杀菌剂的毒力测定和.
09第二章 第三节 杀菌剂的生物测定方法
水溶性药剂、乳油稀释液或稳定的悬浮液（胶悬剂的稀释液）可用此
法，而WP由于是悬浮性差，不宜采用。 优点：操作简单迅速，无需特殊设备
缺点：药剂和孢子始终充分接触，与病害防治的实际相差很大，测得
的毒力往往偏高。
第二章 杀菌剂生物测定
第三节 杀菌剂的生物测定方法
二、杀菌剂温室植株测定方法
针刺法测定农药对番茄灰霉病防治效果的活体试验
二、杀菌剂温室植株测定方法
对照（3d）
40%多菌灵WP1500×（3d）
一种植物精油1000×
针刺法测定农药对番茄灰霉病防治效果的活体试验
二、杀菌剂温室植株测定方法
盆栽法测定农药对小麦白粉病的防治效果
二、杀菌剂温室植株测定方法
第二章 杀菌剂生物测定
第三节 杀菌剂的生物测定方法
一、杀菌剂皿内生物测定 （一）孢子萌发法
3、孢子悬浮液的准备
菌种
无菌水，搅匀
菌种悬浮液
二层纱布过滤 除去菌丝体及破碎培养基
离心 无菌水洗
洗净的孢子
调至浓度5000个/mL（10×10倍，35个孢子）
Байду номын сангаас
第二章 杀菌剂生物测定
第三节 杀菌剂的生物测定方法
第二章 杀菌剂生物测定
第三节 杀菌剂的生物测定方法
一、杀菌剂皿内生物测定 （一）孢子萌发法
3、孢子悬浮液的准备
菌种应是标准菌种，供试菌种应符合以下条件： ①菌种纯粹，在一般培养基上易大量产生孢子； ②多代繁殖不易产生变异； ③孢子个体较大，易于在显微镜下观察萌发情况；
④在分类上有一定的代表性，而且是重要的植物病害病原菌。
2、生长速率法
杀菌剂咯菌腈对根腐病的室内毒力测定和田间防治效果
试验 大豆试验于 ２０２０年 ５月中旬至 ７月底在江 苏省徐州市睢宁县双沟镇陈王村进行。露天种植， 土壤为沙壤土，肥力水平中等。试验共设 ６个处理， 其中 ２５ｇ／Ｌ咯菌腈悬浮种衣剂设置 ３个用量处理， 分别为 ２００、４００、６００ｇ／１００ｋｇ种子；３５０ｇ／Ｌ精甲霜 灵种子处理乳剂和 ３０ｇ／Ｌ苯醚甲环唑悬浮种衣剂 按照 常 规 使 用 剂 量 各 设 １个 处 理，分 别 为 ８０、 ５００ｇ／１００ｋｇ种子。另设 １个空白对照。于 ２０２０年 ５月 １８日大豆播种前拌种包衣，晾干后进行播种。 随机区组排列，每个小区面积为 ２５ｍ２，重复 ４次， 共计 ２４个小区。按照 ６７．５ｋｇ／ｈｍ２ 的播种量进行 人工点播，行距为 ５０ｃｍ，株距为 １０ｃｍ。各小区大 豆长势较好且均匀一致，肥水管理及病虫害防治按 常规进行，试验期间不再施用其他防治大豆根腐病 的药剂。
菌丝生长平均抑制率 ＝（对照菌落直径 －处理 菌饼直径）／（对照菌落直径 －５ｍｍ）×１００％。
将菌丝生长抑制率转换成几率值，将药剂浓度 换算成对数值，以几率值为毒力回归方程应变量 ｙ， 药剂浓度对数值为毒力回归方程自变量 ｘ，计算毒 力回归方程和各药剂的 ＥＣ５０。 １．２．３ 咯菌腈对大豆根腐病和花生根腐病的防治
娄天成１，左 杨２，张心宁３，余文杰１，２，孙 凯２，刘永锋２，刘邮洲１，２
（１．南京农业大学植物保护学院，江苏南京 ２１００９５；２．江苏省农业科学院植物保护研究所，江苏南京 ２１００１４； ３．江苏省徐州市睢宁县农业农村局，江苏睢宁 ２２１２００）
摘要：根腐病是生产中的一种重要的土传真菌病害，为明确药剂咯菌腈对根腐病的防效，给生产上提供合理有效 的用药方案。采用室内离体试验和田间小区试验相结合的方式，进行 ２５ｇ／Ｌ咯菌腈悬浮种衣剂对根腐病的室内毒力 测定和田间防效试验。结果表明，咯菌腈对病原菌立枯丝核菌（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａｓｏｌａｎｉ）和高粱镰孢菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ａｎｄｉｙａｚｉ） 菌丝生长的抑制作用较强，对禾谷镰孢菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ）和尖孢镰孢菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍｏｘｙｐｏｒｕｍ）菌丝生长的抑制 作用次之，对层出镰孢菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ）菌丝生长无抑制作用。在 ２５ｇ／Ｌ咯菌腈悬浮种衣剂按照使用剂量 ２００、 ４００、６００ｇ／１００ｋｇ种子进行大豆根腐病的防治试验中，出苗后 １０ｄ，对大豆根腐病的防效为 ７５６０％ ～９０．５８％；出苗 后 ３０ｄ，对大豆根腐病的防效为 ６９．６１％ ～８４．４３％；出苗后 ６０ｄ，对大豆根腐病的防效为 ５８３７％ ～７５．３１％。随着用 量的增加防效显著提高，在 ０．０５水平上，３个剂量的处理防效具有显著差异。在 ２５ｇ／Ｌ咯菌腈悬浮种衣剂进行花生 根腐病防治试验中，出苗后 １０ｄ，咯菌腈低、中、高 ３个使用剂量对花生根腐病的防效为 ６１．２６％ ～８３．７９％；出苗后 ３０ｄ， 对花生根腐病的防效为 ５６．１８％ ～７９．３０％；出苗后 ６０ｄ，对花生根腐病的防效为 ４９．７６％ ～６９７８％，在 ０．０５水平上，３ 个剂量的处理防效具有显著差异。此外，对照药剂 ３５０ｇ／Ｌ精甲霜灵种子处理乳剂的平均防效与咯菌腈低剂量防效 相当，３０ｇ／Ｌ苯醚甲环唑悬浮种衣剂的防效与咯菌腈中剂量防效相当。结果表明，２５ｇ／Ｌ咯菌腈悬浮种衣剂能有效防 治大豆根腐病和花生根腐病，随着时间的推移，其防效呈逐渐下降趋势。 关键词：根腐病；咯菌腈；抑制作用；田间防效；悬浮种衣剂；毒力测定 中图分类号：Ｓ４８２．２ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００２－１３０２（２０２１）１１－００８０－０５
29种常用杀菌剂对番茄枯萎病菌和青枯病菌的室内毒力测定
29种常用杀菌剂对番茄枯萎病菌和青枯病菌的室内毒力测定摘要：在实验室内，采用菌丝生长速率法测定了29种杀菌剂对番茄枯萎病菌的抑菌效果，采用纸碟法测定了29种杀菌剂对番茄青枯病菌的抑菌效果。
结果表明，有10种杀菌剂对番茄枯萎病菌的毒力较强（Ec50值相对抑制率计算公式如下：抑菌率=对照菌落直径-处理菌落直径对照菌落直径-菌饼直径×100%。
1.2.2杀菌剂对番茄青枯病菌的毒力测定方法菌液的制备：将番茄青枯病菌在LB斜面上活化，移入50mLLB培养液中，在28℃下振荡（150r/min）培养过夜。
用无菌水将番茄青枯病菌菌液稀释至浓度约为106cFU/mL，备用。
纸碟测定方法参照文献[12-15]：将29种杀菌剂分别制成浓度为1000、100、10、1mg/L，吸取20μL在LB平板中央，每处理重复3皿。
设清水对照。
用上述番茄青枯病菌稀释液（106cFU/mL）喷雾后，28℃培养过夜，调查抑菌圈直径，计算相对抑制率。
应用Excel软件处理系统求出各单剂毒力回归方程、Ec50值及相关系数。
2结果与分析2.1杀菌剂对番茄枯萎病菌的毒力测定采用菌丝生长速率法测定了29种杀菌剂对番茄枯萎病菌的抑菌效果。
2.2杀菌剂对番茄青枯病菌的毒力测定采用纸碟法测定了29种杀菌剂对番茄青枯病菌的抑菌效果。
结果表明，有3种杀菌剂对番茄青枯病菌有较强的毒力，其Ec50值均小于10mg/L（表3、图2），其中3%中生菌素的毒力最强，Ec50值为3.3742mg/L。
其余26种杀菌剂对番茄青枯病菌不表现毒力。
表33种杀菌剂对番茄青枯病菌的室内毒力测定结果药剂名称毒力回归方程相关系数（r）Ec50（mg/L）3%中生菌素y=7.10x+1.250.96823.374280%代森锰锌y=5.58x+0.830.97565.58872%春雷霉素y=4.11x+1.210.94198.35873结论与讨论番茄具有较高的营养价值，深受广大消费者的喜爱。
十种杀菌剂对李细菌性穿孔病的毒力测定与药效试验
危害引起人 们 的重视 ， 过几年 控制 ， 病 在辽 宁逐 渐 经 该
趋于平缓 。进 入 ２ 纪 ， 随 以布朗李 为 代表 的 国外 Ｏ世 伴
李品种在 国内的引种热潮 ， 李细 菌性穿孔病 在国 内李树 栽培 区又卷土重来 。严重影 响李 树栽培 的经济效益 ， 成 为生产上迫 切需要 解决 的病 害 。化学 防治 是控 制李 细 菌性穿孔病流行的主要措施之 一 ， 对生产 上控制植物 针 细菌性病害的化学药剂相 对较少 的情况 ， 对近 年来 各地 报道的对细菌性病 害有效 的 １ Ｏ种药剂 进行 了毒力 测定
间药效试验结果基本 一致 ， 治效果依 次为 ５ 福 美双 可 湿性粉 剂 、２ 防 Ｏ ７ ％农 用链 霉 素可溶性 粉
剂 、 酸阿米卡 星注射液 、 酸庆大霉素注射 液和 ８ 宁南霉素水剂 。不 同厂 家生产 的 ７ 农 用 硫 硫 ２
链 霉素可溶性粉 剂的抑 菌和 防治效果差异显著。
分别为 ０ １ ５６ ０ １～１ 、 １ 个 。 、－ 、～１ 、１ ５＞ ６
及 田间药效试验 ， 以期筛选 出对李细 菌性 穿孑 病 防治效 Ｌ
果较好的药剂 。
２ 结 果与分 析
２ １ 室 内毒 力 测 定 ．
１ 材 料 与 方 法
１１ 供试 药剂Biblioteka ．参试的 １ Ｏ种药剂对李 细菌性穿孔病的室 内毒力测 定结果见表 １ Ｏ 福美双可湿性粉剂 １ ０ 倍液 、２ 。５ ０ ０ ７
进行 喷雾处理 ， 以喷清水为对照 ， ４ 每 株李树为 ｌ 区， 小 ４ 次重复 ， 随机排列 ， 验地 边留 ２ 试 行树为保护行 。８月 １ ５ 日每株树按不 同方位根据结果量 随机调查果实 ５ ￣１０ ０ ０ 个， 叶片 ２０片 ， ０ 统计病果 率和 叶片 病情指 数 ， 用方差分 析进行 比较 。叶片病情分为 ：、 、、 、 级 ， 叶病斑数 ０ ｌ ２３ ４ 单
杀菌剂的毒力测定和
但近代随着新型内吸杀菌剂的发展，对杀菌剂的生物筛选
逐渐由经典的离体筛选趋向活体筛选。 因为它不仅模拟田间实际，同时可以防止那些在离体平板 上无效，而必须在植物活体上方显示活性的化合物漏筛。 但活体筛选涉及的因素较多，对寄主植物、试验条件要求
较高，如光照、湿度、温度，为控制病原菌与寄主相互作用的
条件，必须有适合的温室，费工耗资都较大。 离体测定能反映化合物毒力的本质和程度，方法简便，为 研制新农药不可缺少，但它存在有一点缺点，应该和温室活体 的盆栽试验结合起来。
过试验确定其药效的好坏，经济效益的高低，
也就是说，田间试验是确定一种药剂在生产 上有无实用价值的主要方法。 田间实验的具体方法可参考《农药药效 试验的设计与分析》一书，防治效果可用以 下公式计算。
一，活性效应显现较快，缺点是有时与活体测
定结果不一致，有时会漏筛或误筛，如用粉锈
宁处理大麦白粉病菌，离体测定不仅分生孢子
能萌发且能形成吸器，但此药在活体上却表现
高效。所以初筛手段不采用平板法，采用盆栽
法，即病原---寄主植物组合法。
2．盆栽方法
在温室内进行的，具体方法随各种不同病害
而异，例：小麦赤霉病采用分生孢子 --- 幼苗
抑制百分率=50%，机率值=5
将 5 代入回归方程，然后求其反对数，即
LD-P-Line（剂量对数---机率值直线）。
ED50 可以作为多种药剂对同一病菌等效剂 量的毒力比较，在一定的范围内可以用它来 衡量一种药剂对病原菌毒力的大小，但不能 做为田间防治的实际指标。
三、田间试验
室内筛选的药剂必须进行田间试验，通
（3）生长速率测定法
即在琼脂培养基中加入药液，冷凝后接
菌的方法，用木塞钻孔器切取正常培养基上
杀菌剂的毒力测定方法
生长速率测定法注意事项：
1）带毒培养基的制作
应先加药液再加培养基（1：9）； 对一些受热易分解的药剂则要待培养基 冷却到50度左右时再加入。
2）接种病原菌
如果是菌丝接种，打孔制作菌饼时 取材要从种菌皿的外缘开始，避免使用 中心区的菌丝。
如果是孢子液接种，用接种针蘸取 孢子液后，在带药培养基上划一直线。
6 扩散法
原理：在已接种的培养基上加少量的 抗菌物质，使其接触培养基和病原菌，经 一定时间培养后，接触部分的周围由于抗 菌物质的扩散，而产生抑菌圈（或抑菌 带），其大小与药剂浓度有关系，以此来 比较杀菌剂的毒力大小。
此法主要用于抗生素的效价测定。
农用抗生素的效价
效价是衡量抗生素有效成份和质量好坏的 一个指标。
药剂抗菌力也即药剂毒力。
5 气体效力测定
原理：有些杀菌剂具有挥发性，且有杀 菌特性，在测定这类杀菌剂毒力时，可将麦 芽汁-琼脂培养基置于皿底内，冷凝后接种病 原菌孢子，然后盖上皿盖并倒过来使底成 “盖”，使盖成“底”，并将杀剂菌剂置于 “底”内，放到适于病菌孢子发芽生长的环 境中培养一定时间后观察。
如：嘧啶胺类化合物在室内，以 100ug/ml对灰霉病菌孢子没有抑制作用； 300ug/ml对菌丝生长也不能抑制； 1ug/ml的浓度在田间使用时，却能很好 的防治灰霉病。
药剂与病菌的作用关系
传统的：以其“毒力”抑制或杀死病菌。一 般是一致的。
病菌
药剂
环境
新类型的杀菌剂：
影响病菌的致病过程； 影响寄主的抗病性；
即在各处理组的调查孢子总数中增加调查 孢子数量，增加的数量根据对照组孢子萌发 率换算出来。
如：CK孢子萌发率达98%时，在调查处理 组时，拟定调查数量为100时，此时就要调查 102个，并对其不萌发孢子数减去2，然后计 算孢子萌发率。
农药学实验报告
实验一波尔多液的配制及质量检验（3学时）一.实验原理波尔多液是用硫酸铜和生石灰配制的天蓝色胶悬状悬浮液，呈碱性，质量好的波尔多液沉降慢，粘附性强。
其有效成分为碱式硫酸铜，CuSO4·XCu(OH)2·YCa(OH)2·ZH2O。
二.实验目的通过实验掌握波尔多液的配制方法，了解原料质量和不同配制方法与波尔多液质量的关系，波尔多液的性质及其防病特点。
三.实验材料1.仪器：250ml烧杯6个，100ml烧杯30个，50ml烧杯3个，50ml、100ml量筒各6个，玻璃棒，温度计，电炉（或水浴锅），电子天平，pH试纸。
2.药品：CuSO4·5H2O，CaO（生石灰）四.实验方法与步骤（一）10％石灰乳的配制称取生石灰10g，放入烧杯中，滴入少量水，使石灰化成粉状，再加入定量的水，配成10％石灰乳100ml。
（二）10％CuSO4溶液的配制称取CuSO4·5H2O13.7g,加少量水使其溶解，然后加定量水配制成10％的硫酸铜溶液100ml。
（三）不同比例波尔多液的配制分别取一定量10％的硫酸铜溶液和10％石灰乳，加水稀释成下表所指定的溶积和浓度，并按表中规定的方法配成波尔多液。
100-1-⨯对照死亡率对照死亡率处理死亡率100⨯每一浓度处理试虫总数死亡虫数五.波尔多液质量检查1.沉降速度观察：将用不同配制方法配成的波尔多液，分别倒入100ml 量筒中，分别静置15min 、30min 、60min 后观察各量筒中波尔多液药粒沉降体积，用量同上的刻度表示。
2.pH 值测定：用1-14的pH 试纸测定波尔多液的pH 值，确定其酸碱性。
六.实验报告将上述实验结果写成实验报告，并对不同方法配制的波尔多液质量进行比较。
实验二 杀虫剂熏蒸作用测定（3学时）一.实验原理杀虫剂熏蒸作用室内毒力测定的基本原理是利用某些杀虫剂具有明显的挥发成有毒气体的性能，让有毒气体经昆虫的气门进入气管、呼吸系统而起毒杀作用。
12种杀菌剂对葡萄灰霉病菌的室内毒力测定
12种杀菌剂对葡萄灰霉病菌的室内毒力测定姜彩鸽;杨小伟;张怡;王国珍;王广录;方治永【摘要】为筛选出对葡萄灰霉病有良好防治效果的杀菌剂,本试验采用菌丝生长速率法和离体叶片法分别测定12种不同作用机制的杀菌剂对葡萄灰霉病菌的室内毒力.结果表明:生物制剂在离体叶片法预防作用试验中的毒力效果远好于治疗作用,可见该种制剂的保护作用更优,适于病前预防.化学药剂在试验中均表现出了较稳定且较强的毒力,尤其是咯菌腈、啶酰菌胺、啶菌恶唑、腐霉利及氟啶胺对葡萄灰霉病菌的抑制作用明显高于其他药剂,可在生产中协调施用.【期刊名称】《宁夏农林科技》【年(卷),期】2017(058)008【总页数】4页(P33-35,封2)【关键词】杀菌剂;葡萄;灰霉病菌;毒力;EG50值【作者】姜彩鸽;杨小伟;张怡;王国珍;王广录;方治永【作者单位】宁夏农林科学院植物保护研究所,宁夏银川 750002;宁夏大学农学院,宁夏银川 750021;宁夏农林科学院植物保护研究所,宁夏银川 750002;宁夏农林科学院植物保护研究所,宁夏银川 750002;御马国际葡萄酒业(宁夏)有限公司,宁夏青铜峡751600;御马国际葡萄酒业(宁夏)有限公司,宁夏青铜峡751600【正文语种】中文【中图分类】S436.631.1葡萄是我国果树中的大树种之一，其产量和栽培面积居世界前列[1]，但葡萄灰霉病已成为葡萄生产中常见、危害最大的病害之一，在我国南方地区和北方温室葡萄生产中发生尤为严重[2]，是制约我国葡萄生产的一大障碍。
灰霉病菌的腐生性强，它可以通过侵染果实、幼苗及贮藏器官等途径导致病害发生，从而造成巨大的经济损失。
虽然有高效杀菌剂和先进的贮藏技术，但每年因灰霉病造成的葡萄产后损失依然高达50%，一般损失在20%～30%[3-4]。
另外，它还给葡萄酒带来不良味感，同时使葡萄酒不耐陈酿，降低葡萄酒的质量[5]。
宁夏贺兰山东麓地区是全国最大的葡萄酒地理标志保护产区，随着葡萄种植面积不断扩大以及单一的生态环境的持续，有害生物的生态适应性也不断提高，葡萄灰霉病已成为宁夏葡萄生产中的主要病害之一。
14种杀菌剂对玉米藤仓镰孢菌室内毒力测定
14种杀菌剂对玉米藤仓镰孢菌室内毒力测定作者：马金慧杨克泽吴之涛崔凌霄任宝仓杨成德高正睿陈志国来源：《山东农业科学》2020年第03期摘要：近年来，由藤仓镰孢菌（Fusarium fujikuroi）引起的玉米茎腐病在甘肃发生危害，造成部分品种植株枯死，严重减产。
为筛选防治玉米藤仓镰孢茎腐病的高效低毒杀菌剂，本研究采用菌丝生长速率法测定14种杀菌剂对藤仓镰孢菌的毒力。
结果表明：10%苯醚甲环唑WG、12.5%戊唑醇EW、75%肟菌·戊唑醇WG和70%丙森锌WP对藤仓镰孢菌菌丝的生长均有较好的抑制作用。
对该菌毒力最强的杀菌剂是12.5%戊唑醇EW，其EC50值为0.0831μg/mL;较强的是10%苯醚甲环唑WG和75%肟菌·戊唑醇WG，其EC50值分别为0.2927μg/mL和0.3914 μg/mL;70%丙森锌WP和75%百菌清WP的毒力相对较强，EC50值分别为0.6404 μg/mL和0.7487 μg/mL;2%春雷霉素AS毒力最弱，EC50 值为45.6161 μg/mL。
玉米藤仓镰孢菌菌丝生长对75%肟菌·戊唑醇WG、0.3%四霉素AS、80%代森锰锌WP和2%春雷霉素AS的敏感性相对较强，对75%百菌清WP、77%氢氧化铜WP和50%烯酰吗啉WG的敏感性较弱。
关键词：玉米茎腐病;藤仓镰孢菌（F.fujikuroi）;生长速率法;毒力测定中图分类号：S482文献标识号：A文章编号：1001-4942（2020）03-0102-05AbstractIn recent years， corn stalk rot caused by Fusarium fujikuroi occurred seriously in Gansu Province， causing some varieties to die and yield-reduction seriously. In order to screen out the high-efficiency and low-toxicity fungicides for field control of corn stalk rot， the toxicity of 14 fungicides to F. fujikuroi was determined by mycelium growth rate method. The results showed that 10% methyloxazole WG， 12.5% tebuconazole EW， 75% oxime bacteria·tebuconazole WG and 70% propineb WP had better inhibitory effects on mycelium growth of F. fujiana，in which，12.5% tebuconazole EW had the strongest toxicity to F.fujikuroi with the EC50 value as 0.0831μg/mL. The toxicity of 10% methyloxazole WG and 75% oxime bacteria·tebuconazole WG was stronger，and the corresponding EC50 values were 0.2927，0.3914 μg/mL， respectively. 70% propineb WP and 75% chlorothalonil WP had relatively stronger toxicity with the EC50 values as 0.6404 and 0.7487μg/mL， respectively，While that of 2% kasugamycin AS was the weakest with the EC50 value as 45.6161 μg/mL. The mycelial growth of F.fujikuroi was relatively sensitive to 75% oxime bacteria·tebuconazole WG， 0.3% tetramycin AS， 80% carmazine WP and 2% kasugamycin AS，but less sensitive to 75% chlorothalonil WP， 77% copper hydroxide WP and 50% dimethomorph WG.KeywordsCorn stalk rot;Fusarium fujikuroi;Growth rate method;Toxicity test玉米是重要的粮饲兼用型作物和工业原料、能源植物[1]，种植范围广，在农业生产和国民经济中占有重要地位。
杀菌剂对合欢枯萎病菌的毒力测定
杀 菌剂
，ｇ ｍ・
菌丝 生长 抑制 菌丝生长 抑制 菌丝 生 抑制
量向ｍ 率助 量向 牢，１ 量向ｍ率 ｍ ；长 ｆ
效果都不错， ２ 第 天的抑制效果明显下降 ； 其余杀菌
剂对合欢枯萎病菌基本上没有抑制效果。
进 一步 开展 大 田防治 提供依 据 。
吸取 ０ Ｌ ．ｍ 预先配制好 的菌悬液加入各培养皿中。 ４
将培养基加热熔化后 ， 待冷却至 ４～ ０ｃ ， ５ ５ ｅ时 迅速倒
入加有菌悬液的培养皿 中， 每皿约 １ Ｌ ５ 培养基 ， ｍ 充 分摇匀后冷却凝 固。然后用无菌水配制各种杀菌剂
欢枯萎病菌种 ， 加入 １ Ｌ ０ 无菌水 ， ｍ 用接种针将菌丝 体挑洗下来 ， 倒人培养皿 中 ， 制成菌悬液 ， 用移液枪
种系统侵染性病害。 植株发病后 ， 常造成枝干局部或 整体干枯死亡，严重影响合欢苗木的繁殖和绿化景 观效果。 为了筛选防治用药 ， 分别采用抑菌圈法和生 长速率法对合欢枯萎病菌进行 了室内毒力测定 ， 为
第３ 卷 第６ ６ 期
２ 年 １ １ ０１ １月
林 业 科 技
Ｆｏ ＲＥＳ ＴＲＹ ＳＣＩ ＥＮＣＥ ＆ ＴＥＣＨ Ｎｏ ＬｏＧ Ｙ
Ｖ０． ６ １ ３ Ｎｏ ６ ． ＮＯ ． ２０ ｌ１ Ｖ
文章编号 ： ０ １ ４９一（ ０ １ ０ １０ —９ ９ ２ １ ） ６—０２ —０ ０３ ３
分率。 抑制醋 。 ％
粉剂 （ 深圳诺普信农化股份有 限公司）７ ％甲基托 ，０
布津可湿性粉剂 （ 江苏龙灯化学有限公司）８％代 ，０ 森锰锌可湿性粉剂（ 南通德斯益农化工有限公司 ） 。
１２ 试 验方 法 ．
２ 结果 与分析
２１ 抑菌圈法测定杀菌剂的抑菌效果 ．
七种杀菌剂对番茄早疫病病原菌室内毒力测定
七种杀菌剂对番茄早疫病病原菌室内毒力测定方案，为番茄早疫病的防治提供科学依据，制定出切实可行的防治措施。
1 材料与方法1.1材料1.1.1供试菌株番茄早疫病病原菌株采集于豫北地区番茄种植大棚中的病果，经组织分离、纯化获得病原菌［10］。
1.1.2试验药剂50%异菌脲（病可丹）可湿性粉剂为山东鑫星农药有限公司生产，50%氯溴异氰尿酸（比秀）可湿性粉剂为以色列海法作用保护有限公司生产，80%丙森锌（好锌泰）水分散粒剂为陕西美邦农药有限公司生产，10%苯醚甲环唑（病可丹）水分散粒剂为山东鑫星农药有限公司生产，50%醚菌酯（信赖）可湿性粉剂为陕西美邦农药有限公司生产，32.8%烷基腈氧基醌（凯银）水分散粒剂、35%腐霉利悬浮剂为宜宾川安高科农药有限责任公司生产。
1.2方法1.2.1杀菌剂单剂毒力测定将7种杀菌剂单剂与PDA培养基充分混匀，配制成0.01、0.05、0.10、0.50、1.00、5.00mg/L系列浓度的平板。
采用菌丝生长速率法测定，用5mm打孔器在培养6d后的番茄早疫病菌平板上打孔，用镊子取菌丝面向下接种在含药PDA培养基上，每皿1个菌碟，28℃倒置培养，以去离子水作为对照组，每个处理设3次重复，于接种后第3天检查菌丝生长情况并用十字交叉法测量菌落生长直径，通过菌丝生长抑制率值和各药剂浓度对数值间的线性回归性进行分析，求出各菌株EC50并计算相对抑菌率。
抑菌率计算方法为每个菌落使用十字交叉法测量2次，取其平均数作为菌落的大小。
计算7种杀菌剂对菌丝生长的抑制百分率，公式如下：菌落增长直径=菌落测量直径-菌盘直径抑菌率=（对照菌落增长直径-含药培养基上菌落增长直径）/对照增长菌落直径x100%[11]以浓度对数为横坐标（x）,相对抑制率几率值为纵坐标（丫），求出各药剂对供试菌株的毒力回归曲线方程y=a+bx、相关系数r与有效抑制浓度（EC50）。
根据EC50分析比较不同杀菌剂对供试病菌菌丝生长的影响[12]。
5种杀菌剂对桃炭疽病菌的毒力测定
中国园艺文摘 2018年第3期5种杀菌剂对桃炭疽病菌的毒力测定胡晓颖，赵 杰（上海市浦东新区农业技术推广中心，上海 201201）摘 要：以桃炭疽病菌为试验菌，采用生长速率法，测定5种杀菌剂对病菌的毒力，结果表明：咪鲜胺锰盐、氟啶胺、多菌灵、苯醚甲环唑和吡唑醚菌酯5种杀菌剂都具有较高的毒力。
咪鲜胺锰盐与氟啶胺的联合毒力测定结果表明：咪鲜胺锰盐和氟啶胺按3∶1和6∶1复配表现为增效作用，咪鲜胺锰盐和氟啶胺按1∶6、1∶3和1∶1复配表现为相加作用。
关键词：杀菌剂；桃炭疽病菌；毒力测定水蜜桃是我国的主要果品之一，也是上海市浦东新区的主要果树，常年种植面积0.2…万余hm2。
桃炭疽病是水蜜桃的主要病害，能侵染桃树枝梢、叶片和果实[1]，在上海市浦东新区以秋季叶片受害最重，造成叶片穿孔或枯焦，严重时导致大量叶片枯死和早落，影响花芽和结果枝充实，从而影响翌年结果产量。
科技工作者在桃树炭疽病菌生物学特性和防治方面开展大量工作[2-5]，但不同地区和寄主存在差异。
本文以当地桃炭疽病菌为试验材料，通过开展杀菌剂的毒力测定，筛选出高效低毒药剂，为防治该病害提供技术参考。
1 材料与方法1.1 供试病菌从浦东新区盛果期桃树病叶上分离获得桃炭疽病菌[Colletotrichum gloeosporioides…(Penz.)…Sacc.]，病菌于PDA培养基上25℃培养5…d后用于毒力测定。
1.2 供试药剂50%咪鲜胺锰盐可湿性粉剂(江苏辉丰农化股份有限公司)、50…g/L氟啶胺悬浮剂(浙江石原金牛农药有限公司)、50%多菌灵悬浮剂（江苏龙灯化学有限公司）、30%吡唑醚菌酯悬浮剂(深圳诺普信农化股份有限公司)、10%苯醚甲环唑水分散粒剂(江苏丰登农药有限公司)。
1.3 试验方法1.3.1 毒力测定方法…采用生长速率法[6]：将以上第一作者简介：胡晓颖(1979-)，女，农艺师；从事作物栽培研究。
通讯作者：赵 杰，硕士，高级农艺师。
3种杀菌剂对葡萄霜霉病菌的毒力测定和田间药效试验共4页文档
3种杀菌剂对葡萄霜霉病菌的毒力测定和田间药效试验收稿日期：2013-05-22基金项目：国家公益性行业（农业）科研专项（编号：201203035）。
1材料与方法1.1供试药剂88%代森锰锌原药、97.4%烯酰吗啉原药和98%嘧菌酯原药均由山东省农业科学院提供。
80%代森锰锌可湿性粉剂（大生-M45）为陶氏益农农业科技（中国）有限公司产品；50%烯酰吗啉可湿性粉剂（安克）为德国巴斯夫贸易股份有限公司产品；25%嘧菌酯悬浮剂（阿米西达）为瑞士先正达作物保护有限公司产品。
1.2室内抑菌活性测定1.2.1孢子悬浮液的配制取田间自然发病的新鲜葡萄病叶，用自来水冲洗净表面的孢子后，将病叶置于25 ℃条件下保湿24 h来培养新鲜的孢子；用干净的毛笔将新鲜孢子刷于无菌蒸馏水中，配成孢子悬浮液；在显微镜下调整孢子悬浮液浓度至5×105 个/mL用于试验测定。
1.2.2接种方法将88%代森锰锌原药依次稀释为800、400、100、50、25 mg/L；97.4%烯酰吗啉原药依次稀释为80、40、20、10、5 mg/L；98%嘧菌酯原药依次稀释为12.5、6.25、3125、1.563、0.781 mg/L。
试验采取叶盘法[3]，将葡萄新枝条上健康无病的4～5位叶片喷洒相应的药液后自然晾干，用打孔器打取直径1 cm的叶盘，叶背面朝上置于铺有无菌湿润滤纸的培养皿中，每皿放置15个叶盘；在叶盘中央滴20 μL孢子悬浮液，置于生物培养箱中培养，培养条件为温度25 ℃、湿度保持在80%左右、光照12 h/d。
对照叶片喷施等量清水，晾干，打取叶盘后滴加等量的菌液。
每处理重复4皿，5～7 d后调查发病情况。
1.2.3统计方法病情调查采用6级记载法[4]，根据病斑面积占叶盘面积的百分率划分病级：0级，无病斑；1级，病斑面积占整个叶面积的5%以下；3级，病斑面积占整个叶面积的6%～25%；5级，病斑面积占整个叶面积的26%～50%；7级，病斑面积占整个叶面积的51%～75%；9级，病斑面积占整个叶面积的75%以上。
6种杀菌剂对马铃薯坏疽病病菌的毒力测定
6种杀菌剂对马铃薯坏疽病病菌的毒力测定王立;惠娜娜;李继平【摘要】为筛选可有效防治马铃薯坏疽病的杀菌剂,采用生长速率法测定了13种杀菌剂对马铃薯坏疽病病菌的抑菌作用,并对入选杀菌剂对坏疽病病菌的毒力进行了测定.结果表明,13种供试杀菌剂中有6种能有效抑制坏疽病病菌,但这6种杀菌剂毒力差异较大.EC50值由小到大依次为10%苯醚甲环唑ME<3%甲霜·噁霉灵(秀苗)AS<40%溴菌腈·多菌灵·福美双(炭息)WP<62.5g/L精甲·咯菌腈(亮盾)FS<68%精甲霜·锰锌(金雷)WP<80%代森锰锌(大生M-45)WP,其中10%苯醚甲环唑ME、3%甲霜·噁霉灵(秀苗)AS、40%溴菌腈·多菌灵·福美双(炭息)WP的EC50值均小于1μg/mL,说明病原菌对这3种杀菌剂更为敏感.该试验为田间防治马铃薯坏疽病提供了科学依据.【期刊名称】《中国马铃薯》【年(卷),期】2017(031)005【总页数】6页(P296-301)【关键词】马铃薯;坏疽病;杀菌剂;毒力测定【作者】王立;惠娜娜;李继平【作者单位】甘肃省农业科学院植物保护研究所,甘肃兰州730070;甘肃省农业科学院植物保护研究所,甘肃兰州730070;甘肃省农业科学院植物保护研究所,甘肃兰州730070【正文语种】中文【中图分类】S532Abstrraacctt::The effectiveness of 13 fungicides in inhibiting Phoma foveata was tested to screen fungicides which can efficiently control Phoma foveata in potato by the mycelium growth rate method and the toxicity of the selected fungicides to the pathogen was studied.The results showed that six out of the 13 fungicides tested could efficiently inhibit Phoma foveata.The toxicity of the six selected fungicides to Phoma foveata varied greatly.Their EC50values in ascending order were asfollows:10%difenoconazole＜3%metalaxyl hymexazol＜40%bromothalonil·carbendazim·thiram ＜62.5 g/L metalaxyl-m·fludioxonil ＜68%metalaxyl-m·mancozeb＜80%mancozeb.EC50values of10%difenoconazole,3%metalaxyl hymexazol and40%bromothalonil·carbendazim·thiram were all lower than 1μg/mL,demenstrating that the pathogen were more sensitive to them.This work may provide scientific basis for field control of Phoma foveata in potato.Key Worrddss::potato;gangrene;fungicide;toxicity test马铃薯是世界第四大粮食作物，甘肃省第三大粮食作物。
5种杀菌剂对山茶枯斑病菌的室内毒力测定
5种杀菌剂对山茶枯斑病菌的室内毒力测定作者：李小霞肖仲久姜仕敏来源：《绿色科技》2017年第03期摘要：为了研究不同药剂对山茶枯斑病菌的毒力作用，对山茶枯斑病的防治提供帮助。
采用生长速率法进行了试验，测定了20%井.唑.多菌灵、75%百菌清、72%农用硫酸链霉素、68%精甲霜.锰锌和35%快克5种药剂在不同浓度下对山茶枯斑病病菌的影响。
结果表明：75%的百菌清对病原菌的抑菌的抑制效果最好，EC50为145.6829 μg/mL；其次是20%井唑多菌灵，EC50为257.9576 μg/mL；35%快克的抑菌效果最差，EC50为13563.7054 μg/mL。
关键词：山茶；枯斑病病菌；杀菌剂；毒力中图分类号：S685文献标识码：A文章编号：16749944（2017）030111021引言山茶（Camellia japonica L.）是山茶花科的常绿灌木，又名曼阳罗树、红茶花等，小乔木或灌木，叶卵形或椭圆形，边有细锯齿，革质，表面亮绿色。
花瓣多，呈圆形，花的颜色多样，花期因品种不同而异。
山茶花具有观赏价值和药用价值[1]。
山茶枯斑病菌，由交链格孢菌（Alternaria alternata）侵染山茶叶片而引起。
病斑症状多发生于叶面，由暗绿色斑纹扩大成不规则大斑，颜色由褐色变为黑色，病斑扩散到整个叶片，从而引起大落叶。
因此本试验通过室内毒力测定方法测定了5种杀菌剂对山茶枯斑病病菌的毒力，旨在为山茶枯斑病病菌的防治提供理论依据。
2材料与方法2.1菌种来源山茶枯斑病样本分别采自贵州遵义桐梓县松坎镇、正安县土坪镇及遵义市区凤凰山、三阁公园，采集有山茶枯斑病典型症状的山茶叶部样本经分离、纯化和致病性鉴定[2]，最终确定是由交链格孢菌（Alternaria alternata）引起的，将其置于4℃的环境下保存备用。
2.2供试药剂毒力测定所采用的5种实验药剂名称、剂型、生产厂家见表1。
2.3试验方法以大田施用浓度为参考值，按有效成分从高浓度到低浓度逐步测试，每种药剂选定5个浓度进行测定，每个处理重复3次，通过预实验得出杀菌剂的浓度梯度如表2。
9种杀菌剂对樟子松枯梢病的室内毒力测定
9种杀菌剂对樟子松枯梢病的室内毒力测定摘要：利用菌丝生长速率法和孢子萌发抑制法，测定了9种杀菌剂对松球壳孢菌的毒力，筛选出有效控制松枯梢病的高效杀菌剂。
主要结果：抑制菌丝生长试验，25%苯醚甲环唑效果最好，对病原菌抑制的ec50值为0.0797mg·l-1，32.5%苯甲+醚菌酯次之；在抑制孢子萌发方面，32.5%苯甲+醚菌酯效果最好，对分生孢子萌发抑制的ec50值为0.0481mg·l-1，25%苯醚甲环唑次之。
综合分析，32.5%苯甲+醚菌酯和25%苯醚甲环唑不但可以抑菌菌丝生长，还可以有效抑制孢子萌发，同传统杀菌剂多菌灵、代森锰锌比较，苯醚甲环唑和醚菌酯等新型杀菌剂更具优势，可以作为防治樟子松枯稍病的备选药剂。
关键词：樟子松枯梢病；无公害杀菌剂；毒力测定中图分类号：s482.2 文献标识码：a 文章编号：1674-0432（2012）-12-0038-2樟子松（pinus sylvestris var mongolica）因具有耐干旱、耐瘠薄、抗寒、速生等生物学特性，而且材质优良，用途广泛，成为用材林、防护林以及绿化的优良树种。
樟子松现已成为三北防护林工程和治沙工程建设的主要造林树种之一[1]。
樟子松枯梢病是由由松球壳孢菌（sphaeropsis sapinea（fr）dyko et sutton）引起的樟子松人工林主要病害[2-5]，在北方地区包括黑龙江、吉林、辽宁以及内蒙古均有发生，随着樟子松人工林面积的逐年扩大，樟子松枯梢病害日趋严重，造成了巨大的经济损失。
对樟子松枯梢病的有效持续控制是当前研究的重点，目前樟子松枯梢病主要以化学防治结合营林措施为主[6-7]，经过多年的研究，形成了有效的防控方法和技术，但是也存在一定的问题，农药品种老旧，病原产生抗药性，以及防治过程中造成的环境污染等一系列问题亟待解决。
本文的主要工作是对高效无公害农药品种进行筛选，以期筛选得到好的农药品种，为樟子松枯梢病的防治提供理论基础。
杀菌剂毒力测定
17
一、杀菌剂毒力测定方法
孢子萌发条件 B、湿度：真菌孢子一般要求在水滴 中才能萌发，但也有少数真菌孢子， 如白粉病菌的分生孢子，在相对湿度 很低的情况下也能萌发。
1.4
18
一、杀菌剂毒力测定方法
孢子萌发条件 C：光照：光照对多数真菌孢子萌发 的影响不大，但对某些真菌孢子有刺 激或抑制作用，如光照可刺激水稻黑 粉病菌厚垣孢子的萌发，抑制小麦秆 锈病菌夏孢子的萌发。
2.
26
Determining fungicide inhibition of pathogen spore germination on concave slides
药剂的配制 水溶性药剂直接用水溶解，其它药剂 选用合适的有机溶剂（甲醇、丙酮、 二甲基亚砜等）溶解，再用0.1%的吐 温80水溶液稀释，设置5~7个浓度， 有机溶剂最终含量不超过2%
4.
28
Determining fungicide inhibition of pathogen spore germination on concave slides
调查 当空白对照孢子萌发率达到90%以上 时，每重复了随机观察3个以上视野， 调查孢子总数不少于200个，分别记 录萌发数和孢子总数。
4
一、杀菌剂毒力测定方法
1、孢子萌发法
(spore germination method) 快速。广泛用于保护剂的测 定 此法适用于抑制病菌能量合 成系统，而使孢子不能萌发 的杀菌剂。
5
一、杀菌剂毒力测定方法
玻璃器皿的处理 清洁：以洗液浸泡数十分钟,用自来水 冲洗, 用蒸馏水清洗,防尘干燥. 载玻片保存于70%的酒精溶液内.
多菌灵对镰刀菌及由镰刀菌引起的赤
10种杀菌剂对杨树锈病室内毒力测定及田间药效试验
10种杀菌剂对杨树锈病室内毒力测定及田间药效试验刘宝生;白鹏华;冯友仁;张立强;孟丽慧;张绍青【摘要】室内10种杀菌剂抑制杨树锈病病原菌松杨栅锈菌Melampsora larici-populina夏孢子萌发毒力测定及田间防控药剂筛选的结果表明:对抑制夏孢子萌发毒力强的4种药剂是85％三氯异氰尿酸SP、40％嘧菌酯SC、1.8％辛菌胺醋酸盐AS和40％福美胂WP,其LC50依次为0.396,0.953,2.557,4.299mg/kg;在田间杨树锈病发病后,使用40％氟硅唑EC 6000倍液、43％戊唑醇SC 4000倍液、45％咪鲜胺EW 1500倍液、40％苯醚甲环唑SC 3000倍液、40％嘧菌酯SC 2500倍液喷雾处理,间隔10 d,用药2次,第2次药后12 d防效92％～96％,可以高效控制该病为害.【期刊名称】《中国森林病虫》【年(卷),期】2015(034)003【总页数】3页(P44-46)【关键词】杨树锈病;松杨栅锈菌;杀菌剂;筛选;夏孢子;毒力测定【作者】刘宝生;白鹏华;冯友仁;张立强;孟丽慧;张绍青【作者单位】天津市植物保护研究所,天津西青区300381;天津市植物保护研究所,天津西青区300381;天津市植物保护研究所,天津西青区300381;静海县林业局,天津静海301600;天津市蓟县林业局,天津蓟县301900;天津市蓟县林业局,天津蓟县301900【正文语种】中文【中图分类】S763.15杨树具有生长快、适应性强、品种多，分布广，易繁殖等优点［1，2］，广泛用于集约栽培，现已成为我国各地解决木材供应和生态绿化的一个重要树种。
寄生在杨树上的病原菌100多种，而在杨树病害中，尤由栅锈菌属Melampsora spp．引起的叶锈病最为普遍［3］。
杨树锈病严重发生时提早落叶，致使人工林产量下降，同时诱发其它病虫害严重发生。
松杨栅锈菌Melampsora larici-populina引起的杨树叶锈病是杨树病害中分布最广、危害最大的一种病害，当前世界各国仍然采用化学防治［4］，如25%粉锈宁，25%多菌灵、1∶1∶100波尔多液、800代森锌等。
6种杀菌剂对番茄早疫病的毒力测定
Ｔｏ ｉ ｉｙ Ｄｅ ｅ ｍ ｉ ｔｏ ｆＳ ｘ Ｆｕｎ ｉｉ ｅ ｎ ｒｙ Ｂｌｇ ｔｏ ｍ ａ ｏ ｘ ｃｔ ｔ ｒ ｎａ ｉ ｎ ｏ ｉ ｇ ｃｄ ｓｏ Ｅａ ｌ ｉ ｈ ｆＴｏ ｔ
Ｗ ＡＮＧ ｈ ｎ ｒ ｉ ｇ Ｚ Ｃ ｕ — ｎ ， ＨＥ ｕ ＮＧ ｕ ， Ｇ ｏ ＨＯＮＣ Ｌ ｕ ｉ
ｅｍ ｒｎ Ｊｎｓ ｔＧ ｏｔ 是 甘肃 保护 地番 茄 的主要 ｔ ａｔ ）ｏｅ ． ｒｕ］ ｉ ｅ 病 害之 ～ ，该 病 流行 时 间长 ，在 番 茄 的整 个 生 育
期 均 可发 生 ，主要 危 害茎 、叶和 果 实 ， 的重大课题 之一 ［ 引。 我们 研究 测 定 了番茄 早 疫病 菌对 巨佳 、阿 米西 达 、 金 力 士 、世 高 、纳米 欣 及代 森锰 锌 ６ 化学 杀 菌剂 种
２ ％金力 士乳 油 （ 学成 分丙 环唑 ， ５ 化 新加 坡利 农私 人
菌丝生长抑制率 （ ＝ （ ％） ［对照菌落直径一 处理
菌 落直 径 ） 照 菌落直 径 ］ ０ 寸 ×１０
将 菌 丝 生长 抑制 率 换 算成 几率 值 （ ，药 剂 浓 ， ）
有 限公 司生 产 ） ０ 、１％世 高水 分散粒 剂 （ 化学 成分 苯 醚 甲环 唑 ，瑞 士先 正 大 作 物保 护 有 限 公 司 生 产 ） 、 ７ ％代 森锰 锌 可湿性 粉 剂 （ ０ 江苏 江 阴市 精 细化 工 二
甘 肃 农 业 科 技 ２ １ ０ １年 第 ３ 期
Ｇ ｎ ｕＡ ｒ ｃ． ｎ ｅ ｈ ． Ｎｏ ３ ２ １ ａ ｓ ｇ ．Ｓ ｉａ ｄ Ｔ ｃ ｎ ． ０ １
１ １
有限公 司生 产 ） ０ 、７％纳 米欣 可湿性 粉 剂 （ 学成 分 化 甲基 硫 菌 灵 ，新 加 坡 利 农 私 人 有 限 公 司 生 产 ） 、
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抑制百分率=50%，机率值=5
将 5 代入回归方程，然后求其反对数，即
LD-P-Line（剂量对数---机率值直线）。
ED50 可以作为多种药剂对同一病菌等效剂 量的毒力比较，在一定的范围内可以用它来 衡量一种药剂对病原菌毒力的大小，但不能 做为田间防治的实际指标。
三、田间试验
室内筛选的药剂必须进行田间试验，通
少氧而受影响。
（2）抑菌圈法
广泛地应用于真菌细菌的杀菌剂筛选，基本原理
是将病原菌孢子或菌丝的悬浮液与琼脂培养基混匀
冷凝后，在培养基平面放上消毒的并蘸有不同浓度 药剂的圆形滤纸片（直径6mm）左右，或放特制的直 径 8mm 高 10mm 的不锈钢环，将配好的药液定量加 在 钢环内，经定温培养一定时间后，由于药剂的扩 散 作用，使病菌生长受到抑制，即形成“抑菌圈”。 测量抑菌圈的大小，以比较杀菌剂的毒力。
丝生长、变色、变形等指标作为毒力衡量的标准。
但近代随着新型内吸杀菌剂的发展，对杀菌剂的生物筛选
逐渐由经典的离体筛选趋向活体筛选。 因为它不仅模拟田间实际，同时可以防止那些在离体平板 上无效，而必须在植物活体上方显示活性的化合物漏筛。 但活体筛选涉及的因素较多，对寄主植物、试验条件要求
较高，如光照、湿度、温度，为控制病原菌与寄主相互作用的
条件，必须有适合的温室，费工耗资都较大。 离体测定能反映化合物毒力的本质和程度，方法简便，为 研制新农药不可缺少，但它存在有一点缺点，应该和温室活体 的盆栽试验结合起来。
1.毒力测定的方法
室内离体平板法：
（1）孢子萌发测定法 （2）抑菌圈法
（3）生长速率测定法
（1）孢子萌发测定法
有载玻片萌发法及平板培养基培养法。 即将不同的药液喷布于玻片表面或平板上，定量
持效期的试验：
以上各种方法，用先喷药后接菌或先接菌后喷药，间隔不
同日期进行处理，可以测定杀菌剂残效。
剪叶法分级标准：
0 级（不发病）； 1 级（＜剩余叶面 1/4 ）； 2 级（剩余叶面
1/4-1/2）；3级（＞剩余叶面1/2）；4级（全部发病）。
二、有效中量的测定
采用一系列的药剂剂量或浓度，每一剂 量或浓度可以得出一个相应的孢子抑制百分 率，得到两组数据，然后把各剂量换算成对 数值，将抑制百分率换算成几率值，将换算 后的 5 对数据建立回归方程，在直坐标系 中画出回归直线，此直线称为剂量对数--抑制百分率几率值直线（ED-P-line直线）。
过试验确定其药效的好坏，经济效益的高低，
也就是说，田间试验是确定一种药剂在生产 上有无实用价值的主要方法。 田间实验的具体方法可参考《农药药效 试验的设计与分析》一书，防治效果可用以 下公式计算。
（2）治疗作用：
测定方法是先在植株上接菌，保温，保 湿一定时间，待病菌菌丝侵入或始见发病， 再进行喷药处理，其他调查统计方法同上。
（3）内吸作用：
测定根的内吸输导试验，可以采用水培的稻株或棉株，在营 养液中加定量的药剂，待 24h 或 48h 后进行接菌，发病后调查，
若以土培盆栽方法，则药液定量灌入土中，程序与上相同。
组合法，根据杀菌剂物不同作用机理，有测定 以下作用的方法。 （1）保护作用；（2）治疗作用； （3）内吸作用。
（1）保护作用：
一般经定量喷雾法处理供试植物，喷药后间隔 一定的时间再接种（方法很多，如多针接种，剪叶
法或将菌丝块贴在叶片上等），保持发病所需的温、
湿度条件，发病后再按病情分级标准进行统计，以 病叶率，病情指数增长等指标判断药效。
滴加孢子悬浮液，药液与悬浮液接触后，经一定培育
时间，镜检孢子萌发的百分率，载玻片法适合于水溶 性较好的保护剂，能计算单位面积药液的沉积量及药 液浓度，接近实际条件，但对萌发时需氧较多的病原 菌不适用。
平板萌发适用于不易分解的保护剂，根据测定对
象生长需要的配方来制备合适的培养基，由于孢子在 培养基的表面能得到较充足的空气，萌发时不致因缺
第三节 杀菌剂的毒力测定和
田间药效试验
一、毒力测定
杀菌剂对病菌的毒力是指药剂本身对病原菌直
接作用的性质和程度，它是在严格控制条件下测定
的，常用有效中量（ED50）表示，是指抑制50%病菌
孢子萌发所需的剂量或有效中浓度（EC50）。
杀菌剂的毒力测定方法很多，长期采用经典的
离体平板法，即以孢子萌发，抑制孢子发芽率或菌
一，活性效应显现较快，缺点是有时与活体测
定结果不一致，有时会漏筛或误筛，如用粉锈
宁处理大麦白粉病菌，离体测定不仅分生孢子
能萌发且能形成吸器，但此药在活体上却表现
高效。所以初筛手段不采用平板法，采用盆栽
法，即病原---寄主植物组合法。
2．盆栽方法
在温室内进行的，具体方法随各种不同病害
而异，例：小麦赤霉ห้องสมุดไป่ตู้采用分生孢子 --- 幼苗
（3）生长速率测定法
即在琼脂培养基中加入药液，冷凝后接
菌的方法，用木塞钻孔器切取正常培养基上
的供试菌丝体，放在平板上（也称菌碟），
经一定时间后观察测量菌落生长速率，一定
时间菌落直径的长度与对照组比较，求出抑
制百分率，绘浓度对数 --- 抑制百分率毒力
曲线图，以ED50来比较毒力程度。
平板测定是室内杀菌剂活性测定最常用的 方法，优点是条件比较一致，影响因子比较单