植物组织培养复习提纲

(1) 什么是植物组织培养?

植物组织培养是在无菌条件下，将植物体的任何一部分，如植物器官、组织、细胞以及原生质体等，培养在人工配制的培养基上，并给予合适的培养条件（包括营养、激素、温度、光照、湿度），使之发育成完整植株的过程。

（广义）又叫离体培养：指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞、原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。

（狭义）组织培养：指用植物各部分组织，如形成层、薄壁组织、叶肉组织、胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物。

(2) 什么是"外植体"?

从植物体上分离下来的用于离体培养的材料称为外植体。

(3) 按照外植体的不同，植物组织培养可以分成几类?

可以分成5类

1、植株培养

2、器官培养（胚，花药，子房，根、茎和叶）

3、组织培养（各种组织、愈伤组织）

4、原生质体培养

5、细胞培养（愈伤组织分离或花粉单细胞或很小的细胞团)

(4) 植物组织培养有哪些特点?

①培养条件可以人为控制

②生长周期短，繁殖率高

③管理方便，利于工厂化生产和自动化控制

(5) 你认为植物组织培养技术在当前的农业生产上有什么价值?为什么?

（一）快速繁殖种苗

用组织培养的方法进行快速繁殖是生产上最有潜力的应用，包括花卉观赏植物、蔬菜、果树、大田作物及其他经济作物。快繁技术不受季节等条件的限制，生长周期短，而且能使不能或很难繁殖的植物进行增殖。

（二）无病毒苗的培养

植物在生长过程中几乎都要遭受到病毒病不同程度的危害，有的种类甚至同时受到数种病毒病的危害，尤其是很多园艺植物靠无性方法来增殖，若蒙受病毒病，代代相传，越染越重，甚至会造成极严重的后果。

（三）在育种上的应用

植物组织培养技术为育种提供了许多手段和方法，使育种工作在新的条件下更有效的进行

（四）人工种子

人工种子，是指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽，被包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中，从而形成能发芽出苗颗粒体。

（五）工厂化育苗

是指以植物组织培养为基础，将外植体接种在人工配制的培养基上，通过控制环

境条件，使细胞脱分化、再分化成新的组织、器官，进而培育出与母株一样的批量幼苗的方法。

具有这些优点：繁殖快，整齐、一致，无病虫害，周期短，周年生产，性状稳定

(6)因地制宜建一个组织培养实验室，需要哪些分实验室?各分室的作用是什么? 分实验室：洗涤室（准备室）、配置室、灭菌室、接种室培养室、观察室；

1.准备室

器具的洗涤、干燥、消毒

2、配置室

进行药品的保存、配置、消毒、分装

3.灭菌室

培养基及使用器具的消毒与灭菌

4. 接种室

进行材料的接种，内置超净工作台或接种箱。

5. 培养室

将接种的材料进行无菌培养生长的场所

6.细胞学观察实验室

进行培养材料的组织学、细胞学观察照相等

(7)组织培养中，pH值起什么作用?如果pH值过高或过低会有什么后果?

不同的植物对培养基最适pH值的要求也是不同的, 大多在5—6.5左右，一般培养基皆要求5.8。一般来说pH值高于6.5时，培养基会变硬；低于5时，琼脂不能很好地凝固。

(8). 常见的培养基种类有哪些？各有何特点？专为什么材料的培养而设计的？

1、MS培养基：为培养烟草细胞而设计的。

特点：无机盐离子浓度高，硝酸盐含量较高

广泛用于植物的器官、花药、细胞和原生质体培养

2、B5 培养基：为培养大豆根细胞而设计的。

特点：

含有较低的铵，这可能对不少培养物的生长有抑制作用。

双子叶植物尤其木本植物组培可选择

3、White 培养基：为培养番茄根尖而设计

特点：无机盐数量较低

适于生根培养

4、N6培养基：为水稻等禾谷类作物花药培养而设计

特点;成分较简单， KNO3 和 (NH4)2SO4含量高

适合花药培养

5、KM-8P培养基：为原生质体培养而设计

特点：有机成分较复杂，它包括了所有的单糖和维生素

广泛用于原生质体培养，包括融合的培养

(9).培养基的成分主要包括有哪些？

水、无机盐、有机物、植物激素、培养体的支持材料、其它辅助性物质

(10).培养基中常用的植物激素有哪些？各有何作用？

植物激素（植物生长调节剂）

1、生长素类：IAA，IBA，2，4-D，NAA等。

诱导愈伤组织形成和根分化，促进细胞分裂和伸长生长。根对生长素最敏感，在极低浓度下(10.5-10.8mg／L)就可促进生长，其次是茎和芽。

2、细胞分裂素类：KT，6-BA，ZT等。

①诱导芽的分化促进侧芽萌发生长

②促进细胞分裂与扩大

③抑制根的分化

3、赤霉素类；GA1-GA4，GA7，GA9， GA16，GA24，GA25等

促茎伸长，促胚发育成植株；打破休眠

4、脱落酸：ABA

(抑制与促进生长；维持芽与种子休眠；促进果实与叶的脱落；促进气孔关闭；影响开花；影响性分化)

5、乙烯( 催熟)

(11).外植体的选择需注意哪些问题？什么季节取材最好？

1、不同的植物、器官和组织其形态发生能力很不相同。在组培中，选择合适的，最易表达全能性的部位，是决定组培系成功建立的前提之一。在选择植物外植体进行组织培养时，还要考虑待培养材料的来源是否保证，是否容易成苗；同时要考虑到该外植体，特别是经过脱分化产生的愈伤组织，是否会引起不良变异，丧失原品种的优良性状。

2、对大多数植物而言，应在生长开始的季节采样较好，若在生长末期或已进入休眠期时取样，则外植体可能对诱导反应迟钝或无反应。在母株生长旺盛的季节取材料，不仅成活率高而且增殖率也大。如，马铃薯在12月和4月所取的外植体具有强烈的再生能力。而2~3月间或5~11月间所取的材料，则很少能够再生。

(12).在组织培养过程中，常用的灭菌方法有哪些？

答：常用的灭菌方法可分为物理的和化学的两类

物理方法：如干热(烘烧和灼烧)、湿热(常压或高压蒸煮)、射线处理(紫外线、超声波、微波)、过滤、清洗和大量无菌水冲洗等措施；

化学方法：是使用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来苏儿、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精化学药品处理。这些方法和药剂要根据工作中的不同材料不同目的适当选用。

(13)何谓外植体褐变？产生褐变的主要原因？如何防止减轻褐变现象的发生？答：1、外植体褐变是指在接种后，其表面开始褐变，有时甚至会使整个培养基褐变的现象。

2、原因是由于植物组织中的多酚氧化酶被激活，而使细胞的代谢发生变化所致。