植物组织培养重点
植物组织培养重点
器官培养：即离体器官的培养。
植株培养：对完整植株材料的培养。
组织或愈伤组织培养:是对植物体的各部分组织进行培养或对由植物器官培养产生的愈伤组织进行培养，二者均通过再分化诱导形成植株.细胞培养:是对由愈伤组织等进行液体振荡培养所得到的能保持较好分散性的离体单细胞或花粉单细胞或很小的细胞团的培养.原生质体培养:是用酶及物理方法除去细胞壁的原生质体的培养。
初代培养：芽、茎段、叶片、花器等外植体在离体培养条件下诱导愈伤组织、侧芽或不定芽、胚状体过程植物组织培养：是指通过无菌操作分离植物体的一部分（外植体），接种到培养基上，在人工控制的条件下（包括营养、激素、温度、光照、湿度）进行培养，使其产生完整植株的过程。
愈伤组织：原指植物在受伤之后于伤口表面形成的一团薄壁细胞，在组培中则指在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞，多在植物体切面上产生。
外植体：从植物体上分离下来的用于离体培养的材料。
植物细胞全能型：任何具有完成细胞核的植物细胞，能拥有形成一个完整植株所必须的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。
脱分化:已分化好的细胞在人工诱导条件下，恢复分生能力，回复到分生组织状态的过程。
再分化:脱分化后具有分生能力的细胞再经过与原来相同的分化过程，重新形成各类组织和器官的过程。
胚状体：在离体过程中产生一种形似胚（具有明显的根端和芽端），功能与胚相同的结构。
褐变现象：指在接种后，其表面开始褐变，有事甚至会使整个培养基褐变的现象。
继代培养材料的玻璃化：当植物材料不断的进行离体繁殖时，有些培养物的嫩芽，叶片往往会呈半透明水迹状，这种现象通常成为玻璃化。
人工种子：通过植物组织培养的方法获得的具有正常发育能力的材料，外被有特定的物质，在适宜的条件下可以发芽成苗的植株幼体。
植板密度：形成的细胞团数/植板的细胞总数×100%对称融合：双方原生质体均带有核基因组和细胞质基因组的全部遗传信息。
非对称融合：指一方亲本的全部原生质与另一方亲本的部分核物质及细胞质物质重组产生不对称杂种。
植物组织培养复习重点
组培复习材料一、名词解释1、培养基：是离体植物（外植体）赖以生长、分化的基础，是根据植物的需求，人工配制的含有各种营养成分的营养液。
2、液体培养：把细胞或生物体的一部分，置于液体培养基中使其发育，并不断振荡，使之均匀地在悬浊液中进行培养的一种方法。
3、种子培养：是成熟种子和发育不全的未成熟种子的无菌培养。
4、叶培养：从母体植株上将叶组织（包括叶原基在内）切下，放在无菌的人工条件下使其生长发育形成植株的技术。
5、热处理脱毒：在一定范围内，用高温处理可部分或完全钝化植物组织中的某些病毒而不伤害或很少伤害植物本身的脱毒方法。
6、花药培养：是把花粉发育到一定阶段的花药接种到培养基上，来改变花粉的发育程序，使其分裂形成细胞团，进而分化成杯状体，然后再生植株，或形成愈伤组织，由愈伤组织再分化成植株。
7、连续培养：是利用特别的培养容器进行大规模细胞培养的一种培养方式。
（培养过程中，不断注入新鲜培养基，排掉等体积用过的培养基，或者抽取悬浮培养物，使培养物的营养物质得到不断补充，从而保持其恒定体积的培养。
——8、分批培养：指把细胞分散在一定容积的培养基中进行培养，建立单细胞培养物的培养方式。
（细胞生长在固定体积的培养基中，当主要营养物质耗尽时，细胞的分裂和生长即停止。
）二、简答题1、MS培养基特点。
答：MS培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的，其特点是无机盐和离子浓度较高，是较稳定的离子平衡溶液，具有高含量的氮、钾，尤其是硝酸盐用量大，还有一定数量的铵盐，其养分的数量和比例合适，不需要添加更多的有机附加物，就能满足植物组织对矿质营养的要求，加速愈伤组织和培养物的生长，当培养物就不转移时仍可维持其生存。
目前应用最广泛。
2、植物组培生产特点。
答：①和传统的生产方式相比，具有不占耕地、生产不受季节限制而且能够整年连续进行、不受灾害性天气和病虫害影响的特点；②具有人为可控性，可采用更适合于植物生长的“培养基”代替土壤提供养分和生长调节物质；③具有很高的生产效率。
高中生物选修一植物组织培养知识点总结
中学生物选修一植物组织培育学问点总结生物是高考考试中重要的科目之一，尤其是植物组织培育这个学问点，是高考考试中必考学问点。
下面是为大家整理的中学生物学问点，希望对大家有所帮助!中学生物选修一学问点课题一菊花的组织培育植物组织培育的基本过程细胞分化：在生物个体发育过程中，细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。
离体的植物组织或细胞，在培育了一段时间以后，会通过细胞分裂，形成愈伤组织，愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形态态的薄壁细胞。
由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化，或者叫做去分化。
脱分化产生的愈伤组织接着进行培育，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。
再分化形成的试管苗，移栽到地里，可以发育成完整的植物体。
植物细胞工程具有某种生物全套遗传信息的任何一个活细胞，都具有发育成完整个体的实力，即每个生物细胞都具有全能性。
但在生物体的生长发育过程中并不表现出来，这是因为在特定的时间和空间条件下，通过基因的选择性表达，构成不同组织和器官。
植物组织培育技术的应用有：实现优良品种的快速繁殖;培育脱毒作物;制作人工种子;培育作物新品种以及细胞产物的工厂化生产等。
细胞分化是一种长久性的变更，它有什么生理意义?使多细胞生物体中细胞结构和功能趋向特地化，有利于提高各种生理功能的效率。
比较根尖分生组织和愈伤组织的异同影响植物组织培育的条件材料：不同的植物组织，培育的难易程度差别很大。
植物材料的选择干脆关系到试验的成败。
植物的种类、材料的年龄和保存时间的长短等都会影响试验结果。
菊花组织培育一般选择未开花植物的茎上部新萌生的侧枝作材料。
一般来说，简单进行无性繁殖的植物简单进行组织培育。
选取生长旺盛嫩枝进行组培的是嫩枝生理状态好，简单诱导脱分化和再分化。
养分：离体的植物组织和细胞，对养分、环境等条件的要求相对特别，须要配制相宜的培育基。
常用的培育基是MS培育基，其中含有的大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg，微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I、Co，有机物有甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。
高中生物植物的组织培养技术知识点总结
高中生物植物的组织培养技术知识点总结导读：我根据大家的需要整理了一份关于《高中生物植物的组织培养技术知识点总结》的内容，具体内容：植物组织培养技术是高中生物的一个重要组成部分，学生需要掌握相关知识点，下面是我给大家带来的高中生物植物的组织培养技术知识点，希望对你有帮助。
高中生物植物的组织培养技术基础知识点...植物组织培养技术是高中生物的一个重要组成部分，学生需要掌握相关知识点，下面是我给大家带来的高中生物植物的组织培养技术知识点，希望对你有帮助。
高中生物植物的组织培养技术基础知识点1、植物组织培养过程：(1)原理：植物细胞具有全能性。
(2)过程：2、用途：(1)微型繁殖微型繁殖就是用于快速繁殖优良品神的植物组织培养技术，也叫快速繁殖技术。
繁殖过程中的分裂方式是有丝分裂，亲、子代细胞内DNA不变，所以能够保证亲、子代遗传特性不变。
(2)作物脱毒作物脱毒是利用茎尖、根尖等无毒组织，进行微型繁殖，所获幼苗是无毒的。
(3)人工种子：通过组织培养技术，可把植物组织的细胞培养成在形态及生理上与天然种子胚相似的胚状体，也叫作体细胞胚。
这种体细胞胚有于叶、根、茎分生组织的结构。
科学家把体细胞胚包埋在胶囊内形成球状结构，使其具备种子机能。
所以，人工种子是一种人工制造的代替天然种子的颗粒体，可以直接播种于田间。
①制作方法：人工种子是利用植物组织培养获得胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等，然后包上人丁种皮就形成了人工种子，如图：②优点：可使在自然条件下不结实或种子昂贵的植物得以繁殖;保持亲本的优良性状，因该过程为无性繁殖;节约粮食，减少种子的使用;可以控制添加一些物质，如除草剂、农药、促进生长的激素、有益菌等。
周期短，易储存和运输，不受气候和地域的限制。
(4)细胞产物的工厂化生产：从人工培养的愈伤组织细胞中提取某种成分，如紫草素、香料等。
高中生物植物的组织培养技术重要知识点1、植物细胞的全能性(1)概念：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能。
植物组织培养教案
植物组织培养教案一、教学目标：1.了解植物组织培养的基本概念和意义；2.掌握植物组织培养的基本原理、方法和步骤；3.能够根据实验要求进行植物组织培养的实验操作。
二、教学重点：1.植物组织培养的基本原理和方法；2.植物组织培养的实验操作。
三、教学难点：1.植物组织培养的实验操作技巧；2.植物组织培养的常见问题及解决方法。
四、教学内容及教学步骤：1.植物组织培养的基本概念和意义（10分钟）讲解植物组织培养的概念、特点和意义，引导学生认识植物组织培养在农业、园艺和生物科学领域的重要作用。
2.植物组织培养的基本原理（15分钟）介绍植物细胞和组织的培养原理，包括细胞分裂、组织分化和激素调控等方面的基本知识。
3.植物组织培养的基本方法和步骤（30分钟）3.1材料准备解释所需要的实验器具、培养基成分和化学试剂等材料的选择和准备。
3.2植物组织的获取与处理讲解植物组织的获取方法，包括茎尖、叶片和种子等不同组织的处理方法。
3.3组织培养基的制备介绍培养基的成分和配方，讲解培养基的调配方法和无菌操作技巧。
3.4组织培养的操作步骤详细演示组织培养的具体操作步骤，包括无菌操作、组织切割、接种和培养条件设置等。
4.实验操作（60分钟）将学生分成小组，提供植物组织培养实验所需的材料和器具，指导学生进行组织培养的实验操作。
注：实验前需提前准备无菌操作室和培养箱等设备。
五、教学评价体系：1.实验操作的规范程度；2.实验结果的准确性和可靠性；3.对植物组织培养中常见问题的解决能力。
六、教学过程设计：本教案主要以理论授课和实验操作相结合的方式进行。
首先通过理论讲解，让学生了解植物组织培养的基本概念、意义和原理，掌握植物组织培养的基本方法和步骤。
然后，将学生分组进行实验操作，指导学生完成组织培养实验，同时进行实时指导和纠正，帮助学生掌握实验技巧和解决实验中的常见问题。
七、教学反思：植物组织培养是植物生物技术领域的重要研究内容，对于培育新品种、研究植物生长发育机制等具有重要意义。
植物组织培养重点
植物组织培养绪论1.组培根据材料个分为哪几个类型根据外植体来源和培养对象的不同，植物组织培养的研究类型可以分组织培养（tissue culture）、器官培养（organ culture）、胚胎培养（embryo culture）、细胞培养（cell culture）、原生质体培养（protoplast culture）2.组培发展的3个阶段①植物组织培养的早期实践细胞学说，1838-1839年，该学说的基本内容是：一切生物都是由细胞构成的，细胞是生物体的基本功能单位，细胞只能由细胞分裂而来。
1902年，德国植物学家Haberlandt提出了植物细胞全能性学说。
植物的器官和组织可以不断分割，直至分到单个细胞而不影响细胞增殖的观点。
并设想离体细胞具有再生完整植株的潜力。
②植物组织培养的奠基1934年美国的White，利用番茄根建立了第一个活跃生长的无性繁殖系，发现B族维生素对培养的离体根生长具有重要作用。
创立了White培养基。
1943年美国的White发表了《植物组织培养手册》的专著，使植物组织培养开始成为一门新兴的学科。
1948 年，Skoog和崔徵通过对烟草茎切段和髓培养组织的研究，确定了腺嘌呤／生长素的比例是控制芽和根形成的主要条件之一。
1956年Miller等发现了激动素。
控制器官分化的激素模式变为激动素／生长素的比例关系。
促进组培发展。
在这一阶段植物组织培养建立了2个与培养技术有关的重要模式：培养基模式、激素调控模式。
③植物组织培养的建立Reinert和Steward（1958）对胡萝卜悬浮培养细胞和愈伤组织形成体细胞胚作了报道，用实验科学地论证了植物细胞全能性，标志着植物生物技术快速发展的开始。
1960年，Cocking 等用真菌纤维素酶分离植物原生质体获得成功。
这是植物组织培养的第二次突破。
1960年G.Morel采用兰花的茎尖培养，实现了去病毒和快速繁殖两个目的。
这是经过茎尖—原球茎—小植株的方式而再生的。
植物组织培养概论
广义概念
人工培养植物体一 部分(即外植体 ) 生成完整植株。
愈伤组织：在离体培养过程中在人工培养基 上从外植体上长出来的，改变了它们原有的特性， 具有分生能力的能迅速增殖的无特定结构和功能 的细胞团。多在植物体切面上产生。
外植体：是指从植物体上分离下来的用于植 物组织培养的接种材料，它包括植物体的各种器 官、组织、细胞和原生质体等。
思考题：
1.什么是组织培养？组织培养的原理是什么？
2.组织培养分哪几种类型？ 3.组织培养有哪些特点？
四、植物组织培养的理论基础
细胞全能性理论
植物每一个具有 完整细胞核的体细胞， 都含有植物体的全部 遗传信息，在适当条 件下，具有发育成完 整植株的潜在能力。
植物细胞全能性的表达
分裂 细胞 分化 再 分 化 器官 分裂
组织
脱分化
已分化组织细胞
分裂 植株
植物细胞全能性的实现
• 植物的生活史：
受 精 卵 早期胚 胎发育 合 分化 子 胚 组 织 形成 器 构成 植 物 体
茎段培养成苗示意图
茎段培养成苗示意图
组织培养：为狭义的植物组织培养，是对植物体的 各部分组织进行培养，如茎尖分生组织、形成层、• 木质部、韧皮部、表皮组织、胚乳组织和薄壁组织 等等；或对由植物器官培养产生的愈伤组织进行培 养。二者均通过再分化诱导形成植株。
组织培养
愈伤组织培养 分生组织培养 薄壁组织培养 输导组织培养
团按照一定密度在液体培养基中进行培养增殖的技术。
平板培养：是指将一定密度的悬浮细胞接种到一薄
层固体培养基中进行培养的技术。
看护培养：是指利用生长的愈伤组织所产生的物质
来培养单细胞或者异种愈伤组织等的方法。
微室培养：是指人工制造一个微室，将单细胞培养
植物组织培养知识点总结
堂清日结31、原生质是细胞内生命物质的总称。
原生质层指的是细胞膜和液泡膜以及两层膜之间的细胞质。
去掉细胞壁的植物细胞就是原生质体，所以一个动物细胞就相当于一个原生质团。
2、原生质层的融合过程体现了细胞膜的流动性。
3、植物体细胞融合的实质：原生质体的融合，植物体细胞融合完成的标志：细胞壁的再生。
新细胞壁的产生与细胞内高尔基体相关。
4、植物组织培养中愈伤组织的形成是细胞分裂的结果。
5、植物细胞工程通常所采用的技术手段：植物组织培养技术和植物体细胞杂交技术。
6、植物体细胞杂交的过程：1）酶解法去除细胞壁，获得原生质体2）利用物理或者化学法诱导原生质体的融合3）再生细胞壁，获得杂种细胞。
4）利用植物组织培养技术，通过脱分化和再分化获得杂种植物。
7、微型繁殖技术：也叫快速繁殖技术即快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。
该技术与传统繁殖技术相比，具有：①繁殖速度快；②“高保真”（因为是无性繁殖）；③不受自然生长季节的限制（因为在具有一定人工设施的室内生产）等特点。
堂清日结41、作物脱毒材料：分生区细胞作物脱毒方法：进行植物组织培养作物脱毒结果：获得脱毒苗脱毒苗的特点：不会或极少感染病毒。
2、人工种子的组成：胚状体（或不定芽或顶芽或腋芽）+人工薄膜；要获得人工种子，需将离体的器官、组织或细胞培养至再分化阶段。
3、人工种皮中应具有的有效成分：适量的养分、无机盐、有机碳源、农药、抗生素、有益菌等，为了促进胚状体的生长发育，还可以向人工种皮中加入植物生长调节剂。
4、单倍体育种原理：染色体变异方法：花药离体培养采用的技术：植物组织培养技术优点：后代无性状分离、明显缩短育种年限突变体的利用育种原理：突变（基因突变、染色体变异）优点：能够产生新性状植物体细胞杂交育种原理：染色体变异优点：克服远缘杂交不亲和的障碍5、植物组织培养中易获得突变体的原因：培养的细胞一直处于分生的状态，易受培养条件和外界压力（如射线、化学物质等）的影响。
植物组织培养与细胞培养知识重点
第一个发明的培养基为White 培养基培养基中的铁盐采用Fe-EDTA 形态IAA/CTK比例高时，促进生根培养，比例低时，促进芽的分化植物组织培养：（广义）人工控制条件下培养形成再生植株（狭义）对植物组织器官产生愈伤组织进行培养直至生成完整植株。
外植体：从植物体上分离下来的用于离体培养的材料愈伤组织：在离体培养的条件下切口处形成的一团具有分生能力的不规则的细胞团分化：细胞在分裂过程中发生结构和功能上的改变形成各类组织和器官的过程脱分化：已分化好的细胞在人工诱导条件下恢复分生能力恢复到分生组织状态的过程再分化：由脱分化的细胞重新形成各类组织和器官的过程初代培养：诱导愈伤组织、侧芽或不定芽、胚状体（形似胚，具有配的功能）过程继代培养：更换新鲜培养基繁殖同一类型材料生根培养：将芽苗转移到生根培养基上培养形成完整植株驯化培养：将组培苗经人工炼苗驯化使其能够在苗床上生长器官培养：是指对植物体各种器官的离体培养离体胚培养：指从植物种子中分离出胚组织进行离体培养的技术细胞悬浮培养：将植物的细胞或细胞小聚体悬浮在液体培养基上进行培养，使之在体外繁殖、生长、发育，并在培养过程中能保持很好的分散性的技术原生质体培养：指从细胞中分离出来的原生质体经过离体培养使其分裂、增殖进而分化成完整植株的技术。
器官发生：又名器官形成，是指植物根茎叶花果实等器官的分化与形成灭菌：用物理或化学方法，杀死物体表面或空隙间的微生物消毒：杀死，消除或抑制部分微生物，使之不发生作用褐化：接种后外植体表面产生酚、醌类棕褐色物质，细胞停止代谢生长玻璃化：离体植物嫩茎或叶呈半透明水状，生理失调不能进行光合作用指示植物：能够对病毒汁液产生迅速和特有的反应的某类转株寄主植物细胞的全能性：每个植物细胞都具有母体的全部遗传特性；每一个细胞都可以在特定条件下发育成与母体一样的植株灭菌方法：物理法：灼烧、常压蒸煮，紫外线，超声波，微波，过滤清洗。
化学法：升汞，过氧化氢，甲醛，酒精，高锰酸钾，漂白粉，次氯酸钠，抗菌素四大母液：大量元素母液，微量元素母液、铁盐母液、有机物质母液、激素母液实验室安排：贮藏室、药品室、洗涤间、消毒室、接种室，准备室、暗室、分析室、培养室离体培养基本设备：天平、酸度计、移液管、容量瓶、三角瓶添加活性炭的目的：活性炭具有吸附作用，可吸附非极性物质和色素大分子物质，茎尖初代培养使可防止褐化，促进生根，防止玻璃化苗几种维生素：VB1：有利于植株生根，促进愈伤组织产生VB6：促进根的生长VC：防止褐化VB5：影响植物代谢和胚的发育VE、VB12各培养基的特点：White：无机盐浓度低，适宜于生根培养；MS：无机盐浓度高，为比较稳定的离子平衡溶液，其养分的数量和比例比较合适，可满足植物的营养和生理需要，硝酸盐含量相对较高，广泛应用于植物器官，花药，细胞和原生质体培养，效果良好；B5：含较低的铵对不少培养物的生长有抑制作用。
植物组织培养教案
植物组织培养教案一、教学目标1. 了解植物组织培养的定义、原理和应用。
2. 掌握植物组织培养的基本步骤和操作技巧。
3. 能够独立完成植物组织培养的实验操作。
4. 培养学生的创新意识和实践能力。
二、教学内容1. 植物组织培养的定义和原理2. 植物组织培养的应用领域3. 植物组织培养的基本步骤4. 植物组织培养的操作技巧5. 植物组织培养的实验操作三、教学方法1. 讲授法：讲解植物组织培养的定义、原理和应用。
2. 演示法：展示植物组织培养的实验操作。
3. 实验法：学生动手完成植物组织培养的实验操作。
4. 小组讨论法：学生分组讨论植物组织培养的应用领域和实验操作中的问题。
四、教学准备1. 教室环境：教室应保持干净、整洁，通风良好。
2. 实验材料：植物组织培养实验所需的植物材料、仪器设备和试剂。
3. 教学器材：黑板、投影仪、教学PPT等。
五、教学过程1. 导入：通过展示植物组织培养的图片，引起学生兴趣，提问学生对植物组织培养的了解。
2. 讲解：讲解植物组织培养的定义、原理和应用，重点讲解植物组织培养的基本步骤和操作技巧。
3. 演示：展示植物组织培养的实验操作，让学生直观地了解实验过程。
4. 实验：学生分组进行植物组织培养的实验操作，教师巡回指导，解答学生的问题。
5. 讨论：学生分组讨论植物组织培养的应用领域和实验操作中的问题，分享彼此的成果。
6. 总结：教师总结植物组织培养的重要性和应用前景，强调实验操作的注意事项。
7. 作业：布置植物组织培养相关题目，巩固所学知识。
教学反思：本教案通过讲解、演示和实验等教学方法，使学生了解植物组织培养的定义、原理和应用，掌握植物组织培养的基本步骤和操作技巧。
在教学过程中，注意引导学生主动参与实验操作，培养学生的实践能力。
通过小组讨论，激发学生的创新意识和团队合作精神。
总体来说，本教案能够有效地实现教学目标，提高学生的学习兴趣和积极性。
但在实验过程中，要注意安全事项，确保学生的安全。
植物组织培养教案
植物组织培养教案一、教学目标1. 让学生了解植物组织培养的原理和过程。
2. 培养学生运用科学方法进行实验操作的能力。
3. 培养学生关注植物组织培养在生产和生活中的应用。
二、教学内容1. 植物组织培养的定义和原理。
2. 植物组织培养的过程。
3. 植物组织培养技术的应用。
三、教学重点与难点1. 重点：植物组织培养的原理、过程和应用。
2. 难点：植物组织培养技术的操作和应用。
四、教学方法1. 采用讲授法讲解植物组织培养的原理和过程。
2. 采用实验法培养植物组织，让学生动手操作。
3. 采用案例分析法分析植物组织培养在生产和生活中的应用。
五、教学准备1. 实验室设备：无菌操作台、培养皿、镊子、剪刀、植物激素等。
2. 实验材料：植物组织、消毒液、培养基等。
3. 教学课件和案例资料。
教案内容：一、导入（5分钟）1. 引导学生关注植物组织培养在生产和生活中的应用。
2. 提问：什么是植物组织培养？为什么需要进行植物组织培养？二、讲解（10分钟）1. 讲解植物组织培养的原理。
2. 讲解植物组织培养的过程：离体组织、愈伤组织、胚性细胞团、植株再生。
三、实验操作（15分钟）1. 分组，每组准备一份植物组织样本。
2. 指导学生进行无菌操作，将植物组织接种到培养基上。
3. 学生动手操作，观察并记录植物组织的生长情况。
四、案例分析（10分钟）1. 展示植物组织培养在生产和生活中的应用案例。
2. 引导学生分析案例中植物组织培养的关键技术和应用效果。
五、总结与反思（5分钟）1. 学生总结植物组织培养的原理、过程和应用。
2. 教师提问，检查学生对植物组织培养的理解和掌握程度。
六、作业布置（5分钟）2. 让学生查阅资料，了解植物组织培养在生产和生活中的应用。
七、课后反思（教师）1. 总结课堂教学效果，发现问题并及时改进。
2. 收集学生作业，了解学生掌握情况，为下一步教学做好准备。
八、课后作业（学生）1. 完成实验报告。
2. 查阅资料，了解植物组织培养在生产和生活中的应用。
植物组织培养教案
植物组织培养教案第一章：植物组织培养概述1.1 植物组织培养的定义1.2 植物组织培养的发展历程1.3 植物组织培养的应用领域1.4 植物组织培养的优点与局限性第二章：植物组织培养的原理与技术2.1 植物组织培养的原理2.2 植物组织培养的技术步骤2.3 植物组织培养的注意事项2.4 植物组织培养的设备与材料第三章：植物组织培养的实践操作3.1 植物组织培养的实验设计3.2 植物组织培养的实验操作步骤3.3 植物组织培养的实验注意事项3.4 植物组织培养的实验结果与分析第四章：植物组织培养在农业中的应用4.1 植物组织培养在作物育种中的应用4.2 植物组织培养在植物繁殖中的应用4.3 植物组织培养在作物栽培与管理中的应用4.4 植物组织培养在农业环境保护中的应用第五章：植物组织培养在生物科技领域的拓展5.2 植物组织培养在细胞工程中的应用5.3 植物组织培养在植物生物反应器中的应用5.4 植物组织培养在其他生物科技领域的应用第六章：植物组织培养在医药领域的应用6.1 植物组织培养在中药生产中的应用6.2 植物组织培养在珍稀药用植物繁殖中的应用6.3 植物组织培养在细胞产物的工业化生产中的应用6.4 植物组织培养在药物研发与评价中的应用第七章：植物组织培养在环境保护中的应用7.1 植物组织培养在植物修复中的应用7.2 植物组织培养在生物降解中的应用7.3 植物组织培养在生物过滤中的应用7.4 植物组织培养在生产生态材料中的应用第八章：植物组织培养在生物多样性保护中的应用8.1 植物组织培养在濒危植物繁殖中的应用8.2 植物组织培养在基因资源的保存中的应用8.3 植物组织培养在人工种子生产中的应用8.4 植物组织培养在植物育种中的作用第九章：植物组织培养的最新研究进展9.1 植物组织培养技术的最新发展9.2 植物组织培养在基因编辑中的应用9.4 植物组织培养在其他新兴领域的应用第十章：植物组织培养的未来发展趋势10.1 植物组织培养在可持续农业中的作用10.2 植物组织培养在生物产业的发展前景10.3 植物组织培养在生物技术领域的挑战与机遇10.4 植物组织培养在教育与普及中的意义重点和难点解析一、植物组织培养的定义与发展历程：理解植物组织培养的基本概念，以及其从最初发现到现代技术的发展历程。
植物组织培养复习
植物组织培养复习1、概念：组织培养：利⽤植物离体器官、组织或细胞(包括原⽣质体)，在适宜的⼈⼯培养基上和⽆菌条件下进⾏培养，使其⽣长、增殖、进⽽发育形成⼩植株的⽅法。
也称之为离体培养（In vitro culture）。
愈伤组织：原指植物在受伤后，于伤⼝表⾯形成的⼀团薄壁细胞。
在组织培养中，指在⼈⼯培养基上由外植体长出来的⼀团⽆序⽣长的薄壁细胞。
外植体：由活植物体上切取下来的可以⽤于组织培养的组织或器官2、为什么说愈伤组织是最为常见的培养⽅式？原因：⼤部分组织培养经历callus再⽣途径长出植株；callus可以⽤于悬浮培养和原⽣质体培养。
3、组织培养的类型有哪些？a按培养⽅法：固体培养、液体培养、看护培养、微室培养、包埋培养等b按培养过程：初代培养、继代培养4、组织培养在园艺业（农业）上的应⽤有哪些？a倍性育种：花药培养、胚乳培养b突变体筛选：愈伤组织培养c创造新种质：细胞融合d克服胚败育：胚培养e植物性药物和⽣物制品的⽣产5、在组织培养技术的发展中做出巨⼤贡献的⼈。
6、⼀个正规的组织培养实验室应具备哪些基本仪器？有何⽤途？烘箱，冰箱，灭菌锅，超净⼯作台，酸度计，摇床，显微镜，天平，培养箱。
玻璃器⽫，微孔过滤器，细胞计数器，接种⽤具。
7、⼀个正规的组织培养实验室应具备哪些房间？洗涤室（区），制备室（区），灭菌室（区），贮放室（区），操作室（区），培养室（区），观察室（区），药品室（区）8、详细叙述组织培养过程中的基本技术规程洗涤，灭菌，⽆菌操作~9、培养基的类型有哪些？a按性质分：基本培养基，完全培养基b按状态分：固体培养基，液体培养基10、培养基的主要成分有哪些？各有何作⽤？a⽆机营养成分：⼤量元素（氮，磷，钾，钙，镁，硫）微量元素（硼、锰、锌、钼、铜、钴、氯、铁）b有机营养成分：含氮有机物（维⽣素、氨基酸）碳源和能源，植物激素c其他成分：活性炭，琼脂，抗⽣素，缓化剂11、配制培养基的基本步骤及注意事项有哪些？选择，配置（取样，加成分，测PH）12、什么是⼈⼯种⼦？有哪些特点与优点？⼈⼯种⼦：(artificial seeds)亦称体细胞种⼦。
植物组织培养(全)
胚培养是器官培养的一种。选用的外植体是成熟或未成熟的胚进行离体无菌培养。其具体方法是将取出放在液体或固体培养基上培养，由于胚包含在胚珠和子房里，因而进行胚胎培养时，常常是将胚珠和子房放在培养基上培养。
胚培养用途：1.拯救胚2.研究胚的发育营养研究3.一些特殊的领域的研究。
(4)细胞和原生质体培养
二是要给予它们适当的刺激，即给予它们一定的营养物质，并使它们受到一定的激素的作用。
全能性体现的两个过程
一个已分化的细胞要表现它的全能性，必须经历两个过程，即首先要经历脱分化过程，然后再经历再分化过程。
再分化的过程有两种方式：
一是器官发生方式 二是胚胎发生方式
2.激素（植物生长调节剂）调控
后来证明，激素可调控器官发生的概念对于多数物种都可适用，只是由于在不同组织中这些激素的内生水平不同，因而对于某一具体的形态发生过程来说，它们所要求的外源激素的水平也会有所不同。
⑤1958年，Wickson和Thimann指出，应用外源细胞分裂素可促成在顶芽存在的情况下处于休眠状态的腋芽的生长。
当把茎尖接种在含有细胞分裂素的培养基上以后，将可使侧芽解除休眠状态，而且，能够从顶端优势下解脱出来的不只是那些既存于原来茎尖上的腋芽，此外，还有由原来的茎尖在培养中长成的侧枝上的腋芽，结果就会形成一个郁郁葱葱的结构，里面包含了数目很多的小枝条，其中每个小枝条又可取出来重复上述过程，于是在相当短的时间内，就可以得到成千上万的小枝条。当把这些小枝条转够到另外一种培养基上诱导生根以后，即可移植于土壤中。
奠基阶段（从20世纪30年代中至20世纪50年代末）
30年代中期，植物组织培养领域两个重要的发现，其一是认识了B族维生素对植物生长的重要意义；二是发现了生长素--一种天然的生长调节物质。
植物组织培养复习重点
考试重点（大部分是课后作业）：题型：填空，判断，名词解释，问答（1）植物组织培养的广义和狭义概念？答：广义概念是指对植物的器官，组织，细胞及原生质体进行离体培养的技术。
狭义概念是指对植物的组织（如分生组织，表皮组织、薄壁组织等）及其培养产生的愈伤组织进行离体培养的技术。
（2）植物组织培养分类及其主要特点？答：根据外植体来源和培养对象不同，植物组织培养的研究类型可以分为5种，分别是器官培养，组织培养，细胞培养，胚胎培养，原生质体培养。
主要特点：⑴无菌条件；⑵成分完全确定的人工培养基；⑶起始材料处于离体状态；⑷克隆；⑸组培苗叶片表面一般都缺乏角质层或蜡质层，且气孔都是张开的；⑹环境温度、光照强度和时间等都是人为设定的；（3）植物组织培养的应用及展望？答：应用：植物离体快繁，无病毒苗木培育，培育新品种或创制新品种，次生代谢物生产，种质资源保存及制作人工种子。
展望：组培容器大型化，组培技术简单化，组培环境自然化（4）细胞全能性、脱分化、再分化概念？答：细胞全能性：离体细胞在适当条件下分化形成再生植株的能力。
脱分化：也称去分化，是指在离体培养条件下生长的细胞、组织或器官经过细胞分裂或不分裂逐渐失去原来的结构和功能而恢复分生状态，形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞的过程。
再分化：是指离体培养的植物细胞和组织可以由脱分化状态重新进行分化，形成另一种或几种类型的细胞、组织、器官，甚至形成完整植株的过程。
（5）植物激素配比模式？答：生长素/细胞分裂素：高有利于根的形成；中无定向结构生长；低有利于芽苗生长；（6）体细胞胚胎发生的概念、方式、机理和特点？答：概念：植物离体培养细胞产生胚状体的过程。
方式：直接途径：从外植体某些部位的胚性细胞直接诱导分化出体细胞胚胎。
间接途径：外植体先脱分化形成愈伤组织，再从愈伤组织的某些细胞分化出体细胞胚胎。
机理：特点：①双极性；②（与母体组织或外植体的维管束系统无直接联系，处于较为孤立状态，）即存在生理隔离。
组培考试重点
1.名词解释愈伤组织；原生质体；再分化；外植体；离体器官发生；污染；植物无糖组织培养；看护培养；胚状体；连续培养细胞全能性；脱分化；植物组织培养；褐化；植物脱病毒；植物器官培养；人工种子；细胞悬浮培养；脱毒苗；植物离体快繁；玻璃化；继代培养；植物离体快繁2.填空题1.植物组织培养过程中，最常用的培养基是？常用？和？调节pH，大多数植物的pH要求调节在？范围内。
2、植物组织培养按培养对象分为？、？、？、？、？等几种类型。
3、在原生质体的酶溶液中，需要加入一定量的？，其作用是保持原生质体膜的稳定。
4、培养基的灭菌要求压力为？、温度为？、维持时间为？。
5、组织培养中常用的有吲哚乙酸（IAA），2，4-二氯苯乙酸（2，4-D），吲哚丁酸（IBA），萘乙酸（NAA），它们的作用强弱顺序为？> ？> ？> ？。
6、在细胞培养中，常由分散性较好的_____？__ 来制备单细胞，也可以用____？___ 从植物不同组织直接制备单细胞。
7、活性炭在植物组织培养中的作用是？。
8、组织培养植株的再生途径有两条：一是？发生，另一是？发生。
9、可以通过？、？、？、？、？等措施预防褐变的发生。
10、某些生长调节物质及抗生素、酶类物质预热不稳定，不能使用？的灭菌方法，而要采取？方法灭菌。
11、悬浮培养的材料必须达到？、？和？等三个要求。
12、植物组织培养技术的三大难题分别为？、？和？。
13、6-BA/NAA的高低决定了外植体的发育方向，比值低时促进？的生长，这时？占主导地位；比值高时促进？的生长，这时？占主导地位。
14、具有防止褐变作用的维生素是？。
3.判断题1. 环境的相对湿度可以影响培养基的水分蒸发，一般要求80%-90%的相对湿度。
（）2. 幼年细胞比成年细胞和组织诱导愈伤组织更容易。
（）3. 一般来说，光照强度较强，幼苗容易徒长，而光照强度较弱幼苗生长的粗壮。
( )4. 培养基中的铁盐，常用不易分解的乙二胺四乙酸铁螯合物，以防在PH较高时铁被氧化为不溶的氢氧化铁。
组培重点名词解释、填空
一、名词解释（20）1、植物组织培养:是指用无菌方法，使植物体的离体器官（根、茎、叶、花、果实等）、组织（形成层、分生组织、花药组织、韧皮部、皮层等）和细胞（体细胞和生殖细胞）在人为提供的条件下生长和发育的培养技术的总称。
2、细胞全能型：离体的体细胞，具有母体植株的遗传物质，在适宜的条件下，能按其母株的表型完整地加以表达。
在形态建成上具有再生成完整植株的潜势，在代谢上具有合成原植物体所含有的代谢产物的能力。
3、培养基：人工配制的、适合于植物生长发育的“人工土壤”。
它含有植物生长所需的各种无机营养元素、有机营养元素、水分、植物生长调节物质以及培养基的支持体等。
4、母液（贮备液）：在组织培养工作中，配制培养基是日常工作，为简便起见，将配方中的药品一次称量供一段时间使用，即配一些浓溶液，用时稀释，这种浓溶液就是贮备液或母液5、外植体：把由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官叫做外植体6、快速繁殖：在无菌条件下，利用植物体的一部分，包括细胞，组织或器官，在人为控制的营养和环境条件下快速繁殖植物的方法。
7、顶芽萌发：又称器官型再生，是指由培养的顶芽或腋芽直接萌发形成小茎后，再诱导小茎生根而形成完整植株的过程。
8、胚状体发生型：是指外植体在适宜的培养环境中，形成类似于合子胚结构的胚状体或体细胞胚。
体细胞胚与合子胚一样具有胚根和胚芽两极性。
成熟的胚状体可以像合子胚一样长出根、芽，萌发再生植株。
9、不定器官发生型：离体培养条件下不定器官的发生可以通过直接或间接途径由外植体表面分化出不定芽或不定根等器官，并进一步发育成完整植株。
10、原球茎形成型：原球茎形成型是兰属植物特有的再生植株途径。
兰属植物外植体接种于培养基上，经过一段时间的培养便能形成原球茎，然后每一个原球茎可以进一步发育成完整植株，且原球茎可以进一步增殖。
11、玻璃化:是指无菌苗生长异常，茎叶呈透明或半透明的水浸状，植株矮小肿胀、失绿、叶片皱缩成纵向卷曲，脆弱易碎的现象。
植物组织培养
植物组织培养重点名词解释：1、植物组织培养：是指在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或完整植株的技术。
又称为植物离体培养2、外植体（explant）：用于离体培养的那部分植物器官、组织或细胞。
3、愈伤组织（callus）：是指外植体因受伤或在离体培养时，其细胞进行活跃的分裂增殖而形成的一种无特定结构和功能的组织。
4、离体生态学（in vitro ecology）：是指研究离体培养环境条件控制的科学，其研究对象是培养基、植物材料和人工环境条件。
5、植物细胞全能性（totipotency）：是指任何携带完整遗传信息的植物活细胞都具有表达其所有遗传信息的能力，能够发育成完整的植株。
胞需经过脱分化和再分化过程才能表现其全能性。
6、脱分化（dedifferentiation）：成熟细胞或分化细胞转变为分生状态（即形成愈伤组织）的过程。
7、再分化（redifferentiation）：成熟细胞或分化细胞脱分化转变为愈伤组织后重新分化成异质细胞的过程。
8、植物茎段培养是指对植物的带有一个以上定芽或不定芽的外植体（包括块茎、球茎、鳞茎在内的幼茎切段）进行离体培养的技术。
9、茎尖培养（shoot tip culture or apical meristem culture）是指对植物顶端的原分生组织和它衍生的分生组织的培养。
10、叶培养的意义：研究叶形态建成、光合作用、叶绿体形成等；叶细胞全能性；原生质体融合；无性繁殖系；诱变育种。
11、离体叶组织发育途径：直接产生不定芽，由愈伤组织产生不定芽，胚状体和其他。
12、植物器官培养是指对植物某一器官的全部或部分或器官原基进行离体培养的技术。
13、植物胚胎培养是指对植物的胚、胚乳、胚珠和子房等进行离体培养，使其发育成完整植株的技术。
包括：胚培养、胚乳培养、胚珠培养以及子房培养。
14、胚乳培养是指将胚乳组织从母体上分离出来，通过离体培养，使其发育成完整植株的技术15、胚珠培养是将胚珠从母体分离出来，无菌条件下让其进一步生长发育，使其形成植株的技术。
植物组织培养知识点归纳
植物组织培养知识点归纳1第1章植物组织培养:指植物器官、组织、细胞、原生质体等的培养。
体内使用人工培养基使它们生长成完整的植物2，外植体:在植物组织培养中，为无菌细胞、组织、器官等。
从活植物中提取并接种在培养基上的称为外植体。
3，愈伤组织:指在人工培养基上无序地从外植体中生长出来的大量薄壁细胞。
4.1的应用。
1农业应用。
幼苗的快速繁殖。
无病毒培养3。
(1)倍性育种，缩短育种年限，具有明显的杂种优势；(2)克服远缘杂交(胚胎培养)的不亲和性和不育性；(3)种质保存(4)变异2的创造，在遗传学、分子生物学、细胞生物学、组织学、胚胎学、基因工程、生物工程等方面的应用。
用于基因工程创造植物新种质用于植物生长发育的理论研究，包括生理学、病理学、胚胎学、细胞和分子生物学等。
3。
使用组织培养材料作为植物生物反应器第2章1，全能性:任何具有完整细胞核的植物细胞都具有形成完整植物所必需的所有遗传信息以及发育成完整植物的能力。
2，细胞分化:指导致细胞形成不同结构和功能变化或潜在发育模式的过程3，去分化:指在体外生长的细胞、组织或器官逐渐失去原来的结构，恢复分生组织状态，形成无组织结构的细胞团或愈伤组织的过程4，再分化:指去分化细胞恢复其分化能力并形成具有特定结构和功能的细胞、组织、器官甚至植物的过程5，植物组织培养中经常遇到的问题及解决方法1，污染与预防:1，真菌污染后，如果孢子已经形成，必须在高压灭菌后丢弃然而，在细菌污染的情况下，只要及时发现，材料仍然可以使用，并且材料上部不易受细菌影响的部分被切割和转移。
2.用抗生素等抗菌剂处理会影响植物材料的正常生长第二，的褐变和防止(1)选择合适的外植体(2)适宜的培养条件(3)用抗氧化剂连续转移(4)，玻璃化和防止(1)提高培养基中的溶质水平和降低培养基中的水势；(2)减少培养基中氮化合物的量；(3)增加光照；(4)增加容器通气量和施用CO2肥料对降低试管苗玻璃化有明显效果。
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名词解释1.外植体：由活植物体上切取下来的可以用于组织培养的组织或器官。
2.愈伤组织：在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞（细胞排列疏松、无规则）。
3. 植物细胞的脱分化：由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程，又称去分化。
4. 植物细胞的再分化：脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等器官的过程。
5. 试管苗的玻璃化植物组培玻璃化苗的1、叶和嫩梢呈水晶透明或半透明水渍状；2、整株矮化肿胀、失绿；3、叶片皱缩成纵向卷曲，脆弱易碎；4、叶表缺少角质层蜡质，没有功能性气孔，不具栅栏组织，仅有海绵组织。
玻璃化现象的预防措施：1、适当控制培养基中无机盐浓度2、适当控制培养基中蔗糖和琼脂浓度3、适当降低细胞分裂素和赤霉素浓度4、增加自然光照，控制光照时间5、改善培养皿的气体交换状况6、控制好温度7、在培养基中添加其他物质6.胚性感受态：体胚发生的相对容易程度。
7.人工种子又称合成种子或体细胞种子。
任何一种繁殖体，无论是在涂膜胶囊中包裹的、裸露的或经过干燥的，只要能够发育成完整的植株，均可称人工种子。
8.微室培养法：即将细胞培养在很少量的培养基中。
9.看护培养法：指用一块活跃生长的愈伤组织来看护单个细胞，并使其生长和增殖的方法。
10.植板效率：已形成细胞团的百分数，即每100个铺在平板上的细胞中有多少个长出细胞团。
11.试管外生根：将生根诱导与驯化培养结合在一起.试管内生根：茎芽生根诱导有2条途径，其中一途径为试管内生根，在试管内诱导枝条生根叫试管内生根12.植物离体保存：将离体培养的植物细胞、组织、器官或试管苗，保存于人工环境下，一般需要在低温或超低温条件下进行，以抑制其生长，达到长期保存的目的。
13．超低温保存：低温从4℃往下推，－80℃（干冰温度），－196℃以下的低温称为超低温。
问答题1. 母液：为了避免每次配制培养基都要对几十种化学药品进行称量，将培养基中的各种成分按质量的特定倍数称量配制成的浓缩液。
2.植物激素⑴生长素类生长素主要促进细胞分裂的生长，促进细胞脱分化，有利于诱导愈伤组织的产生，生长素与细胞分裂素同时使用有协调作用，在离体培养分化调节中，生长素促进根的形成抑制芽的形成，液体培养中利于体细胞胚胎发生。
常用IAA、IBA、NAA、2,4-D。
⑵细胞分裂素类：促进细胞分裂和扩大，调解器官分化，延缓组织衰老，增强蛋白质合成，能改善其它激素作用，离体培养中，促进不定芽的发生，与生长素协调作用可有效控制培养物的生长与分化。
常用6-BA、ZT、KT、2iP。
⑶赤霉素类：促进细胞伸长生长、诱导花芽形成、打破种子休眠以及诱导单性结实等生理功能。
有20多种，目前主要是赤霉酸GA3。
离体培养下，还与生长素协调作用对形成层分化有影响，刺激体细胞胚进一步发育成植株。
（4）脱落酸：对某些植物体细胞胚发生的特异基因表达起调控作用，激活相关基因的表达，大量合成贮藏蛋白、晚期胚胎丰富蛋白和少量胚胎发生特异性蛋白。
通常低浓度促进体细胞胚发生，高浓度抑制体细胞胚的发生。
3.芽的增殖途径（一）通过愈伤组织利用植物细胞在培养中无限增殖的可能性以及它们的全能性，可以对若干种植物类型进行快速繁殖。
由这些植物的器官或组织诱导形成的愈伤组织，通过器官发生或体细胞胚胎发生都可以分化出植株。
（二）不定芽形成：产生不定芽的器官：根（福禄考属植物、苹果的某些无性系、悬钩子属植物）、鳞茎（风信子—基部受伤以后）、叶（秋海棠、天竺葵等）。
通过培养基中适当配比激素的影响，就是那些在正常情况下不能进行营养繁殖的植物，如芸苔属植物、除虫菊、亚麻以及番茄等，也能由叶段和茎段上长出不定芽来。
（三）增强腋芽生枝能力（四）单节段扦插：在某些植物中，通过调节培养基中的激素组成还不能使腋芽由顶端优势下解放出来，原来存在于外植体上的芽只能长成一个不分枝的茎。
在这种情况下，则须将待繁殖的枝条剪成单节茎段，接种在培养基上，过一定时间成苗后，再将它剪成单节茎段，经继代培养后又可成苗。
（五）原球茎：1960年，Morel提出了一个离体无性繁殖兰花的方法，繁殖系数极高。
当把兰花离体茎尖进行培养时，它们不是长成带叶的枝条，而是形成一个扁球状体，基部着生假根。
在茎尖培养中，这种原球茎起源于叶片的表皮或下表皮细胞。
某些原球茎还能进行增殖，形成原球茎丛，其中最多可包含十几个原球茎。
4．原生质体融合方法：1、自发融合2、诱发融合（物理和化学方法）：1、NaNO3法：NaNO3的作用：中和质膜的负电荷，使原生质体不再相互排斥，而紧密结合在一起。
不足：诱导频率不高。
2、高pH-高Ca离子法：优点：杂种产量高。
不足：高pH值对细胞有毒害作用。
3、PEG法：PEG是一种带负电性的高分子化合物，在原生质体融合中起到一种桥梁作用，可以使原生质体凝聚。
在洗脱过程中，PEG将被洗掉，导致质膜表面电荷重排。
粘连的质膜大面积紧密相连，电荷的重排导致一个原生质体的负性电荷部位与另一原生质体的正性电荷部位相连而导致融合。
①融合频率高②可重复性强③诱发融合无特异性④毒性较低4、电融合法原理：①交流电场使原生质体表面电荷偶极化，沿着电极排列，形成串珠。
②施加直流电场后，形成串珠的原生质体在质膜接触处发生穿孔，开始遗传物质的交流。
5. 褐变是指外植体在培养过程中体内的多酚氧化酶被激后活，使细胞内的酚类物质氧化成棕褐色醌类物质，这种致死性的褐化物不但向外扩散致使培养基逐渐变成褐色，而且还会抑制其他酶的活性，严重影响外植体的脱分化和器官分化，最后变褐而死亡的现象。
褐变的产生：1.植物种类：一般木本植物，单宁、色素含量高的植物易发生褐变2.外植体的生理状态：一般幼龄材料，幼嫩器官和组织，春季取外植体，褐变发生较轻3.培养基的成分：培养基中的细胞分裂素类如6-BA或KT促进褐变发生，而生长素类如IAA可减轻褐变发生。
4.材料转移时间5.基因型褐变的防止措施：1、选择适宜的外植体及最佳培养基：适当降低培养基无机盐浓度，降低PH值，降低细胞分裂素水平等，可显著减轻培养物褐变2、连续转移3、加抗氧化剂：如硫代硫酸钠、抗坏血酸4、加多胺类物质：如精胺、亚精胺5、加活性碳6.为什么要进行试管苗的驯化移栽？1、试管苗移栽是组织培养过程的重要环节，这个工作环节做不好，就会造成前功尽弃。
为了做好试管苗的移栽，应该选择合适的基质，并配合以相应的管理措施。
2、必须通过炼苗，例如通过控水、减肥、增光、降温等措施，使她们逐渐地适应外界环境，从而使生理、形态、组织上发生相应的变化，使之更适合于自然环境，保证试管苗移栽成功。
3、从叶片上看，试管苗的角质层不发达，叶片通常没有表皮毛，或较少表皮毛，甚至叶片上出现了大量的水孔，气孔的数量大小也超过普通苗。
所以，试管苗更适合于高湿的环境生长，当将它们移栽到试管外环境时，试管苗失水率会很高，容易死亡。
因此，为了改善情况，要经过与外界相适应的驯化处理，通常采取的措施有：对外界要增加湿度、减弱光照；对试管内要通透气体、增施二氧化碳肥料、逐步降低空气湿度等。
4、对栽培驯化基质要进行灭菌是因为试管苗在无菌的环境中生长，对外界细菌、真菌的抵御能力极差。
为了提高其成活率，在培养基质中可掺入75%的百菌清可湿性粉剂200-500倍液，以进行灭菌处理。
7.外植体的选择：原则：1.易于离体培养的种类、品种、类型；2.生产上或研究上意义比较大的种类、品种、类型考虑因素：1.外植体的类型:(茎尖)生长速度快,遗传稳定,无病毒分布,但材料有限.为此茎段也是重要来源.(叶片)采用幼嫩的叶片较好.(花蕾)在花诱导之前细胞的脱分化容易发生,故外植体常取发育早期阶段的花即花蕾.(胚)大多数花卉都可用胚培养的方式进行快繁.2.年龄和着生部位:植株的生理年龄越小,外植体的再生能力越强,培养成功的可能性越大.同一植株上接近基部的枝条,生理年龄越小3.取材季节和时间:对培养材料的启动和培养至关重要.一般在生长季夏季4.大小(大:不易灭菌小:不易成活):一般0.5-1厘米脱毒培养0.2-0.5厘米污染原因:1.病原菌污染(细菌,真菌)2.外植体、培养基、培养器皿带菌3.操作人员未遵守操作规程。
污染预防措施：1.防止材料带菌2.防止用具带菌3.操作室要处于无菌状态4.操作人员要按照操作程序进行8.影响花药诱导频率的因素①花粉发育时期是影响培养效果的重要因素。
对多数植物来说，单核中期或晚期的花粉最容易形成花粉胚或花粉愈伤组织。
②花药供体植株的生长条件、年龄、基因型对花药培养反应的影响是很大的。
不同季节、栽培环境、不同部位的花蕾，其花粉的生理状态不同。
多数情况下幼年植株优于老年植株。
③培养基是花药培养中影响花粉启动和再分化的重要条件。
1）基本培养基：关于水稻、小麦的花药培养基，在N6培养基上，水稻花粉的出愈率大幅度提高。
C17和W14培养基，它们可以大幅度提高小麦的花药出愈率。
2）培养基中的植物生长物质的种类会影响花粉发育的途径3）培养基中糖的种类对花粉胚的诱导和分化重要影响。
4）氮源和硝酸银5）其他成分和pH值6）活性炭④逆境处理对小孢子胚胎发生的诱导作用（低温、热激、γ射线处理、秋水仙素处理、营养饥饿、重金属胁迫）。
低温预处理可以提高花粉胚的诱导频率，培养温度是影响花药反应的一个重要因素。
较高的温度虽能诱导较高频率的花粉愈伤组织，但愈伤组织分化白化苗的频率也高。
控制培养温度仍是减少白化苗的一个有效措施。
附加题1.植物组织培养在农业上的应用：（育种？举例）快繁：人工种子、茎尖培养脱毒：微芽嫁接、茎尖培养克服杂交不亲和：花药培养、细胞融合种质资源保存和交换：愈伤组织培养、茎尖培养3.植物组织培养的发展简史:1.Haberlandt(德国)：观点: 高等植物的组织和器官可以分割成单个细胞贡献：提出细胞全能性&首次进行离体细胞培养2.怀特white培养基3.1948年：Skoog和崔真培养烟草茎段时，发现腺嘌呤或腺苷可解除生长素对芽生长的/生长素高，生芽；低，生根；相等，不分化。
4. 1960年：Cocking酶解法分离原生质体获得成功。
使植物细胞可以象动物细胞一样进5. 1952年：Morel和Martin首次报道茎尖分生组织的离体培养，获得无病毒大丽花植6.Guha&Maheshwari南洋金华花药培养发育成胚。