药物血浆半衰期测定实验
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C1号试管
取
血 1
给 药
取 血 离显比 2、 心 色 色 3
12.计算:
t1/ 2
0.301
log OD1 /
OD2
OD1和OD2分别为2、3号管的光密度值。
公式推导
C C kt
t
0 .e
lnCt ln C0 Kt
Kt ln C0 ln Ct
t ln C0 Ct K
K 0.693
t
1 2
t ln C0 Ct
0.693
t
1 2
t
1 2
0.693
8. 取血: 在给药后20分钟和40分钟时, 开启动脉夹取血约1~1.5 ml 20分钟→A2→准确取1 ml→2号离心管 40分钟→A3 →准确取1 ml→3号离心管。
移入离心管的血 液摇匀或搅拌均 匀,以充分沉淀
血浆蛋白
9.离心:3000 rpm,3分钟。
漫漫倾倒上清液入对应编号的B1、B2、 B3号试管中。 从B组管精确吸取上清液3 ml→ C组管
B1,B2,B3 C1,C2,C3备用。
2.取家兔一只,称重,麻醉(20% 乌拉坦5 ml/kg,2/3 iv,1/3 ip)
3.分离颈总动脉,头端用线结扎, 心端用动脉夹夹闭。
头 端
向心端
动脉 夹
4.动脉插管,备取血用。
离 心 端
向心端
5.肝素化:0.5%肝素生
动脉 理盐水2 ml/只,IV。
A1→B1→ C1 A2→B2→ C2 A3→B3→C3
10.显色:各管加入10%三氯化铁 (FeCl3)0.5 ml,显色。
比色杯必须配套,擦干净;721分光光 度计调零点时至少三次后再测;清洗 比色杯后用卫生纸单向擦拭透光面,
11.比色、测光密度值:以C1号管为 对照管,用721分光光度计在520 nm 波长下读取C2、C3号管的光密度值。
夹
开启动脉夹取血时,不 要将动脉夹抽离动脉
每次移入离心管的 血量务必准确
6.取血: 开启动脉夹取血约1~1.5 ml, 放入A1号试管,再从A1号试管准确吸 取1 ml移入1号离心管,充分摇匀,以 沉淀血浆蛋白。
7.给药:10%水杨酸钠2 ml/kg,IV。
每次取血前应先将 动脉插管内残余血
放掉!
ln
OD1 OD2
/t
t1/ 2
0.301
log OD1 /
OD2
零级
对
浓
数
度
浓
度
一级
时间
零级 一级
时间
操作流程图
血1~1.5ml 三氯醋酸4ml 倾入
离 心 (
三氯化
吸
铁0.5ml
取
上
清
液
3ml
3000rpm.3min
A1号试管
标称 分 记重 离 管麻 动
醉脉
)
1号离心管Βιβλιοθήκη Baidu
肝
动 脉
素插
化管
B1号试管
【目的】学习药物血浆半衰期测定方法。 【药品】 10%水杨酸钠, 10%三氯醋
酸4ml, 0.5%肝素生理盐水, 10%三 氯化铁
【动物】 家兔
【原理】血中药物浓度随时间推移
呈规律性(一级动力学消除)下降。
Ct C0 ekt
【方法、步骤 】
1.取3支离心管标记1、2、3,加入 10%三氯醋酸4ml ; 取9支试管标记:A1,A2,A3