ImageJ Western 量化 拿走不谢

ImageJ实用技巧之Western blot量化

原创2016-05-26 李莫愁博士实验万事屋

ImageJ对医学生来讲最常用的功能是WesternBlot量化和细胞计数，又以前者最常见。不是所有的WB都需要量化，看审稿人的要求，好了，今天内容比较枯燥，我们一步一步来学习image J量化Western blot的条带吧！

首先下载安装Image J,温馨提示软件在网上有下载。

安装完image J，打开一张要量化的图片如下图：

点击选择方形选框工具，按住左键，在图片上拖动，选择需要分析的条带区域，如图中黄色方框所示。

依次选择，如下图，Select First Lane选项后会出现以上对话框，直接点击Yes 即可：

当选区出现1表示选择成功：

然后选择，Analyze→Gels→Plot Lanes，就会弹出山峰样的图。

峰的面积即灰度值，但是这几个峰连在了一起要先把他们分开，点击直线工具，画直线。

点击选择魔棒工具，然后分别点击每个峰的下方区域，然后就会弹出各个峰面积的结果，分别与六个条带的灰度值相对应，表示六个条带所代表的目的蛋白的表达水平。

使用同样的方法也可以对beta-actin进行量化，最后通过标准化计算得到该Western Blot的量化结果，至于如何将量化结果变成审稿人要求的柱状图，就留给你们自己思考。