽5、植物组织培养概念:在无菌和人工控制条件下,将离体的植物器官,组织,细胞培养在人工配置的培养基上,诱导其产生愈伤组织,丛芽,最终形成完整的植株。
6、地位:是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序。
二、植物体细胞杂交1、植物体细胞杂交概念:将不同种的植物细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新的植物体的过程。
2、过程及注意事项:①去除细胞壁:酶解法(纤维素酶、果胶酶),获得原生质体②原生质体融合方法:物理法(离心、震荡、电刺激);化学法:聚乙二醇③细胞融合成功的标志:杂种细胞再生细胞壁3、融合结果:获得杂种细胞,进而获得杂种植株。
A细胞+B细胞所得杂种植株遗传物质=A+B4、成功例子:番茄—马铃薯;烟草—海岛烟草;胡萝卜—羊角芹;白菜—甘蓝5、优点:克服远缘杂交不亲和障碍6、局限性:不能按照人的要求表达性状三、植物细胞工程应用1、微型繁殖:可以高效快速地实现种苗的大量繁殖(观赏植物,经济林木,无性繁殖作物)2、作物脱毒:采用茎尖等分生区组织培养来除去病毒(因为分生区附近的病毒极少或没有)如:马铃薯;草莓;甘蔗;菠萝、香蕉等经济作物3、人工种子:以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料,经人工薄膜包装得到的种子。
植物组织培养(全)
胚培养是器官培养的一种。选用的外植体是成熟或未成熟的胚进行离体无菌培养。其具体方法是将取出放在液体或固体培养基上培养,由于胚包含在胚珠和子房里,因而进行胚胎培养时,常常是将胚珠和子房放在培养基上培养。
胚培养用途:1.拯救胚2.研究胚的发育营养研究3.一些特殊的领域的研究。
(4)细胞和原生质体培养
二是要给予它们适当的刺激,即给予它们一定的营养物质,并使它们受到一定的激素的作用。
全能性体现的两个过程
一个已分化的细胞要表现它的全能性,必须经历两个过程,即首先要经历脱分化过程,然后再经历再分化过程。
再分化的过程有两种方式:
一是器官发生方式 二是胚胎发生方式
2.激素(植物生长调节剂)调控
后来证明,激素可调控器官发生的概念对于多数物种都可适用,只是由于在不同组织中这些激素的内生水平不同,因而对于某一具体的形态发生过程来说,它们所要求的外源激素的水平也会有所不同。
⑤1958年,Wickson和Thimann指出,应用外源细胞分裂素可促成在顶芽存在的情况下处于休眠状态的腋芽的生长。
当把茎尖接种在含有细胞分裂素的培养基上以后,将可使侧芽解除休眠状态,而且,能够从顶端优势下解脱出来的不只是那些既存于原来茎尖上的腋芽,此外,还有由原来的茎尖在培养中长成的侧枝上的腋芽,结果就会形成一个郁郁葱葱的结构,里面包含了数目很多的小枝条,其中每个小枝条又可取出来重复上述过程,于是在相当短的时间内,就可以得到成千上万的小枝条。当把这些小枝条转够到另外一种培养基上诱导生根以后,即可移植于土壤中。
奠基阶段(从20世纪30年代中至20世纪50年代末)
30年代中期,植物组织培养领域两个重要的发现,其一是认识了B族维生素对植物生长的重要意义;二是发现了生长素--一种天然的生长调节物质。
植物组织培养复习资料
植物组织培养复习资料1、植物组织培养:在⽆菌和⼈⼯控制的环境条件下,利⽤⼈⼯培养基,对植物的胚胎、器官、组织、细胞、原⽣质体等进⾏离体培养,使其再⽣发育成完整植株的过程。
由于外植体已脱离了母体,植物组织培养⼜叫植物离体培养。
2、植物组织培养的特点:⽆菌条件下进⾏;多数情况下是利⽤成分完全不确定的⼈⼯培养基进⾏时;材料为离体状态;可以不断增殖,并通过调整成分控制实验的⽬的;在封闭的容器中进⾏,⽓体通过封⼝材料进⾏交换;环境、温度、光照强度都可⼈为控制。
3、植物组织培养的类型:按培养对象分:植株培养:对完整植株材料的离体⽆菌培养;胚胎培养:从果实或⼦房中分离出成熟或未成熟的胚进⾏离体⽆菌培养的技术;器官培养:以植物的根、茎、叶、花、果等器官为外植体的离体⽆菌培养技术;组织培养:对植物体的各部分组织如茎尖分⽣组织、形成层、⽊质部、韧⽪部、表⽪组织、胚胎组织和薄壁组织等,或对植物器官培养产⽣的愈伤组织进⾏培养,⼆者均通过再分化诱导形成植株;细胞培养:对植株器官或愈伤组织上分离出的单细胞、花粉单细胞或很⼩的细胞团进⾏培养,形成单细胞⽆性系或再⽣植株的技术;原⽣质体培养:对⽤酶、物理等⽅法除去植物细胞壁的、裸露的、有活性的原⽣质体团进⾏培养的技术;按培养过程分:初代培养、继代培养;按培养基的物理状态分:固体培养、液体培养。
4、植物组织培养在农林中的应⽤:植株离体快繁、⽆病毒苗⽊培育、次⽣代谢物的产⽣、培育新品种或创造新品种、植物种质资源的离体保存、⼈⼯种⼦、基因⼯程的应⽤。
5、外植体:植物组织培养中作为离体培养材料的器官或组织的⽚段。
在继代培养时,将培养的组织切段移⼊新的培养基时,这种切段也称外植体。
6、愈伤组织:指在植物受伤后的伤⼝处或在植物组织培养中外植体切⼝处产⽣的⼀团不定形的薄壁组织。
7、脱分化:指离体培养条件下⽣长的细胞、组织或器官经过细胞分裂或不分裂,逐渐失去原来的结构和功能⽽恢复分⽣状态,形成⽆组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞的过程。
高考生物知识点:植物组织培养
高考生物知识点:植物组织培养
植物组织培养是一种利用植物的细胞、组织、器官等进行无菌培养和繁殖的技术。
以
下是高考生物中与植物组织培养相关的知识点。
1. 组织培养的目的和应用:组织培养可以用于大规模繁殖植物,繁育优良植株,获得
大量无菌基质,研究植物生长发育、激素生物学等。
2. 组织培养的基本原理:组织培养利用植物细胞的无性繁殖能力,在无菌条件下培养
植物细胞、组织和器官,提供适当的养分和激素,创造适宜的生长环境,使其生长和
分化。
3. 组织培养的种类:包括无子繁殖、离体培养、植株再生等。
4. 无子繁殖:将植物的无性结构,如幼苗、叶片、叶柄、茎段、芽鳞等放入适宜的培
养基中,通过刺激其分裂增生和分化形成新的植株。
5. 离体培养:将植物的组织或器官,在无菌条件下切割并放入含有适宜养分和激素的
培养基中,促使其生长和分化成完整的植株。
6. 植株再生:通过植物体的某些部位(如气生根、愈伤组织等)培养和再生整个植株。
7. 组织培养的条件:无菌环境、适宜的培养基、适宜的温度、光照和湿度。
8. 组织培养中的植物激素:植物激素如生长素、赤霉素、细胞分裂素等,对植物的生
长和分化起到重要的调节作用。
9. 组织培养的影响因素:培养基的组成、激素浓度、光照条件、温度等都会对组织培养结果产生影响。
10. 组织培养的优点:可以大规模快速繁殖优良植株、修复植物、研究植物生理生化过程等,是种植业和植物繁育研究中的重要技术手段之一。
植物组织培养
植物组织培养重点名词解释:1、植物组织培养:是指在无菌和人工控制的环境条件下,利用适当的培养基,对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养,使其再生细胞或完整植株的技术。
又称为植物离体培养2、外植体(explant):用于离体培养的那部分植物器官、组织或细胞。
3、愈伤组织(callus):是指外植体因受伤或在离体培养时,其细胞进行活跃的分裂增殖而形成的一种无特定结构和功能的组织。
4、离体生态学(in vitro ecology):是指研究离体培养环境条件控制的科学,其研究对象是培养基、植物材料和人工环境条件。
5、植物细胞全能性(totipotency):是指任何携带完整遗传信息的植物活细胞都具有表达其所有遗传信息的能力,能够发育成完整的植株。
胞需经过脱分化和再分化过程才能表现其全能性。
6、脱分化(dedifferentiation):成熟细胞或分化细胞转变为分生状态(即形成愈伤组织)的过程。
7、再分化(redifferentiation):成熟细胞或分化细胞脱分化转变为愈伤组织后重新分化成异质细胞的过程。
8、植物茎段培养是指对植物的带有一个以上定芽或不定芽的外植体(包括块茎、球茎、鳞茎在内的幼茎切段)进行离体培养的技术。
9、茎尖培养(shoot tip culture or apical meristem culture)是指对植物顶端的原分生组织和它衍生的分生组织的培养。
10、叶培养的意义:研究叶形态建成、光合作用、叶绿体形成等;叶细胞全能性;原生质体融合;无性繁殖系;诱变育种。
11、离体叶组织发育途径:直接产生不定芽,由愈伤组织产生不定芽,胚状体和其他。
12、植物器官培养是指对植物某一器官的全部或部分或器官原基进行离体培养的技术。
13、植物胚胎培养是指对植物的胚、胚乳、胚珠和子房等进行离体培养,使其发育成完整植株的技术。
包括:胚培养、胚乳培养、胚珠培养以及子房培养。
14、胚乳培养是指将胚乳组织从母体上分离出来,通过离体培养,使其发育成完整植株的技术15、胚珠培养是将胚珠从母体分离出来,无菌条件下让其进一步生长发育,使其形成植株的技术。
植物组织培养知识点归纳
植物组织培养知识点归纳1第1章植物组织培养:指植物器官、组织、细胞、原生质体等的培养。
体内使用人工培养基使它们生长成完整的植物2,外植体:在植物组织培养中,为无菌细胞、组织、器官等。
从活植物中提取并接种在培养基上的称为外植体。
3,愈伤组织:指在人工培养基上无序地从外植体中生长出来的大量薄壁细胞。
4.1的应用。
1农业应用。
幼苗的快速繁殖。
无病毒培养3。
(1)倍性育种,缩短育种年限,具有明显的杂种优势;(2)克服远缘杂交(胚胎培养)的不亲和性和不育性;(3)种质保存(4)变异2的创造,在遗传学、分子生物学、细胞生物学、组织学、胚胎学、基因工程、生物工程等方面的应用。
用于基因工程创造植物新种质用于植物生长发育的理论研究,包括生理学、病理学、胚胎学、细胞和分子生物学等。
3。
使用组织培养材料作为植物生物反应器第2章1,全能性:任何具有完整细胞核的植物细胞都具有形成完整植物所必需的所有遗传信息以及发育成完整植物的能力。
2,细胞分化:指导致细胞形成不同结构和功能变化或潜在发育模式的过程3,去分化:指在体外生长的细胞、组织或器官逐渐失去原来的结构,恢复分生组织状态,形成无组织结构的细胞团或愈伤组织的过程4,再分化:指去分化细胞恢复其分化能力并形成具有特定结构和功能的细胞、组织、器官甚至植物的过程5,植物组织培养中经常遇到的问题及解决方法1,污染与预防:1,真菌污染后,如果孢子已经形成,必须在高压灭菌后丢弃然而,在细菌污染的情况下,只要及时发现,材料仍然可以使用,并且材料上部不易受细菌影响的部分被切割和转移。
2.用抗生素等抗菌剂处理会影响植物材料的正常生长第二,的褐变和防止(1)选择合适的外植体(2)适宜的培养条件(3)用抗氧化剂连续转移(4),玻璃化和防止(1)提高培养基中的溶质水平和降低培养基中的水势;(2)减少培养基中氮化合物的量;(3)增加光照;(4)增加容器通气量和施用CO2肥料对降低试管苗玻璃化有明显效果。
《植物组织培养技术》 知识清单
《植物组织培养技术》知识清单一、什么是植物组织培养技术植物组织培养技术是一种在无菌条件下,将植物的离体器官、组织或细胞等培养在人工配制的培养基上,使其生长、分化并发育成完整植株的技术。
这项技术的核心在于利用植物细胞的全能性,即植物的每个细胞都具有发育成完整植株的潜在能力。
通过特定的条件和操作,诱导细胞重新启动生长和分化的程序,从而实现植物的快速繁殖、品种改良以及珍稀植物的保护等目的。
二、植物组织培养技术的基本原理植物细胞全能性是植物组织培养的理论基础。
细胞全能性意味着每个植物细胞都包含了该物种的全部遗传信息,在适宜的条件下,能够表现出完整的植物个体特征。
在自然条件下,细胞的全能性受到多种因素的限制,无法充分表达。
而在组织培养中,通过提供无菌环境、合适的营养物质、植物激素以及适宜的温度、光照等条件,打破了这些限制,使细胞能够重新恢复全能性,进行分裂、分化和生长。
三、植物组织培养技术的基本步骤1、外植体的选择与消毒外植体是指用于培养的植物器官、组织或细胞。
常见的外植体有茎尖、叶片、茎段、花粉等。
在选择外植体时,要考虑其来源的植株健康状况、生长阶段以及品种特性等因素。
选择好外植体后,需要进行严格的消毒处理,以消除表面的微生物,常用的消毒方法有酒精浸泡、升汞消毒等。
2、培养基的制备培养基是为植物细胞提供营养和生长环境的重要物质。
其主要成分包括大量元素、微量元素、有机成分、植物激素等。
大量元素如氮、磷、钾等,为细胞的生长和分裂提供基本的养分;微量元素如铁、锰、锌等,参与细胞内的多种生理生化过程;有机成分如氨基酸、维生素等,有助于维持细胞的正常代谢;植物激素如生长素、细胞分裂素等,对细胞的分化和发育起着关键的调节作用。
3、接种将消毒后的外植体小心地接种到培养基上,操作过程要在无菌环境中进行,以防止微生物的污染。
4、培养接种后的培养物需要放置在适宜的环境中进行培养。
培养条件包括温度、光照、湿度等。
温度一般控制在 25℃左右,光照强度和光照时间根据不同的植物种类和培养阶段进行调整,湿度通常保持在较高水平。
植物组织培养知识点归纳
植物组织培养知识点归纳第⼀章1、植物组织培养:是指在离体条件下,利⽤⼈⼯培养基对植物的器官、组织、细胞、原⽣质体等进⾏培养,使其长成完整植株2、外植体:在植物组织培养中,由活体(in vivo)植物上提取下来的、接种在培养基上的⽆菌细胞、组织、器官等均称为外植体。
3、愈伤组织:指在⼈⼯培养基上由外植体长出来的⼀团⽆序⽣长的薄壁细胞。
4、应⽤⼀、农业上的应⽤1. 种苗快速繁殖(rapid propagation)2.⽆病毒苗(virus free)的培养3.在育种上的应⽤(breeding)(1)倍性育种,缩短育种年限,杂种优势明显;(2)克服远缘杂交的不亲合性和不孕性(胚培养);(3)保存种质(4)创造变异⼆、在遗传学、分⼦⽣物学、细胞⽣物学、组织学、胚胎学、基因⼯程、⽣物⼯程等⽅⾯的应⽤。
⽤于基因⼯程技术创造植物新种质。
⽤于植物⽣长发育理论研究,包括⽣理学、病理学、胚胎学和细胞与分⼦⽣物学等。
三、利⽤组织培养材料作为植物⽣物反应器第⼆章1、细胞全能性(Totipotency):指任何具有完整的细胞核的植物细胞都拥有形成⼀个完整植株所必须的全部遗传信息和发育成完整植株的能⼒。
2、细胞分化(cell differentiation):指导致细胞形成不同结构,引起功能或潜在的发育⽅式改变的过程。
3、脱分化(Dedifferentiation):指离体条件下⽣长的细胞、组织或器官逐渐失去原来的结构和功能⽽恢复分⽣状态,形成⽆组织结构细胞团或愈伤组织的过程。
4、再分化(Redifferentiation):指脱分化的细胞重新恢复分化能⼒,形成具有特定结构和功能的细胞、组织、器官甚⾄植株的过程。
5、植物组织培养中常遇到的问题以及解决措施⼀、污染及防治:1、真菌污染后,如果已形成孢⼦,则必须经⾼压灭菌后扔掉。
但若是细菌污染,只要及时发现,将材料上部未感菌的部分剪下转接,材料仍可使⽤。
2、⽤抗⽣素等杀菌药剂的处理,会影响植物材料正常⽣长。
植物的组织培养
植物的组织培养【基础回顾】考点一、植物组织培养的过程1.组织培养过程外植体――→脱分化愈伤组织――→再分化幼苗―→移栽2.培养基(1)成分:大量元素、微量元素、有机物、植物激素和琼脂。
(2)类型:MS培养基、发芽培养基和生根培养基。
(3)作用:植物组织或器官生长和发育的营养条件。
(4)配制:称量、溶解、调pH、分装(三角瓶)、灭菌。
考点二、植物组织培养的实验操作(1)菊花的组织培养过程制备MS培养基(配制母液、配制培养基、灭菌)→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培。
(2)月季的花药培养过程①过程:材料的选取→材料的消毒→接种和培养→鉴定和筛选。
②影响花药培养的因素主要有材料的选择和培养基的组成。
③要挑选完全未开放的花蕾,确定花粉发育时期最常用的方法是醋酸洋红法。
【技能方法】1.植物组织培养技术和花药离体培养技术的异同2.植物激素与组织培养(1)生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素,其作用及特点:①在生长素存在的情况下,细胞分裂素的作用呈现加强的趋势。
②使用顺序不同,结果不同,具体如下:③用量比例不同,结果也不同3.影响植物组织培养的因素(1)材料:植物的种类、材料的年龄和保存时间的长短等都会影响实验结果。
一般来说,容易进行无性繁殖的植物容易进行组织培养。
嫩枝生理状态好,容易诱导脱分化和再分化。
(2)营养:常用的培养基是MS培养基,其中含有的大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg,微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I、Co,有机物有甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。
(3)环境条件:pH、温度、光照等条件。
如菊花的组织培养所需pH为5.8左右,温度为18~22 ℃,光照条件为每日用日光灯照射12 h。
4、实验操作中注意事项(1)材料的选取:菊花的组织培养实验中,应选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝;月季的花药培养实验中,应选择花粉发育过程中的单核靠边期的花粉进行培养。
高中生物植物的组织培养技术知识点总结
⾼中⽣物植物的组织培养技术知识点总结 植物组织培养技术是⾼中⽣物的⼀个重要组成部分,学⽣需要掌握相关知识点,下⾯是店铺给⼤家带来的⾼中⽣物植物的组织培养技术知识点,希望对你有帮助。
⾼中⽣物植物的组织培养技术基础知识点 1、植物组织培养过程: (1)原理:植物细胞具有全能性。
(2)过程: 2、⽤途: (1)微型繁殖 微型繁殖就是⽤于快速繁殖优良品神的植物组织培养技术,也叫快速繁殖技术。
繁殖过程中的分裂⽅式是有丝分裂,亲、⼦代细胞内DNA不变,所以能够保证亲、⼦代遗传特性不变。
(2)作物脱毒 作物脱毒是利⽤茎尖、根尖等⽆毒组织,进⾏微型繁殖,所获幼苗是⽆毒的。
(3)⼈⼯种⼦:通过组织培养技术,可把植物组织的细胞培养成在形态及⽣理上与天然种⼦胚相似的胚状体,也叫作体细胞胚。
这种体细胞胚有于叶、根、茎分⽣组织的结构。
科学家把体细胞胚包埋在胶囊内形成球状结构,使其具备种⼦机能。
所以,⼈⼯种⼦是⼀种⼈⼯制造的代替天然种⼦的颗粒体,可以直接播种于⽥间。
①制作⽅法:⼈⼯种⼦是利⽤植物组织培养获得胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等,然后包上⼈丁种⽪就形成了⼈⼯种⼦,如图: ②优点:可使在⾃然条件下不结实或种⼦昂贵的植物得以繁殖;保持亲本的优良性状,因该过程为⽆性繁殖;节约粮⾷,减少种⼦的使⽤;可以控制添加⼀些物质,如除草剂、农药、促进⽣长的激素、有益菌等。
周期短,易储存和运输,不受⽓候和地域的限制。
(4)细胞产物的⼯⼚化⽣产:从⼈⼯培养的愈伤组织细胞中提取某种成分,如紫草素、⾹料等。
⾼中⽣物植物的组织培养技术重要知识点 1、植物细胞的全能性 (1)概念:具有某种⽣物全部遗传信息的任何⼀个细胞,都具有发育成完整⽣物体的潜能。
(2)原理:细胞内含有本物种的全部遗传信息。
(3)全能性表达条件:具有完整的细胞结构,处于离体状态,提供⼀定的营养、激素和其他适宜外界条件。
2、作物新品种培育 (1)单倍体育种: ①过程:植株(AaBb)通过减数分裂得到花粉(AB、Ab、aB、ab四种类型);对花粉进⾏花药离体培养(技术是植物组织培养);得到单倍体植株;对其幼苗时期进⾏秋⽔仙素处理;得到了正常的纯合⼆倍体植株(AABB、Aabb、aaBB、aabb四种类型)。
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第一章1、植物组织培养:是指在离体条件下,利用人工培养基对植物的器官、组织、细胞、原生质体等进行培养,使其长成完整植株2、外植体:在植物组织培养中,由活体(in vivo)植物上提取下来的、接种在培养基上的无菌细胞、组织、器官等均称为外植体。
3、愈伤组织:指在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。
4、应用一、农业上的应用1. 种苗快速繁殖(rapid propagation)2.无病毒苗(virus free)的培养3.在育种上的应用(breeding)(1)倍性育种,缩短育种年限,杂种优势明显;(2)克服远缘杂交的不亲合性和不孕性(胚培养);(3)保存种质(4)创造变异二、在遗传学、分子生物学、细胞生物学、组织学、胚胎学、基因工程、生物工程等方面的应用。
用于基因工程技术创造植物新种质。
用于植物生长发育理论研究,包括生理学、病理学、胚胎学和细胞与分子生物学等。
三、利用组织培养材料作为植物生物反应器第二章1、细胞全能性(Totipotency):指任何具有完整的细胞核的植物细胞都拥有形成一个完整植株所必须的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。
2、细胞分化(cell differentiation):指导致细胞形成不同结构,引起功能或潜在的发育方式改变的过程。
3、脱分化(Dedifferentiation):指离体条件下生长的细胞、组织或器官逐渐失去原来的结构和功能而恢复分生状态,形成无组织结构细胞团或愈伤组织的过程。
4、再分化(Redifferentiation):指脱分化的细胞重新恢复分化能力,形成具有特定结构和功能的细胞、组织、器官甚至植株的过程。
5、植物组织培养中常遇到的问题以及解决措施一、污染及防治:1、真菌污染后,如果已形成孢子,则必须经高压灭菌后扔掉。
但若是细菌污染,只要及时发现,将材料上部未感菌的部分剪下转接,材料仍可使用。
2、用抗生素等杀菌药剂的处理,会影响植物材料正常生长。
二、褐变及防止(1)选择合适的外植体(2)合适的培养条件(3)使用抗氧化剂(4)连续转移三、玻璃化问题及其防止(1)增加培养基溶质水平,降低培养基水势;(2)减少培养基含氮化合物用量;(3)增加光照;(4)增加容器通风,进行CO2施肥,对减轻试管苗玻璃化现象有明显作用;(5)降低培养温度,进行变温培养,有助于减轻试管苗玻璃化现象发生;(6)降低培养基细胞分裂素含量,加入适量脱落酸。
四、其他问题和解决措施(一)初始培养阶段:1、培养物水浸状、变色、坏死、茎断面干枯改进措施:调换其他杀菌剂或降低浓度,缩短消毒时间;试用其他部位,生长初期取材。
2、长期培养培养物几乎无反应改进措施:更换基本培养基或调整培养基成分,尤其是调整盐离子浓度,增加生长素用量,试用2,4-D,调整培养温度。
3、愈伤组织生长过旺、疏松,后期水浸状改进措施:减少激素用量,适当降低培养温度,调整无机盐(尤其是铵盐)含量,适当提高琼脂用量增加培养基硬度。
4、愈伤组织太紧密、平滑或突起,粗厚,生长缓慢改进措施:减少细胞分裂素用量,调整细胞分裂素与生长素比例,降低糖浓度。
5、侧芽不萌发,皮层过于膨大,皮孔长出愈伤组织改进措施:减少激素用量,采用较老化枝条。
(二)继代培养阶段1、苗分化量少、速度慢、分枝少、个别苗细高改进措施:增加细胞分裂素,降低温度,改善光照,改单芽继代为团块(丛芽)继代。
2、苗分化过多,生长慢,畸形,节间极短,苗丛密集,微型化改进措施:减少或停用细胞分裂素一段时间,调节温度。
3、分化率低,畸形,培养时间长时苗再次愈伤组织化改进措施:减少生长素用量,适当降温。
4、叶粗厚变脆改进措施:减少激素用量,避免叶片接触培养基。
5、再生苗的叶缘、叶面等处偶有不定芽分化出来改进措施:适当减少细胞分裂素,或分阶段地利用这一再生方式。
6、丛生苗过于细弱,不适于生根或移栽改进措施:减少细胞分裂素,免用赤霉素,延长光照时间,增强光照,及时转接,降低接种密度。
7、幼苗淡绿,部分失绿改进措施:针对营养元素亏缺情况调整培养基,调好PH值,调控温度、光照。
8、幼苗生长无力、发黄落叶、有黄叶、死苗夹于丛生苗中改进措施:及时转接、降低密度,调整激素配比和营养元素浓度,改善瓶内气体状况,控制温度。
(三)生根阶段1、久不生根,基部切口无适宜愈伤组织改进措施:选用适宜的生长素或增加生长素用量,适当降低无机盐浓度。
2、愈伤组织生长过快、过大,根茎部肿胀或畸形,几条根并联或愈合。
改进措施:调换生长素种类或几种生长素配合使用,降低浓度,附加VB2或PG 等减少愈伤等。
6、操作技术 一、洗涤技术2、塑料用品洗涤3、金属用品洗涤二、灭菌技术 1、灭菌(1)培养基灭菌:高温高压湿热灭菌法(2)玻璃器皿灭菌:蒸汽高压消毒灭菌干热消毒灭菌。
(3)塑料器皿灭菌:多采用高压蒸汽消毒灭菌;(4)金属用具灭菌:灼烧灭菌;浸入95%酒精,后置于酒精火焰上灼烧,冷却后使用。
(5)接种室灭菌接种室→紫外灯照射→空气消毒灭菌超净工作台→紫外灯照射、70%—75%的酒精擦洗→培养材料的接种 (6)外植体灭菌流水冲洗10—20min 或更长时间→70%—75%酒精中浸泡30s →0.1%—0.2%氯化汞液中浸泡10min 左右、在10%的次氯酸钠、饱和漂白粉浸泡30min 左右→蒸馏水冲洗4—5次→备用第三章新的塑料器皿打开即用 已用过的塑料器皿2%NaOH 浸泡12h清水冲洗 2%—5%盐酸浸泡30min清水冲洗蒸馏水冲洗晾干备用热洗衣粉水洗净冲洗 擦干1、植物营养器官:植物器官培养(Organ culture)是指对植物某一器官的全部或部分或器官原基进行离体培养的技术。
2、组织培养:组织培养(Tissue culture)是指对植物愈伤组织等进行离体培养的技术。
3、植物器官和组织培养的基本程序一、无菌外植体的获得二、初代培养物的建立三、形态发生和植株再生四、培养产物的观察记载五、诱导生根和再生植株移栽4、形态建成方式⑴不定芽途径⑵腋芽增殖(侧芽增殖)途径⑶原球茎途径⑷胚状体途径5、根、茎、叶培养的意义1、根培养意义◆研究根系生理代谢的最优良试验体系。
◆研究器官分化、形态建成的良好体系。
◆建立快速生长的根无性系,对药物生产有重要意义。
◆对根细胞培养物进行诱变处理,可筛选突变体,用于育种实践。
2、茎培养意义✓无性系快速繁殖;✓培养无病毒苗,品种改良;✓理论基础研究。
3、叶培养意义研究叶形态发生以及光合作用、叶绿素形成、遗传转化研究。
第四章1、植物胚培养(Embryo Culture):指对植物的胚、胚乳、子房和胚珠进行离体培养,使其发育成完整植物的技术。
2、胚培养的发育途径➢按正常胚胎发育途径形成植株➢脱分化形成愈伤组织➢胚“早熟萌发”3、胚培养的意义1、克服远缘杂交不亲和性利用“胚胎拯救(Embryo rescue)”技术获得远缘杂种;2、打破种子休眠,缩短育种周期;3、提高种子萌发率;特别是对于一些长期营养繁殖植物的种子4、胚乳培养的意义➢胚乳培养再生植株证明了全能性理论;➢研究胚和胚乳的关系及胚乳组织的功能;➢获得三倍体植株,用于育种利用。
三倍体植株具有营养体大,无籽等特点。
如无籽西瓜、葡萄、香蕉。
➢胚乳培养也会产生较多的混倍体,影响育种利用。
但可用于染色体工程研究。
➢胚乳细胞是研究淀粉、蛋白质和脂类天然产物代谢途径的理想系统。
5、胚“早熟萌发”:幼胚在培养基不能长出成熟胚的各种结构,越过正常胚胎发生若干阶段,直接长成幼苗。
6、离体授粉(pollination in vitro):指将未授粉的胚珠或子房从母体上分离下来,进行无菌培养,并以一定的方式授以无菌花粉,使之在试管内实现受精的技术。
7、离体授粉的意义可以克服远缘杂交中的不亲和性,特别是离体子房授粉和离体胚珠授粉,能消除柱头和花柱所造成的受精前障碍。
8、花粉培养:是将花粉从花药中分离出来进行离体培养的过程。
9、花药培养:把发育到一定阶段的花药,通过无菌操作技术,接种在人工培养基上,以改变花药内花粉粒的发育程序,诱导其分化成完整植株的过程。
10、花药培养过程1. 取材:多数植物以单核靠边期为宜2. 灭菌及预处理未开放花蕾,常规灭菌后直接取出花药在4~5℃条件下冷处理2~4d,易产生胚状体。
3. 接种尽量不损伤花药并去除花丝,排除二倍体组织对单倍体植株再生的影响。
4. 培养常用MS、B5、Nitsch、White等培养基,3~8周后形成胚状体或愈伤。
先暗培养,再转至2000lx/14h光照下促分化。
11、花粉花药培养的应用1、诱导形成单倍体,快速获得纯系,缩短育种周期;常规育种需4-6年获得纯系,而小孢子培养仅需一年。
2、有利于筛选隐性突变体,提高选择效率;3、有利于隐性基因控制性状的选择;4、快速获得自交系的超雄株。
第五章1、单细胞培养方法1、看护培养法2、微室培养法3、平板培养法2、细胞悬浮培养的意义:3、细胞培养的应用1、植物次生代谢产物的生产2、突变体选择3、诱导多变体4、原生质体培养意义1、原生质体无细胞壁,有利于细胞融合、体细胞杂交。
2、原生质体容易摄取外来遗传物质,可作为理想的受体系统。
5、原生质体培养方法以及融合方法原生质体培养方法:1、液体浅层培养2、固体双层培养3、固体平板培养4、琼脂糖珠培养5、双层滤纸植板培养融合法:(1)无机盐诱导融合(2)高pH—高钙离子融合(3)聚乙二醇融合法(4)电融合技术6、单倍体植物:细胞中仅含配子染色体的植物。
7、细胞培养:指从体内取出组织,分离细胞,或使用细胞系,在体外模拟体内生理环境,在无菌、适当温度和一定的营养条件下,使之生存和生长,并维持其结构和功能特性。
8、超低温保存:将细胞等置于液氮中保存,解冻后仍能存活的技术。
9、种质保存:指在天然或人工创造的适宜环境条件下,贮存植物种质,使其保持生命力与遗传性的技术。
10、植物离体繁殖:指利用植物组织培养技术对外植体进行离体培养,使其在短期内获得遗传性一致的大量再生植株的方法。
11、原生质体:指脱去细胞壁的、裸露的、有生活力的原生质团。
12、原生质体融合:指不同种类的原生质体,不经过有性阶段在人工控制条件下,相互融合成一体,形成杂种细胞,并进一步发育成杂种植株的技术。
第六章1、植物离体繁殖与传统营养繁殖的优缺点◆繁殖效率高,生长速度快;◆培养条件可控制性强;◆占用空间小;◆管理方便,利于自动化控制;◆便于种质交换和保存。
2、快繁器官再生类型◆短枝发生型◆丛生芽发生型◆不定芽发生型◆胚状体发生型◆原球茎发生型3、快繁程序以及影响因素程序:a)无菌(或初代)培养的建立b)繁殖体增殖c)芽苗生根d)小植株的移栽驯化影响因素:◆外植体◆培养基◆培养条件◆继代培养◆移栽4、商业化生产应注意的问题○1污染污染来源:培养基及器具、器皿污染;外植体灭菌不彻底;操作原因;环境原因等污染控制:灭菌彻底;操作正确;保持操作区环境清洁无菌。