《生物化学实验》教学大纲

《生物化学实验》教学大纲

一．实验目的

二．实验内容

三．实验学时安排

四．考试方法

五．参考教材

一．实验目的

生物化学是一门实验性学科，其所有知识均来自于实验。本课程着眼于学生学习和掌握生物化学课程的基本理论、基本知识以及实验技能，培养学生具有初步分析问题和解决问题的能力。

生物化学实验课通过学习滴定、比色、纸层析、电泳、生化制备等基本实验技术，分析研究糖、脂、蛋白质、核酸、酶、维生素等生化物质及某些代谢过程，培养学生具有初步的科学实验能力及严格的科学作风，同时验证生物化学的某些基本理论知识，加深感性认识，并锻炼初步的综合实验能力。

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二．实验内容

•实验一糖的呈色反应及还原糖的检验

一．实验目的

学习鉴定糖类及区分酮糖和醛糖的方法；了解鉴定还原糖的方法及其原理。

二．实验内容

Molish反应、蒽酮反应、Seliwanoff反应、Bial反应、Fehling 反应。

三.实验过程

1.呈色反应

（1） Molish 反应

（2）蒽酮反应

（3） Seliwanoff反应

（4） Bial反应

2.还原糖的检验

（1） Fehling反应

（2） Benedict反应

（3） Barfoed反应

四.作业与思考

1.列表总结和比较本实验7种颜色反应的原理及其应用.

2.应用Molish反应和Seliwanoff反应分析未知样品时，应注意些

什么问题？

3.举例说明那些糖属于还原糖.

•实验二脂类组成对脂类单分子层通透性的影响

一、实验目的

学习制作脂类单分子层和鉴定它的原理及方法，比较不同脂类所形成的脂类单分子层通透性的差异。

二、实验内容

以脂类单分子层作为模式膜，用甲烯蓝为指示剂，观察不同脂类单分子层通透性的影响。

三.实验过程

1.溶液准备

2.分光光度计测样

四.作业与思考

1.试述生物膜的基本结构与功能

2.解释下列名词：双亲媒性分子、脂类单分子层、磷脂双分子层、膜

的内在蛋白质和外在蛋白质.

•实验三蛋白质浓度的测定（1）——Folin-酚法

一、实验目的

学习Folin-酚法的原理及方法，制备标准曲线，测定未知样品中蛋白质含量。

二、实验内容

制备Folin-酚法标准曲线，测定未知样品蛋白质浓度。

三.实验过程

1.制备Folin-酚法标准曲线

2.测定未知样品蛋白质浓度

3. 计算

四.作业与思考

1.Folin-酚法测定蛋白的原理是什么？

2.有哪些因素可以干扰Folin-酚测定蛋白含量？

3.作为标准蛋白的牛血清清蛋白或酪蛋白在应用时有何要求？

•实验四蛋白质浓度测定（2）——紫外线吸收法

一、实验目的

学习紫外线（UV）吸收法测定蛋白质含量的原理，了解紫外分光光度计的构造原理，掌握它的使用方法。

二、实验内容

标准曲线的绘制及未知浓度蛋白质溶液的测定。

三.实验过程

1.标准曲线的绘制

2.样品测定

四.作业与思考

1.本法与其它测定蛋白质含量法相比，有哪些优点？

2.若样品中含有干扰测定的杂质，应如何校正实验结果？

•实验五氨基酸的分离与鉴定——滤纸层析法

一、实验目的

了解氨基酸滤纸层析的原理及操作方法。

二、实验内容

进行氨基酸的纸层析及定性鉴定。

三.实验过程

1.滤纸的剪裁

2.点样

3.展层

4.定性鉴定

5.定量测定

四.作业与思考

1.做好本实验的关键是什么？

2.实验操作过程，为何不能用手接触滤纸？

制的因素有哪些？

3.影响R

f

•实验六血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳

一、实验目的

了解电泳的一般原理，掌握醋酸纤维素薄膜电泳操作技术，测定人血清中各种蛋白质的相对百分含量。

二、实验内容

进行血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳并进行结果判断。

三.实验过程

1.仪器与薄膜的准备

2.点样

3.电泳

4.染色与漂洗

5.透明

6.结果判断与定量

四.作业与思考

1.根据人血清中血清蛋白各组分等电点，如何估计它们在pH8.6的巴比

妥—巴比妥钠电解缓冲液中移动的相对位置

2.简述醋酸纤维素薄膜电泳原理及优点

•实验七蛋白质和氨基酸的呈色反应

一、实验目的

学习常用的鉴定蛋白质氨基酸的方法及其原理；学习几种特定氨基酸的特殊颜色反应及其原理。

二、实验内容

双缩脲反应、茚三酮反应、黄色反应、茚三酮反应。

三.实验过程

1.加样

2.观察

四.作业与思考

1.综合分析、对比蛋白质和氨基酸各种鉴定方法的特点和用途？

2.如果蛋白质水解作用一直进行到双缩脲反应呈阴性结果，能对此作

何结论？

3.茚三酮反应的阳性结果是否是同一色调？若不是，为什么？

•实验八蛋白质的沉淀、变性反应

一、实验目的

了解蛋白质的沉淀反应、变性作用和凝固作用的原理及它们的相互关系；学习盐析和透析等生物化学的操作技术。

二、实验内容

可逆沉淀反应，不可逆沉淀反应。

三.实验过程

1.蛋白质的可逆沉淀反应—蛋白质的盐析作用

2.蛋白质的不可逆沉淀反应

（1）重金属沉淀蛋白质

（2）有机酸沉淀蛋白质

（3）无机酸沉淀蛋白质

（4）加热沉淀蛋白质

3.蛋白质可逆沉淀与不可逆沉淀的比较

四.作业与思考