1表达谱芯片

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康成生物全基因组表达谱芯片技术服务

康成生物为您提供全基因组表达谱芯片技术服务,您只需要提供保存完好的组织或细胞标本,康成的芯片技术服务人员就可为您完成全部实验操作,并提供完整的实验报告。根据您的需要您可选择不同厂家提供的全基因组表达谱芯片,包括Phalanx,Agilent 和 NimbleGen。

Phalanx全基因组表达谱芯片

华联生物科技开发的标准规格的高密度基因组芯片 (Phalanx Whole Genome Microarray)在开发过程中透过台湾工业技术研究院与英国Sanger Institute等国外权威研究机构合作,从设计到生产再到实验的各个步骤中均执行严格标准,采用创新技术,广泛吸收现有芯片的优点,使得其生产的高密度基因组芯片获得了优异的国际品质。康成生物为您提供华联生物高密度基因组芯片及全程技术服务。

●Phalanx Slide TM 专利片基处理技术

华联生物的高密度基因组芯片,探针设计采用台湾工业技术研究院特有探针设计软件平台(Integrated Massive Probes Optimal Recognition Tool,IMPORT)。在芯片的制作过程中,华联生物应用表面化学专利技术(PhalanxSlide TM Technology)对片基表面进行处理,使得片基与寡核苷酸探针的亲和活力更高,背景噪音更低,点阵的均一性更强。

●高速的PhalanxArray探针布放技术

华联生物在点样过程中,采用非接触式基因探针布放技术,并以方阵基因探针高速布放技术 (PhalanxArray Technology)之优势,大量生产。PhalanxArray 同时使用196个排列整齐的PhalanxJets,在一张芯片上布放39,200个均一的探针。PhalanxArray能够布放多达1,000,000张高密度芯片,布放效率和产量是目前市场上一般芯片布放系统的100倍。

●先进的PhalanxJet TM专利点样技术

华联生物开发出独特的PhalanxJet TM系统,结合其先进的非接触式基因探针布放技术和专利的片基处理技术,保证了探针布放的高重复性。尤其重要的是,PhalanxJet TM系统可以最大限度的避免探针布放中可能的探针交叉污染。每个单独的PhalanxJet TM包含200个独立的点样针,分别对应不同的探针,在布放时彼此独立,不会相互干扰。

●严谨的检测探针和控制探针设计

华联生物的的高密度基因组芯片,寡核苷酸探针均经过严格筛选,能特异性检测数据库中的基因,灵敏度高,特异性强。人类基因组表达谱芯片,探针信息主要基于数据库UniGene V.175版,同时整合了各大重要数据库信息。小鼠基因组表达谱芯片,探针信息基于数据库MEEBO (Mouse Exonic Evidence Based Oligonucleotide)。

华联生物的高密度基因组芯片,实验控制探针设计严谨,包括GAM,OGAM,CGAMs,IHCs,ITQC,ETQC等等,并且还采用了多家公司已经设计好的芯片检测探针,如SpotReport Oligo Array 验证系统,Stratagene 的Alien Oligo Array 验证系统,以及Ambion 公司的ArrayControl Sense Oligo Spots 系统等等,从而全面检测样品质量,杂交反应效果,标记反应效果等。使得芯片质量与实验效果得到双重保障。

●生物芯片质量评估标准MAQC规范

依据美国食品药物管理局(FDA)与国际上主要生物芯片企业协商制定的生物芯片质量评估标准MAQC计划规范,华联全基因组表达谱芯片各项指标,包括检出率,再现率,重复性和准确性,均达到或者超过国际先进水平。

●实验全过程反复优化,采用多种独特技术

华联生物的高密度基因组芯片在杂交步骤中采用了独特的热收缩杂交袋,将芯片固定在杂交袋内,在杂交液一定的情况下,有效的提高杂交反应的均一性,从而提升杂交效率,增进杂交效果,使实验结果的准确性和可靠性大大提高。在实验中,康成生物基于华联生物提供的实验条件进一步优化改进。康成生物对RNA样品的质量要求更加严格,在采用Trizol的方法进行RNA抽提后,进一步用DNase消化DNA,并采用Qiagen纯化柱对RNA进行纯化,探针标记和杂交则严格按照华联生物的要求。芯片检测采用先进的GenePix 4000B荧光检测系统以保证优质的实验结果。

Agilent全基因组表达谱芯片

Agilent公司的原位喷墨专利技术(SurePrint)可以实现在1"x 3"的玻璃片基上灵活地、大规模地原位合成60mer的寡核苷酸探针,该技术可以很快很灵活地响应并实现最新的芯片探针设计方案,使研究者及时得到高质量的、最新的芯片,作为研究基因表达变化的利器。

每个芯片探针的设计除了经过软件考虑其Tm、二级结构、序列特异性等之外,还都要经反复实验筛选优化以得到灵敏度和精确度更高、重复性更好的结果。2006年美国FDA发表的现主流芯片平台评估报告MAQC中,Agilent array 的结果与 Taqman array 结果的重复性最高。在国际论文期刊上,也有很多利用Agilent array 平台发表的高质量文章,具体请参阅Agilent 网站。

目前提供的芯片有人、小鼠、大鼠的全基因组表达芯片,每个物种覆盖的基因超过41000个,探针设计综合参考了各种公共数据库,是经过实验验证的经典设计方案。

Agilent Design ID Array format Genes coverage Database source

Whole human genome 14850 4 x 44K ~41,000 Goldenpath, Ensembl, Unigene, Human Genome (Build 33), Refseq, GebBank

whole mouse genome 14868 4 x 44K ~41,000 USC mRNA known genes, Natl. Institute on Aging, Genbank, Unigene, Refseq, Ensembl, RIKEN

whole rat genome 14879 4 x 44K ~41,000 Ensembl, UCSC Goldenpath, Unigene, Refseq, Genbank

Agilent 芯片技术示意图

A. 客户提供实验组(Exp)、对照组(Control)样本或Total RNA;

B. 使用Nanodrop测定RNA 在分光光度计260nm 、280nm和230nm的吸收值,以计算浓度并评估纯度;

C. cDNA放大及荧光标记,实验组(Cy5),对照组(Cy3);

D. 进行芯片杂交及洗脱等步骤;

E. 进行图像扫描及数据分析。

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