小鼠体外受精的影响因素

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的验 证 。 111 c ry .. —n b对小 鼠 I F的影 响 V
徐 平 等 (0 4年 ) 验 中还 观察 到 , 子 的复 苏 20 实 精
率 与 I F的受 精 率无 直 接关 系 , 冻 方 法对 小 鼠精 V 冷 子 受精 能 力 的影 响 比精子 的活 力更 高 , 但是 据 史 晓 萍 等 ( 0 6年 ) 究 报道 , 鼠新 鲜 精子 的受 精 率 略 20 研 小 高 于冷 冻 复苏精 子 的受 精率 。 陆晔 等 (0 3年 ) 而 20 研
化 学 的方 法 发 现 在 小 鼠的精 子 上 有 E b 的存 在 , rB
方面 , 即精 子 、 子和 培养 液 。 文将 这些 因素予 以 卵 本
进 行 系统 的总 结 。
1 精 子 因素
c eb O N — rB AS D s能 呈 剂 量 依 赖方 式 抑 制 小 鼠体 外
寡 脱 氧 核 苷 酸 能 呈 剂 量 依 赖 方 式 抑 制 小 鼠 体 外 受 收稿 日期 :0 0 0 — 4 2 1— 7 1
作 者 简 介 : 秀 娟 (9 0 , , 师 。 孙 18 一)女 讲
伤也 存 在 于精 子 头 背部 的前 面质 膜 . 体 反 应所 需 顶
蛋 白正 是 在精 子 头 部 的 喙部 表达 。 而且 小 鼠冻 融精
例 则 是 11 :。小 鼠体 外 受 精 时精 卵 比例 范 围变 动较
对体外 受精 确有影 响 , 且排 卵后 3 4 体外受 精 的 ~ h为 最佳 时间 。
23 去 卵丘 和 透明 带外对 小 鼠 I F的影响 _ V
大, 有报道 为 1 0 — 00 01 有时也 可为 5 01 体 00 0 2 0 :, 0 :。
受精 , 同时 伴 有 精 子 细 胞 上 Eb 蛋 白免 疫 组 化 并 rB
染 色积 分 光 密 度 的 下 降 , 无 义 ttO N 而 a D s由 于 与 c eb 因无互 补序列 , - rB 基 未观察到类似 的作 用 。这表 明 c eb 受精关 系密 切 , 作用 是序列 特异 性和 — rB 与 此
个 / L的范 围内都 能获得 较 高 的受 精率 。 m
B t (0 3 ) ah ML 2 0 年 研究表 明 , 仅需去 除不动精子 ,
吴红 等 (0 2年 ) 卵 丘 细 胞 卵 的受 精 率极 显 20 去 著低 于 卵丘 卵母 细胞 复 合体 的受 精率 ; 切割 透 明带 卵 的受 精 率 均极 显 著高 于 去卵 丘 细胞 卵 的受 精率 ; C 一 、6 F D 1B D 1切割 透 明带卵 的受 精率 与其 卵 丘 卵母 细胞 复合体 的受 精率差异均不 显著 , C 7 I6小 鼠 而 5 BJ 切割 透 明带 卵 的受精 率极 显著 高 于直接 法 的卵 丘卵 母 细胞 复合 体 的受 精率 。乌 日琴 等 (0 1年 ) 道 , 20 报 卵丘卵母 细胞 ( O ) C C 较裸卵 ( O) D 的体外成熟率 、 体外 受 精率 都低 。
外 受 精 时 常用 的精 子 浓 度 与 动 物 种 类 有 很 大 的关
系 , 子 密 度 过 高 会 引 起 多 精 子 受 精 , 低 则 受 精 精 过 率 下 降 。 rsr Fae 等认 为 , 鼠精子 I F时 的精 卵 比为 小 V 4 71 最 佳 精 子 浓度 为 3 1 m , 25 9 x 0 1 :,  ̄ 0 个/ L 在 。~ 0 1
Ke y wor ds: w b e dpo; p o u t ep roma c Co re lt Re rd ci efr n e v

3 8・
卞 奶 ・ 1・ 科技 圈 斗2 14 0 ・
细胞 , 受 精率 效果 较 好 , 精率 (02 6 .%) 其 受 6 .%、 1 6 显 著 高于 1 h取 卵 的受精率 ( I 。 7 5 %) 张嘉保 等认 为 , 昆
电镜 观 察 发 现 , 子 冷 冻 后 顶 体 出 现 畸 变 , 时损 精 同
吴凌 峰 等 ( 0 5年 ) 用 免疫 组 织 化 学 方 法 观 20 采 察 My b转 录因子 家族成 员 cmy - b蛋 白在小 鼠精 子 和 卵母 细胞 一 丘 复合 物 中 的分 布 。结 果 发 现 ,— y 卵 cm b
小 鼠作 为 一 种最 常 用 的 实 验 动物 , 然 是人 们 仍
精率 , 表 明 c m b与受 精关 系密 切, 作用 是 序列 这 —y 此
特异 性 和剂 量依 赖性 的。 11 E b 小 鼠 I F的影 响 .. 2 rB 对 V
研 究 中首 选 的一 种 动 物模 型 。小 鼠体 外 受 精 (V I F)
中 奶 21・ 科技 圈 斗・ 14 0 ・
・7・ 3
小 鼠体外受精的影响因素
孙秀娟
(. 1东北 农 业大 学 动物科 技 学院 , 尔滨 1 0 3 ;. 龙江 农垦科 技 职业 学院 , 尔滨 10 3 ) 哈 5 0 0 2黑 哈 5 4 1
中图分 类号 : 8 44 文献 标 识码 : 文 章 编号 :0 4 4 6 (0 10 — 0 70 ¥ 1. A 10 — 2 4 2 1 )4 0 3 — 3
究 对 相 同年 龄 5个 不 同 品 系 的小 鼠进 行 精 子 冷 冻
实 验 , 现 I F受 精 率 较 新 鲜 精 子 都 有 明显 下 降 。 发 V 总结 起来说 , 鼠 IF受精率 较新鲜精 子都 有下 降。 小 V
N si n 等 (0 4年 ) 过 扫 描 电镜 和透 射 i z oH ho 20 通
技 术 是 研究 受 精 生 理 的重 要 手 段 , 鼠体 外受 精 己 小
经 是一 项较 为 成熟 的技 术 。影 响小 鼠体 外受 精 的 因
素 很 多 , 很 复 杂 , 总 结 起 来 可 以 分 为 三 个 大 的 也 但
钟 志胜 (0 3年 ) 20 等报 道 。 实验 中用 免 疫组 织 在
前 的 卵 。吴 红等 研 究发 现 C 一 小 鼠的最佳 取 卵时 D 1
间是注 射 H G后 1 h C 5 。马 玉芳 等研 究 发现 , 鼠正 小 常排 卵后 1 5 ( 1 %一 1 %) — h 6 . 9 . 的受 精 率 极 显 著 高 9 8 于排 卵 0 (.%) 6 (0%) h 00 和 h 4 . 的受 精 率 , 卵 3 5 排 —h 的受 精 率 显 著 高 于排 卵 1 2 ~ h的受 精 率 , 说 明小 这
剂 量依 赖性 的。
1 . 精 子 冷冻 对 小鼠 I F的影 响 2 V
11 精 子遗 传 因素 对 小鼠 I F的影 响 . V
最 近 的一 些 研 究结 果 表 明 . 子携 带 的遗 传 信 精
息 也 会 对 小 鼠 I F和 胚 胎 发 育 产 生 一 定 的 影 响 。 V N k g t(0 0年 ) a aaa 2 0 和陆 哗 等 ( 0 3年 ) 研究 表 明 , 20 的 不 同遗 传 背 景 小 鼠冻 融 精 子 的体 外 受 精 率 不 同 。 陈 悦 洲 (0 5年 ) 两 只 公 鼠的 精 子 进行 体外 受 精 20 用 试验 , 得到结 果表 明两 只公 鼠受精率 差异 显著 。赵丹 凤 等 (0 6年 ) 究 的认 为 , 于体 外受 精 率 的结果 20 研 对 是 否 受 精 子 遗 传 背 景 的不 同 而 变 化 还 需 要 进 一 步
白小 鼠采卵 时 间最 好在 注射 HC G后 1 — 8 。唐 一 4 1h
明 , 融 精 子线 粒体 的缺 陷可 能 与精 子 受 精 能力 和 冻
快 速前 进运 动能 力 的丧失 密切 相关 。小 鼠冻融 精子 受 精 能力 低 是 由 于冷 冻 和解 冻 过 程 中头 部 及 尾 部
的损 伤所 引起 的 。 成 了精 子顶 体 的损 伤及 顶 体 内 造
容 物 的 丢 失 , 以 至 于 冻 融 精 子 不 能 发 生 顶 体 反 应, 无法 穿透 卵子 透 明带 。因为线 粒体 的损 伤 , 鼠 小 的 冻融 精子 也 丧 失 了受 精所 需 的基 本 活 力 。 因而 ,
子 的 线 粒 体 形 态 异 常 ( 胀 、 分 嵴 缺 失 ) 由此 说 肿 部 ,
b u e s mmaie sfl ws h O re ig ae Sa n a o c pin rt s 8 .% ,c lig itra s4 70  ̄ .6 ,p sp r m r d a ol :te C W be dn ra’ n u lc n e t ae i 30 z o o avn nev li 2 .0 33 d otat u
在 冷冻过 程 中 , 鼠精 子丧 失 了受精 能力 。 小
13 精 子 密 度 对 小 鼠 I F的 影 响 . V
岷 (0 3年 ) 20 等人 研究 表 明 , 鼠在 注射 H G后 1 h 小 C 4 取 卵最 好 , 外 受精 率 显 著 高 于 1 h以后 和 1h以 体 5 2
鼠卵母 细胞 排 卵后 l 2 一 h基 本 成熟 ,~ h完 全成 熟 , 34 排卵 5 h后 则开 始退 化 。说 明不 同卵 龄 的卵 母 细胞
哺乳 动物 正 常交 配 时 , 性一 次射 出的精 子 很 雄
多 。 性小 鼠一 次 可 以射 出约 5 17 雄  ̄ 0 个精 子 , 是到 但 达 输 卵 管壶 腹 部 的只有 10 2 0个 , 精 时精 卵 比 0 ~0 受
w mb b c s n i s3 .4 I7 d i 0 7 2 0 o a k wi g t me i 9 9 _ . 2 n 2 0 - 0 9;t e mo b d t fb a ay e f rt e c i b rh a tr i h a e u a l o d e s + h r i i o e p r l s d at hl i , f b r r n b e t r s , y e h d t e t e d me r i n h t l o n f eu a e t e te d g i g d wn y a y y a ,b tma t i n i o fd s a e mo b d t su h n o t t a d t e si b r o t sh v h r n on o e r b e r u si sa d l is l t mb h o ie s r i i a s me t e y t n sn , n h r ii fatr i h a e u a l o d e s ma t i, h mb i n rf m s s o c i g a d l o fd s a e ae r d r i g a d t e mo b d t o e b r r n b e t r s , si s t e wo n e l i c r h n n i e i y f t t i mb h o ie s r h g e , ih afc e h c n mi r f f h o r e ig a e e o s . ih r wh c e t d t e e o o cp o t e c wb e d n r a s r u l f i ot i y
24 卵母 细胞 冷 冻 对 小 鼠 I F的 影 响 . V
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