白头翁汤通过保护微血管内皮细胞的完整性及PMNs迁移杀菌功能的影响

畜牧兽医学报 2016,47(4)：836-843

A c t aV e t e r i n a r i a e tZ o o t e c h n i c aS i n i c a

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.i s s n .0366-6964.2016.04.025白头翁汤通过保护微血管内皮细胞的完整性及P M N s 迁移杀菌功能的影响

王明明,杨 舒,董 虹*,穆 祥*(北京农学院兽医学(中医药)北京市重点实验室,北京102206

)摘 要：本研究旨在研究白头翁汤(P D )对脂多糖(L P S

)诱导内皮细胞损伤的保护作用,从而揭示白头翁汤的药理作用。分别采用水溶性四氮唑(W S T -1)、乳酸脱氢酶(L D H )、苏木素伊红(H E )和H o e c h s t 33342染色法检测P D 和

L P S 对大鼠肠黏膜微血管内皮细胞(R I MV E C s

)增殖、细胞毒性、细胞连接和细胞核变化的影响；建立中性粒细胞(P MN s )跨R I MV E C s 迁移的T r a n s w e l 模型,检测P D 对L P S 损伤的R I MV E C s 后P MN s 细胞内和细胞外细菌数

量的影响。结果显示,L P S (1μg ·m L －1)致R I MV E C s 细胞核萎缩、细胞膜损坏,细胞毒性百分比达53.2%；细胞连接破坏导致细胞脱落,脱落率为39.6%。P D (20μg ·m L －1)对上述损伤有明显的保护作用。在20μg ·m

L －1

P D 作用下,L P S 诱导的跨内皮迁移的P MN s 细胞内外细菌的存活明显减少(P ＜0.01)。结果揭示P D 可以有效保护L P S 损伤的R I MV E C s 从而增强P MN s 的杀菌能力,为临床治疗动物细菌性疾病用药提供理论依据。关键词：白头翁汤；

大鼠肠黏膜微血管内皮细胞；脂多糖；中性粒细胞中图分类号：S 853.9 文献标志码：A 文章编号：0366-6964(2016)04-0836-08收稿日期：2015-10-16

基金项目：国家自然基金项目(31272144；31572558)；北京市科委科技计划(Z 121100007412004)；北京市科技新星(Z 141105001814041)

；北京市自然科学基金(6132007

)作者简介：王明明(1990-),女,辽宁沈阳人,硕士生,主要从事中兽医药及疾病防控方面研究,E -m a i l ：592477872@q q

.c o m *通信作者：穆 祥,教授,T e l ：010-********,E -m a i l ：m u x i a n g 1109@s i n a .c o m ；董 虹,副教授,T e l ：010-********,E -m a i l ：d o n g h o n g

523@163.c o m P u l s a t i l l a eD e c o c t i o n I m p r o v e s t h eB a c t e r i c i d a l C a p a c i t y o fN e u t r o p h i l s b y

P r o t e c t i o no f I n t e g r i t y o

fM i c r o v a s c u l a rE n d o t h e l i a l C e l l s W A N G M i n g -m i n g ,Y A N GS h u ,D O N G H o n g *,M U X i a n g

*(B e i j i n g K e y L a b o r a t o r y o f T r a d i t i o n a lC h i n e s eV e t e r i n a r y M

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ft h er a t m i c r o v a s c u l a re n d o t h e l i a lc e l l s (R I M -V E C s )w e r e d e t e r m i n e db y W S T -1E L I S Ak i t a n d l a c t a t ed e h y d r o g e n a s e (L D H )a s s a y

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l i n -e o s i n (H E )a n dH o -e c h s t 33342s t a i n i n g .T h e t r a n s e d o t h l i a l n e u t r o p h i l s k i l l i n g w a s d e t e c t e db yg

e n t a m i c i n p r o t e c t i o n a s s a y t h o u g h t h e b u i l d o fT r a n s w e l l .T h e r e s u l t s s h o w e d t h a t L P S (1μg

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g ·m L －1P D (P ＜0.01).R e s u l t s r e v e a l t h a tP Dc a n i m p r o v e t h e s t e r i l i z a t i o n f u n c t i o no f P MN s