白血病基因筛查

EVI1


定位于染色体3q26。在小鼠逆转录病毒诱发的急性髓 系白血病模型中，EVI1是病毒常见的插入位点。EVI1 编码一个能结合DNA的锌指蛋白，其过度表达在髓系 恶性肿瘤的发生和发展中起重要作用。与其表达相关 的还有MDS和CML。 现阶段的研究表明EVI1高表达的患者的预后不良，但 其机制尚未清晰。


MLL-AF9:t(9;11)(p22;q23)易位主要发生在 AML中,是AML中t(11q23)最常见的易位形式。 MLL-AF9的病人的预后较差1,2。
1、 Microenvironment Determines Lineage Fate in a Human Model of MLL-


MLL/AF10:MLL/AF10与AML相关，染色体上表现为 t(10;11)(p12;q23)的易位，主要见于AML-M5型患者，儿童 多见，80%的患者小于3岁。 MLL/AF10阳性的患者的预后差1。
1
、AML with 11q23/MLL abnormalities as defined by the WHO classification: incidence,
白血病融合基因检测及意义
WH0血液肿瘤分类方案（1999年）

新分类方案的基本原则是：结合形态学、免疫表型、 遗传改变和临床特征来鉴定疾病的“真实本质”。

提供了疾病分类与治疗选择和预后判断的较明确关联
性，开启了血液肿瘤靶向性治疗和个性化方案的新时 代。
遗传学
细胞
形态学
免疫学
WH0血液肿瘤分类方案（2008年）
AF9 Leukemia. Junping Wei,Mark Wunderlich et,2008 2、 The prognostic value of MLL-AF9 detection in patients with t(9;11)(p22;q23)-positive acute myeloid leukemia. Claudia Scholl et,2005
PML/RARa



t(15,17)易位形成； 是APL的一个典型标志，其易位造成了15号染色体上的PML 基因和17号染色体上的RARa基因的融合，产生了一个融合 基因PML/RARa。由于PML基因上融合位点的不同， PML/RARa有三种融合型， 即:bcr1(55%),bcr2(5%),bcr3(40%)。 检测PML/RARa融合基因的存在与否，对APL的诊断，判断 ATRA的疗效和预后复发都非常重要。 PML/RARa阳性强烈预示着复发的可能，而其持续性阴性则 预示病人有更长的生存期。该基因阳性的病人，可用于疗效 监测和微小残留的检测。
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MLL/ELL MLL/AFX MLL/AF1q MLL/AF1p PLZF/RARa MLL/AF6 MLL/MLL（dupMLL） TLS/ERG TEL/PDGFR TEL/ABL SET/CAN DEK/CAN MLL/AF17 E2A/HLF NPM/RARa AML1/MDS1
b3-a2（ 55% ）
b2-a2（ 40% ）
b3-a2和b2-a2 （ 5% ） b3-a3 （罕见） b2-a3 （罕见）

p230型 u-bcr e19-a2（罕见）
BCR-ABL融合基因ABL激酶突变检测
ABL激酶突变会引起伊马替尼治疗耐药 T315I
耐药机制: T315突变后不能与伊马替尼形成关键性的氢
SIL/TAL1


位于染色体1p32上的TAL1基因可以通过多种遗传变异 导致在T细胞中异常表达。其中最常见的重组方式是 TAL1基因上游约90kb的DNA缺失，导致SIL与TAL1融 合，这种染色体内微缺失全部出现在T-ALL病例中。 SIL/TAL1融合基因与T-ALL的免疫表型密切相关。 SIL/TAL1融合基因可以在26%的儿童T-ALL病例和16% 的成人（主要是年轻成人）T-ALL病例检测到。 SIL/TAL1融合基因与T-ALL预后的关系还不是很清楚。 该融合基因可以用于T-ALL的辅助诊断，该融合基因还 可以用于疗效监测和微小残留的检测。
进行白血病治疗后的微小残留检测.
白血病常见融合基因

CBFB/MYH11 AML1/ETO PML/RARa E2A/PBX1 MLL/AF4 BCR/ABL TEL/AML1 SIL/TAL1 EVI1 HOX11 MLL/AF10 MLL-AF9 MLL/ENL NPM1/ALK NPM/MLF1
1、 Expression of HOX11 in childhood T-lineage acute lymphoblastic leukaemia can
occur in the absence of cytogenetic aberration at 10q24: a study from the Children’s Cancer Group (CCG) . UR Kees, NA Heerema et,2003 2、 Prognostic importance of TLX1 (HOX11) oncogene expression in adults with T-cell acute lymphoblastic leukaemia. Adolfo A Ferrando MD et,2004 3、 Prognostic and oncogenic relevance ofTLX1/HOX11 expression level in T-ALLs. Julie Bergeron et,2007
组织
细胞
蛋白
基因
基因检测
——融合基因
基因突变
融合基因的形成
Bcr/Abl融合基因
fish探针
白血病分子诊断的意义
白血病初发
MICM诊断
系统诊断
异常标记
精确诊断 准确预后 指导治疗 科研资料
残留监测
靶向治疗
分子诊断在白血病诊断中的应用
提供早期辅助诊断及预后判断;

对治疗过程进行跟踪;
F317L、E355G、F359V及V379I等，通过提高药物
剂量，可以克服耐药。
TEL/AML1


t(12;21)(p13;q22)易位最早在1995年被报道。随后的报道发 现这种普通遗传学无法检测的易位，是儿童ALL中最为常见 的易位。几乎25%的小儿ALL有该易位。其主要的阳性病人 出现在1-12岁之间，其中最多的在2-5岁的这个年龄段。所 有的病例其免疫分型都是前B细胞ALL。另外，这类病人的 另一个特征是其白细胞比较低。 t (12;21)阳性的病人都有较好的预后，其复发的时间也会较 晚。该基因阳性的病人，可用于疗效监测和微小残留的检测。
E2A/PBX1



t(1:19)导致了19号染色体上的E2A基因和1号染色体上的 PBX1基因的融合，产生了融合基因E2A/RBX1； 5-6%的儿童ALL和3%的成人ALL检测到，几乎全部出现在 前B细胞ALL病例中。 携带有该易位的病人，其临床症状都比较凶险。该基因阳性 的病人，可用于疗效监测和微小残留的检测。
CML病例中的应用

BCR-ABL融合基因检测：
t(9;22)(q34;q11) BCR-ABL p210
t(9;22)(q34;q11) BCR-ABL p230

BCR-ABL融合基因ABL激酶突变检测
超过95%的CML病例中存在BCR-ABL融合基因

BCR-ABL融合基因
P210型 M-bcr（绝大多数）
CBFB/MYH11


是Inv(16)(p13q22)形成； 是急性髓系白血病(AML)特征性染色体异常，通常见于AMLM4Eo亚型，占总AML患者的10%，其中50％发生在AML-M4Eo中。 带有Inv(16)(p13q22)的病人通常有较好的预后。该基因阳 性的病人，可用于疗效监测和微小残留的检测。
BCR/ABL




在超过95%的CML病人的白血病细胞中，30%（20-50%）的成人 ALL和2-10%的儿童ALL中，以及小于2%的AML（淋巴瘤和骨髓 瘤）的病例中有BCR/ABL融合基因。 在CML中BCR/ABL融合基因都是p210型的，在CML病例中有 55%的b3-a2型，40%的b2-a2型。在5%的病例中b3-a2和b2-a2 型由于剪接的不同同时存在。另外，在非常少的ph+的CML病人 中存在一种大的BCR/ABL融合基因e19-a2，即u-bcr,p230型 BCR/ABL融合基因。 在30-50%的成人ph+的ALL，20-30%儿童ph+的ALL病例中 BCR/ABL融合基因是p210型的。还有60%的ph+的ALL患者的 BCR/ABL融合基因是p190型的 。 在ALL中，Ph阳性和随之出现的BCR/ABL融合基因是一个非常不 好的标志，它影响着病人血相的完全缓解率和可能的生成率。该 基因阳性的病人，可用格列卫进行治疗，并可进行疗效监测和微 小残留的检测。
MLL/AF4


在50-70%的婴幼儿ALL和将近5%的小儿和成人ALL病例中 有MLL/AF4融合基因。t(4,11)(q21;q23)与前BALL(CD79A+,CD19+,CD10-,CD24-)相关，同时与粒系分化 抗原CD16和CD65以及NG2抗原共表达。MLL/AF4融合基因 在所有t(4;11)移位的病例中存在，也存在于相当一部分细胞 遗传学没有检测到t(4;11)移位的病例中。 在婴幼儿ALL中MLL/AF4融合基因被认为是预后不良的标志。 在成人ALL中也是一个不良的标志，但对于成人ALL，该融 合基因的存在似乎能增强高剂量的Ara-C的疗效。该基因阳 性的病人，可用于疗效监测和微小残留的检测。
Baidu Nhomakorabea
AML1/ETO


t(8,21)(q22;q22)形成，在1973年首次报道。 AML1/ETO融合基因出现在所有的t(8,21)阳性的AML中， 同 时也出现在具有复杂移位的t(8,21)阴性的AML病例中。 t(8,21)出现在大约7%的AML病例中，在年轻的患者中更为 常见。其主要出现在AML-M2这一亚型中，大约有20-40%病 例具有t(8,21)。在非常少见的AML-M1，AML-M4和t-AML中 也有报道。 t(8,21)异位是一个较好的标志，它的存在使这类病例对一些 药物有较好的反应。因此基于细胞遗传学和分子遗传学的检 测结果，可以为病人选择风险低的较好的治疗方案。该基因 阳性的病人，可用于疗效监测和微小残留的检测。
partner chromosomes, FAB subtype, age distribution, and prognostic impact in an unselected series of 1897 cytogenetically analyzed AML cases. Claudia Schoch, Susanne Schnittger et,2003


MLL/ENL:t(11;19)(q23;p13.3)易位可见于 ALL，AML-M4,M5,M1,M2。以小于1岁的婴 儿多见，中位生存期为17.6月。易位导致 MLL-ENL融合基因形成。 预后尚无确切说明，与年龄，免疫表型相关1。
键，可完全阻断伊马替尼与ABL激酶区的结合,从而耐药。 P环的突变(244-255) 耐药机制：如 Y253F／H、E255K／V、Q252H、 G250E等通过改变ABL激酶的空间构象，亦可阻碍伊马
替尼与之结合。
A环突变(381-402) 一般提高用药量可以降低耐药程度。
其它突变
对于耐药程度较弱的突变，如M244V、G250E、
HOX11


据细胞基因学研究，4-7%的T-ALL中涉及染色体10q24的 易位。HOX11正是定位在10q24上，并被t(10;14)(q24;q11) 易位以及t(7;10)(q35;q24)易位激活。B-ALL中无HOX11的 发现。 在现阶段的文献报道中，HOX11高表达的儿童T-ALL的预 后较阴性者有优势1。成人中也有相似的论断2。低表达的 HOX11与阴性者无统计学差异3。