梅毒-实验室诊断

早期梅毒（一期、二期）经足量规则抗梅毒治
疗后3个月，RPR 试验抗体滴度下降 2个稀释度，
6个月下降4个稀释度。

一期梅毒1年后转为阴性


二期梅毒2年后转为阴性。
晚期梅毒 治疗后血清滴度下降缓慢，2年后
约50%病人血清反应仍为阳性。
非梅毒螺旋体抗体试验特点
非梅毒螺旋体抗原血清试验方法简单、快速、
检测梅毒螺旋体 IgM抗体的血清学试验
临床应用
先天梅毒的检测 神经梅毒的检测 最早期的一期梅毒的检测( RPR阴性或可疑 时) 梅毒再感染的判断 晚期梅毒患者有无活动性感染的判断
梅毒血清学试验的比较
非梅毒螺旋体血清试验 操作简单 价格便宜 有试剂盒 便于携带 适宜于人群的筛查试验 可以用作治疗后的疗效观 测和判愈的指标
抗体的主要成分： IgM和IgG
梅毒血清学试验的分类
非梅毒螺旋体抗原血清试验 RPR TRUST 梅毒螺旋体抗原血清试验： TPPA ELISA
非梅毒螺旋体血清试验
抗类脂抗原的抗体
即是反应素 是机体对损害细胞和梅毒螺旋体表 面所释放的脂类物质的免疫反应 现在学术认为5-7周产生反应素 是IgM和IgG的混合体 未经治疗可长期存在，经正规治疗 后这种抗体减少转成阴性 是用心磷脂 卵磷脂和胆固醇作检 测抗原

梅毒螺旋体血清试验 敏感性和特异性均高 FTA-ABS操作繁复 需熟练 的技术人员和实验室的设 TPPA有试剂盒用作确诊试 验 价格比较贵不能用于大量人 群 患梅毒后终身阳性 不能用作 治疗后随访

非梅毒螺旋体血清的 假阳性反应
定义:不存在梅毒感染 但血清学反应呈阳性 假阳性反应可分为 技术性假阳性 标本的采取 保存 运送和实验室操作的误差而 产生 可重复试验 即可证实为阴性 生物学假阳性 事实上不存在梅毒感染 而是其他非技术性因 素所产生的阳性反应 在“正常”的人群中发生率 约为1/4000
阳性
阴性
报告检测方法及 阳性结果
报告检测方法及 阴性结果
以估计梅毒累计感染率为目的的检测策略
梅毒螺旋体试验（如TP-ELISA）
阳性
阴性
报告检测方法及 阳性结果
报告检测方法及 阴性结果
以估计梅毒现症感染率为目的的检测策略
梅毒螺旋体试验（具体方法）
阳性
报告检测 方法及阳 性结果 非梅毒螺旋 体试验（具 体方法）
梅毒血清学试验的临床诊断意义
血清学试验
USR RPR VDRL _ 毒 + + -TPHA TPPA
意
义
_
排除梅毒 ；一期梅毒的早期；艾滋病患者合并梅
+ -+
现症梅毒(梅毒孕妇所生的婴儿除外) ；部分晚期 生物学假阳性 早期感染；既往感染；早期感染后部分晚期
梅毒血清学检测策略与流程
以临床诊断为目的两种策略 以血液筛查为目的的检测策略
梅毒患者经过正规治疗和充分的随访（2年以 上） 一期梅毒随访1年 二期梅毒随访2年 晚期梅毒随访3年 RPR试验仍不阴转 这种情况是血清固定 早期梅毒血清固定者有35％出现梅毒的复发
非梅毒螺旋体抗体试验的特殊情 血清固定 （sero-risistance） 况
原因：早期梅毒是 与机体的免疫抑制有关 可能与体内仍有潜在的活动性病变有关 与治疗剂量不足 治疗较晚 治疗不正规 与复发 再感染有关 与可能发生神经系统梅毒有关
3．银染色法（Warthin-
starry或Levoaditis法）
临床意义
1. 暗视野显微镜检查、镀银染色和荧光
抗梅毒螺旋体单克隆抗体等检查方法， 直接镜检到梅毒螺旋体，在临床可确 诊梅毒，且具有快速、方便、易操作 的特点。暗视野显微镜检查已被世界 卫生组织指定为性病实验室必备项目
之一。
临床意义
FTA-ABS试验的生物学假阳性
系统性红斑狼疮 类风湿性关节炎 肝硬化 淋巴肉瘤 脑膜瘤 海洛因成瘾 自家免疫性溶血性贫血 结肠癌 麻风
梅毒螺旋体学血清试验的 生物学假阳性
FTA-ABS试验的生物学假阳性
非常罕见 系统性红斑狼疮占绝大多数 真阳性呈均匀的荧光 假阳性呈串珠状荧光 鉴别需结合病史和临床综合分析
敏感性和特异性较好。适用于大量人群的筛查。

早期梅毒硬下疳出现 1 周 -2 周后，血清可呈阳 性。

经治疗后血清滴度可下降并阴性，故可作为疗
效观察、判愈、复发或再感染的指征。
非梅毒螺旋体抗体试验特点
非梅毒患者的梅毒血清反应呈阳性，此
现象称为梅毒血清反应假阳性。 ①技术性假阳性反应 由于标本的保存不 当（如细菌污染或溶血）、试剂质量差 或过期、或实验室操作错误所造成。
治疗后的6个月内 RPR滴度应下降2个梯度 否则应视为治疗失败 第一年 每3个月1次 第二年 每半年1次 第三年末一次
梅毒螺旋体血清试验
用于检测梅毒螺旋体特异性抗体
梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验 (TPPA) 荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验 (FTA-ABS) 酶联免疫吸附试验（ELISA） 梅毒快速检测 (TP-RT) 梅毒螺旋体蛋白印迹试验 （TP-WB）
梅毒实验室诊断技术
目前主要有两种: 梅毒螺旋体检查 （病原学） 梅毒血清抗体检 测（血清学）
梅毒螺旋体检查--早期梅毒的最佳方法
诊断一期梅毒、二期梅毒
时，可取患者的渗出液或淋
巴结穿刺术得到的组织液，
在暗视野显微镜下观察螺旋
体的特征性形态和运动方式
检查方法
1．暗视野显微镜检查 2．免疫荧光染色
梅毒螺旋体（TP） 生物学特性-3
致病性：自然条件下TP只
感染人 传染性：感染早期传染性 最强，随着病程的延长传 染性越来越小。
梅毒螺旋体（TP） 生物学特性-4
抵抗力：TP在体外仅能存
活数小时，40℃时失去传 染力，煮沸立即死亡；对 干燥特别敏感，一般的消 毒剂均能容易将其杀灭。 血库的血液和血浆中可存 活24小时以上，三日后全 部死亡。
IgM 目前 所使用的确诊试验FTA-ABS和TPPA 均是检测血清的IgG抗体 IgG抗体终身存在 故尽管正规治疗后 仍可 阳性 不能作为判愈和随访的手段
检测梅毒螺旋体 IgM抗体的血清学试验
梅毒螺旋体IgM抗体有很强的特异性 IgM抗体与梅毒螺旋体活动性感染成正相关
关系 即有感染而出现 随感染消失而消失 IgM抗体在感染后2周即可出现 治疗后消失 也快(与反应素比较) IgM抗体是一种聚合体 不能通过胎盘和脑 膜 故可用于检测先天梅毒和神经梅毒
晚期梅毒是与梅毒的类型和治疗较晚有关
血清固定（sero-resistance） 处理： 早期梅毒出现血清固定可作一次正规治疗 晚期梅毒出现血清固定应作全面的检查 以除 外心血管 神经或内脏梅毒 作一次正规的治疗 后 定期随访 不必过度治疗如RPR滴度没有 反复 可终止治疗
非梅毒螺旋体抗体试验的特殊情 况
非梅毒螺旋体抗体试验的特殊情 况
血清复发
在早期梅毒抗梅治疗后，第一年每3个月复 查一次，以后每半年复查一次，连续2～3 年；晚期梅毒治疗后，应连续观察3年以 上。如果血清反应由阴性转为阳性或滴度 升高4倍，例如由1:2升为1:8，属于血清 复发。应药量加倍再次治疗。
梅毒治疗后的血清学观察
早期梅毒治疗后要定期作血清学检查
梅毒螺旋体抗体试验
梅毒螺旋体明胶凝集试验 TPPA试验原理，TPPA试验用梅毒螺旋 体致敏明胶颗粒，此致敏颗粒与人血清中 的抗梅毒螺旋体抗体结合，产生可见的凝 集反应，具有较高的敏感性。明胶粒子为 洋红色，在操作部步上也较为方便，出结 果较快。
梅毒螺旋体抗体试验
梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验
TP—ELIS试验是用重组梅毒螺旋体抗原
毒品瘾者的假阳性反应:
假阳性发生率高 可达33.3%~94.8% 毒品瘾者常与性乱有关 常可同时感染梅毒 医务人员在处理这些情况时要特别仔细
非梅毒螺旋体血清的 假阳性反应
妊娠的假阳性反应
这是一种生理情况下的生物学假阳性 假阳性发生率较低有报告为0.4% 滴度低
梅毒螺旋体血清试验的 生物学假阳性
梅毒实验室诊断
唐山市疾病预防控制中心
张庆娟
2014.12.Fra Baidu bibliotek2
梅毒螺旋体（TP）
生物学特性-1
免疫性：细胞免疫和体液免疫 特异性抗体：初次感染后产生， 保持终生，但对清除机体内的 TP无作用。
梅毒螺旋体（TP） 生物学特性-2
反应素：
反应素水平与 梅毒感染过程相平行，抗 梅治疗后约半年转阴，但 反应素并非感染TP后所特 有。

非梅毒螺旋体血清的 假阳性反应
急性生物学假阳性反应
出现于非梅毒感染的感染性疾病 特点:RPR呈阳性 但滴度很低 很少大于1:8 在病情缓解后数周 即转成阴性 病程很 少大于半年 证实试验TPHA或FTA-ABS为阴性 缺乏明确的梅毒临床证据
非梅毒螺旋体血清的 假阳性反应

急性生物学假阳性反应的疾病 风疹 水痘 传染性单核细胞增多症 传染性肝炎 上呼吸道感染 肺炎球菌性肺炎 病毒性肺炎 牛痘疹
非梅毒螺旋体血清试验
VDRL试验(血清需要灭
活)
0.03%心磷脂 0.21%卵磷脂和 0.90%胆固醇组成 该抗原需新鲜配制 不能保存 待检血清需灭活 主要用于脑脊液检查
RPR环状卡片实验
是VDRL
的改良实验,抗原中加入活性炭颗粒 作为指示物,加入了氯化胆碱,血清不需灭活
TRUST实验
与RPR
以流行病学监测为目的的检测策略
以临床诊断为目的的检测策略
非梅毒螺旋体试验（具体方法）
阳性 阴性 报告检测方法及阴 性结果
非 梅毒螺旋 体定量试 验 报告检测 方法及定 量结果
报告检测 方法及阳 性结果
梅毒螺旋 体试验 （具 体方法）
阳性 报告检测方法及阳 性结果
阴性 报告检测方法及阴 性结果
以临床诊断为目的的检测策略
包被固相板条，加上梅毒血清和单克隆抗
体酶标记物，形成抗原抗体复合物与酶标
记物结合，用酶联检测仪判定试验阳性反 应。本法可用于大规模血清检测。近年出 现采用基因工程重组表达的特异性梅毒螺 旋体抗原包被固相板，使试验更具有敏感 性和特异性。
检测梅毒螺旋体 IgM抗体的血清学试验
人体特异性抗梅毒螺旋体抗体可分为IgG和
前带现象（Prozone
phenomenon） 。（非梅毒螺旋体抗原实验中，由于有时抗 体水平过高，抗原抗体比例不合适而出现弱 阳性、不典型或阴性的结果，但临床上又有 典型的二期梅毒体征，将此血清稀释后再做 血清学实验出现了阳性的结果，成为“前带 现象”） 发生率为1％～2％
非梅毒螺旋体抗体试验的特殊情 况 ） 血清固定（sero-risistance
原理相同 用甲苯胺红颗粒代替了活性炭颗粒，使阳性 结果出现红色絮状现象，阴性结果可见红色 颗粒集中中央或均匀分布。
RPR试验结果
定量实验
经VDRL,RPR,TRUST定性试验为阳性、弱阳
性、可疑或阴性但临床怀疑梅毒者需做定量 实验 阳性者是为了明确抗体滴度，后者是为了排 除前带现象
非梅毒螺旋体抗体试验临床意义
非梅毒螺旋体血清的 假阳性反应

慢性生物学假阳性反应的疾病 系统性红斑狼疮 自家免疫性溶血性贫血 盘状红斑狼疮 结节性多动脉炎 类风湿性关节炎 桥本氏甲状腺炎 风湿性心脏病 干燥综合征 毒品瘾者 慢性肾炎 肝硬化 老年 麻风 (是唯一产生慢性生物学假阳性的感染性 疾病)
非梅毒螺旋体血清的 假阳性反应
梅毒螺旋体试验（具体方法） 阳性 报告检测 方法及阳 性结果 非梅毒螺旋 体试验（具 体方法） 阴性 报告检测方法及 阴性结果
阳性 报告检测 方法及阳 性结果 非梅毒螺旋体定 量试验 报告检测方法及 定量结果
阴性 报告检测方法及 阴性结果
以血液筛查为目的的检测策略
梅毒螺旋体试验（如TP-ELISA）
2、如未见到梅毒螺旋体，并不能排除患 梅毒的可能性，这可能是由取材不当
或皮损处螺旋体数量不足，或患者使
用过抗菌素，损害已接近自然消退等
原因引起。可让患者复查及进行血清
学检查。
梅毒血清抗体检测
抗体出现的时间：
感染梅毒螺旋体，1～4周后出现抗体
抗体的分类：
非特异性反应素抗体--抗类脂质抗体 特异性抗体--抗梅毒螺旋体抗体
②生物学假阳性反应 是由于患者有其他 疾病或生理状态发生变化，使梅毒血清 试验出现阳性
非梅毒螺旋体抗体试验特点
梅毒假阳性反应的处理
技术性假阳性反应一般是由于操作错误引
起的假阳性反应，经过重复试验即可除外。
对急性生物学假阳性反应，应做TPPA等试
验进行排除。
非梅毒螺旋体抗体试验的特殊情 况