实验五 白细胞分类计数

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4.计数结果：用各类白细胞的百分率乘以白细胞总数， 即可求得每升血液中各类白细胞数量的绝对值。
5.血涂片中有有核红细胞时，应逐个计数，但不计入 100个白细胞内，以分类100个白细胞过程中见到的有 核红细胞个数来报告，并注明其所属阶段。
6.分类中还应注意观察成熟红细胞、血小板的形态、 染色及其分布情况，注意有无寄生虫（如疟原虫）及 其他异常所见。
பைடு நூலகம்
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按胞核的形态分为：
N杆状核 （Nst）
核径最窄处大于最宽处1/3 为杆状核，核型多样，可 呈C形 、S形、V形或不规 则形。
N分叶核 （Nsg）
核径最窄处小于最宽 处1/3为分叶核，细 胞分2~5叶，甚至5叶 以上。
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中性粒细胞
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杆状核
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分叶核
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2. 嗜酸性粒细胞（E） 形态：略大于中性粒细胞
胞核：核分叶不明显，形态不规则。
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嗜碱性粒细胞 （血涂片）
颗粒特点 大小不一 分布不均 嗜碱性强
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4. 淋巴细胞（L）
形态：直径6-15um，分为大L和小L。
胞浆：小淋巴极少,浆内无颗粒，常呈裸 核。大淋巴胞浆丰富 ，呈透明蓝色，常有 少量粗大、大小不均的紫红色嗜天青颗粒。
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外周血各类白细胞的正常形态
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一、白细胞的组成
中性粒细胞
粒细胞
嗜酸性粒细胞
白细胞
淋巴细胞
嗜碱性粒细胞
单核细胞
——白细胞是机体抵抗病原微生物等异物
入侵的主要防线
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全能干细胞
髓系干细胞
粒-单核系祖细胞
GM-CSF
原粒细胞
早幼粒细胞 原单核细胞
淋巴系干细胞
T淋巴系祖细胞 B淋巴系祖细胞
胞核：细胞核大，呈不规则圆形、肾形、马
蹄形或不规则分叶，有时折叠扭曲。染色质
细致、疏松如网状，染为淡紫红色。
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五类白细胞
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外周血正常白细胞形态特征
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四、一些异常结构及细胞的认识
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1.核左移
外周血中杆状核粒细胞增多或出现晚幼粒、中幼 粒、早幼粒细胞
胞核：圆形或肾形，深紫红色。染色
质粗糙，排列均匀，大淋巴细胞核常
偏于一侧。
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淋巴细胞 （血涂片）
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5.单核细胞（M）
形态：为外周血中最大的细胞，直径15-25um 胞体呈圆形或不规则形 。
胞浆：丰富，染淡蓝色或灰蓝色，呈毛玻璃 样半透明。胞浆内含大量细小、弥散分布的 灰尘样淡紫红色嗜天青颗粒，可见空泡。
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4.油镜观察：选择血涂片体尾交界处细胞分布均 匀、着色良好的区域，滴加1滴香柏油，按一定 的方向顺序对所见到的每个白细胞进行分类，并 用白细胞分类计数器做好记录，共计数100个白 细胞。
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5.计算：求出各类白细胞所占的百分率。 6.报告方式： 百分率（%）。
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六、参考区间
WBC 百分率 （%）
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嗜酸性粒细胞（Eosinophil，E）
抑制嗜碱性粒细胞和肥大细胞合成和释 放活性物质，吞噬其释出颗粒，破坏组胺， 限制过敏反应
参与对寄生虫的免疫反应
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三、白细胞正常形态
1.中性粒细胞(N) 直径10-15um 胞质：粉红色，含较多细小均匀的紫红
色中性颗粒。 胞核：染色不均
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三、实验器材与试剂 器材： 显微镜，香柏油，擦镜纸，清洁液 试剂：Wright 染液。
四、实验标本：制备良好的血涂片
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五、操作步骤
1.制备血涂片：按照正确的操作方法制备血涂片
2.染色：用Wright染液对血涂片染色，冲洗干净， 自然干燥后备用 。
3.低倍镜观察：低倍镜下观察全片，包括白细胞飞 分布和染色情况。
实验五 白细胞分类计数
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一、实验目的
掌握显微镜外周血白细胞分类计数（DLC）的 方法；
掌握外周血各类白细胞的正常形态。
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二、实验原理
将血液制成细胞分布均匀的血涂片， 用瑞氏染液染色，根据各类细胞的形态特 点和颜色差异将白细胞区别并进行计数。 通常计数100个白细胞，计算得出各种白 细胞所占的百分率。
胞浆：胞浆内充满粗大、整齐、均匀、 排列紧密、有立体感的桔红色嗜酸性颗 粒
胞核：长呈分叶状，二叶居多，呈眼镜 状，偶见3~4叶,染色质粗，染深紫红色。
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嗜酸性粒细胞 （血涂片）
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3. 嗜碱性粒细胞（B） 胞体呈圆形，略小于中性粒细胞
胞浆：含粗大但大小不一、分布不均匀的 紫黑色嗜碱性颗粒，颗粒常覆盖于核上， 致使核的轮廓与结构模糊不清
2.分类方法：遵循一定的方向，以“城垛式”连续 进行，避免主观选择视野；结果的记录可采用计数 器、手工画“正”字或“+++++”。
3.计数的白细胞数：白细胞总数在（3.0~15.0） ×109/L之间者，分类计数100个白细胞；总数在 15.0×109/L以上时，计数200个；总数低于 3.0×109/L时，应选用两张血涂片计数50~100个白 细胞。
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淋巴细胞（Lymphocyte，L）
B细胞 疫
T细胞
浆细胞 生成Ab 免疫活性物质
体液免 细胞免疫
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单核细胞（Monocyte，M）
吞噬，杀灭病原体 清除损伤或已死亡的细胞 处理抗原
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嗜碱性粒细胞（Basophil，B）
通过释放嗜碱性颗粒（组胺、肝素、慢反 应物质等）参与超敏反应
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2.核右移：主要见于营养性巨幼细胞 性贫血、恶性贫血等
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3. 毒性变化
大小不均：病程长的化脓性炎症 中毒颗粒：化脓菌感染及大面积烧伤 空泡：败血症 Dohle小体 （蓝斑）：是核和胞质发育不平衡表现 退行性变：核固缩、核肿胀 、核溶解
T原淋巴细胞
B原淋巴细胞
中幼粒细胞
幼单核细胞
晚幼粒细胞
T幼淋巴细胞
杆状核粒细胞 分叶核粒细胞
单核细胞
嗜酸性 粒细胞
嗜碱性 粒细胞整理版
T淋巴细胞
B幼淋巴细胞
B淋巴细胞 浆细胞 13
二、白细胞的功能
中性粒细胞（Neutrophil，N）
具有趋化、变形、黏附、吞噬、杀菌作用， 防御和抵抗病原菌侵袭
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中性杆Nst 1~5
中性分Nsg 50~70
嗜酸性 E 0.5~5
嗜碱性B
0~1
淋巴 L
20~40
单核M
3~8
绝对值（ ×109/L ） 0.04~0.50 2.00~7.00 0.05~0.50 0~0.10 0.80~4.00 0.12~0.80
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七、注意事项
1.计数区域：以体尾交界处最佳。