蛋白结晶技术

第一种类型的晶体一般很小，不能用于高分辨衍射的 研究。
第二类晶体，从图中可以看出，蛋白质分子不能太小， 否则极性区域接触不够。
蛋白质分子的大小无法改变，选择合适的去垢剂分子 成为关键
主要参考书目
• 卢光莹.《生物大分子晶体学基础 第二版》. 北京大学出版社. • 梁栋材. 《X射线晶体学基础 第二版》.科学 出版社. • Barry s. selinsky. <membrane protein protocols>.Human Press.
蛋白质结晶技术
Background
• 蛋白质的功能是基于蛋白质的三维结构，应用Xray蛋白质的结构需要得到高质量的蛋白质晶体。 • 得到高质量的蛋白质晶体是蛋白质功能研究的瓶 颈，严重制约着蛋白质工程、理性药物设计、合 成疫苗设计等新型生物技术的发展。
蛋白结晶流程图
蛋白表 达
蛋白纯 化
蛋白结 晶
货号 用途备注 用于生物大分子结晶 HR2-110 用于蛋白质，核酸水溶 HR2-112
• wizard
• • • • • • Pegrx 1 HR2-082 用于生物大分子结晶 Pegrx 2 HR2-084 用于生物大分子结晶 Peg/Ion Screen Kit HR2-126 用于生物大分子结晶 Peg/Ion 2 Screen™ HR2-098 用于生物大分子结晶 Saltrx Kit HR2-108 用于生物大分子结晶 Membfac Kit HR2-114 用于膜蛋白和溶解度有限的样 品结晶 • Crystal Screen Lite HR2-128 用于蛋白质，缩氨酸，
联系方式
邮箱 kuni071@163. com
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微量蒸汽扩散法（浓度增加） 平衡透析法（PH或离子强度） 一批结晶法（沉淀剂） 温度梯度结晶法（温度） 重复结晶法
• 结晶常用方法
悬滴法
Hale Waihona Puke Baidu 坐滴法
Crystal Screen Kit
»产品名称 • Index Kit HR2-144 • Crystal Screen Kit 性小分子结晶 • Crystal Screen 2 Kit
（电荷均一，大小均一）
蛋白质结晶过程
成核阶 段 晶体生 长 生长停 止
• 蛋白质结晶过程是一个有序化的过程，即 溶液中无规律的分子转变成有规则排列状 态的固体。
• 影响蛋白质溶解性的因素： 1. 离子强度 2. PH和相反离子 3. 温度 4. 有机溶剂 改变溶液中以上因素可以使蛋白质在溶液 中达到过饱和状态，从而形成晶核，晶核进 一步生长成具有一定空间结构的晶体。
膜蛋白结晶技术
• 膜蛋白可根据膜上的位置和分离的难易分 为周边和本体两类。 • 膜蛋白有疏水和亲水两个部分，其非极性 区域倾向于形成无序化聚合物，需要采用 特殊的条件才能使膜蛋白形成晶体。 • 去垢剂（detergent）本身也像膜脂分子一 样的两亲性结构，可以替代膜脂。
• 从膜蛋白的水溶液中形成膜蛋白晶体有两 种可能的类型。
• Natrix Kit HR2-116 用于核酸和蛋白核酸复合物的结晶 • Crystal Screen Cyro Kit HR2-122 用于蛋白质，可溶性缩 氨酸，核酸和水溶性小分子的初次低温结晶 • Nucleic Acid Mini Screen Kit HR2-118 用于核酸片段的结晶 • Low Ionic Strength Screen HR2-120 用于完整单抗，单抗片 段以及在低离子浓度下溶解度较低的样品结晶 • Silver Bullet & Silver Bullet Bio HR2-078 用于生物大分 子的初次和二次结晶 • HR2-080 • Peg/Tacsimate Ph5.8 Crystallization Reagent HR2-090 • Peg/Tacsimate Ph 6.8 Crystallization Reagent HR2-092 • Peg/Tacsimate Ph 7.8 Crystallization Reagent HR2-094 • Additive Screen™ HR2-428 利用样品间和样品溶剂间相互 作用来优化晶体生长和改变样品溶解度