乳酸菌定义分类、分离筛选及应用
食品中嗜酸乳酸菌的筛选与应用研究
食品中嗜酸乳酸菌的筛选与应用研究引言：食品安全和营养健康一直是人们关注的焦点。
乳酸菌作为一类益生菌，具有很强的生物活性和保健功能，被广泛应用于食品行业。
本文将讨论食品中嗜酸乳酸菌的筛选与应用研究。
第一部分：嗜酸乳酸菌的筛选方法自然界中存在海量的乳酸菌，包括嗜酸乳酸菌和耐酸乳酸菌。
嗜酸乳酸菌是指在低pH环境下可以快速生长和发酵的乳酸菌。
其筛选方法包括传统方法和分子生物学方法。
传统方法主要包括菌落计数法、筛选培养基法、生理生化方法等，而分子生物学方法主要包括PCR技术、16S rRNA测序等。
这些方法可以分离出具有鲜明特点的嗜酸乳酸菌菌株，为进一步的应用研究奠定基础。
第二部分：嗜酸乳酸菌在食品中的应用嗜酸乳酸菌在食品工业中有着广泛的应用前景。
首先，嗜酸乳酸菌可以应用于发酵乳制品，如酸奶、酸乳酪等。
通过嗜酸乳酸菌的发酵作用，乳制品不仅能延长保质期，还能增强其口感和营养成分。
其次，嗜酸乳酸菌还可以用于面包、饼干等烘焙食品的制作。
在这些制品中，嗜酸乳酸菌能够增加产品的口感、改善口味，并提高产品的质量和食品安全。
此外，嗜酸乳酸菌还可以用于肉制品的发酵腌制，如腊肠、腊肉等。
乳酸菌的发酵作用不仅可以提高产品的风味，还能促进蛋白质降解，增加产品的储存稳定性。
第三部分：嗜酸乳酸菌的保健功能研究嗜酸乳酸菌除了在食品加工中的应用外，其保健功能也备受重视。
嗜酸乳酸菌含有丰富的益生物质和乳果糖，能够改善肠道菌群结构，增强免疫力，同时还对抗肠道疾病有一定的预防作用。
此外，乳酸菌还具有排毒、抗氧化、抗菌等多种保健功效。
因此，人们开始将乳酸菌应用于保健品、营养补充剂的制作中，以满足现代人们对健康饮食的需求。
结论：食品中嗜酸乳酸菌的筛选与应用研究在食品工业中具有重要的意义。
通过选择适合的筛选方法，可以分离出优良的嗜酸乳酸菌菌株，并将其应用于食品工业中，以提高产品的质量和食品安全。
此外，嗜酸乳酸菌还具有丰富的保健功能，可以改善肠道菌群结构，增强免疫力，并对抗肠道疾病。
乳酸利用菌的筛选及应用
乳酸利用菌的筛选及应用宋克伟;周森;魏金旺;王勇;张如金;胡建华;胡佳音;赵卫鹏【摘要】At present, there exists technical problems in the production of Qingxiang base liquor such as excessive high content of ethyl lactate and unbalanced ratio of acetic acid and lactic acid. In this study, we isolated a bacterial strain from Qingxiang Daqu in Niulanshan Distillery for the degradation of lactic acid, such strain was numbered B001 and it was identified as Bacillus subtilis by PCR. The use of B001 in Qingxiang base liquor production could effectively reduce the content of ethyl lactate and increase slightly the content of ethyl acetate. The technical prob-lems had also been settled successfully.%当前，我国清香型白酒基酒生产过程中，普遍存在着乳酸乙酯含量过高，乙乳比例失调的技术难题。
牛栏山酒厂运用微生物技术，从本厂清香型大曲中分离筛选出1株可降解乳酸的细菌，编号为B001，通过PCR 鉴定确定为枯草芽孢杆菌。
同时，将B001进行中试试验，有效降低了白酒中乳酸乙酯的含量，同时少量提升了乙酸乙酯的含量，解决了乙乳比例失调的技术难题，有效改善了清香型白酒因乙乳比例失调导致的酒体不协调的问题。
【课件】乳酸菌的筛选及应用PPT
2、筛选过程
样品预处理→梯度稀释至10-6→选择合适 的稀释度涂布→37℃培养48h→挑选产生溶钙 圈的菌落反复在MRS培养基上划线→挑起单 菌落染色，经镜检确认为纯种→挑选革兰氏 阳性单菌落→试管穿刺4℃冰箱保存。
（二）溴甲酚绿指示剂法
1、培养基：MRS培养基（含溴甲酚绿酒精溶液） 2、筛选过程：同上，不同之处是稀释涂布后长
3、 双歧杆菌
样品来源：婴儿新鲜粪便 培养基：MRS培养基、NPNL培养基 、TYP培养基、
PTYG培养基
培养温度：37℃ 需氧情况：严格厌氧 筛选方法：常规的稀释涂布和划线分离法
第三部分、乳酸菌的应用
一、乳酸菌的生理功能
①维持肠道菌群的微生态平衡； ②增强机体免疫功能； ③预防和抑制肿瘤发生； ④提高营养利用率、促进营养吸收； ⑤控制内毒素、降低胆固醇； ⑥ 延缓机体衰老。
聚乳酸是以微生物发酵产物乳酸为单体用化学 合成方法聚合而成的一种高分子材料，它无毒、无 刺激性。
聚乳酸制品废弃后在土壤或水中，30天内会在 微生物、水、酸和碱的作用下彻底分解成CO2和H2O， 不会对环境产生污染，因而是一种完全可生物降解 的材料。
（2）聚乳酸的生产过程
目前聚乳酸的生产和制备主要有：
（4）前景
PLA作为一个新型的医用、生物可降解塑料在 我国有广阔的市场发展前景。生物降解塑料大多数 是天然高分子与常用塑料复合体系，或基于天然高 分子(主要是淀粉、纤维素)的改性。
PLA合成直链脂肪族聚酯，在医用领域是最重 要的可降解高分子材料，已越来越受到重视。PLA 树脂替代现有降解材料已成为市场发展的必然趋势， 并具有与烯烃类聚合物竞争的能力，“绿色生态塑 料”的市场前景将十分看好!
3、明串珠菌属（Leuconostoc）
乳酸菌菌种的分离筛选办法
乳酸菌菌种的分离筛选方法乳酸细菌是一类能利用发酵糖产生大量乳酸的细菌通称;为兼性厌氧菌,杆状或球状,革兰氏阳性菌,无芽孢,不运动;营养要求高,需要提供丰富的肽类氨基酸维生素;在琼脂表面或内层形成较小的白色或淡黄色的菌落;通常用作为有益微生物的菌种有乳酸乳杆菌、干酪乳杆菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、粪肠球菌、乳酸片球菌、双歧杆菌、屎肠球菌、戊糖片球菌等;乳杆菌常用MRS琼脂作半选择培养基;当乳杆菌仅是复杂区系中的部分菌类时,SL培养基常用作为选择性培养基;对于芽孢乳杆菌常用GYP培养基,链球菌有TYC培养基、MS 培养基;M17培养基被用作乳球菌的分离培养基;嗜酸乳杆菌属于乳杆菌属的一个种;其特性为：杆菌,两端圆,不运动,无鞭毛;粪肠球菌为革兰氏阳性,圆形或椭圆形;乳酸片球菌细胞呈球状,直径0.6~1.0μm,在直角两个平面交替形成四联状,一般细胞成对生,单生者罕见,不成链状排列;革兰氏阳性,不运动,兼性厌氧;在MRS培养基上菌落小,呈白色;沿洋菜穿刺线的生长物呈丝状;乳酸菌在一般琼脂培养基上形成微小菌落,不易观察,所以分离时先富集培养并选择合适的培养基;分离培养基一般添加西红柿、酵母膏、吐温-80等物质,也常常加入醋酸盐,因醋酸盐能抑制部分细菌生长,对乳酸菌无害;培养基中添加碳酸钙,乳酸溶解培养基中的碳酸钙形成透明圈,作为分离鉴别的依据,通过对生成的乳酸量进行性能鉴定;乳酸菌生长繁殖时需要多种氨基酸,维生素及微氧,一般菌落比较小;分离培养基一般可添加西红柿酵母膏油酸吐温等物质,均具有促进生长作用;也常常添加醋酸盐抑制有些细菌的生长,对乳酸菌无害;一.筛选方法：1.溶钙圈法：利用一些产酸类细菌在含CaCO3的培养基上产生CaCO3溶解圈,从而筛选出这些产酸类细菌,可用于乳酸菌的筛选;其中培养基中加入CaCO3的作用是：①鉴别能产生酸的细菌；②中和产生的酸,以维持培养基的PH;筛选过程：样品预处理→梯度稀释至10-6→选择合适的稀释度涂布→37℃培养48h→挑选产生溶钙圈的菌落反复在MRS培养基上划线→挑起单菌落染色,经镜检确认为纯种→挑选革兰氏阳性单菌落→试管穿刺4℃冰箱保存;2.溴甲酚绿指示剂法：培养基：MRS培养基含溴甲酚绿酒精溶液筛选过程：同上,不同之处是稀释涂布后长出菌落,挑取使溴甲酚绿变色的菌落;二.菌种的分离筛选1.培养基：★1.1麦芽汁碳酸钙培养基：麦芽汁10BX1L预先灭菌碳酸钙5-10g/LPH自然分离用★★1.2牛肉膏10g/L蛋白胨10g/L酵母膏10g/L番茄汁200g/L葡萄糖10g/L吐温0.05%CaCO315-20g/L溴甲酚绿0.01%PH6.0-6.5分离用★1.3番茄汁碳酸钙培养基：酵母膏7.5g/L葡萄糖10g/L番茄汁100mL蛋白胨7.5g/LKH2PO42.0 g/L吐温0.5mLPH6.0-6.5分离用1.4葡萄糖20g/L酵母膏10g/LPH6.0-6.51.5蛋白胨8-10g/L酵母膏3-5g/L葡萄糖13-15g/LKH2PO41.5-2.0g/LMgSO40.3-0.5g/LMnSO40.2-0.25g/LNaAC3.0-5.0g/LPH5.5-6.51.6蛋白胨0.8-1.0g/L糖蜜3.0-5.0g/L酵母膏3-5g/L玉米浆0.5-1.0g/LKH2PO40.1-0.3g/LMgSO40.3-0.5g/LNaC13-5g/L葡萄糖8-10g/LPH5.5-6.5发酵或种子培养基★★1.7MRS培养基分离培养计数用蛋白胨10.0g、牛肉膏10.0g、酵母膏5.0g、柠檬酸氢二铵2.0g、葡萄糖20.0g、吐温801.0mL、乙酸钠5.0g、磷酸氢二钾2.0g、硫酸镁0.58g、硫酸锰0.25g、琼脂18.0g、蒸馏水1L,pH6.5;分离培养基,当MRS培养基冷却至45～50℃时,加入已灭菌的碳酸钙,充分混匀,倒平板;1.8BCP培养基溴甲酚紫培养基乳糖5.0g蛋白胨5.0g酵母膏3.0g0.5℅溴甲酚紫10ml自来水1000ml pH6.5-7.0分离用1.9BCG牛乳营养琼脂：脱脂奶粉10g,溶于50ml水中,加入1.6℅溴甲酚绿酒精溶液0.07ml,0.075Mpa20min;另取琼脂2.0g,溶于50ml水中,加酵母膏1.0g溶解后调pH6.5-6.8,0.1Mpa20min.趁热在无菌操作下两者混合均匀,倒平板,37℃培养24h,检查是否有杂菌;2.分离筛选：2.1富集培养：取1.0g1.0ml于无菌细口瓶中,加入无菌麦芽汁液体培养液于瓶口处,密闭,25-32℃培养48h;若培养基表内出现绢丝波纹物,镜检杆状,革兰氏阳性,初步定为乳酸菌;以同样方法转接2-3次,接种量3-5℅.2.2菌种分离纯化：溶钙圈法：富集菌液或样品适当稀释至10-7,混菌法分离,先加入10-12ml MRS培养基或麦芽汁培养基,凝固后再注入4-5ml水琼脂培养基,制成厌氧环境,30℃或37℃培养2-3天温度低时间稍长,可出现针头状或圆形稍扁菌落,周围形成透明圈;挑取透明圈大,培养基变黄的菌落,反复划线纯化2-3次,所得单菌落编号,经镜检后,疑似乳酸菌落接种于MRS培养基培养后保存备用;或接入液体培养基中,25-32℃培养24-48h,然后穿刺于MRS培养基或麦芽汁碳酸钙半固体培养基中,25-32℃培养48h 保存备用;2.3性能测定：乳酸菌定性试验：不同条件下的产酸速率试验：将分离菌种接种于MRS液体培养基中25℃37℃温度下培养测不同菌株不同温度的pH;方法1.吸取发酵液10ml,注入空试管中,加入10℅硫酸1.0ml,在加入2.0℅高锰酸钾约1.0ml,此时乳酸转化成乙醛;取滤纸一条,在含氨的硝酸银溶液中浸湿,横搭在试管口上,将试管徐徐加热至沸腾,使乙醛挥发,若管口滤纸变黑,证明有乳酸生成;方法2.纸层析法：展开剂为正丁醇：甲醇：水=80：15：5,毛细血管吸取发酵液,多次点样于新华滤纸上,1.5℅标准乳酸为对照,平衡2小时后进行层析,3℅溴甲酚蓝显色计算Rf值;产酸量测定：5.0ml发酵液于150ml三角瓶中,加中性蒸馏水10-20ml,酚酞指示剂2滴,用0.1mol/l 氢氧化钠滴定至微红色;醋酸量g/100mL=氢氧化钠摩尔浓度.Vx90.08x10-3/样品毫升数x100同时,进行单因素试验,分别考察醋酸速度,耐高温,耐酒精度,耐低酸度等主要生产性能,选择优势菌株;3.菌株鉴定：3.1菌落形态：3.2菌体形态：革兰氏染色观察染色镜检：杆状阳性;3.3乳酸菌运动性检测：半固体穿刺法3.4生理生化：乳酸菌产酸能力曲线：将筛选的乳酸菌接种于MRS液体培养基中,25-32℃培养48h,间隔4-6h测定发酵液pH;食盐对乳酸菌的影响：在MRS液体培养基中,添加0.0℅2.0℅4.0℅6.0℅氯化钠,菌种分别接种于培养基中,32℃培养48h,测定OD值;溴甲酚绿指示剂法：原理：溴甲酚绿指示剂在酸性环境中呈黄色,碱性环境呈蓝色,分离培养基配制后PH为6.8,加入溴甲酚绿指示剂呈蓝绿色,产酸后菌落周围变成黄色,较容易鉴别;培养基：BCG牛乳营养琼脂初筛：将样品富集液梯度稀释,适温培养,平板上出现扁平的黄色菌落及周围培养基也为黄色初定为乳酸菌;复筛：将典型菌落转接脱脂乳发酵管,若凝固,无气泡,呈酸性,镜检细胞杆状或链球状,革兰氏染色阳性,连续传代若干次培养,挑选出3-4h能凝固的乳管保存备用;注：1.乳酸菌筛选常在几种培养基同时进行：分别在麦芽汁碳酸钙培养基,番茄汁碳酸钙培养基,BCP培养基溴甲酚紫培养基同时进行混菌划线或涂布培养放厌氧袋,分别25℃37℃培养48h;菌落观察：平板表面形成浅色黄色或白色小菌落;麦芽汁碳酸钙培养基表面,菌落周围形成透明圈,BCP培养基溴甲酚紫培养基周围使紫色的培养基形成黄色包围圈;触酶反应：厌氧菌一般无触酶过氧化氢酶,用滴管滴加3.0℅过氧化氢于菌落上,若无气泡产生,证明该菌为触酶阴性;将各种特征菌落分别接入斜面,培养后保存,进一步生理生化试验,以鉴定分别何种乳酸菌;2.菌落鉴定：半固体或双平板琼脂利于乳酸菌的生长,菌落出现早;2.1菌落形态观察：乳白色边缘不整齐,稍呈半球状凸起,实心菌落;个体形态：半透明细杆状链状排列,大量时呈发丝状堆积;初步认为乳杆菌;2.2生化鉴定：在吲哚试验中,加入菌种试管无任何变化,为阴性反应;说明该菌不具有分解色氨酸产生吲哚的能力;明胶液化淀粉水解氢氧化钾试验均为阴性,说明此菌为乳酸菌;过氧化氢酶还原硝酸盐糖发酵试验：发酵果糖半乳糖葡萄糖乳糖产酸为阳性反应,其余麦芽糖蔗糖棉子糖鼠李糖产酸为阴性反应;根据手册第九版判断此种乳酸菌为德氏乳杆菌保加利亚亚种;纤维二糖甘露醇山梨醇七叶苷水杨苷2.3乳酸菌生长曲线pH-t测定结果：三.几种乳酸菌筛选举例1.嗜热链球菌：样品来源：市售酸奶培养基：M17改良培养基,培养温度：42℃,需氧情况：兼性厌氧,筛选方法：常规的稀释涂布和划线分离2.保加利亚乳杆菌：样品来源：市售酸奶,培养基：牛肉浸膏1.5％,酵母浸膏0.5％,葡萄糖3.0％,柠檬酸三铵0.2％,七水硫酸镁0.02％,琼脂1.5％,pH5.1;培养温度：42℃,需氧情况：兼性厌氧,筛选方法：常规的稀释涂布和划线分离法;3.双歧杆菌：样品来源：婴儿新鲜粪便,培养基：MRS培养基、NPNL培养基、TYP培养基、PTYG培养基,培养温度：37℃,需氧情况：严格厌氧,筛选方法：常规的稀释涂布和划线分离法;。
乳酸菌菌种的分离筛选原理
乳酸菌菌种的分离筛选原理乳酸菌是一类广泛存在于自然界中的益生菌，广泛应用于食品、饲料、医药等领域。
乳酸菌菌种的分离筛选是乳酸菌应用研究中的重要一环，其目的是从大量的混合菌群中筛选出具有优良特性的菌株。
乳酸菌菌种的分离筛选原理主要包括以下几个方面：1. 选择合适的培养基：乳酸菌菌种对营养要求较高，因此选择适宜的培养基是分离筛选的首要步骤。
常用的培养基有MRS培养基、DC培养基等，它们含有适宜乳酸菌生长的营养成分，能提供所需能量和营养物质。
2. 适宜的培养条件：乳酸菌对培养环境的温度、pH、氧气和二氧化碳等条件有一定要求。
通常情况下，乳酸菌分离筛选需要在适宜的温度（一般为30-40）下进行，pH值保持在4.5-7.0之间，氧气和二氧化碳含量适中。
3. 分离方法：乳酸菌菌种的分离常采用传统的分离培养技术，如层析法、稀释平板法、摇瓶培养法等。
其中，层析法是一种常用的快速分离方法，通过将混合菌群在筛选培养基上涂抹或刺激，使不同菌株在筛选培养基上形成分离的菌落。
4. 鉴定鉴别：乳酸菌菌种的筛选与鉴定是不可分割的一步，只有确定菌株的种属和特性才能真正确认其乳酸菌的菌种类型。
目前，常用的鉴定方法包括形态学观察、生理和生化特性检测、分子生物学方法（如PCR技术、16S rDNA序列分析）等。
在乳酸菌菌种的分离筛选过程中，还需要注意以下几个问题：1. 选择样品：样品的选择对于乳酸菌菌种的分离筛选至关重要。
通常情况下，从乳制品、肠道、土壤等环境中寻找潜在的乳酸菌菌种，可以提高分离到优良菌株的几率。
2. 优化培养条件：对于特殊的乳酸菌菌种，可能需要优化培养条件，如调整温度、添加特定的营养成分等，以促进其生长和繁殖。
3. 评价筛选结果：乳酸菌菌种的分离筛选结果需要综合考虑其特性和应用价值。
如菌株的酸奶生产能力、耐酸碱能力、抗菌能力、抗氧化能力等。
总结起来，乳酸菌菌种的分离筛选原理主要包括选择合适的培养基和培养条件、采用适当的分离方法和鉴定鉴别技术。
乳酸菌的分离与筛选具体实验流程
乳酸菌的分离与筛选具体实验流程1. 引言1.1 背景介绍乳酸菌是一类广泛存在于自然界中的细菌，它们能够以乳酸为代谢产物进行无氧发酵，并且在食品工业、农业和医学领域具有重要的应用价值。
乳酸菌不仅能够促进食品品质的改善和保鲜，还对人体健康具有积极影响。
然而，目前市面上存在许多商业化的乳酸菌制剂，其有效成分及效果并不尽相同。
因此，研究和筛选出优质活性的乳酸菌种类，具有重要意义和广阔前景。
1.2 研究意义本研究旨在通过分离与筛选方法得到高活性的乳酸菌。
通过该研究可以加深我们对乳酸菌及其作用机制的理解，并为特定领域如食品工业、农业等提供先进的技术支持和解决方案。
此外，筛选出具有优良特性的乳酸菌株也将为开发新型功能性食品、生物农药等领域的产品提供重要支持。
因此，本研究对于推动食品工业、农业发展具有积极意义。
1.3 实验目的本实验主要目的如下：- 收集和处理样品：收集富含乳酸菌的样品，并经过适当处理以提高分离效果。
- 选择与制备分离培养基：根据乳酸菌的特性选择适合的培养基并进行制备。
- 设定分离培养条件：通过调控温度、pH值等参数，确定适宜的乳酸菌分离培养条件。
- 鉴定活性乳酸菌指标：确定评价乳酸菌活性和质量的指标，并进行相关试验和检测。
- 设计与实施筛选试验：根据所选指标设计筛选试验，并在实验中采用相应方法进行实施。
- 可行性评估与结果分析：对筛选试验结果进行评估和分析，并总结可行性及相关优化建议。
通过以上实验流程，我们旨在深入了解乳酸菌的特点及其在不同领域中应用潜力，并为进一步研究和开发具有市场竞争力的乳酸菌产品提供理论和实践基础。
2. 乳酸菌的分离方法2.1 样品收集与处理在乳酸菌的分离研究中，样品的选择和处理十分重要。
我们可以选择不同来源的样品，如发酵食品、生态环境等。
收集样品后，需要进行适当的处理以消除非目标微生物对于乳酸菌生长和筛选的干扰。
常见的样品处理方法包括冷藏、过滤、稀释等。
2.2 分离培养基选择与制备为了促进乳酸菌的分离和生长，在实验中需要选择适宜的分离培养基。
乳酸菌概述及其应用
引言概述乳酸菌是一类广泛存在于自然界中的细菌，其能力包括发酵和产生乳酸。
乳酸菌不仅具有益生菌的作用，还对人体健康有着多种积极影响。
本文将对乳酸菌的概述及其应用进行详细阐述。
正文内容1.乳酸菌的分类及特点乳酸菌属于革兰氏阳性菌，可以根据其形态和生理特性进行分类。
常见的乳酸菌种类有乳酸杆菌、嗜热链球菌、纤维链球菌等。
乳酸菌通常具有产酸能力，能够将碳水化合物通过发酵代谢产生乳酸。
2.乳酸菌的功效及机制乳酸菌具有多种益生功效，包括调节肠道菌群平衡、增强肠道屏障功能、促进营养物质吸收等。
乳酸菌可以通过产生抗菌物质、调节免疫系统等机制来实现这些功效。
乳酸菌可以产生抗菌物质，如乳酸、双歧杆菌素等，具有抑制有害菌生长的作用。
乳酸菌能够调节宿主免疫系统，增强机体的免疫力。
乳酸菌能够降低肠道内毒素的，保护肠道黏膜免受损伤。
3.乳酸菌在食品工业中的应用乳酸菌在食品工业中有着广泛的应用。
乳酸菌能够促进食品发酵过程，改善食品的品质和口感。
乳酸菌还可以用于制作乳酸饮料、酸奶、奶酪等乳制品，并能提高这些产品的保质期。
乳酸菌在酸奶制作中起到重要作用，可以通过发酵代谢产生乳酸，使酸奶呈现出酸味和特殊的口感。
乳酸菌还可以用于面包发酵，能够增加面包的松软度和口感。
乳酸菌能够改善肉制品的质地和风味，提高食品的营养价值。
4.乳酸菌在保健品和医药领域中的应用乳酸菌在保健品和医药领域中具有重要的应用前景。
乳酸菌作为一种益生菌，可以改善人体肠道菌群的平衡，提高人体的免疫力。
因此，乳酸菌常被应用于保健品的生产。
乳酸菌可以调节人体肠道菌群，预防和缓解腹泻等肠道疾病。
乳酸菌可以促进食物消化和营养吸收，有助于改善消化系统功能。
乳酸菌还可以预防和缓解女性尿路感染和阴道感染等问题。
5.乳酸菌在环境修复中的应用除了在食品工业和医药领域中的应用，乳酸菌还可以用于环境修复。
乳酸菌具有一定的降解能力，能够降解有机废弃物，并减少环境污染。
因此，乳酸菌在废水处理、土壤修复等领域中具有潜在的应用价值。
乳酸菌的筛选与鉴定
• 片球菌属（Pediococcus）
– 形态：细胞呈球形，成对或四联排列。 – 运动性：不运动。 – 营养类型：化能异养型。 – 需氧情况：兼性厌氧型。
乳酸菌的筛选
• 乳酸菌的分布
– 乳酸菌绝大多数都是厌氧菌或兼性厌氧菌，营 养类型为化能异养型。生长繁殖于厌氧或微好 氧、矿物质和有机营养物丰富的环境中。具体 如下：
• 与动物相关：乳汁、消化道、粪便等； • 与植物相关：花蜜、树液、植物残骸、果实损伤部 位等； • 自然水体； • 发酵食品：酸奶等。
• 筛选方法
– 利用碳酸钙溶解圈法筛选。
改良乳酸细菌培养基（MRS）
• • • • 蛋白胨10.0 g，牛肉膏8.0 g，酵母膏4.0 g， 柠檬酸二铵2.0 g，葡萄糖20.0 g， 吐温-60 1.0 mL，乙酸钠5.0 g， 磷酸氢二钾2.0 g，硫酸镁0.2 g，硫酸锰0.05 g， 琼脂20.0 g，碳酸钙30 g，
乳酸菌蛋白酶活性试验
• 在添加了15%脱脂乳或0.5%干酪素的MRS 固体培养基中, 分别滴入0.2ml一定稀释度 的试验菌液涂布均匀后,37℃ 恒温培养。当 牛乳中酪蛋白分解时, 菌落周围会出现透明 圈。
耐盐性试验
• 在添加质量分数为0%、2%、4%、6%、 8%食盐的MRS平板, 划线接种分离菌种， 在37 ℃ 培养24h后观察菌落生长情况。
分解脂肪的能力
• MRS固体培养基中添加15%的猪脂肪和甲 基红指示剂，稀释平板法接入供试菌后， 于37'C培养48 h，观察各种菌种有无红色 斑点出现。
• 乳杆菌属（Lactobacillus）
– 形态：细胞呈长或细长杆状、弯曲形短杆状， 一般成链状排列。 – 运动性：通常不运动，有的能够运动，具有周 生鞭毛。 – 营养类型：化能异养型。 – 需氧情况：微好氧型。
微生物乳酸菌
引言概述:微生物乳酸菌是一类广泛存在于自然界和人体内的微生物，具有重要的生物学功能和应用价值。
它们是一类可产酸的革兰氏阳性菌，能够利用碳水化合物产生乳酸。
微生物乳酸菌在食品工业、医学和农业等领域有着广泛应用，具有调节肠道菌群、增强免疫力、抗菌和防腐等作用。
本文将从微生物乳酸菌的分类、生物学特性、功能和应用等方面进行详细阐述。
正文内容:一、微生物乳酸菌的分类1.乳酸菌的基本特征乳酸菌是一类革兰氏阳性菌，能够利用碳水化合物进行乳酸发酵。
其基本特征包括形态特征、生理特性和生物化学性质等方面。
2.微生物乳酸菌的分类与系统发育微生物乳酸菌是按不同的分类体系进行分类的，常见的分类体系有传统的形态分类和现代的分子分类等。
二、微生物乳酸菌的生物学特性1.微生物乳酸菌的形态及培养特性微生物乳酸菌的形态多样，包括球形、杆状和弯曲杆状等。
在不同的培养基和条件下，它们具有不同的培养特性和生长速度。
2.微生物乳酸菌的代谢途径微生物乳酸菌主要以碳水化合物为底物进行乳酸发酵代谢，同时还可以进行其它代谢途径，如产生酒精、乙酸和丙酸等。
三、微生物乳酸菌的功能1.调节肠道菌群微生物乳酸菌能够通过抑制有害菌的生长和增加有益菌的数量来调节肠道菌群，保持肠道微生物平衡，从而促进肠道健康。
2.增强免疫力微生物乳酸菌具有抗菌和免疫调节作用，能够增强人体免疫力，促进免疫细胞的活化和增殖，从而提高机体的抵抗力。
3.抗菌和防腐微生物乳酸菌能够产生酸和抗菌物质，具有抑制细菌和真菌生长的作用，可以用于食品工业中的防腐和保鲜。
四、微生物乳酸菌的应用1.食品工业中的应用微生物乳酸菌广泛应用于食品工业，如酸奶、乳酸发酵面包、酸奶饮料等。
它们能够增强食品的营养价值，改善口感，并有助于消化和吸收。
2.医学和药物领域中的应用微生物乳酸菌在医学和药物领域中也有重要应用，如用于治疗胃肠道疾病、预防和治疗感染性疾病、制备益生菌药品等。
3.农业领域中的应用微生物乳酸菌可用于农业领域，如作为土壤增效剂、生物防治剂和饲料添加剂，起到改善土壤质量、增强作物抗病能力和促进动物生长的作用。
乳酸菌的内容总结
乳酸菌的内容总结引言乳酸菌是一种常见的微生物，在许多食品和保健品中都有应用。
它们能够发酵食品，产生乳酸和其他有益物质，有益于人体健康。
本文将对乳酸菌的定义、分类、功能和应用进行总结。
定义乳酸菌（Lactic acid bacteria）是一类革兰氏阳性、无芽孢和缺乏细胞呼吸的革兰氏阳性杆菌。
它们能够在缺氧条件下通过乳酸发酵代谢产生能量。
分类乳酸菌根据形态、生理特征、代谢路径和遗传特性等方面进行分类。
根据酸酶的类型和底物，乳酸菌可分为多种类型，如乳杆菌属（Lactobacillus）、嗜热乳杆菌属（Thermophilus）和链球菌属（Streptococcus）等。
不同类型的乳酸菌在应用中具有不同的特点和功能。
功能乳酸菌在食品加工和人体健康中发挥着重要的作用，具有以下功能：发酵乳酸菌能够在适宜条件下发酵食品，将碳水化合物转化为乳酸和其他有益物质。
这种发酵过程不仅改变了食品的口感和味道，还可以增加食品的保质期和营养价值。
产生乳酸乳酸是乳酸菌最主要的代谢产物，它能够降低食品的pH值，抑制有害菌的生长，从而延长食品的保质期。
抑制有害菌生长乳酸菌产生的乳酸和其他有益物质具有抗菌作用，可以抑制食品中有害菌的生长，减少食品腐败的风险。
促进消化和吸收乳酸菌可以促进消化道的微生物平衡，增强人体对营养物质的吸收能力，改善消化系统功能。
提高免疫力乳酸菌可能通过刺激免疫系统和增加抗氧化物质的产生来提高人体的免疫力，减少感染和炎症的风险。
应用由于乳酸菌的功能和益处，它们在食品工业和保健品领域得到了广泛应用。
食品工业乳酸菌是很多食品的常见组成部分，如酸奶、奶酪、发酵蔬菜和酸面团等。
它们能够改善食品的质地、口感和保质期，同时增加食品的营养价值。
保健品乳酸菌也被用作保健品，供人体补充益生菌。
由于它们对消化和免疫系统的益处，乳酸菌产品被认为有助于维持身体健康和预防疾病。
结论乳酸菌是一类重要的微生物，具有多种功能和应用。
它们能够通过发酵食品、产生乳酸、抑制有害菌生长、促进消化和吸收、提高免疫力等方式对人体产生积极影响。
乳酸菌的筛选及应用
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2、乳酸菌在医药中的应用
（1）乳酸菌素；（2）γ -氨基丁酸(GABA)
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3、开发可降解的聚乳酸塑料
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（1）聚乳酸（PLA）简介
落，挑取使溴甲酚绿变色的菌落。
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（三）几种乳酸菌筛选举例
1、嗜热链球菌
样品来源：市售酸奶 培养基： M17改良培养基
培养温度：42℃
需氧情况：兼性厌氧
筛选方法：常规的稀释涂布
和划线分离
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2、 保加利亚乳杆菌
样品来源：市售酸奶
培养基：牛肉浸膏 1.5％，酵母浸膏 0.5％，葡萄糖 3.0％，柠檬酸三铵 0.2％，七水硫酸镁 0.02％，琼 脂 1.5％，pH 5.1。 培养温度：42℃
二、筛选方法
（一）溶钙圈法
利用一些产酸类细菌在含CaCO3的培养基上产生 CaCO3溶解圈，从而筛选出这些产酸类细菌，可用 于乳酸菌的筛选。 其中培养基中加入CaCO3的作用是： ①鉴别能产生酸的细菌； ②中和产生的酸，以维持培养基的PH。
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1、乳酸菌筛选培养基（MRS培养基）
配方（1L）:
形态：细胞呈多样形态：Y字形、
V字形、弯曲状、勺形，典
形形态为分叉杆菌
运行性：不运动 营养类型：化能异养型 需氧情况：专性厌氧
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5、片球菌属（Pediococcus）
形态：细胞球形，成对或四联状
排列
运行性：不运动 营养类型：化能异养型 需氧情况：兼性厌氧
乳酸菌知识点总结
乳酸菌知识点总结乳酸菌作为一种非常重要的微生物，其在人类的健康维护和食品工业中扮演着不可或缺的角色。
本文将从乳酸菌的定义、分类、生理功能、应用等各方面进行深入探讨，希望能够对读者更好地了解乳酸菌有所帮助。
一、乳酸菌的定义及分类乳酸菌是一类革兰氏阳性、非芽孢杆菌，产生乳酸为代谢产物，能够发酵多种碳水化合物，这使得其在食品发酵和生物医学领域中广泛应用。
根据乳酸生成产物和代谢途径的不同，乳酸菌可以分为两类：homofermentative乳酸菌和heterofermentative乳酸菌。
前者主要产生乳酸，而后者还会产生一定量的乙醛、二氧化碳等物质。
乳酸菌也可以根据表现形式、营养特性等方面进行分类，如Lactobacillus、Bifidobacterium、Streptococcus、Lactococcus等。
其中Lactobacillus是最具代表性的乳酸菌之一，其在多种食品中被广泛使用。
二、乳酸菌的生理功能1. 食品发酵乳酸菌适应性广泛，能够使用各种碳水化合物进行发酵，进而改善食品的口感和品质。
比如，Lactobacillus acidophilus可以在牛奶中产生乳酸和乳酸菌素，这有助于保持牛奶的新鲜和稳定。
2. 肠道正常菌群的维护乳酸菌在人类肠道中存在，并且作为一种益生菌，乳酸菌可以增强肠道的免疫力，维护肠道正常菌群的平衡。
此外，乳酸菌还可以促进肠道蠕动，减少便秘。
3. 抑制有害菌滋生乳酸菌可以通过产酸和抗菌素等机制，抑制肠道中有害菌的生长繁殖，维持肠道微生态系统的平衡，减轻或预防肠道疾病，如腹泻和炎症性肠病等。
4. 抗氧化作用乳酸菌中含有丰富的抗氧化物质，可以清除自由基，减缓细胞老化，同时增强机体的免疫力，预防各种疾病。
三、乳酸菌在食品和医药行业中的应用1. 食品工业乳酸菌在食品工业中被广泛应用，包括乳制品、酸奶、酸菜等。
比如，Lactobacillus reuteri可以用于生产乳清酸饮料，而Streptococcus thermophilus则常用于生产奶酪和酸奶等。
乳酸菌的简介
乳酸菌的简介乳酸菌的简介⼀、乳酸菌的起源根据圣经旧的书上记载，公元前4000多年，⼈类已经开始发酵乳酸⾁制品及蔬菜腌渍物。
直到公元1857年，巴斯德(Pasteur)发现酸乳(sour milk)中有微⼩⽣物体存在，将其定名为”levue lactique”，发酵乃微⽣物作⽤所致的秘密才⾸次得以揭露；这是发现乳酸菌的开端。
1873年李斯特(Lister)利⽤稀释法，由酸乳中纯化分离出Bacterium lactis，也就是⽬前的Lactococcus lactis，这是乳酸菌最早被分离出来的纪录(廖,1998；李,2000)。
⼆、乳酸菌的定义乳酸菌⼀般是指能将碳⽔化合物发酵分解为乳酸的细菌群(佐佐⽊隆,1998)。
乳酸菌群具有以下⼏点特性：1.为⾰兰⽒阳性(gram positive)球菌或杆菌。
2.不产⽣孢⼦(nonsporting)且⽆运动性(nonmotile)3.不具分泌催化酶(catalase negative)之能⼒。
4.可在有氧环境⽣长，但以⽆氧状态下⽣存较佳，亦有绝对厌氧者。
5.需有碳⽔化合物、胺基酸、维⽣素等多种⽣长因⼦⽅能⽣长之复合营养需求性(complex nutritional requirements)。
6.依代谢途径与最终产物的不同，可分为同质发酵(homofermentative)及异质发酵(heterofermentative)两种乳酸菌。
同质发酵性乳酸菌含有aldolase，最终产物90％-100％为乳酸；异质发酵性乳酸菌具有phosphoketolase，其最终产物除了40％-50％的乳酸外，还包括⼄醇、⼆氧化碳及醋酸等多项产物(Ingledew,1995)。
乳酸菌普遍存在动物体消化道中，因耐酸性佳且可分泌乳酸及抗菌物质等有利于⽣存的条件，故消化道三⼤菌群当中最占优势(Nemcova et al. 1997)三、乳酸菌的分类乳酸菌⼀般包括Lactobacillus (L)、Leuconostoc (Leuc.)、Streptococcus (S)及Pediococcus (Ped.)四属；⼴义的乳酸菌尚包括Bifidobacterium与Sporolactobacillus 两个属(Jay, 2000)。
食品加工中乳酸菌的筛选与应用
食品加工中乳酸菌的筛选与应用食品加工是人们日常生活中不可或缺的一部分。
随着人们对食品质量和健康的关注度不断提高，乳酸菌作为一种有益微生物备受关注。
乳酸菌的筛选与应用对于食品加工行业来说具有重要意义，下面我们来了解一下乳酸菌筛选的方法以及其在食品加工中的应用。
一、乳酸菌的筛选方法乳酸菌是一类常见的益生菌，具有抗菌、抗肿瘤、降血脂等多种功能。
在食品加工中，需要选用菌株进行乳制品、酸奶、发酵蔬菜等食品的制作，因此，乳酸菌的筛选非常重要。
目前，常用的乳酸菌筛选方法主要有以下几种。
首先是酸奶乳酸菌的筛选。
酸奶是一种常见的乳制品，乳酸菌在其中起到发酵作用。
筛选酸奶乳酸菌主要依靠其形态特征和代谢产物。
乳酸菌通常呈链状、球状等形态，也会产生乳酸和醋酸。
通过观察菌落形态和酸度的变化，可以初步确定乳酸菌的种类。
其次是发酵蔬菜中的乳酸菌筛选。
发酵蔬菜是另外一种常见的食品，其中的乳酸菌对保持蔬菜的新鲜度和产生特殊的风味有着重要作用。
筛选发酵蔬菜中的乳酸菌主要依靠发酵过程中的酸度和气味变化。
乳酸菌可以产生乳酸和一些挥发性化合物，通过观察酸度的变化和气味的特殊性，可以初步确定乳酸菌的种类。
最后是基因分析法。
随着科技的不断进步，乳酸菌的筛选越来越多地采用基因分析法。
基因分析法通过对乳酸菌的基因组进行测序和分析，可以准确地确定其物种和亲缘关系。
这种方法不仅可以快速准确地筛选乳酸菌，还可以为乳酸菌的进一步研究提供数据支持。
二、乳酸菌在食品加工中的应用乳酸菌在食品加工中具有广泛的应用价值。
首先是酸奶制作。
酸奶是一种受人们喜爱的乳制品，其中含有丰富的乳酸菌。
乳酸菌能够将乳糖转化为乳酸，降低酸奶的pH值，抑制有害菌的生长，同时还赋予酸奶独特的口感和风味。
其次是乳制品的保鲜。
乳酸菌产生的乳酸具有抗菌作用，可以抑制一些有害菌和腐败菌的生长，延长乳制品的保质期。
乳酸菌还可以产生一些挥发性化合物，赋予乳制品特殊的风味和香味。
此外，乳酸菌还可以用于发酵蔬菜的制作。
乳酸菌的分离与筛选试验
ｌ ７
酸菌 ，将 其 编 号 从 Ｌ ．到 Ｌ ．９ Ｓ １ Ｓ２ 。
２２ 菌株 的筛选 ． 通 过产酸 能 力的检 定和 对猪源 弱 毒型大肠 杆菌有 抑 制效果的 比较 ，Ｌ ． 、Ｌ ．、Ｌ ．５ 个菌株产酸 能力较 Ｓ３ Ｓ９ Ｓ １ －
强，对Ｅ ｃｉ 抑菌 圈的直径（ ． ｏｌ 的 ｍｍ） 别 为 ： １． ２ １． 分 ８２ 、 ５ ＋ ８
１ ． 初 筛 将 分 离 得 到 的 纯 化 菌 株 接 种 于 液 体 产 酸 培 ．３ ２
２ 结果与分析
２１ 菌种 的确 定 ．
从 不 同来 源材 料 中，共 分离得 到纯 培养菌株 ５ 株 。 ６ 其ｑ Ｇ染色 结果 为 阳性 、ＫＯ － ＇ Ｈ试 、Ｈ２ ２ Ｏ 酶试验 、明胶 水 解 试验 、产硫 化氢试 验均 为为 阴性 的有２ 株 ，确定 为乳 ９
（ ａｍｏｅｌ Ｃ ９ １ ，革 兰 氏 阳性 菌 金黄 色 葡 萄球 菌 Ｓ ｌ ｎｌ ７ ．３） ａ （ ｔｐ）ｏｏ ｃｓ ａ ｒｕ ） 单 核 细 胞 增 生 利 斯 特 氏菌 Ｓａｈｒｃ ｃｕ ｕｃ ｓ ， ｌ （ ｉｅａｍｏ ｏ ｙｏ ｅｅ ４ ０ ） Ｌｓ ｒ ｎ ｅｔｇ ｎ ｓ５ ０ ２ ，热带产朊 假丝酵母和啤 ｔ 酒酵母 （ ａｃ ａ ｍａｅ ｅｅ ｉ ａ ）作 为试 验菌 ，用管碟 Ｓ ｃｈｒ ｃｓｃｒｖｓ ｅ ｏ ｉ 法测定复筛确定的菌株对上述供试菌株 的抑菌作用。 １ ． 抗 药性 的测 定 采用 牛津杯 法 。预 先将 复筛 确定 ．７ ２
一种植物乳杆菌lp90及其筛选方法和应用
一种植物乳杆菌lp90及其筛选方法和应用
植物乳杆菌LP90是一种具有益生作用的乳杆菌菌株，属于乳酸菌科。
乳酸菌是一类广泛存在于自然界中的菌群，其在食品工业、医学和农业等领域具有重要应用价值。
植物乳杆菌LP90是一种以植物为基质生长的菌株，与人体肠道中的益生菌具有相似的特性，因此具有很高的应用潜力。
筛选方法是获取高效乳酸菌菌株的关键步骤。
对于植物乳杆菌LP90的筛选方法，一般可以采用以下步骤：首先，从植物材料中分离出可能的乳酸菌菌株。
其次，通过形态学特征、生理生化特性和分子生物学鉴定等手段，确认乳酸菌菌株的身份。
最后，通过对菌株在不同环境条件下的生长情况、产酸能力、胆盐耐受性、抗菌活性等方面的评估，筛选出具有高效益生作用的植物乳杆菌LP90。
植物乳杆菌LP90具有广泛的应用领域。
首先，植物乳杆菌LP90可以应用于食品工业中的乳酸发酵过程，用于制作酸奶、乳酸饮料和发酵食品等。
其次，植物乳杆菌LP90可以作为一种保健菌添加剂，添加在食品中具有调节肠道菌群、促进肠道健康的作用。
此外，植物乳杆菌LP90还可以应用于农业领域，用于提高作物的抗逆性和生长发育。
此外，植物乳杆菌LP90还可用于制备益生菌制剂，用于改善人体肠道菌群失衡引起的肠道疾病。
植物乳杆菌LP90作为一种具有益生作用的乳酸菌菌株，在食品工
业、医学和农业等领域具有广泛的应用潜力。
通过合适的筛选方法，可以筛选出高效的植物乳杆菌LP90菌株。
未来，随着对该菌株的深入研究，相信将会发现更多该菌株的潜在价值，并将其应用于更多领域，为人类健康和农业发展做出更大的贡献。
乳酸菌分离鉴定及试验方法
乳酸菌分离鉴定及试验方法
乳酸菌的分离鉴定主要包括以下步骤：
1. 菌落筛选：根据菌落的颜色、大小、光泽度和透明程度，挑取含溶钙圈的单菌落。
2. 分离纯化：在MRS或Elliker固体培养基上反复划线分离，直到分离到纯的单一菌落。
3. 革兰氏染色：镜检观察菌体颜色、大小、形状和排列方式。
4. 过氧化氢酶实验：将革兰氏染色阳性、过氧化氢酶阴性的菌株初步认定为乳酸菌。
5. 保藏：用终浓度为25%甘油冻存管进行菌株的保藏，置于-80℃冰箱中保存备用。
乳酸菌的试验方法主要包括以下步骤：
1. 耐酸性优良菌株筛选试验：将分离纯化的乳酸菌和实验室耐酸性较好的WHH544接种到MRS液体培养基中，接种量为2%，于37℃培养箱中培养24小时，连续活化2代后，以6000r/min离心10分钟，弃去上清液，沉淀菌体用灭菌生理盐水洗涤、离心2次后，通过麦氏比浊法调整菌悬液浓度为×108CFU/mL。
2. 其他试验：根据具体研究需求进行相关试验，例如通过不同条件培养，观察菌株生长情况；或通过发酵实验，测定乳酸菌的产酸能力等。
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（1）乳酸菌素； （2）γ-氨基丁酸(GABA)
聚乳酸塑料 （PLA）
食品
饲料
医药
材料
思考题（知识点回顾）
1、请说明酸奶常用菌种“保加利亚乳杆菌”和“嗜热链球菌”的分类地位。 2、请设计实验，从环境中得到一株双歧杆菌的纯培养物。 3、未来乳酸菌研究的发展方向是什么？ 4、预习醋酸菌相关知识。
希腊史诗“独眼巨人” 以器皿盛满乳清、 架上堆满干酪 贾思勰的《齐民要术》 记载酸奶的制法、 成吉思汗令士兵 携带酸奶，保证健康
1919年，克拉索创建酸奶生产工厂 给商品命名为“达能”
1930年，代田博士分离到乳乳酸菌是一类无芽孢、革兰氏染色阳性细
菌的总称。凡是能发酵葡萄糖或乳糖产生乳酸的 细菌统称为乳酸菌。这是一群相当庞杂的细菌， 目前至少可分为18个属，共有200多种。
/
是否产气
分子学 是否凝乳 方法 吲哚实验
6% NaCl 生长实验 8% NaCl 生长实验
10 ℃ 生长实验
45 ℃ 生长实验 不同碳源发酵实验 初步鉴定结果
——
5、应用领域
（1）酸奶、奶酪； （2）乳酸饮料； （3）酿造调味品中的应用； （4）功能性食品的开发； （5）防腐、保鲜； （1）饲料添加剂； （6）肉制品加工； （2）青贮饲料； （7）腌渍物等
3、分类地位
“两界学说”： 植物界、动物界
.tw/home.php
门 纲 目
厚壁菌门
芽孢杆菌纲
乳杆菌目 乳杆菌科、 肠球菌科、 链球菌科 ……
“六界学说”：
科
植物界、 动物界、 属 原生生物界、原核生物界、 真菌界、 非胞生物界（病毒） 种
4、分离鉴定
采样
选择适合目的菌生长的 培养基及培养条件 37℃培养48h，厌氧培养
富集培养
采样用具：灭菌 采样地点：根据乳酸菌 生理习性选取 乳汁、消化道、发酵食品
分离纯化
梯度稀释（ 10-5 / 10-6 / 10-7 ） 平板涂布法/平板划线分离法 挑取单菌，镜检（形态，G+，H2O2-） 试管穿刺4℃保存
乳酸菌概述
高洁
发酵
霉菌
酵母 菌
醋酸 菌
乳酸 菌
乳酸菌概述
发 展 史
定 义
分 类 学 地 位
分 离 鉴 定
应 用 领 域
1、发展史
圣经《创世纪篇》 亚伯拉罕以甜奶及酸奶 款待三位天使
1857年，巴斯德 用显微镜观察到了乳酸菌 1878年，李斯特 从酸败的牛奶中分离出乳酸乳球菌 1905年，戈里戈罗夫 从酸奶中分离到“保加利亚乳杆菌”
待鉴定目的菌经过生理生化实验后， 与阳性对照菌株比较， 查阅伯杰氏系统学鉴定手册。 实验项目
菌落颜色 菌落表面形态 细胞形态
阴性对照 （空白）
阳性对照 目的菌 （已知菌种） （待鉴定菌种）
传统 方法
革兰氏染色反应 触酶实验 明胶液化实验 淀粉水解实验 硫化氢实验 硝酸盐还原实验
提取目的菌的基因组DNA， 选择通用引物对16S rDNA进行PCR扩增 扩增后的片段进行测序， 测序结果与数据库比对