野生软枣猕猴桃茎尖培养研究

本文于2008-10-27收到。

3辽宁省科技攻关项目(2008205001)。刘长江电话:(024)23448888

野生软枣猕猴桃茎尖培养研究

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刘长江

(沈阳农业大学食品学院,辽宁110161)

刘国成,赵德英

(沈阳农业大学园艺学院)

孙晓荣

(沈阳农业大学成人教育学院)

摘　要　研究了野生软枣猕猴桃的茎尖繁殖。结果表明:茎尖是野生软枣猕猴桃快繁的最佳外植体;适宜初代培养基为M S +BA 110mg/L +NAA 0105mg/L,继代培养基为MS +BA 210mg/L +I B A

012mg/L,生根培养基为1/2M S +I B A 012mg/L;当试管苗根系长115～215c m 时,去掉培养瓶封口

膜,室内炼苗3～5天,移栽的基质宜选用河沙,控制移栽后温度、湿度、光照等,试管苗的移栽成活率可达80%,40天以后可将小苗装钵或移栽露地,成活率可达100%。

关键词　软枣猕猴桃　茎尖　培养　繁殖

野生软枣猕猴桃[A ctin idia a rguta (Sieb 1et Zucc 1)Planch ],又名软枣子、猕猴

梨、藤瓜,属于猕猴桃科猕猴桃属,多年生落叶攀缘藤本植物,在我国分布较广,尤其以东北、华北地区资源最为丰富。软枣猕猴桃果面无毛,果实酸甜适口,维生素C 含量高,可鲜食,也可加工果汁、果酱等,丰产性好,具有较强的抗寒性,病虫害少,是一种发展前景广的野生果树资源。软枣猕猴桃在东北目前仅有零星栽培,山区基本为野生状态,由于长期处于野生状态,资源面临枯竭。本试验研究了野生软枣猕猴桃的茎尖繁殖,旨在建立软枣猕猴桃茎尖培养育苗技术体系,实现野生软枣猕猴桃组培苗工厂化生产,保护面临濒危的野生软枣猕猴桃,扩大野生软枣猕猴桃栽培规模。

1　材料与方法

试验于2005年3月进行,试材取自辽宁省海城市九龙川自然保护区,萌芽前剪取软枣猕猴桃1年生枝条,竖立于室内清水中促使其萌芽生长,抽出新梢后取梢尖部分,用流动的自来水冲洗,在超净台上将试材剪成3c m 左右长小段,用蒸馏水冲洗3遍,然后用无菌滤纸将水吸干,再用70%酒精消毒30秒,用011%升汞消毒4分钟后将升汞倒掉,重新加

升汞再消毒4分钟,用无菌水漂洗4～5次,然后将外植体放在装有无菌滤纸的培养皿中吸干水分备用。去掉顶芽外的嫩叶,切取3～5mm 长茎尖,接种于附加不同激素的初代培养

基上:(1)MS +BA 110mg/L +NAA 0101mg /L;(2)MS +BA 110mg/L +NAA 0105mg /L;(3)MS +BA 110mg/L +NAA 0110mg /L;(4)MS +BA 210mg/L +NAA 0101

mg /L;(5)MS +BA 210mg/L +NAA 0105mg /L;

(6)MS +BA 210mg/L +NAA 0110

mg /L 。每1种培养基接种20瓶,每瓶内接种4个茎尖,40天后开始调查。

将初代培养的芽和幼苗转移到继代培养基上进行增殖培养。转移时把基部的愈伤组织切除,将幼苗切成小段,每段上都带有2个或2个

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3

以上腋芽。继代培养基为:(1)MS+BA210 mg/L+I B A0105mg/L;(2)MS+BA210mg/ L+I B A012mg/L;(3)MS+BA310mg/L+ I B A012mg/L;(4)MS+BA210mg/L+NAA 0105mg/L;(5)MS+BA210mg/L+NAA012 mg/L;(6)MS+BA310mg/L+NAA012mg/ L。每1种培养基接种15瓶,每瓶内接种4个茎尖,35天后调查。

将继代分化出的小苗,转移到不同的生根培养基上使其发出不定根,成为完整的植株。生根培养基为:(1)1/2MS+NAA012mg/L;

(2)1/2MS+NAA015mg/L;(3)1/2MS+ NAA017mg/L;(4)1/2MS+I B A012mg/L;

(5)1/2MS+I B A015mg/L;(6)1/2MS+

I B A017mg/L。15天后调查生根情况。

初代培养、继代培养和生根培养的基本培养基pH值均为518。

根系长至2～3c m的试管苗,去掉培养瓶封闭膜,开瓶在室内炼苗3～4天,使试管苗逐步适应外界环境,然后移栽到大棚内,棚内做成苗床,苗床上再做成拱棚,可供保湿、遮荫所用。3种移栽基质分别是:(1)草炭土+河沙+园土(5∶2∶3);(2)草炭土+蛭石+河沙+园土(4∶1∶2∶3);(3)河沙。

2　结果与分析

211　初代培养

软枣猕猴桃茎尖在2号初代培养基,即MS+BA110mg/L+NAA0105mg/L中生长势整齐一致,叶片色泽黑绿,愈伤组织很少,并且是绿色,个别形成了丛芽,幼苗高可达2c m(表1)。

表1　野生软枣猕猴桃茎尖在不同初代培养基上的表现

培养基序号接种数

(个)

成活数

(个)

成苗数(株)生长情况

1 2 3 4 5 680

80

80

80

80

80

67

74

72

63

70

68

115

133

116

90

90

81

茎尖生长快,丛芽少,基部有少量白色,有愈伤组织

茎尖生长快,丛芽多,叶片色泽正常,基部愈伤组织绿,少

茎尖生长快,丛芽较多,叶片色泽正常,基部愈伤组织,淡绿或淡黄

茎尖生长一般,丛芽少,叶片色泽淡绿,基部愈伤组织多,白色

茎尖生长一般,丛芽少,叶片色泽淡绿,基部愈伤组织多,白色

茎尖生长缓慢,丛芽少,叶片色泽淡绿,形成大块愈伤组织

212　增殖培养

结果表明,在2号继代培养基,即MS+ BA210mg/L+I B A012mg/L中生长效果最好,试管苗基部丛生芽形成较多,增殖系数为510,新梢的数量也较多,已经长出的新梢整齐一致,基本上没有愈伤组织(表2)。

213　生根培养

从表3中可以看出,4号生根培养基,即1/2MS+I B A012mg/L是适宜的软枣猕猴桃生根培养基。15天时根长2c m左右,生根率可达98%,根的粗细适度,有根毛。移栽成活率高。

表2　野生软枣猕猴桃茎尖在不同继代

培养基上生长情况

培养基序号增殖系数生长情况

1

2

3

4

5

6

413

510

412

410

318

315

丛生芽中有1～2个芽超过3个节,

愈伤组织少

丛生芽中有3～4个芽超过3个节,

没有愈伤组织

丛生芽中有1～2个芽超过3个节,

愈伤组织少

丛生芽中有1～2个芽超过3个节,

愈伤组织较大

丛生芽中一般只有1个超过3个节,

愈伤组织大

丛生芽中个别有1个超过3个节,

愈伤组织大,白色

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