液相色谱基本常识
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A B C D E
1.
2.
Si O
OH
O
O
CH3
Si R
CH3
CH3
Si
CH3
CH3
Si R
CH3
R = C8,
C18,
etc.O
OH
OH
O
CH3
Si R
CH3
CH3
Si R
CH3
++Cl CH3
Si
CH3
CH3
OH OH OH OH
CH3
Cl R
CH3
(TMS) bonding end‐capping
O
Si O
O
传统的极性反相固定相键合方法
极性包埋
极性封尾
极性反相固定相
液相色谱柱填料结构和表面化学
0.050 0.040
5 1 2
3
4
常规C18 6
0.030 AU 0.020 0.010 0.000 0.030
0.025
1
3 2
4 5
极性C18 6
0.020
AU
0.015
0.010
0.005
0.000 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 Minutes 8.00 9.00 10.00 11.00 12.00 13.00 14 .00 15.00
1 尿嘧啶,2 普萘洛尔,3 对羟基苯甲酸丁酯,4 邻苯二甲酸二丙酯,5 阿米替林,6 萘
Key Lab of Separation Science for Analytical Chemistry, DICP, CAS
液相色谱柱反相填料作用机理
Bonded functional group (C8)
NH2
SO3-
Silica base
液相色谱柱正相填料作用机理
O OH H C N
Dipolar attraction or hydrogen bonding
H O H O
O
亲水作用色谱(HILIC)
¾
Hydrophilic Interaction Liquid Chromatography
反相色谱 正相色谱
固定相: 非极性 流动相: 极性 (有机溶剂/水)
固定相: 极性 流动相: 非极性(有机溶剂)
亲水作用色谱 HILIC
• • •
1975年,Linden等使用氨基柱,75%乙腈/水溶液分离糖 1990年,Alpert提出HILIC的概念 1998年,Strege较系统的报道了HILIC保留特性
亲水作用色谱原理
I. 溶质在固定相表面 富水层和流动相中的 分配作用 II. 离子交换作用(带 电的极性化合物) III. 氢键作用,偶极‐ 偶极作用,疏水作用 等
亲水作用色谱固定相
其他亲水分离材料
糖基修饰固定相
酰胺固定相
两性离子固定相
硅胶填料表面化学修饰-不同的键合方式
单点键合
三点键合
高密度键合
低密度键合