植物组织培养复习提纲

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1.植物组织培养按培养对象分为______ 、 _______ 、________ 、 ________ 、________ 等几种类型。

2.一个己停止分裂的成熟细胞转变为分生状态,并形成耒分化的愈伤组织的现象称为n tv3.不同的灭菌剂其灭菌的机理一般不一样,次氯酸钙和次氯酸钠都是利用分解产生 _________ 来杀菌的;升汞是靠 ________ 来达到灭菌日的。

4.去除植物病毒的主耍方法是 _____ 和_______ 两种方法,当把二者结合起來脱毒效果最好5.在通过微茎尖培养脱毒时,外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定,一般以 __________ mm、带 ________ 个叶原基为好。

6.White培养基________ 浓度低,适合生根培养。

7.一个已停止分裂的成熟细胞转变为_________ 状态,并形成_________ 的现象称为“脱分化”。

8.BA/NAA的高低决定了外植体的发育方向,比值低时促进 ________ 的生长,这时_________ 占主导地位;比值高促进_________ 的生长,这时 _________ 占主导地位。

9.进行植物组织培养最基本的前提条件是 _____ 。

1、植物组织培养的理论基础是植物细胞全能性。

2、组织培养实验室必要的设备有超净工作台、高压灭菌器、空调机、夭平、显微镜、蒸饱水发生器等。

3、糖在植物组织培养中是不可缺少的,它不但作为离体组织赖以生长的碳源,而且还能维持培养菇渗透压4、培养基灭菌一般在-108 kPa的压力下,锅内温度达121 °C ,维持20-30 min o5、在离体叶培养中,6・BA和KT利于芽的形成:24D利于愈伤纟FI织的形成6、在离体叶组织脱分化和再分化培养屮,茎和芽的分化主要有4个途径:方•接产生不泄芽、由愈伤组织产工不定芽、胚状体形成、形成球状体或小鳞茎等途径。

7、目前培育无病毒苗最广泛和最重要的一个途径是茎尖培养脱毒。

植物组织培养复习提纲有答案

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植物组织培养复习提纲(仅供参考,关键在于全面复习掌握!)一、主要专业术语细胞全能性:在多细胞生物中每个体细胞的细胞核具有个体发育的全部基因,只要条件许可,都可发育成完整的个体。

脱分化:已经分化的植物器官、组织或细胞,当受到创伤或进行离体(也受到创伤)培养时,已停止分裂的细胞,又重新恢复分裂,细胞改变原有的分化状态,失去原有结构和功能,成为具有未分化特性的细胞。

愈伤组织:指切取植物体的一部分,置于含有生长素和细胞分裂素的培养液中培养,诱导产生的无定形的组织团块。

人工种子:指植物离体培养中产生的胚状体(包括体细胞胚和性细胞胚),包裹在含有养分和具有保护功能的物质中,并在适宜条件下能够发芽出苗的颗粒体。

植物快速繁殖:采取培养基配制,材料灭菌,无菌培养,幼苗转移到苗床,成苗转至大田栽种五步走的繁殖培养方式。

单倍体:体细胞中含有本物种配子染色体数(1n)的个体二倍体:体细胞中含有两个染色体组的生物个体胚乳培养:将胚乳从母体上分离出来,放在无菌的人工环境条件下使其进一步生长发育形成幼苗的技术。

连续培养:连续培养又叫开放培养,是相对分批培养或密闭培养而言的。

是采用有效的措施让微生物在某特定的环境中保持旺盛生长状态的培养方法。

胚状体:离体培养条件下,没有经过受精过程,但是经过了胚胎发育过程所形成的胚状类似物看护培养:将亲本愈伤组织或高密度的悬浮细胞同低密度细胞一起培养,以促进低密度细胞生长、分裂的培养方法。

植物种质保存:在适宜环境条件下贮存种质基因载体,使蔬菜种质保持生命力和遗传性的技术。

二、主要知识点1、植物组织培养成功的关键是什么?1.无毒无菌的环境2.生长素或生长素类似物3.通常用固体培养基(琼脂)4.先进行植物组织或器官的脱分化5.长出根来后要保证根呼吸所需氧气2、植物外植体的表面消毒剂种类1、漂白粉(1%~10%的滤液)2、次氯酸钠溶液(0.5%~10%)3、氯化汞(0.1%~1%)4、酒精(70%~75%)5、过氧化氢(3%~10%)6、新洁尔灭等。

植物组织培养复习重点

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组培复习材料一、名词解释1、培养基:是离体植物(外植体)赖以生长、分化的基础,是根据植物的需求,人工配制的含有各种营养成分的营养液。

2、液体培养:把细胞或生物体的一部分,置于液体培养基中使其发育,并不断振荡,使之均匀地在悬浊液中进行培养的一种方法。

3、种子培养:是成熟种子和发育不全的未成熟种子的无菌培养。

4、叶培养:从母体植株上将叶组织(包括叶原基在内)切下,放在无菌的人工条件下使其生长发育形成植株的技术。

5、热处理脱毒:在一定范围内,用高温处理可部分或完全钝化植物组织中的某些病毒而不伤害或很少伤害植物本身的脱毒方法。

6、花药培养:是把花粉发育到一定阶段的花药接种到培养基上,来改变花粉的发育程序,使其分裂形成细胞团,进而分化成杯状体,然后再生植株,或形成愈伤组织,由愈伤组织再分化成植株。

7、连续培养:是利用特别的培养容器进行大规模细胞培养的一种培养方式。

(培养过程中,不断注入新鲜培养基,排掉等体积用过的培养基,或者抽取悬浮培养物,使培养物的营养物质得到不断补充,从而保持其恒定体积的培养。

——8、分批培养:指把细胞分散在一定容积的培养基中进行培养,建立单细胞培养物的培养方式。

(细胞生长在固定体积的培养基中,当主要营养物质耗尽时,细胞的分裂和生长即停止。

)二、简答题1、MS培养基特点。

答:MS培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的,其特点是无机盐和离子浓度较高,是较稳定的离子平衡溶液,具有高含量的氮、钾,尤其是硝酸盐用量大,还有一定数量的铵盐,其养分的数量和比例合适,不需要添加更多的有机附加物,就能满足植物组织对矿质营养的要求,加速愈伤组织和培养物的生长,当培养物就不转移时仍可维持其生存。

目前应用最广泛。

2、植物组培生产特点。

答:①和传统的生产方式相比,具有不占耕地、生产不受季节限制而且能够整年连续进行、不受灾害性天气和病虫害影响的特点;②具有人为可控性,可采用更适合于植物生长的“培养基”代替土壤提供养分和生长调节物质;③具有很高的生产效率。

植物组织培养知识点归纳教学提纲

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植物组织培养知识点归纳教学提纲第⼀章1、植物组织培养:是指在离体条件下,利⽤⼈⼯培养基对植物的器官、组织、细胞、原⽣质体等进⾏培养,使其长成完整植株2、外植体:在植物组织培养中,由活体(in vivo)植物上提取下来的、接种在培养基上的⽆菌细胞、组织、器官等均称为外植体。

3、愈伤组织:指在⼈⼯培养基上由外植体长出来的⼀团⽆序⽣长的薄壁细胞。

4、应⽤⼀、农业上的应⽤1. 种苗快速繁殖(rapid propagation)2.⽆病毒苗(virus free)的培养3.在育种上的应⽤(breeding)(1)倍性育种,缩短育种年限,杂种优势明显;(2)克服远缘杂交的不亲合性和不孕性(胚培养);(3)保存种质(4)创造变异⼆、在遗传学、分⼦⽣物学、细胞⽣物学、组织学、胚胎学、基因⼯程、⽣物⼯程等⽅⾯的应⽤。

⽤于基因⼯程技术创造植物新种质。

⽤于植物⽣长发育理论研究,包括⽣理学、病理学、胚胎学和细胞与分⼦⽣物学等。

三、利⽤组织培养材料作为植物⽣物反应器第⼆章1、细胞全能性(Totipotency):指任何具有完整的细胞核的植物细胞都拥有形成⼀个完整植株所必须的全部遗传信息和发育成完整植株的能⼒。

2、细胞分化(cell differentiation):指导致细胞形成不同结构,引起功能或潜在的发育⽅式改变的过程。

3、脱分化(Dedifferentiation):指离体条件下⽣长的细胞、组织或器官逐渐失去原来的结构和功能⽽恢复分⽣状态,形成⽆组织结构细胞团或愈伤组织的过程。

4、再分化(Redifferentiation):指脱分化的细胞重新恢复分化能⼒,形成具有特定结构和功能的细胞、组织、器官甚⾄植株的过程。

5、植物组织培养中常遇到的问题以及解决措施⼀、污染及防治:1、真菌污染后,如果已形成孢⼦,则必须经⾼压灭菌后扔掉。

但若是细菌污染,只要及时发现,将材料上部未感菌的部分剪下转接,材料仍可使⽤。

2、⽤抗⽣素等杀菌药剂的处理,会影响植物材料正常⽣长。

植物组织培养复习资料

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植物组织培养复习资料一、名词解释。

(每个3分,共24分)1、植物组织培养:在无菌和人工控制的环境条件下,利用适当的培养基,对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养,使其再生细胞或发育成完整植株的技术。

又称植物离体培养。

2、细胞的全能性:指植物体的任何一个有完整细胞核的活细胞都具有该植物的全套遗传基因和产生完整植株的潜在能力。

3、脱分化:离体培养条件下生长的器官、组织、细胞,经过细胞分裂或不分裂而恢复分生状态,形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞过程。

4、外植体:从活体植物上切取下来,用以进行离体培养的那部分组织或器官。

5、单细胞培养:对分离的到的单个细胞进行培养,诱导其分裂增殖,形成细胞团,再通过细胞分化形成芽、根等器官或胚状体,直至长成完整植株的技术。

6、胚状体:亦称体细胞胚。

指在组培过程中,由植物体细胞所形成的类似于合子胚的结构。

它具有根、茎结构,能够一次性形成再生植株。

7、平板培养:是将悬浮培养的细胞接种到未固化的薄层培养基中,使其与培养基充分配合,再倒入培养皿中进行培养的方法。

8、人工种子:指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽,被包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中,从而形成能发芽出苗的颗粒状。

9、次生代谢产物:指植物生长发育正常运行的非必需的小分子有机化合物,其产生和分布通常有种属、器官、组织以及生长发育时期的特异性。

10、再分化:细胞经过脱分化形成的愈伤组织再次分化,进行器官形成,产丛生芽或胚状体,形成完整植株的过程。

11、无病毒苗:指不含该种植物主要危害病毒的苗木。

二、不定项选择1、培养室里的湿度一般保持在____C_____.A 30~40%;B 50~60%;C 70~80%;D 80~90%2. 下列不属于生长素类的植物激素是____A D____。

A Kt;B IAA;C NAA;D ZT3. 影响培养基凝固程度因素有_______A B C D__.A 琼脂的质量好坏;B 高压灭菌的时间;C 高压灭菌的温度;D 培养基的PH4. 活性炭在组织培养中的作用有_______ABC_。

植物组织培养复习资料

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1、植物组织培养:在无菌条件下,对植物组织,器官,细胞原生质体等离体活材料进行培养促使其生长发育,并再生成完整植株的过程。

2、外植体:植物组织培养过程中从活体植株上切去下来的用于离体培养的一切材料。

(如器官、组织、细胞、原生质体、种子等)3、愈伤组织:在离体培养的条件下,经过植物细胞脱分化和不断增殖所形成的无特定结构的细胞团或组织。

4、玻璃化现象:在组织培养过程中,培养物叶片或嫩梢呈透明或半透明的水渍状现象。

5、脱分化:一个成熟细胞转化为分生状态并形成为分化的愈伤组织的现象6、再分化:指脱分化形成的愈伤组织细胞在十一的培养条件下,又分化为胚状体,或直接分化出根和芽等器官形成完整植株的过程。

7、细胞的全能性:植物体的每一个生活细胞都具备母体的全套基因,在一定条件下可以发育成完整植株的能力。

8、人工种子:指通过组织培养技术,将植物的体细胞诱导在形态上和生理上均与合子胚相似的体细胞胚,然后将它包埋于有一定营养成分和保护功能的介质中,组成便于播种的类似种子的单位9、植物离体培养:利用植物细胞的全能性,在无菌和人工控制的环境条件下,利用适当的培养基,对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养,使其再生细胞或完整植株的技术。

10、种子败育:是指由于植物自身的原因导致植物胚胎在发育过程中的任何一个阶段死亡或者即使幼胚发育为成熟种子胚、但在常规条件也不能萌发的现象。

11、双极性:表示具有双向极性电平的脉冲信号激素分类:生长素类细胞分裂素赤霉素脱落酸水杨酸植物组织培养{组织培养、器官培养?胚胎培养?细胞培养、原生质体培养}—--次生代谢物的生产、种植创新和品种选育、植物的快速繁殖、无病毒苗木的培育、人工种子的生产、种质资源的离体保存植物组织培养的大致过程是:在无菌条件下,将植物器官或组织(如芽、茎尖、根尖或花药)的一部分切下来,用纤维素酶与果胶酶处理用以去掉细胞壁,使之露出原生质体,然后放在适当的人工培养基上进行培养,这些器官或组织就会进行细胞分裂,形成新的组织。

植物组织培养复习笔记

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植物组织培养复习资料第一章绪论一、概念:植物组织培养:在无菌条件下,将离体的植物器官,组织,细胞以及原生质体,培养在人工培养基上和人工控制的环境中,使其生长,分化,增殖,甚至长出新的植株的过程和技术。

外植体:在无菌条件下,离体培养于人工培养基上的,用于达到某种培养目的的原始植物材料。

培养基:根据植物营养原理和植物组织离体培养的要求而人工配制的营养基质即为培养基。

细胞全能性:植物体每一个细胞都含有该植物全部的遗传信息,在合适的条件下,具有形成完整植株的能力。

脱分化:一个成熟细胞恢复到分生状态或胚性细胞状态的现象。

再分化:是脱分化细胞重新恢复细胞分化能力,沿着正常的发育途径,形成具有特定结构和功能的细胞。

二、组织培养的类型,不同分类依据。

(根据培养材料不同)可分为植株培养,胚胎培养,器官培养,组织或愈伤组织培养,细胞或原生质体培养5类;(根据培养目的)可分为试管嫁接,试管受精,试管加倍,试管育种等;(根据培养方法)可分为平板培养,微室培养,悬浮培养,单细胞培养等;(根据培养过程)可分为初代培养和继代培养;(根据培养基类型)可分为固体培养和液体培养。

三、三个发展阶段的关键人物。

1,haberlandt---于1902年提出植物细胞全能性理论,被称为“组织培养之父”。

2,white---于1943年出版《植物组织培养手册》。

3,murashine和skoog---在1962年筛选出MS培养基。

四、植物全能性表达的过程培养脱分化再分化培养五、组织培养的特点:1、植物基础学科研究的良好系统。

2、生物技术的基础。

3、经济高效,管理方便,利于自动化。

4、技术含量高,实验误差小,人工控制能力强。

5、生长周期短,生长速度快,实验重复性好。

6、实验材料经济,来源单一。

六、缺点:需要设备负复杂,投入资金多,电能消耗大;对人员技术水平要求高,对实验场所要求也高,不能代替田间试验。

第二章植物组织培养设备与培养条件一、实验室的组成及主要仪器和设备准备室:干燥箱,高压灭菌锅,电子天平,酸度计,水浴锅,冰箱。

植物组织培养复习提纲

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植物组织培养是通过无菌操作,把植物的离体器官,组织或细胞在人工制备的培养基上进行无菌培养并使其发育成完整植株的科学技术。

植物组织培养根据所培养的植物材料的不同,把组织培养分为五种类型:愈伤组织培养,悬浮细胞培养,器官培养,茎尖分生组织培养和原生质体培养。

组织或愈伤组织培养:即狭义的组织培养,是对植物体的各部分组织进行培养,在通过分化诱导形成植株。

愈伤组织:植物受伤之后,在伤口表面形成的一团薄壁细胞。

外植体:用于进行组织培养的组织,器官和细胞。

植物组织培养的理论依据:细胞全能性。

分化:细胞在形态结构和功能上发生永久性适度变化的过程。

脱分化:由失去分裂能力的细胞回复到分生性状态并进行分裂,形成无分化的细胞团即愈伤组织的现象。

再分化:由无分化的愈伤组织的细胞再转变成为具有一定结构,执行一定生理功能的细胞团和组织,构成一个完整的植物体或植物器官的现象。

植物细胞全能性的实现途径:必须完成两个条件——要使这些细胞处于离体条件下,解除植物体其余部分对这些细胞的抑制性影响;要给予他们适当的刺激,就是给于它们一定的营养物质和激素的作用。

植物培养的特点:培养条件可以人为控制;生长周期短繁殖率高;管理方便,利于工厂化生产和自动化控制。

植物组织培养的发展史:1.1902年,哈布兰特在细胞学说的基础上,提出细胞全能性概念。

2.1934年,美国植物生理学家White人工培养番茄根,建立了第一个活跃生长的无性繁殖系。

3.1943年,White提出了植物细胞全能性学说培养基:供微生物,植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料。

母液:将所用培养基配方的化学成分按一定比例配成的浓缩液。

称取量=扩大倍数*母液体积吸取量=配制体积/放大倍数=配制体积*培养基浓度培养基PH值过大会变硬生长素的作用具有两面性:一般低浓度促进生长,中浓度抑制生长,高浓度则杀死植物常用生长素名称:IAA 吲哚乙酸天然存在的生长素NAA 萘乙酸应用比较普遍IBA 吲哚丁酸促进发根能力较强2.4-D适用范围狭窄常用生长素作用强弱依次递减:2.4-D NAA IBA IAA常用细胞分裂素名称:6-BA(最常用)KT 激动素ZT 玉米素(效果最好但最昂贵)TAA ZT GA采用过滤灭菌花药培养的最适时期:单核靠边期GA 赤霉素常用培养基:MS培养基无机盐和离子浓度较高,为较为稳定的平衡溶液。

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(1) 什么是植物组织培养?植物组织培养是在无菌条件下,将植物体的任何一部分,如植物器官、组织、细胞以及原生质体等,培养在人工配制的培养基上,并给予合适的培养条件(包括营养、激素、温度、光照、湿度),使之发育成完整植株的过程。

(广义)又叫离体培养:指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞、原生质体等,通过无菌操作,在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。

(狭义)组织培养:指用植物各部分组织,如形成层、薄壁组织、叶肉组织、胚乳等进行培养获得再生植株,也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养,愈伤组织再经过再分化形成再生植物。

(2) 什么是"外植体"?从植物体上分离下来的用于离体培养的材料称为外植体。

(3) 按照外植体的不同,植物组织培养可以分成几类?可以分成5类1、植株培养2、器官培养(胚,花药,子房,根、茎和叶)3、组织培养(各种组织、愈伤组织)4、原生质体培养5、细胞培养(愈伤组织分离或花粉单细胞或很小的细胞团)(4) 植物组织培养有哪些特点?①培养条件可以人为控制②生长周期短,繁殖率高③管理方便,利于工厂化生产和自动化控制(5) 你认为植物组织培养技术在当前的农业生产上有什么价值?为什么?(一)快速繁殖种苗用组织培养的方法进行快速繁殖是生产上最有潜力的应用,包括花卉观赏植物、蔬菜、果树、大田作物及其他经济作物。

快繁技术不受季节等条件的限制,生长周期短,而且能使不能或很难繁殖的植物进行增殖。

(二)无病毒苗的培养植物在生长过程中几乎都要遭受到病毒病不同程度的危害,有的种类甚至同时受到数种病毒病的危害,尤其是很多园艺植物靠无性方法来增殖,若蒙受病毒病,代代相传,越染越重,甚至会造成极严重的后果。

(三)在育种上的应用植物组织培养技术为育种提供了许多手段和方法,使育种工作在新的条件下更有效的进行(四)人工种子人工种子,是指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽,被包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中,从而形成能发芽出苗颗粒体。

(五)工厂化育苗是指以植物组织培养为基础,将外植体接种在人工配制的培养基上,通过控制环境条件,使细胞脱分化、再分化成新的组织、器官,进而培育出与母株一样的批量幼苗的方法。

具有这些优点:繁殖快,整齐、一致,无病虫害,周期短,周年生产,性状稳定(6)因地制宜建一个组织培养实验室,需要哪些分实验室?各分室的作用是什么? 分实验室:洗涤室(准备室)、配置室、灭菌室、接种室培养室、观察室;1.准备室器具的洗涤、干燥、消毒2、配置室进行药品的保存、配置、消毒、分装3.灭菌室培养基及使用器具的消毒与灭菌4. 接种室进行材料的接种,内置超净工作台或接种箱。

5. 培养室将接种的材料进行无菌培养生长的场所6.细胞学观察实验室进行培养材料的组织学、细胞学观察照相等(7)组织培养中,pH值起什么作用?如果pH值过高或过低会有什么后果?不同的植物对培养基最适pH值的要求也是不同的, 大多在5—6.5左右,一般培养基皆要求5.8。

一般来说pH值高于6.5时,培养基会变硬;低于5时,琼脂不能很好地凝固。

(8). 常见的培养基种类有哪些?各有何特点?专为什么材料的培养而设计的?1、MS培养基:为培养烟草细胞而设计的。

特点:无机盐离子浓度高,硝酸盐含量较高广泛用于植物的器官、花药、细胞和原生质体培养2、B5 培养基:为培养大豆根细胞而设计的。

特点:含有较低的铵,这可能对不少培养物的生长有抑制作用。

双子叶植物尤其木本植物组培可选择3、White 培养基:为培养番茄根尖而设计特点:无机盐数量较低适于生根培养4、N6培养基:为水稻等禾谷类作物花药培养而设计特点;成分较简单, KNO3 和 (NH4)2SO4含量高适合花药培养5、KM-8P培养基:为原生质体培养而设计特点:有机成分较复杂,它包括了所有的单糖和维生素广泛用于原生质体培养,包括融合的培养(9).培养基的成分主要包括有哪些?水、无机盐、有机物、植物激素、培养体的支持材料、其它辅助性物质(10).培养基中常用的植物激素有哪些?各有何作用?植物激素(植物生长调节剂)1、生长素类:IAA,IBA,2,4-D,NAA等。

诱导愈伤组织形成和根分化,促进细胞分裂和伸长生长。

根对生长素最敏感,在极低浓度下(10.5-10.8mg/L)就可促进生长,其次是茎和芽。

2、细胞分裂素类:KT,6-BA,ZT等。

①诱导芽的分化促进侧芽萌发生长②促进细胞分裂与扩大③抑制根的分化3、赤霉素类;GA1-GA4,GA7,GA9, GA16,GA24,GA25等促茎伸长,促胚发育成植株;打破休眠4、脱落酸:ABA(抑制与促进生长;维持芽与种子休眠;促进果实与叶的脱落;促进气孔关闭;影响开花;影响性分化)5、乙烯( 催熟)(11).外植体的选择需注意哪些问题?什么季节取材最好?1、不同的植物、器官和组织其形态发生能力很不相同。

在组培中,选择合适的,最易表达全能性的部位,是决定组培系成功建立的前提之一。

在选择植物外植体进行组织培养时,还要考虑待培养材料的来源是否保证,是否容易成苗;同时要考虑到该外植体,特别是经过脱分化产生的愈伤组织,是否会引起不良变异,丧失原品种的优良性状。

2、对大多数植物而言,应在生长开始的季节采样较好,若在生长末期或已进入休眠期时取样,则外植体可能对诱导反应迟钝或无反应。

在母株生长旺盛的季节取材料,不仅成活率高而且增殖率也大。

如,马铃薯在12月和4月所取的外植体具有强烈的再生能力。

而2~3月间或5~11月间所取的材料,则很少能够再生。

(12).在组织培养过程中,常用的灭菌方法有哪些?答:常用的灭菌方法可分为物理的和化学的两类物理方法:如干热(烘烧和灼烧)、湿热(常压或高压蒸煮)、射线处理(紫外线、超声波、微波)、过滤、清洗和大量无菌水冲洗等措施;化学方法:是使用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来苏儿、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精化学药品处理。

这些方法和药剂要根据工作中的不同材料不同目的适当选用。

(13)何谓外植体褐变?产生褐变的主要原因?如何防止减轻褐变现象的发生?答:1、外植体褐变是指在接种后,其表面开始褐变,有时甚至会使整个培养基褐变的现象。

2、原因是由于植物组织中的多酚氧化酶被激活,而使细胞的代谢发生变化所致。

在褐变过程中,会产生醌类物质,它们多呈棕褐色,当扩散到培养基后,就会抑制其他酶的活性,从而影响所接种外植体的培养。

①植物品种:研究表明,由于多酚氧化酶活性上的差异,不同品种间的褐变现象是不同的。

因此,在培养过程中应该有所选择,对不同的品种分别进行处理。

②生理状态:由于外植体的生理状态不同,在接种后褐变程度也有所不同。

一般来说,幼嫩的组织在接种后褐变程度不明显,而老熟的组织在接种后褐变程度较为严重。

③培养基成分:浓度过高的无机盐会使某些观赏植物的褐变程度增加,此外,细胞分裂素的水平过高也会刺激某些外植体的多酚氧化酶的活性,从而使褐变现象加深。

④培养条件不当:如果光照过强、温度过高、培养时间过长等,均可使多酚氧化酶的活性提高,从而加速被培养的外植体的褐变程度。

3、防止、减轻褐变现象发生的措施:①选择合适的外植体:一般来说,最好选择生长处于旺盛的外植体,这样可以使褐变现象明显减轻。

②合适的培养条件:无机盐成分、植物生长物质水平、适宜温度、及时继代培养均可以减轻材料的褐变现象。

③使用抗氧化剂:在培养基中,使用半胱氨酸、抗坏血酸等抗氧化剂能够较为有效地避免或减轻很多外植体的褐变现象。

另外使用0.1%-0.5%的活性炭对防止褐变也有较为明显的效果。

④连续转移:对容易褐变的材料可间隔12-24 h的培养后,再转移到新的培养基上,这样经过连续处理7-l0 d后,褐变现象便会得到控制或大为减轻。

(14)试管苗有哪些特点?移栽应注意哪些方面?1、试管苗有的特点A.形态解剖方面(1)根:①无根毛②根与苗的输导组织不相连。

(2)叶:①叶的角质和蜡质层不发达,容易蒸腾失水。

②无表皮毛,保水和反光能力差。

③叶细胞结构疏松。

④叶气孔突出,张大。

⑤叶存在排水孔。

B. 生理功能方面①根的生理功能:低,吸水能力弱②叶片表面极易散失水分③气孔不能关闭④叶光和能力较低,CO2固定能力差。

2、移栽前要注意:(1)移栽要抓三个关键:①水分的平衡(不要失水过多)②温度和光照(不能太高)③光和能力逐步形成或加强(2)提高移栽成活率的技术措施①移栽前的工作:试管苗驯化处理,措施是对外界要增加湿度、减弱光照;对试管内要通透气体、增施二氧化碳肥料、逐步降低空气湿度等;对栽培驯化基质要进行灭菌。

移栽前可将培养物不开口移到自然光照下锻炼2-3d,让试管苗接受强光的照射,使其长得壮实起来,然后再开口练苗1-2d,经受较低湿度的处理,以适应将来自然湿度的条件。

②移栽时应注意的问题:移栽用基质和容器,基质要求:具备透气性、保湿性和一定的肥力,容易灭菌处理,并不利于杂菌滋生的特点。

栽培容器可用6×6cm-10×l0cm的软塑料钵,也可用育苗盘。

(15)为什么说植物器官培养是组织培养的一个最重要的方面?1. 器官培养是研究器官生长、营养代谢、生理生化、组织分化和形态建成的最好材料和方法;2.器官培养在生产实践上具有重要的应用价值.(16)植物脱毒培养的意义是什么?1.去除病毒危害,提高作物品质与产量2. 减少环境污染,有利于保护环境(17)简述植物茎尖脱毒和热处理脱毒的原理与方法1、植物茎尖脱毒(1)原理:感染病毒植株的体内病毒的分布不均匀,病毒的数量随植株部位及年龄而异,越靠近茎顶端区域的病毒的感染程度越低,生长点(分生组织约0.1~1.0mm区域)则几乎不含或含病毒很少。

(2)方法:2、热处理脱毒(1)原理:当植物组织处于高于正常温度的环境中时,组织内部的病毒受热后部分或全部钝化,不能生成或生成病毒很少,以致病毒含量不断降低从而达到脱毒的目的。

(2)方法:A、温汤浸渍处理B、热空气处理(18)脱毒植物鉴定方法有哪几种?1、指示植物法:利用病毒在其他植物(指示植物或鉴别寄主)上产生特定症状(枯斑和空斑)作为鉴别病毒存在与否和种类的方法。

2、抗血清鉴定法:植物病毒是由蛋白质和核酸组成的核蛋白,是一种较好的抗原,给动物注射后会产生抗体,抗体存在于血清之中称抗血清。

不同病毒产生的抗血清有各自的特异性。

用已知抗血清可以鉴定未知病毒的种类。

3、电子显微镜检查法:病毒有一定的形态(球状、杆状、线状等)和大小( 0.01~0.3um )。

采用电子显微镜(分辨率0.0001um)可以直接观察病毒,检查出有无病毒存在,并鉴定病毒的种类。

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