血浆蛋白质的测定(精)

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第八章血浆蛋白质的测定

第一节概述

一、血浆蛋白质的组成及功能

血浆蛋白质是血浆固体成份中含量最多、组成复杂、功能广泛的一类化合物。占血浆固体成份90%左右,目前已经研究的血浆蛋白质有300多种,分离出的纯品约100来种,除免疫球蛋白外,主要由肝细胞合成,主要功能。

1. 维持血浆胶体渗透压;清蛋白。

2. 作为某些物质的载体,起运输作用;如清蛋白能与多种物质结合(FA、胆红素),某些球蛋白具特异地运输某些物质的功能,运铁蛋白、运皮质醇蛋白。

3. 维持体液pH恒定;血浆蛋白pI一般都小于7.4是弱酸,一部分以弱酸盐形式存在,构成缓冲对。

4. 免疫功能;血浆中许多具有免疫功能的球蛋白,主要由浆细胞合成,电泳时位于γ区带,如IgG、IgA、IgM、IgD、IgE,此外,还有具有免疫作用的非特异球蛋白,如补体。

5. 凝血与纤溶作用;凝血与纤溶是一对矛盾的统一、凝血因子与纤溶因子绝大部分是血浆蛋白质,它们促进血液凝固,防止血液流失和溶解血栓,防止重要脏器的动脉栓塞。

6. 营养作用;血浆蛋白质可分解成AA,用于合成组织蛋白或氧化供能。

7. 催化作用;血浆中有许多酶类,其中部分在血浆中发挥作用,称血浆功能性酶,如凝血酶原、纤溶酶原、铜蓝蛋白、LPL、LCAT、肾素等。

二、个别血浆蛋白质

(一)前白蛋白(prealbumin,PA)分子量5.4万,由肝细胞合成,电泳时移动速度较白蛋白快,位于其前方面得名,半寿期短12h,PA是一类运载蛋白,一种能与甲状腺素结合,称为甲状腺结合蛋白,一种能与VitA结合,称为VitA 结合蛋白,常用测定方法是免疫学方法,正常参与范围0.2~0.4g /L,急性炎症,恶性肿瘤,肝硬化或肾炎时下降。

(二)白蛋白(albumin,Alb)分子量66458,由肝实质细胞合成,半寿期15~19天,是血浆中含量最多的蛋白质,占40%~60%,主要功能,维持血浆胶体渗透性,缓冲作用,运输作用,营养作用,调节某些激素或药物活性。

白蛋白可微量地通过肾小球,约0.04%,但大部分被血小管重吸收。

白蛋白的测定方法目前主要是溴甲酚绿(BCG)法,正常参考范围35~55g/L,血浆白蛋白增高临床少见,主要见于严重失水引起血液浓缩,血浆白蛋白降低临

床常见。①合成障碍急;慢性肝炎。②丢失过多;肾病综合症、慢性肾小球、肾炎、糖尿病、系统性斑狼疮等。③分解过多;营养不良,慢性胃肠道疾病。

(三)α1-酸性糖蛋白(α1-acid glycoprotein,AAG)、分子量约4万,含糖约45%,pI2.7~3.5,主要由肝细胞合成,某些肿瘤组织也可合成。

AAG是主要的急性时相反应蛋白,急性炎症时上升,与免疫防御功能有关。

AAG测定方法,使用AAG抗体,进行免疫扩散法或免疫比浊法检测,正常参考范围0.5~1.5g/L,主要作为急性时相反应的指标,风湿病、恶性肿瘤、心肌梗塞患者上升,营养不良、严重肝病下降。

(四)α1-抗胰蛋白酶(α1-antitrypsin,α1AT或AAT),分子量5.5万,pI4.8,含糖10%~12%,电泳时位于α1区带,占90%左右,由肝细胞合成,能抑制多种酶活性,尤其是蛋白酶,占血清中抑制蛋白酶活力的90%左右,抑制作用有明显的pH依赖性,在中性和弱碱性中活力最大。

AAT也是一种急性时相反应蛋白,主要功能是对抗多形核白细胞吞噬作用时释放的溶酶体蛋白水解酶。

AAT测定方法,目前主要采用免疫化学法,正常参考范围,新生儿血清1.45~2.7g/L,成人0.78~2.0g/L,AAT下降见于胎儿呼吸窘迫症,AAT缺陷所致的肺气肿、肝硬化等,AAT上升见于急性炎症、外科手术后,长期服用可的松药物,妊娠及服用避孕药物。

(五)甲胎蛋白(α1-fetoprotein,AFP)分子量6.5~7万,pI4.75含糖量4%,主要由胎儿肝合成,妊娠13~15周血清AFP含量最高,以后逐渐下降,出生时仅为高峰期的1%~0.1%,周岁时接近成人水平,仅10~30μg /L,功能不详。

AFP作为肿瘤标志物,对原发性肝Ca的诊断很有价值,80%以上原发性肝Ca患者血清AFP上升,但无特异性,肺Ca、胰腺Ca,肝硬化患者血清AFP亦升高,此外,羊水AFP含量测定可用于胎儿产前监测,AFP↑提示胎儿畸形(神经管缺损、脊柱裂、无脑儿),死胎。

AFP测定方法,火箭电泳放射自显影,放射免疫分析法,灵敏度特异性很高,有放射污染。反向间接血凝法(RPHA),操作简便,定量不够精细,适合于普查、筛选。酶联免疫法(ELISA),灵敏度接近放免,且操作简便,无放射污染,便于推广。

(六)结合珠蛋白(haptoglobin,Hp)又名触珠蛋白,是一种糖蛋白,主要由肝合成,电泳时位于α2区带,是一种急性时相反应蛋白,为两对肽链组成的四聚体(α2β2),α链有α1和α2两种,其中α1有两种遗传变异体。

Hp的主要功能与血浆中游离血红蛋白结合,(不可逆结合),并送至肝细胞内降解,因此Hp在溶血后含量急剧下降。

血浆Hp测定方法,①测定Hp-Hb复合物中过氧化物酶活性。②在血浆中加入过量Hb,生成Hp-Hb复合物,凝胶层折法收复合物分离,测定结合的Hb。

③电泳法。④免疫分析法,正常参考范围0.3~2.15g/L,个体间变异较大。

急性时相反应中血浆Hp上升,烧伤、肾病综合征引起Alb丢失时Hp上升,血管内溶血Hp下降。

(七)α2-巨球蛋白(α2-macroglobulin,α2MG或AMG)是血浆中分子量最大的蛋白质,分子量为62.5~80万,含糖量8%。

AMG最突出的特性能与多种分子和离子结合,特别是它能与不少蛋白水解酶结合而影响这些酶的活性,有选择地保护某些蛋白酶活性的作用。

AMG由肝细胞与单核吞噬细胞系统合成,半寿期5天。

AMG测定方法,免疫化学法,正常参考范围1.25~4.10g /L,在低Alb血症,AMG上升,妊娠、服用避孕药时AMG上升。

(八)铜蓝蛋白(ceruloplasmin,CER)含铜的糖蛋白,分子量约12~16万,含糖量约10%,因含铜而呈蓝色,故名铜蓝蛋白。

CER具有氧化酶活性,使血液中Fe2+氧化成Fe3+,故又称亚铁氧化酶。CER 还起着抗氧化剂的作用。防止组织中脂质过氧化物和自由基的生成,CER属于急性时相反应蛋白,血浆CER在感染、创伤、肿瘤上升,Wilson病(肝点状核变性)CER下降。

CER测定方法,根据其氧化酶活性或免疫化学法,成人正常参考范围0.2~0.5g/L。

(九)转铁蛋白(transferrin,TRF)血浆中主要含铁蛋白质,分子量7.7万,含糖约6%,由肝及网状皮系统合成,半寿期7天。

主要运载由消化道吸收的铁和RBC降解释放的铁,此外还可逆地结合多价金属离子,如Ca、Zn、Cu等。

TRF测定方法,扩散法、放免法、散射比浊法,成人正常参考范围2.2~4.0g/L。

TRF在急性时反应中下降,如炎症、恶性病变时、TRF、Alb、PA同时下降,慢性肝病,营养不良亦下降,妊娠、口服避孕药,注射雌激素TRF上升。

(十)β2-微球蛋白(β2-microglobulin,BMG)分子量11800,存在于所有有核细胞的表面,特别是淋巴细胞和肿瘤细胞并由此释放入血,半寿期107mim。

作为人类淋巴细胞抗原β链交部分。

BMG测定方法,由于含量很低,常采用放免法,正常参考范围1.0~2.5mg/L。主要用于监测肾小管功能,特别是肾移植后,如有排斥反应,BMG在尿中排出量上升,肾功能衰竭,炎症、肿瘤血浆BMG上升。

(十一)C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP),是一种能结合肺炎双球菌

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