嗜血杆菌军团菌属
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形态染色结构
1.G-小杆菌，球杆状
2.具有多形性（球 杆、长杆或丝状）
3.无芽胞，无鞭毛， 不能运动
4.有荚膜菌株毒力较强
7
流感嗜血杆菌革兰染色 铜绿假单胞菌革兰染色
8
9
抗原性和生化反应
根据荚膜多糖抗原不同分为a、b、c、d、e、f 6个血清型，b型致病性最强（Hib疫苗预防）
能分解葡萄糖、氧化酶（-）、触酶（+） 根据对吲哚、脲酶、鸟氨酸脱羧酶试验的生化
发酵
嗜血杆菌
β溶
XV血
葡萄 蔗
乳
甘露 木
触
糖
糖糖醇 糖酶
ONPG
流感嗜血杆菌 + + -
+ -- - D+
-
副流感嗜血杆菌 - + -
+ +- + -D
D
溶血嗜血杆菌 + + +
+ -- - D+
-
副溶血嗜血杆菌 - + +
+ +- - -+
-
注：D为不同结果
微生物学检验
微生物学检验 标本采集：避免干燥 及时送检 分离培养：巧克力平板生长 血平板 不生长 检验程序
几种嗜血杆菌对生长因子需求
X因子
流感嗜血杆菌
+
副流感嗜血杆菌 -
嗜沫嗜血杆菌
-
副嗜沫嗜血杆菌 -
溶血嗜血杆菌
+
副溶血嗜血杆菌 -
杜克雷嗜血杆菌 +
埃及嗜血杆菌
+
V因子 + + + + + +
β溶血 + + -
15
流感嗜血杆菌巧克力平板培养24h
16
培养48h后菌落
17
流感嗜血杆菌“卫星现象”（血平板上出现） 金黄色葡萄球菌可产生V因子，血细胞可提供X因子
不同种型嗜血杆菌对X、V因子需求不相同
12
培养特性
培养基：巧克力平板 血细胞中含有X、V因子，V因子处于抑制 状态，加热80-90℃ 5-15min破坏细胞膜上抑 制物，可使V因子释放 巧克力琼脂中加入抗生素（万古霉素、杆 菌肽）可提高检出率
13
巧克力平板：灰白色、半透明菌落
流感嗜 血杆菌
14
MH平板上金葡菌周围未 见生长
血平板上金葡萄周围生 长（左）
18
抵抗力
抵抗力弱 对热敏感：56℃30min可杀死 对干燥、消毒剂等敏感 自溶酶
室温保存，4-5天转种一次
19
鉴定
菌落特征: 巧克力平板上灰白色半透明菌落 卫星现象：
当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在血平板上共 同培养时，由于金葡菌能合成释放V因子，并扩散 到培养基中 ，可促进流感嗜血杆菌生长，在金葡 菌周围生长的菌落较大，越远越小直至没有。 因子生长试验： MH平板上贴上X、V、X＋V因子纸片，在所需因 子纸片周围生长 生化反应 糖发酵试验
流感嗜血杆菌（H.influenzae）
副流感嗜血杆菌（H .parainfluenzae）
溶血嗜血杆菌（H .haemolyticus） 副溶血嗜血杆菌（H .parahemolyticus）
除这两菌外均不溶血
杜克嗜血杆菌（H .ducreyi）
埃及嗜血杆菌（H .aegyptius）
嗜沫嗜血杆菌（H .aphrophilus）
22
卫星现象
流感嗜血杆菌 金葡菌
23
卫星现象
24
副流感嗜血杆菌V因子利用试验
（MH平板）
25
生化反应
流感嗜血杆菌：
氧化酶（-） 触酶试验（+） 葡萄糖（+）、蔗糖、乳糖和甘露醇阴性、木 糖多（+） 硝酸盐还原（+） 有荚膜菌吲哚（+） 无荚膜菌吲哚（-） 不溶血
26
嗜血杆菌属中种的特征
因子
28
血液 脑脊液
鼻咽拭子 痰 脓汁
增菌培养
分离培养
涂片镜检（G-小杆菌多形性）
(巧克力平板 )
抗原检测
35℃ 5-10%CO2
18-24h
菌落形态 涂片镜检 卫星试验 荚膜肿胀试验 因子利用试验 (生化反应试验)
Hale Waihona Puke Baidu
报告结果
药敏试验
采用K－B法，用HTM（Haemophilus Test Medium Base)培养基。 常规检测β－内酰胺酶和氯霉素 治疗用氨苄西林，阿莫西林，磺胺类，第 二、三代头孢，红霉素，氨曲南等抗生素
20
卫星试验
“卫星试验”是检测对V因子的需求，培养 基加血与否是确定细菌对X因子的需求 流感仅在血平板上卫星试验（+），在MH 上（-） 副流感仅需V因子，在血平板和MH平板上 均可出现卫星现象。
21
卫星现象(satellite phenomenon)
流感嗜血杆菌 金葡菌
卫星现象：金葡菌周围出现生长
该菌引起的感染常发生在病毒等引起的呼 吸道感染之后
5
几种主要嗜血杆菌常栖部位及所致疾病
菌种
流感嗜血杆菌
副流感嗜血杆菌 溶血嗜血杆菌 副溶血嗜血杆菌
常栖部位及所致疾病
无荚膜菌株多为上呼吸道正常菌群，可引起原发化脓性感染及继发性呼 吸道感染，包括脑膜炎、鼻咽炎、关节炎、心包炎、鼻窦炎及中耳炎等。
口腔及阴道正常菌群，偶尔可引起心内膜炎、尿道炎。 鼻咽部正常菌群，常引起儿童上呼吸道感染。 口腔、咽部正常菌群，偶可引起咽炎、化脓性口腔炎和心内膜炎
嗜血杆菌属
Haemophilus
1
2
流感嗜血杆菌菌名来自1892年流 感世界大流行, 由费佛 （Dr. Pfeiffer) 博士发现。
直至1933年将流感病毒分离成功 才确认流感的真正病原体。
但流感嗜血杆菌这一错名却仍沿 用至今。
3
嗜血杆菌属（Haemophilus）
与临床有关的9个种：
反应不同分为8个生物型。
10
11
培养特性
分离培养：
需氧或兼性厌氧，需5-10%CO2 最适T 35-37 ℃（杜克33℃） ，最适pH7.6—7.8 营养要求高 生长需要X和V因子（均存在于红细胞 中）。 最适培养基为巧克力平板 菌落: 培养18～24h，特殊的“鼠窝味”、不溶血 无荚膜菌株：灰白色、光滑、半透明小菌落 有荚膜菌株：灰白色、粘液样、半透明较大菌落
杜克雷嗜血杆菌 埃及嗜血杆菌 嗜沫嗜血杆菌 副嗜沫嗜血杆菌
软下疳，为性传播病菌。常引起外阴脓疱、溃疡、淋巴结肿大。
急性亚急性结膜炎、儿童巴西紫癜热
咽部正常菌群、牙菌斑中常见菌、偶致心内膜炎和脑脓肿
咽部及阴道正常菌群，偶可引起亚急性细菌性心内膜炎、败血症、甲沟 炎、、脑脓肿、脑膜炎。
流感嗜血杆菌（H.influenzae）
副嗜沫嗜血杆菌（H .paraphrophilus）
迟缓嗜血杆菌（H .segnis）
代表菌：流感嗜血杆菌（H .influenzae）
4
临床意义
致病因素： 荚膜：主要毒力因子
流感嗜血杆菌根据荚膜的有无分成： 有荚膜菌株（血清分型基础，b型毒力最强） 无荚膜菌株（较少侵略性）
菌毛：黏附作用 内毒素：发热等
1.G-小杆菌，球杆状
2.具有多形性（球 杆、长杆或丝状）
3.无芽胞，无鞭毛， 不能运动
4.有荚膜菌株毒力较强
7
流感嗜血杆菌革兰染色 铜绿假单胞菌革兰染色
8
9
抗原性和生化反应
根据荚膜多糖抗原不同分为a、b、c、d、e、f 6个血清型，b型致病性最强（Hib疫苗预防）
能分解葡萄糖、氧化酶（-）、触酶（+） 根据对吲哚、脲酶、鸟氨酸脱羧酶试验的生化
发酵
嗜血杆菌
β溶
XV血
葡萄 蔗
乳
甘露 木
触
糖
糖糖醇 糖酶
ONPG
流感嗜血杆菌 + + -
+ -- - D+
-
副流感嗜血杆菌 - + -
+ +- + -D
D
溶血嗜血杆菌 + + +
+ -- - D+
-
副溶血嗜血杆菌 - + +
+ +- - -+
-
注：D为不同结果
微生物学检验
微生物学检验 标本采集：避免干燥 及时送检 分离培养：巧克力平板生长 血平板 不生长 检验程序
几种嗜血杆菌对生长因子需求
X因子
流感嗜血杆菌
+
副流感嗜血杆菌 -
嗜沫嗜血杆菌
-
副嗜沫嗜血杆菌 -
溶血嗜血杆菌
+
副溶血嗜血杆菌 -
杜克雷嗜血杆菌 +
埃及嗜血杆菌
+
V因子 + + + + + +
β溶血 + + -
15
流感嗜血杆菌巧克力平板培养24h
16
培养48h后菌落
17
流感嗜血杆菌“卫星现象”（血平板上出现） 金黄色葡萄球菌可产生V因子，血细胞可提供X因子
不同种型嗜血杆菌对X、V因子需求不相同
12
培养特性
培养基：巧克力平板 血细胞中含有X、V因子，V因子处于抑制 状态，加热80-90℃ 5-15min破坏细胞膜上抑 制物，可使V因子释放 巧克力琼脂中加入抗生素（万古霉素、杆 菌肽）可提高检出率
13
巧克力平板：灰白色、半透明菌落
流感嗜 血杆菌
14
MH平板上金葡菌周围未 见生长
血平板上金葡萄周围生 长（左）
18
抵抗力
抵抗力弱 对热敏感：56℃30min可杀死 对干燥、消毒剂等敏感 自溶酶
室温保存，4-5天转种一次
19
鉴定
菌落特征: 巧克力平板上灰白色半透明菌落 卫星现象：
当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在血平板上共 同培养时，由于金葡菌能合成释放V因子，并扩散 到培养基中 ，可促进流感嗜血杆菌生长，在金葡 菌周围生长的菌落较大，越远越小直至没有。 因子生长试验： MH平板上贴上X、V、X＋V因子纸片，在所需因 子纸片周围生长 生化反应 糖发酵试验
流感嗜血杆菌（H.influenzae）
副流感嗜血杆菌（H .parainfluenzae）
溶血嗜血杆菌（H .haemolyticus） 副溶血嗜血杆菌（H .parahemolyticus）
除这两菌外均不溶血
杜克嗜血杆菌（H .ducreyi）
埃及嗜血杆菌（H .aegyptius）
嗜沫嗜血杆菌（H .aphrophilus）
22
卫星现象
流感嗜血杆菌 金葡菌
23
卫星现象
24
副流感嗜血杆菌V因子利用试验
（MH平板）
25
生化反应
流感嗜血杆菌：
氧化酶（-） 触酶试验（+） 葡萄糖（+）、蔗糖、乳糖和甘露醇阴性、木 糖多（+） 硝酸盐还原（+） 有荚膜菌吲哚（+） 无荚膜菌吲哚（-） 不溶血
26
嗜血杆菌属中种的特征
因子
28
血液 脑脊液
鼻咽拭子 痰 脓汁
增菌培养
分离培养
涂片镜检（G-小杆菌多形性）
(巧克力平板 )
抗原检测
35℃ 5-10%CO2
18-24h
菌落形态 涂片镜检 卫星试验 荚膜肿胀试验 因子利用试验 (生化反应试验)
Hale Waihona Puke Baidu
报告结果
药敏试验
采用K－B法，用HTM（Haemophilus Test Medium Base)培养基。 常规检测β－内酰胺酶和氯霉素 治疗用氨苄西林，阿莫西林，磺胺类，第 二、三代头孢，红霉素，氨曲南等抗生素
20
卫星试验
“卫星试验”是检测对V因子的需求，培养 基加血与否是确定细菌对X因子的需求 流感仅在血平板上卫星试验（+），在MH 上（-） 副流感仅需V因子，在血平板和MH平板上 均可出现卫星现象。
21
卫星现象(satellite phenomenon)
流感嗜血杆菌 金葡菌
卫星现象：金葡菌周围出现生长
该菌引起的感染常发生在病毒等引起的呼 吸道感染之后
5
几种主要嗜血杆菌常栖部位及所致疾病
菌种
流感嗜血杆菌
副流感嗜血杆菌 溶血嗜血杆菌 副溶血嗜血杆菌
常栖部位及所致疾病
无荚膜菌株多为上呼吸道正常菌群，可引起原发化脓性感染及继发性呼 吸道感染，包括脑膜炎、鼻咽炎、关节炎、心包炎、鼻窦炎及中耳炎等。
口腔及阴道正常菌群，偶尔可引起心内膜炎、尿道炎。 鼻咽部正常菌群，常引起儿童上呼吸道感染。 口腔、咽部正常菌群，偶可引起咽炎、化脓性口腔炎和心内膜炎
嗜血杆菌属
Haemophilus
1
2
流感嗜血杆菌菌名来自1892年流 感世界大流行, 由费佛 （Dr. Pfeiffer) 博士发现。
直至1933年将流感病毒分离成功 才确认流感的真正病原体。
但流感嗜血杆菌这一错名却仍沿 用至今。
3
嗜血杆菌属（Haemophilus）
与临床有关的9个种：
反应不同分为8个生物型。
10
11
培养特性
分离培养：
需氧或兼性厌氧，需5-10%CO2 最适T 35-37 ℃（杜克33℃） ，最适pH7.6—7.8 营养要求高 生长需要X和V因子（均存在于红细胞 中）。 最适培养基为巧克力平板 菌落: 培养18～24h，特殊的“鼠窝味”、不溶血 无荚膜菌株：灰白色、光滑、半透明小菌落 有荚膜菌株：灰白色、粘液样、半透明较大菌落
杜克雷嗜血杆菌 埃及嗜血杆菌 嗜沫嗜血杆菌 副嗜沫嗜血杆菌
软下疳，为性传播病菌。常引起外阴脓疱、溃疡、淋巴结肿大。
急性亚急性结膜炎、儿童巴西紫癜热
咽部正常菌群、牙菌斑中常见菌、偶致心内膜炎和脑脓肿
咽部及阴道正常菌群，偶可引起亚急性细菌性心内膜炎、败血症、甲沟 炎、、脑脓肿、脑膜炎。
流感嗜血杆菌（H.influenzae）
副嗜沫嗜血杆菌（H .paraphrophilus）
迟缓嗜血杆菌（H .segnis）
代表菌：流感嗜血杆菌（H .influenzae）
4
临床意义
致病因素： 荚膜：主要毒力因子
流感嗜血杆菌根据荚膜的有无分成： 有荚膜菌株（血清分型基础，b型毒力最强） 无荚膜菌株（较少侵略性）
菌毛：黏附作用 内毒素：发热等