实验十五血清睾酮和皮质醇(TC)测定和应用
血睾酮皮质醇在马拉松运动训练监控中的应用
血睾酮/皮质醇在马拉松运动训练监控中的应用睾酮、皮质醇的生理机制及其与运动的关系一直是运动科学界研究的重点。
大量的研究结果表明，血睾酮、皮质醇对运动的应答比较敏感，二者可以动态地反应机体同化作用与异化作用的状态，不同的运动负荷会对机体血睾酮、皮质醇产生不同的影响，因此可以利用体内血睾酮、皮质醇的变化来监控运动员的机体情况从而指导运动训练。
本文将从睾酮、皮质醇的生理功能及其与运动的关系，血睾酮、皮质醇在运动训练中的监控和实例分析等方面阐述血睾酮与皮质醇在运动训练监控中的应用。
一、睾酮、皮质醇的生理功能睾酮是雄激素的一种，因其在雄激素中起主导作用，因此常作为雄激素的代表。
男子睾酮90%来自睾丸间质细胞，其余由肾上腺皮质和其他组织分泌；女性体内的睾酮主要由卵巢间质细胞和门细胞与肾上腺皮质网状带合成，其余主要由雄烯二酮在肝脏、脂肪、皮肤等组织转换而来。
正常成年男性每天约产生6- 24睾酮，血中睾酮浓度为10- 45 ；女性血中睾酮水平大约是男子的 1 /10。
体内约98%的睾酮以结合形式存在，游离部分仅占2%左右，目前认为，有活性的睾酮是游离睾酮和与白蛋白结合的睾酮。
正常情况下，男性体内睾酮的分泌在下丘脑—垂体—性腺轴的负反馈调节作用下进行；而在女性体内，睾酮的分泌不具有轴的反馈调节，一定程度上是通过性激素结合球蛋白的合成量与激素代谢率来调节。
睾酮是人体内的主要同化激素之一，它的主要生理功能包括：（1）刺激雄性附性器官发育并维持其功能，维持雄性第二性征；（2）刺激体内蛋白质合成增加，氨基酸的分解代谢减弱；（3）促进骨骼的生长；（4）增加促红细胞生成素的生成，进骨髓造血；（5）减少尿肌酸量，使肌酸与三磷酸腺苷作用合成磷酸肌酸；（6）调节运动后肌糖原的超量恢复，增加糖原储备；（7）维持雄性进攻意识，使运动员训练更刻苦，竞赛时更富有进取心；（8）减少体脂, 增大肌肉体积和力量等。
皮质醇是一种21 个碳原子的固醇类激素，它是由肾上腺皮质的束状带和网状带分泌的。
血清总胆固醇TC测定操作规程
血清总胆固醇TC测定操作规程.docx血清总胆固醇（TC）测定操作规程1. 目的本操作规程旨在规范血清总胆固醇（TC）的测定过程，确保检测结果的准确性和重复性。
2. 原理血清总胆固醇（TC）测定通常采用酶法，通过胆固醇酯酶将胆固醇酯水解为游离胆固醇，然后利用胆固醇氧化酶将游离胆固醇氧化为胆甾酮和H2O2，最后利用过氧化物酶将H2O2分解为2H2O和O2，同时产生颜色变化。
颜色的深浅与血清中胆固醇含量成正比，可通过比色法测定。
3. 试剂和材料酶试剂盒（含胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、过氧化物酶等）校准品和质控品血清样本蒸馏水移液枪及吸头比色杯恒温水浴箱自动生化分析仪或分光光度计4. 操作步骤4.1 准备工作确保所有试剂和样本均已在室温下平衡至25°C。
校准生化分析仪或分光光度计至适当的波长（通常为500-550nm）。
4.2 试剂准备根据试剂盒说明书，将酶试剂混合均匀，并预热至25°C。
4.3 样本处理取适量的血清样本，避免溶血和脂血样本。
如有必要，对样本进行离心，去除沉淀物。
4.4 加样使用移液枪准确取样，将血清样本加入比色杯中。
按照试剂盒说明书，加入等量的酶试剂至每个比色杯中。
4.5 反应将比色杯放入恒温水浴箱中，保持37°C反应一定时间（通常为5-10分钟）。
4.6 比色测定将反应后的比色杯放入自动生化分析仪或分光光度计中。
读取吸光度值，并根据标准曲线计算血清总胆固醇浓度。
5. 质量控制每次测定前，使用校准品进行仪器校准。
定期使用质控品进行质量控制，确保结果的准确性和稳定性。
6. 结果记录与报告记录所有测定结果，包括吸光度值、胆固醇浓度等。
根据医院或实验室的标准操作程序，编写并发布检测报告。
7. 安全注意事项操作时应穿戴适当的个人防护装备，如手套和实验服。
避免接触试剂和样本，尤其是避免吸入和摄入。
按照当地法规处理废弃物。
8. 维护和校准定期对生化分析仪或分光光度计进行维护和校准，确保仪器的准确性。
运动负荷时血睾酮、皮质醇及其比值变化
运动负荷时血睾酮、皮质醇及其比值变化
叶展红
【期刊名称】《中国组织工程研究》
【年(卷),期】2000(004)007
【摘要】目的:探讨利用运动员血睾酮(T)、皮质醇(C)及T/C的动态变化作机能评定可行性的研究.方法:进行2级负荷训练,以放免法对T、C进行测定分析.结果:(1)T 值:最高为降低强度训练后值,最小为实验前值;与受试前比,男降低强度训练后值,P＜0.05,女P＜0.01;SD值较大.(2)T/C值:最高为降低强度训练后值,最小为实验前值;与受试前比,降低强度训练后值,P＜0.01;SD值较大.(3)C值:2级负荷后的数值都有变化P＞0.05.结论:T,C,T/C值对负荷反应灵敏,数值变化有随强度变化的趋势,可作为运动员机能评定的指标;由于T、T/C的SD值较大,运用该指标进行机能评定时,需区别对待.
【总页数】1页(P1081)
【作者】叶展红
【作者单位】广州市体育科学研究所广东广州 510620
【正文语种】中文
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提高铁人三项运动员血睾酮水平的药物效果实验研究.
提高铁人三项运动员血睾酮水平的药物效果实验研究[ 07-06-21 15:39:00 ] 作者：邓运龙， 张海忠 编辑：studa20【摘要】 目的 通过双盲对分组对比实验对提高铁人三项运动员血清睾酮的市售补肾口服液（简称营养品A ）和生力君口服液（简称营养品B ）进行了人体实验研究。
方法 采用双盲交叉对比实验设计。
实验1组每日给予A ，实验2组每日给予营养品B ，空白对照组按B 的口服方法给予同等剂量的淀粉安慰剂。
在实验4周时，实验1组服用安慰剂，对照组服用A ，再进行4周实验。
结果 营养品A 和营养品B 对人体运动训练过程中的低血睾酮现象都具有明显的抑制作用，而且在效果方面，营养品B 要明显好于营养品A ；营养品A 和营养品B 在实验过程中，血皮质醇都表现了先下降后回升的变化趋势，而且变化明显（P<0.05）；营养品A 可以在运动训练中抑制血色素的降低，对身体机能恢复具有一定积极影响。
在效果方面，实验营养品B 药效与营养品A 一致，但营养品B 效果更明显；营养品A 和营养品B 都能够提高超氧化物歧化酶的浓度，实验1组与实验2组没有组间差异；营养品A 能够使体内MDA 浓度降低，可以减少运动后自由基对机体的损伤。
营养品B 则是在实验后2周时，丙二醛明显降低，而后又出现显著回升。
结论 营养品A 和营养品B 都对提高铁人三项运动员血清睾酮有显著作用。
【关键词】 铁人三项运动；血睾酮；实验研究Experimental research of nutriments effect to enhance testosterone level in serum for triathlon athletes【Abstract 】 Objective Through the methods of double-blind ， physical experimental research has been taken on oral liquid for reinforcing kidney in sale （nutriment A ） and ShengLiJun oral liquid （nutriment B ） to enhance triathlon’s testosterone level in serum.Methods Through the experimental design of double-blind ， chiasm and comparison. Group 1 were given A every day ， Group 2 were given B every day ， the control group were given starch placebo with the same dosage and same oral ways. At the fourth week ， group 1 were given placebo ， the control group were given A ， and the next four weeks experiment was taken sequentially.Results Nutriment A and nutriment B both have obviously inhibited effect to the low testosterone phenomenon in the course of training. Furthermore ， nutriment B’s effect is better than A marked ly. Cortisol in serum occurs the tendency of firstly descent and then elevation for both A and B in the experiment ， and the change is very obvious （P<0.05）. Nutriment A can inhibit hemoglobin’s reducing in the training; it has positive effect to body’s eng inery comeback. In the effect ， nutriment B’s function is the same as A， and B’s function is moreobvious. Both A and B can enhance the concentration of superoxide dismutase（SOD）. There is no difference between group 1 and 2. Nutriment A can reduce the concentration of malondialdehyde（MDA），and can alleviate body’s damage from free radical after exercise. For the nutriment B， at the second week of the experiment，MDA’s level reduces evidently， and then ascends evidently.Conclusion Nutriment A and B both have obviously effect to enhance testosterone level in serum for triathlon athletes.【Key words】 triathlon; testosterone; experimental research铁三运动员身体的消耗巨大，属于典型的力竭型运动，当然，耗尽的不仅仅是三大能量源，而且影响到身体各器官、组织的功能水平，包括体内的激素水平。
血清总胆固醇测定实验报告
1. 掌握血清总胆固醇测定的原理和方法。
2. 了解血清总胆固醇测定的临床意义。
3. 培养实验操作技能，提高实验分析能力。
二、实验原理血清总胆固醇（Total Cholesterol，TC）是指血液中所有胆固醇的总和，包括游离胆固醇和胆固醇酯。
血清总胆固醇测定是临床诊断和预防动脉粥样硬化、冠心病等疾病的重要指标。
测定血清总胆固醇的方法主要有酶法、化学比色法、荧光法等。
本实验采用酶法测定血清总胆固醇，利用胆固醇氧化酶（COD）和过氧化物酶（POD）催化反应，将胆固醇氧化生成胆烷4烯3酮，再与4-氨基安替比林和酚在过氧化物酶的作用下生成红色醌亚胺，通过比色法测定吸光度，从而计算出血清总胆固醇含量。
三、实验材料1. 试剂：胆固醇氧化酶试剂、过氧化物酶试剂、4-氨基安替比林试剂、酚试剂、胆固醇标准液、血清样本、蒸馏水、721型分光光度计等。
2. 仪器：恒温水浴箱、移液器、试管、试管架等。
四、实验步骤1. 标准曲线绘制：取一系列已知浓度的胆固醇标准液，分别加入胆固醇氧化酶试剂、过氧化物酶试剂、4-氨基安替比林试剂和酚试剂，混匀后置于37℃水浴箱中保温15分钟。
以蒸馏水为空白对照，在510nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，胆固醇浓度为横坐标，绘制标准曲线。
2. 样本测定：取血清样本，按照与标准曲线绘制相同的步骤，测定吸光度。
3. 结果计算：根据标准曲线，计算血清总胆固醇含量。
五、实验结果1. 标准曲线绘制：以吸光度为纵坐标，胆固醇浓度为横坐标，绘制标准曲线，相关系数R²=0.997。
2. 样本测定：测定血清总胆固醇含量，结果显示：血清总胆固醇为5.8mmol/L。
1. 本实验采用酶法测定血清总胆固醇，操作简便、准确度高，适合临床应用。
2. 标准曲线绘制过程中，应注意标准液的浓度范围，以保证标准曲线的线性关系。
3. 在实验操作过程中，应注意试剂的配制、仪器的校准等，以保证实验结果的准确性。
4. 血清总胆固醇测定结果对临床诊断和预防动脉粥样硬化、冠心病等疾病具有重要意义。
皮质醇测定完整版
皮质醇测定集团标准化办公室：[VV986T-J682P28-JP266L8-68PNN]皮质醇测定人肾上腺皮质分泌类固醇激素以皮质醇（氢化考的松）为主，血浆皮质醇分为游离与结合两种形式。
测定其血浆皮质醇浓度，是直接了解垂体肾上腺皮质系统功能的方法。
皮质醇是由肾上腺皮质束状带合成分泌的一种糖皮质类固醇激素，每日约分泌10～35mg，半衰期约100min。
皮质醇的分泌有明显的昼夜节律，以清晨6～8时最高（50～250μg／L），晚上10时至零晨2时为最低（20～100μg／L）。
皮质醇的主要功能是增加糖异生，对蛋白质和脂肪代谢的影响亦非常显着。
皮质醇分泌人血后绝大部分与血循环中皮质类固醇结合球蛋白（CBG）结合。
真正具有生物活性的只是游离皮质醇，它只占总皮质醇的1％～3％，亦只有游离的皮质醇才能从肾小球滤过，从尿中排出。
故测定尿皮质醇，可排除CBG变化的影响，反映血浆游离皮质醇水平。
参考值：上午8∶00：（127±55）μg／L下午4∶00：（47±19）μg／L午夜：（3．4±12）μg／L新生儿脐带血浆：85～550μg／L临床意义：（1）血浆总皮质醇升高见于下列情况：皮质醇增多症（库欣病），肾上腺肿瘤、妊娠、口服避孕药，异位ACTH综合征、垂体前叶功能亢进症，单纯性肥胖。
应激状态（手术、创伤、心肌梗死等）。
（2）血浆总皮质醇降低见于：肾上腺皮质功能降低，垂体前叶功能低下，全身消耗性疾病，口服苯妥钠、水杨酸钠等药物。
先天性肾上腺皮质功能低下症，席汉综合征。
皮质醇功能减退者，分泌节律基本正常；而血浓度明显降低。
血清总胆固醇测定实验报告
血清总胆固醇测定实验报告一、实验目的血清总胆固醇（Total Cholesterol，TC）测定是临床生化检验中的常见项目之一，本实验旨在掌握血清总胆固醇测定的原理、方法和操作步骤，熟悉实验过程中的注意事项，并对实验结果进行准确分析和判断。
二、实验原理目前，血清总胆固醇测定常用的方法是酶法。
其原理是胆固醇酯酶（CE）将胆固醇酯水解为游离胆固醇（FC）和脂肪酸，胆固醇氧化酶（COD）将 FC 氧化为胆甾烯酮和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶（POD）的催化下与 4-氨基安替比林（4-AAP）和酚反应生成红色醌亚胺。
在一定波长下，通过比色法测定吸光度，从而计算出血清总胆固醇的含量。
三、实验材料与设备1、材料血清样本：新鲜无溶血、无脂浊的血清。
试剂盒：包含胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、过氧化物酶、4-氨基安替比林、酚等试剂。
2、设备分光光度计移液器恒温水浴箱离心机四、实验步骤1、样本处理空腹采集静脉血，置于干燥无抗凝剂的试管中，室温下静置 30 分钟使其凝固。
以 3000 转/分钟离心 10 分钟，分离血清，备用。
2、试剂准备按照试剂盒说明书的要求，将试剂 R1 和试剂 R2 分别配制好，并放置于恒温水浴箱中预热至规定温度。
3、测定操作取两支干净的比色管，分别标记为空白管和测定管。
空白管中加入蒸馏水20μL 和试剂R1 1000μL，混匀，置于 37℃恒温水浴箱中保温 5 分钟。
测定管中加入血清样本20μL 和试剂R1 1000μL，混匀，置于 37℃恒温水浴箱中保温 5 分钟。
然后，向空白管和测定管中分别加入试剂R2 500μL，混匀，置于37℃恒温水浴箱中保温 10 分钟。
4、比色测定以空白管调零，在分光光度计 500nm 波长处读取测定管的吸光度值（A）。
五、实验结果计算血清总胆固醇（mmol/L）＝（测定管吸光度空白管吸光度）×校准品浓度÷校准管吸光度六、实验结果本次实验测定的血清总胆固醇结果为_____mmol/L。
胆固醇测定实验报告
本次实验旨在通过学习血清总胆固醇（Total Cholesterol，TC）的测定方法，掌握酶法测定胆固醇的原理和操作步骤，并了解血清总胆固醇在临床诊断中的应用。
二、实验原理血清总胆固醇的测定采用酶法，利用胆固醇酯酶将胆固醇酯水解为胆固醇和脂肪酸，再利用胆固醇氧化酶将胆固醇氧化为胆汁酸，同时生成过氧化氢。
在过氧化氢的作用下，加入的4-氨基安替比林和酚酞在酸性条件下生成红色化合物，其颜色深浅与胆固醇含量成正比。
通过比色法测定吸光度，即可计算出血清中胆固醇的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 血清样品- 胆固醇酯酶试剂- 胆固醇氧化酶试剂- 4-氨基安替比林试剂- 酚酞试剂- 磷酸缓冲液- 96孔微孔板- 吸量器- 酶标仪2. 实验仪器：- 恒温水浴锅- 离心机- 移液器- 烧杯- 移液管1. 准备工作- 将所有试剂和器材准备好，并确保其清洁、干燥。
- 将血清样品进行编号，并在实验过程中注意避免交叉污染。
2. 样品处理- 取一定量的血清样品，按照实验要求进行稀释。
- 将稀释后的血清样品加入微孔板中，每孔加入一定量的胆固醇酯酶试剂。
3. 酶反应- 将微孔板放入恒温水浴锅中，在37℃下孵育一定时间，使胆固醇酯酶与胆固醇发生反应。
4. 洗板- 将微孔板取出，用去离子水冲洗3次，以去除未反应的酶和底物。
5. 添加试剂- 向每个微孔中加入一定量的胆固醇氧化酶试剂、4-氨基安替比林试剂和酚酞试剂。
- 加入磷酸缓冲液，使溶液pH值保持在酸性范围内。
6. 比色- 将微孔板放入酶标仪中，在特定波长下测定吸光度。
- 将吸光度值与标准曲线进行对比，计算出血清中胆固醇的含量。
7. 结果分析- 根据实验结果，分析血清总胆固醇水平与临床诊断的关系。
五、实验结果与分析1. 实验结果- 根据实验数据，绘制标准曲线，并计算出样品中胆固醇的含量。
2. 结果分析- 通过实验结果，了解血清总胆固醇水平与临床诊断的关系，为临床诊断提供依据。
睾酮测定标准操作规程
睾酮测定标准操作规程
1 检验申请
单独检验项目申请：睾酮测定（缩写Testo）；组合项目申请：性激素检查组合。
临床医生根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理
2.1标本采集
2.1.1常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中。
或采用含分离胶的真空采血管。
也可采集血浆标本，用肝或EDTA 抗凝。
2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。
2.1.5下列标本为不合格标本
2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml 的血清或血浆。
血清总胆固醇测定实验报告
血清总胆固醇测定实验报告背景介绍：总胆固醇（TC）是指血浆中所有脂蛋白的胆固醇总和，包括低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和极低密度脂蛋白胆固醇（VLDL-C）。
总胆固醇水平的高低与心血管疾病的发生密切相关，因此对其进行准确测定具有重要的临床意义。
实验目的：通过本实验，掌握血清总胆固醇的测定方法，了解其在临床诊断中的应用。
实验原理：本实验采用酶法测定血清总胆固醇，其原理为将胆固醇酯酶和胆固醇氧化酶加入样本中，将胆固醇和脂蛋白水解为游离胆固醇和过氧化物，再由过氧化物与酚类物质发生反应，生成有色产物，最后通过比色计测定其吸光度，从而计算出总胆固醇的含量。
实验步骤：1. 取血清标本，离心分离血清。
2. 用标准吸光度计预热，设置波长为500nm。
3. 取适量样本和对照品，加入试剂A和试剂B，混匀后在37°C恒温水浴中反应15分钟。
4. 加入试剂C混匀，再在37°C恒温水浴中反应5分钟。
5. 用比色计在波长为500nm处对样本和对照品吸光度，计算总胆固醇含量。
实验结果：样本A吸光度为0.6，对照品吸光度为0.3，根据标准曲线计算出样本A的总胆固醇含量为5.0mmol/L。
样本B吸光度为0.7，对照品吸光度为0.4，计算出样本B的总胆固醇含量为6.0mmol/L。
实验结论：根据上述实验结果，样本A的总胆固醇含量正常，而样本B的总胆固醇含量超标，提示可能存在心血管疾病的风险。
因此，血清总胆固醇的测定对于心血管疾病的筛查和诊断具有重要意义，有助于及时采取预防和治疗措施。
总结：通过本次实验，我们掌握了血清总胆固醇的测定方法及其临床意义，了解了其在心血管疾病中的重要性。
在临床实践中，我们应该重视血清总胆固醇的监测，及时发现异常情况并采取相应的干预措施，以保障患者的健康。
血清总胆固醇(TC)测定操作规程
血清总胆固醇(TC)测定操作规程A1．2 原理血清中的胆固醇酯(CE)被胆固醇酯水解酶(CEH)水解成游离胆固醇(Chol)，后者被胆固醇氧化酶(CHOD)氧化成△4—胆甾烯酮，并产生过氧化氢，再经过氧化物酶(POD)催化4—氨基安替比林与酚(三者合称PAP)，生成红色醌亚胺色素(Trinder反应)。
醌亚胺的最大吸收在500nm 左右，吸光度与标本中总胆固醇呈正比。
反应式如下：胆固醇酯+H2O CEH 胆固醇+游离脂肪酸胆固醇+02 CHOD △4-胆甾烯酮十H2022H202+4－氨基安替比林+酚POD 昆亚胺+4H2OA1．3．1 受检者(体检对象或病人)的准备：除总胆固醇不一定用空腹血外，测定甘油三酯、脂蛋白与载脂蛋白的病人必须空腹12h，不饮酒24h后采集血样。
对于体检对象抽血前应有2周时间保持平时的饮食习惯，近期内体重稳定，无急性病、外伤、手术等意外情况。
妊娠后期各项血脂都会增高，应在产后或终止哺乳后3个月检验才能反映其基本血脂水平。
注意有无应用影响血脂的药物，如降血脂药、避孕药、噻嗪类利尿剂、β受体阻滞剂、免疫抑制剂、某些降压剂、降糖药、胰岛素及其他激素制剂等，检验以前应根据所用药物的特性停止用药数天或数周，否则应记录用药情况。
对体检对象及做前瞻性观察者，还应注意采血的季节，因为血脂水平有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。
应嘱体检对象在抽血前24h内不作剧烈运动。
A1．3．2 静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，因此影响血脂水平。
例如站立5 min 可使血脂浓度提高5％，15 min提高16％，故在采血前至少应***5min。
一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1 min，穿刺成功后立即松开止血带。
静脉阻滞5min可使甘油三酯增高10％～15％。
A1. 3．3 抗凝剂：我国多用血清作血脂检验。
如用血浆，多主张用EDTANa2(1mg／mL)抗凝。
血清总胆固醇测定实验报告
血清总胆固醇测定实验报告一、实验目的血清总胆固醇（Total Cholesterol，TC）测定是临床生化检验中常见的项目之一。
本次实验的目的是掌握血清总胆固醇测定的基本原理、操作方法和结果分析，了解血清总胆固醇水平在健康评估和疾病诊断中的意义。
二、实验原理目前常用的血清总胆固醇测定方法为酶法。
胆固醇酯酶（CE）首先将胆固醇酯水解为游离胆固醇和脂肪酸，胆固醇氧化酶（COD）催化游离胆固醇氧化生成胆甾烯酮和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶（POD）的作用下与 4-氨基安替比林（4-AAP）和酚反应生成红色醌亚胺化合物。
在 500nm 波长处测定吸光度，吸光度的高低与血清中总胆固醇的含量成正比，通过与标准品比较可计算出血清总胆固醇的浓度。
三、实验材料1、仪器分光光度计恒温水浴箱移液器离心机2、试剂胆固醇测定试剂盒（包括胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、过氧化物酶、4-氨基安替比林、酚等）标准胆固醇溶液（浓度已知）血清样本四、实验步骤1、试剂准备按照试剂盒说明书将试剂配制成工作液，置于 37℃恒温水浴箱中预温。
2、样本处理采集空腹静脉血，离心分离血清。
3、标准曲线绘制取 5 支试管，分别加入0μl、50μl、100μl、150μl、200μl 标准胆固醇溶液，用生理盐水补足至200μl。
各管中胆固醇的浓度分别为0mmol/L、25mmol/L、50mmol/L、75mmol/L、100mmol/L。
向各管中加入 20ml 工作液，充分混匀，37℃水浴 10 分钟。
以空白管调零，在 500nm 波长处测定各管吸光度。
以胆固醇浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
4、样本测定取200μl 血清样本，加入 20ml 工作液，充分混匀，37℃水浴 10 分钟。
测定样本管的吸光度，根据标准曲线计算出血清总胆固醇的浓度。
五、实验结果1、标准曲线记录各标准管的胆固醇浓度和对应的吸光度值，绘制标准曲线。
标准曲线应呈线性关系，相关系数（r）应大于 098。
血清测睾酮
可以用酶免比如西域的产品：产品简述：EHSY西域品质提供的睾酮酶联免疫检测试剂盒；1.用途内分泌腺所合成与释放的性激素，通过血液循环传送到远距离的特异靶组织和靶器官，引起特异的生物学效应。
检测这些激素有助于对男性病，特别是男性不育症的综合分析。
睾酮是睾丸细胞合成，并主要由睾丸，肾上腺和卵巢分泌; 其主要功能是促进男性第二性征的发育和维持。
在临床上血清中睾酮的测定对某些内分泌疾病，如男性曲细精管发育不全综合症、男子性功能障碍、类无睾症、Reifenstein 综合症、女子性征异常、性早熟、性幼稚等的诊断有帮助。
尤其对于完全性性早熟和不完全性性早熟症的确诊意义最大。
女性多毛症患者的血清睾酮值常常高于正常值，垂体前叶功能减退时血清睾酮水平可能降低。
2.原理简介睾酮试剂盒采用抗原标记竞争法测定血清中睾酮的水平。
试剂盒中将抗睾酮抗体包被于微孔板上，制备成固相抗体，酶结合物含有用辣根过氧化物酶标记的睾酮抗原。
反应过程中，若检测标本含有睾酮，则与标记抗原竞争固相抗体，形成固相抗体－抗原或固相抗体－标记抗原复合物，并结合在微孔壁表面，洗去多余的标记抗原，再加入酶底物显色，用1N H2SO4终止酶反应后，在450nm波长下测定吸光度。
以睾酮标准品浓度为横坐标，样品吸光度与标准品“0”点吸光度之比值为纵坐标，在对数坐标纸上绘制标准曲线，然后在其标准曲线上相对应地测出标本值。
3.试剂盒组分1）微孔反应板：96孔(8孔×12条)，用抗睾酮抗体包被微孔反应板，2~8℃干燥保存，有效期内保持稳定。
2）酶结合物：一瓶, 3.0ml，含睾酮与辣根过氧化物酶的结合物，2~8℃保存，有效期内保持稳定。
3）标准品：五瓶，每瓶1ml，含孕酮浓度分别为0ng/ml、0.2ng/ml、0.6ng/ml、2.0ng/ml、6.0ng/ml、20.0ng/ml，2~8℃保存，有效期内保持稳定。
4）质控血清：二瓶，每瓶1ml，浓度分别为L-Ⅰ，L-Ⅱ，2~8℃保存，有效期内保持稳定。
甲状腺相关激素、皮质醇及性激素测定的临床应用2(1)
肾上腺皮质
糖皮质激素
1.皮质醇
正常值 上午8点 50-280ug／L 下午4点 30-150ug／L 午夜0时 20-80ug／L
昼夜节律： 一般早上8时分泌最高，下午4时为8时的一半， 夜间12时为下午4时的一半。
皮质醇测定临床意义:
增高 肾上腺皮质功能亢进(如Cushing综合征)、双侧肾上腺皮质 增生或肿瘤(多为恶性肿瘤)、肾上腺外肿瘤(异位ACTB综合征) 等，以上疾病时皮质醇增高且失去昼夜变化规律； 单纯性肥胖； 应激情况，应激消失后很快即可降至正常； 与皮质醇结合的蛋白质增多，如妊娠或用雌激素治疗等。 降低 肾上腺皮质功能减低(如Addison病)、垂体前叶功能减低(如 Simmonds—Sheehan综合征)等（血浆皮质醇降低，但分泌节 律基本正常）； 某些药物影响，如苯妥英钠、水杨酸等。
血清甲状腺素测定：TT4、TT3
正常成人血清TT4为62.68～150.80 nmol/L
（判定甲状腺功能最基本的筛选指标）
TT3为0.88～2.44 nmol/L （常与TT4平行，但在甲亢初期及复发早期上
升较快，故为早期GD、治疗中疗效观察及停药后
复发的敏感指标）
血清甲状腺激素测定：FT4、FT3
LH
FSH
雌激素 （E2）
孕激素(P)
排卵期
排卵前E2高峰促成正反馈，出现血LH和FSH峰 血LH和FSH峰后约36小时发生排卵
LH
FSH
雌激素 （E2）
孕激素(P)
黄体期
排卵后的卵泡形成黄体 生成与分泌雌孕激素，排卵后5～10天达
高峰
雌激素 （E2）
孕激素(P)
黄体的转归
如未孕，黄体14±2天后退化，使血内 E2、P水平下降，内膜脱落，月经来潮
皮质醇检测标准操作规程
皮质醇检测标准操作规程一、目的规范人皮质醇测定的标准操作程序，确保人皮质醇测定的结果准确有效。
二、适用范围：在AutoLumo A2000化学发光检测仪上定量测定人血清中的人皮质醇。
三、临床意义皮质醇是由肾上腺皮质分泌的一种主要的糖皮质激素。
它的生理功能包括调节碳水化合物的代谢和电解质和水的分布。
同时，皮质醇还有免疫抑制和抗炎的作用。
在正常人体内，皮质醇的分泌最终是由中枢神经系统来控制的。
应激（例如：受伤、禁食、手术、考试等）促使下丘脑释放促肾上腺皮质素释放激素（CRH）。
CRH与垂体前叶的受体结合，刺激促肾上腺皮质激素（ACTH）的释放，ACTH作用于肾上腺皮质，增加皮质醇的合成和分泌。
皮质醇通过血流可以作用于下丘脑和垂体，对CRH和ACTH的分泌起负反馈调节作用，同时作用于靶组织发挥生理作用，整个调节系统是一个封闭的环。
皮质醇水平在清晨最高，晚上降低到清晨的一半[1]。
检测皮质醇，可以直接检测肾上腺的功能状态，同时可以间接观察垂体的功能状态。
皮质醇的病理性增高常见于：能够分泌ACTH的肿瘤、功能性垂体肿瘤--柯兴氏病、功能性肾上腺肿瘤、酒精导致的继发性柯兴氏综合征、糖皮质激素治疗。
皮质醇的病理性降低常见于：垂体肿瘤、席汉综合症、阿狄森氏病、尼尔森病。
怀孕和雌激素治疗可以显著的提高皮质醇的水平，其他一些刺激例如严重的应激也会增加皮质醇的分泌[2-3]。
四、方法原理本试剂盒采用竞争法原理进行检测。
用二抗包被磁微粒，皮质醇抗体制备抗体溶液，辣根过氧化物酶标记皮质醇抗原制备酶结合物。
通过免疫反应形成二抗-抗体-酶标抗原复合物，该复合物催化发光底物发出光子，发光强度与皮质醇的含量成反比。
五、标本的采集与处理5.1.应用正确医用技术收集血清，血浆样本。
5.2.样本中的沉淀物和悬浮物可能会影响试验结果，应离心除去。
5.3.严重溶血、脂血或浑浊的样本不能用于测定。
5.4.样本收集后在室温放置不可超过8小时；如果不在8小时内检测需将样本放置在2~8℃的冰箱中；若需48小时以上保存或运输，则应冻存于 -20℃以下，避免反复冻融。
血清睾酮实验报告
摘要：血清睾酮是男性体内最主要的雄激素，对男性生殖、性功能及第二性征的发育具有重要意义。
本文通过对血清睾酮检测方法的介绍，分析了其临床意义，旨在为临床医生提供参考。
一、引言血清睾酮检测是临床医学中常用的一种检测手段，通过测定血清中睾酮水平，可以评估男性生殖系统功能、性功能及第二性征发育状况。
本文将对血清睾酮检测方法及其临床意义进行探讨。
二、血清睾酮检测方法1. 试剂与仪器（1）试剂：睾酮酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒、酶标仪、移液器、离心机等。
（2）仪器：电热恒温水浴箱、分光光度计等。
2. 检测方法（1）样本采集：抽取患者空腹静脉血，置于抗凝管中，室温下静置30分钟，离心分离血清。
（2）操作步骤：按照试剂盒说明书进行操作，主要包括加样、孵育、洗涤、显色、终止等步骤。
（3）结果判定：根据标准曲线计算血清睾酮浓度。
三、血清睾酮临床意义1. 男性生殖系统功能评估血清睾酮水平是男性生殖系统功能的重要指标。
当睾酮水平低于正常值时，可能导致男性不育、性功能障碍等症状。
通过检测血清睾酮水平，可以判断男性生殖系统功能是否正常。
2. 性功能评估睾酮是维持男性性功能的关键激素。
当睾酮水平降低时，可能导致性欲减退、勃起功能障碍等症状。
通过检测血清睾酮水平，可以评估男性性功能状况。
3. 第二性征发育评估睾酮水平与男性第二性征发育密切相关。
当睾酮水平异常时，可能导致男性第二性征发育不良，如胸部发育、声音变细等。
4. 某些疾病的诊断与鉴别诊断（1）性腺功能减退：血清睾酮水平降低，伴有第二性征发育不良，可能诊断为性腺功能减退。
（2）库欣综合征：血清睾酮水平升高，伴有满月脸、多毛等症状，可能诊断为库欣综合征。
（3）多囊卵巢综合征：血清睾酮水平升高，伴有月经不调、多毛等症状，可能诊断为多囊卵巢综合征。
四、结论血清睾酮检测是临床医学中常用的一种检测手段，对评估男性生殖系统功能、性功能及第二性征发育具有重要意义。
临床医生应重视血清睾酮检测，以便为患者提供准确的诊断与治疗建议。
甾体激素实验报告(3篇)
第3篇
一、实验目的
六、实验讨论
1. 甾体激素对细胞增殖的影响可能与激素受体有关。雌激素和睾酮能够激活细胞内的ERα和AR，进而促进细胞增殖。
2. 孕酮和皮质醇对细胞增殖无明显影响，可能是因为它们不能有效激活相关受体或信号通路。
3. 甾体激素在生物体内的作用机制复杂，涉及多个信号通路。本实验仅探究了甾体激素对细胞增殖的影响，未来需要进一步研究甾体激素在生物体内的其他作用。
4. 信号通路分析：通过Western blot检测相关信号通路蛋白的表达水平。
五、实验结果
1. 甾体激素对细胞增殖的影响：雌激素和睾酮能够促进细胞增殖，孕酮和皮质醇对细胞增殖无明显影响。
2. 信号通路分析：雌激素和睾酮处理后，细胞中ERα和AR的表达水平显著升高，而孕酮和皮质醇处理后，细胞中相关信号通路蛋白的表达水平无明显变化。
七、实验结论
1. 甾体激素在一定浓度范围内能促进小麦生长，提高株高、叶片数、叶面积和根系长度。
2. 甾体激素对小麦生长的影响具有浓度依赖性，过高或过低的浓度都会抑制小麦生长。
3. 甾体激素可能通过调节植物细胞分裂、伸长和分化等过程，影响小麦生长。
八、实验建议
1. 在后续实验中，可以进一步研究不同种类甾体激素对植物生长的影响。
3. 在实验设计时，注意对照组和实验组的差异，提高实验结果的可靠性。
九、参考文献
[1] Zelensky JN, et al. Steroid hormones in health and disease. Endocr Rev. 2016;37(3):335-382.
内分泌常用激素测定的原理标本收集及注意事项课件
3.垂体损伤、受压或阻断：垂体柄受压或断裂（外伤、手术、放疗等）、 垂体浸润性疾病（结核、垂体肿瘤、结节病等）、垂体炎、空泡蝶鞍、动 静脉畸形、脑积水可使PRL水平升高；
4.其他使PRL水平升高的因素包括肝脏疾病、肾衰竭、原发甲减、多囊 卵巢综合征、肾上腺皮质功能减退等。
【采血要点】
空腹抗凝静脉血2ml。
【注意事项和影响因素】
⑴ CT主要受血中钙浓度的调节，高血钙可促进CT的分泌。 ⑵ 男性高于女性，随年龄增长降钙素下降，肾功能不全可使降钙素水 平升高（肾脏清除减少）。
第三节、肾上腺功能相关激素测定
1. 血浆皮质醇及其昼夜节律 2. 24H尿游离皮质醇 3. 肾素-血管紧张素-醛固酮（RAAS） 4. 尿3－甲氧基－4羟基苦杏仁酸（VMA） 5. 尿总甲基肾上腺素（MN+NMN）
普萘洛尔。 老年人PTH水平较中青年高，冬季PTH高于夏季。
⑶ 肾功能不全的病人，其PTH水平可随血清钙的迅速变化（因透析和饮食磷的 量），而有较大的波动。
6、降钙素（CT）测定
【原理】
CT主要由甲状腺滤泡旁细胞（C细胞）分泌，甲状腺髓样癌来自滤泡旁 细胞，自主分泌大量 CT，可作为该肿瘤的标记。
3.各种应激可使ACTH水平增高，应尽量避免。
2、促甲状腺激素（TSH）测定
【原理】 TSH由腺垂体分泌，作用于甲状腺，促进甲状腺激素的
合成和分泌，TRH可刺激TSH分泌，而甲状腺激素反馈抑 制TSH分泌。
【采血要点】 空腹不抗凝静脉血2ml。
2、促甲状腺激素（TSH）测定
【注意事项】
（1）多巴胺、皮质醇可显著减少TSH的释放，在使用这些药物时TSH水 平可抑制到甲亢水平，生长抑素和5羟色胺也可使TSH分泌减少。
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➢ 其分析的基础是标记抗原（*Ag）和被测抗原即非标记抗原 （Ag）限量的特异性抗体（Ab）的竞争性抑制反应，是结合 分析中的一类方法。则于标记原和非标记抗原的免疫活性完 全相同，因此与特异性抗体具有相同的亲和能力。
➢ 通常以下列方式表示：在标记抗原和特异性抗体量恒定时， 由于标记原抗体复合物的形成受非标记抗原（待测浓度的物 质）的含量限制，所以当样品中非标记抗原含量高时，非标 记抗原对特异性抗体的竞争能力强，非标志抗原抗体复合物 的形成量就多，实验结果所计量到的标记性抗原抗体复合物 放射活性就低；相反，样品中非标记抗原含量低时，非标记 抗原对特异性抗体的竞争能力弱，非标记抗体复合物形成就 少，实验结果所计量到的标记性抗原抗体复合物放射活性就 高。其之间形成一定的逆相关函数关系。
双管标准曲线以保证测试数据的准确。 ③ 取样品血清50ul，直接滴入包被试管底部。 ④ 将1.0ml125I睾酮碘标记加入每个已加入了标准品或测试
样品的试管中。在振荡器上振混匀1min。 ⑤ 将加入1251标记的试管置于37℃水浴箱中，温育3h。 ⑥ 将温育后的溶液全部倒出，在吸水纸上击试管，将管内
⑵血清皮质醇的测定原理： 放射免疫法（Radioimmunoassay，RIA）测定血清皮 质醇浓度的实验方法，测试原理同血清睾酮的测定。
4 实验方法与步骤
㈠ 血睾酮的测定 ① 将包被试管、125 I睾酮标记液用标准品处于室温状态，
并充分混合标准品，碘标记液（轻轻翻转）。 ② 分取标准液A、B、C、D、E、F各50ul于包被试管中，做
⑴血睾酮的测定 ①采集1ml全血，避免溶血，静置析出或离心后得到澄清的血清，
血清量不少于100μl。 ②向包被试管中加入样品时，吸头不要触及管底部的药膜。 ③温育时可用小盖子或塑料薄膜纸盖住试管，以防止蒸气形成的
水滴掉入试管中。 ⑵血清皮质醇的测定 ①血样收服最好为晨静脉血，离心后应达到血清澄清进行测定。 ②向包被试管中加入样品时，吸头不要触及管底部的药膜。 ③温育时可用小盖子或塑料薄膜纸盖住试管，以防止蒸气形成的
实验十五 血清睾酮与皮质醇（T/C）测定及应用
1 实验目的
⑴通过实验使学生掌握人体激素血皮质醇和睾酮测 定方法及意义，为体育教学和运动训练提供指导。
⑵进一步巩固离心机、可调微量移液器、振荡器等 仪器的基本操作。
2 实验器材与试剂
⑴仪器：芬兰产1470γ计数器、恒温水浴箱等。 ⑵试剂 ①血睾酮的测定：使用包被-抗体-计数放射免疫试剂盒，
其中包括总睾酮抗体包被试管、125I标记溶液、睾酮 溶液和睾酮标准品。 ②皮质醇的测定：使用包被-抗体-计数放射免疫试剂盒， 其中包括总皮质醇抗体包被试管、125I标记皮质醇溶 液和皮质醇溶液和皮质醇标准品。 ③材料：人体静脉血等
3 实验原理
⑴ 血 睾 酮 的 测定原 理
⑴血睾酮的测定原理
➢ 放射免疫分析中应用放射性同位素标记物进行检测。
溶液尽力甩出。 ⑦ 按标准管、样品管的顺序依次将试管放入测试架，在γ
计数器上进行计数测定。
㈡ 皮质醇的测定
①将包被试管、125I皮质醇碘标记液及标准品于室温状态 下，并充分混合标准品、碘标记液（轻轻翻转）。
②分取标准液A、B、C、D、E、F各25μl于包被试管中， 做单管标准曲线。
③取样品血清25μl，直接滴试管பைடு நூலகம்部。
④将1.0 ml 125I皮质醇碘标记液加入了标准品或样品的 试管中，在振荡器上振荡混合1 min。
⑤将加好碘标记液的试管置于37℃水育箱中，温育45min。
⑥将温育后的溶液全部倒出，在吸水纸上叩击试管，将溶 液尽力甩干。
⑦ 按标准管-样品管的顺序依次将试管放入测试架，在γ 计数器进行测定。
5 注意事项