葡萄糖标准曲线

硫酸－苯酚法测定多糖含量标准曲线实验

1、葡萄糖标准液（0.1mg/mL）:精密称取无水葡萄糖10 mg，用蒸馏水定容到100mL，混匀。

2、5%苯酚：精密称取重结晶苯酚10 g，用蒸馏水定容到200mL，混匀棕色瓶保存。

硫酸－蒽酮法测定多糖含量标准曲线实验

1、葡萄糖标准液（0.1mg/mL）:精密称取无水葡萄糖10 mg，用蒸馏水定容到100mL，混匀。

2、蒽酮试剂：称取蒽酮0.2g，用浓H2SO4定容到100mL，混匀。临用时现配。

3、苯酚－硫酸法测定葡萄糖标准曲线

4、试剂：

5、1、标准G（0.1mg/mL）:精确称取105℃干燥恒重的葡萄糖10 mg，加水定容到100mL。

6、2、5%苯酚：精确称取10重结晶苯酚5g，加水定容到100mL

7、

8、

10、1、芦丁对照品溶液精密称取1 2 0℃干燥至恒重的芦丁20m g，加入60 %乙醇（提取剂浓度一至）溶解，

定容至1 0 0 ml 容量瓶中，摇匀，制成0 .2 m g /ml 的芦丁对照品溶液。

11、

12、

13、多酚测定

14、 1.1.3 试剂及溶液没食子酸、酒石酸钾钠、硫酸亚铁、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、石油醚、乙醇等均为

国产分析纯。本试验用水均为双蒸水。

15、各种溶液的配制：

16、（1）没食子酸母液：精确称取没食子酸500 mg，溶于蒸馏水中，定容至100 mL作为母液，分别吸取

2.5、

17、5、7.5、10、12.5、15 mL于25 mL容量瓶中，用蒸馏水定容，制备成0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3

mg/mL的标准液。

18、（2）pH 7.5磷酸缓冲液1/15 mol/L的磷酸氢二钠溶液（A液）：称取磷酸氢二钠（GB1263）23.877 g，加

水溶解并定容至1 L。1/15 mol/L 的磷酸二氢钾溶液（B 液）：称取经110℃烘干2 h的磷酸二氢钾（GB1274）

9.073 g，加水溶解并定容至1 L。

19、取A液85 mL和B液15 mL混匀，即得pH 7.5的缓冲液。

20、（3）酒石酸铁溶液：称取硫酸亚铁（GB664）0.1 g，酒石酸钾钠（GB1288）0.5 g，加水溶解定容至

100 mL，此液可稳定10天。

21、 1.3 多酚的提取

22、 1.3.1 标准曲线的绘制吸取不同浓度的标准液和对照品160 μL于5 mL离心管中，加入酒石酸铁溶液800 μ

L，

23、加磷酸缓冲液至4 mL，用水代替没食子酸作为对照，用1 cm的比色皿，在540 nm处测定吸光度（A），用

吸

24、光度与对应的浓度进行线性回归，得标准工作曲线，如图1所示。

25、实验结果表明对于橄榄干粉多酚的提取，其最优组合为A2B2C1D2，即以50%乙醇溶液为提取剂，在40℃

条件下浸提2 h，料液比为1:30，提取2次，此时的橄榄干粉多酚提取得率为32.13%。

多酚标准曲线的制备