植物磷含量的测定(钼锑抗比色法)

植物磷含量的测定（钼锑抗比色法）

一、实验目的

1．掌握钼锑抗比色法测定磷的方法。

2．练习实际测量以及定容的操作。

3．练习分光光度计的使用。

二、实验原理

植物样品经消煮使各种形态的磷转变成磷酸盐。在一定酸度下,待测液中的正磷酸与钼酸铵和酒石酸锑钾生成一种三元杂多酸,后者在室温下能迅速被抗坏血

酸还原为蓝色络合物,可用吸光光度法测定。

三、实验试剂

（1）2mol/L NaOH溶液

（2）0.2%二硝基酚指示剂

（3）0.5mol/L H2SO4硫酸溶液:28mL浓H2SO4加水稀释至1L。

（4）钼锑贮存溶液：量取153ml浓硫酸(分析纯，密度1.84g/ml)，缓缓加入到400ml蒸馏水中，不断搅拌，冷却。另称取经磨细的钼酸铵[(NH4)6Mo7O24·H2O，分析纯]10g溶于温度约60℃300ml水中，冷却。然后将硫酸溶液缓缓倒入钼酸铵溶液中。再加入0.5％酒石酸锑钾[KSbOC4H4O6·1/2H2O，分析纯]溶液100ml，冷却后，加水稀释至1000ml，摇匀，贮于棕色试剂瓶中，此贮备液含钼酸铵1％，硫酸2.75mol/L。

（5）钼锑抗显色剂：称取1.50g抗坏血酸溶于100ml钼锑贮存溶液中，此溶液有效期不长，宜随配随用。

（6）5mg/L磷标准溶液：0.4394g在50℃烘干的磷酸二氢钾(KH2PO4。分析纯)，100ml水，加5ml浓硫酸(防腐)，用水定容到1L，浓度为100mg/L磷(P)，此溶液可以长期保存。吸取上述溶液10ml于200ml容量瓶中，加水至标度，浓度为5mg/L磷(P)标准溶液，此溶液不宜久存。

四、实验步骤

1、吸取定容过滤或澄清后的消煮液2.00～5.00ml(V2,含P5～30ug)于50ml 容量瓶中, 用水稀释至约20ml,加1～2滴二硝基酚指示剂,滴加2mol/L NaOH 溶液中和至刚呈黄色,再加入1滴0.5mol/L H2SO4溶液,使溶液的黄色刚刚褪

去呈淡黄色,然后加入钼锑抗显色剂5.00ml,摇匀,用水定容(V3)。在室温高于15

℃的条件下放置30min后,用1cm光径比色槽在波长700nm处测定吸光度,以空白溶液为参比调节仪器零点。

2、校准曲线或直线回归方程: 准确吸取ρ(P)= 5mg/L标准工作溶液0, 1, 2, 4, 6, 8 ml,分别放入50mL容量瓶中,加水至20ml,同上步骤显色并定容, 即得0,0.1, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8 mg/L P标准系列溶

液, 与待测液同时测定,读取吸光度,然后绘制校准曲线或直线回归方程。五、结果计算

W p =

6

10

m

(V1/V2)

V3

c

⨯

⨯

⨯

×1000

式中: W

p

——植物磷的质量分数,g/kg;

c——从校准曲线或回归方程求得的显色液中磷的质量浓

度, mg/L;

V1——消煮液定容体积, ml;

V2——吸取测定的消煮液体积, ml;

V3——显色液体积, ml;

m——称样量,g;

六、注意事项

1、室温低于15℃时，可在30～40℃水浴中，显色30min。

2、植物磷含量0.5g/kg为低量，1.0~2.0g/kg为中量，大于2.0g/kg为高量。

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