最新生物分离与纯化技术模拟试卷八答案

生物分离与纯化技术模拟试卷八答案

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一、名词解释（每小题3分，共15分）

1．超临界流体：超临界流体是状态超过气液共存时的最高压力和最高温度下物质特有的点——临界点后的流体。 2．临界胶团浓度：将表面活性剂在非极性有机溶剂相中能形成反胶团的最小浓度称为临界胶团浓度，它与表面活性剂种类有关。

3．生物分离技术：是指从动植物与微生物的有机体或器官、生物工程产物（发酵液、培养液）及其生物化学产品中提取、分离、纯化有用物质的技术过程。

4．凝胶过滤：层析是以具有网状结构的凝胶颗粒作为固定相，根据物质的分子大小进行分离的一种层析技术。

5．高效液相色谱：是指选用颗粒极细的高效耐压新型固定相，借助高压泵来输送流动相并配有实时在线检测器，实现色谱分离过程全部自动化的液相色谱法。 二、单选题（每小题1分，共15分） 1．有机溶剂为什么能够沉淀蛋白质（B ）

A.介电常数大 B 介电常数小 C.中和电荷 D.与蛋白质相互反应 2．若两性物质结合了较多阴离子，则等电点pH 会（B ） A.升高 B 降低 C.不变 D.以上均有可能 3．离子交换树脂适用（B ）进行溶胀 A.水 B 乙醇 C.氢氧化钠 D.盐酸

4．下列关于离子交换层析洗脱说法错误的是（D ）

A. 对强酸性树脂一般选择氨水、甲醇及甲醇缓冲液等作洗脱剂 B 弱酸性树脂用稀硫酸、盐酸等作洗脱剂

C. 强碱性树脂用盐酸-甲醇、醋酸等作洗脱剂

D. 若被交换的物质用酸、碱洗不下来，应使用更强的酸、碱 5．分子筛层析指的是（C ）

A. 吸附层析 B 分配层析 C. 凝胶过滤 D. 亲和层析 6．对于吸附的强弱描述错误的是（A ）

A. 吸附现象与两相界面张力的降低成反比 B 某物质自溶液中被吸附程度与其在溶液中的溶解度成正比 C. 极性吸附剂容易吸附极性物质 D. 非极性吸附剂容易吸附非极性物质 7．疏水亲和吸附层析通常在（D ）的条件下进行 A.酸性 B 碱性 C.中 D. 高浓度盐溶液 8．为加快过滤效果通常使用（C ）

A.电解质 B 高分子聚合物 C.惰性助滤剂 D.活性助滤剂 9．关于疏水柱层析的操作错误( D )

A 疏水层析柱装柱完毕后，通常要用含有高盐浓度的缓冲液进行平衡

B 疏水层析是利用蛋白质与疏水性吸附剂之间的弱疏水性相互作用的差别进行分离纯化的层析技术

C 洗脱后的层析柱再生处理，可用8mol/L 尿素溶液或含8mol/L 尿素的缓冲溶液洗涤，然后用平衡缓冲液平衡

D 疏水柱层析分辨率很高、流速慢、加样量小

10．在高效液相色谱中,下列哪种检测器不适合于在梯度洗脱时使用. （ D ） A ． 紫外检测器 B ．荧光检测器 C ．蒸发光散射检测器 D ．示差折光检测器 11．下列哪个不属于初步纯化：( C )

A .沉淀法 B. 吸附法 C. 离子交换层析 D. 萃取法

12．为了进一步检查凝胶柱的质量，通常用一种大分子的有色物质溶液过柱，常见的检查物质为蓝色葡聚糖，下面不属于它的作用的是 （C ） A 、观察柱床有无沟流 B 、观察色带是否平整 C 、测量流速 D 、测量层析柱的外水体积 13．用活性炭色谱分离糖类化合物时，所选用的洗脱剂顺序为：（D ）

A 、先用乙醇洗脱，然后再用水洗脱

B 、用甲醇、乙醇等有机溶剂洗脱

C 、先用乙醇洗脱，再用其他有机溶剂洗脱

D 、先用水洗脱，然后再用不同浓度乙醇洗脱 14．气相色谱柱主要有（C ）。

A 填充柱

B 毛细管柱

C A 或B

D A 或B 及其他

15．将四环素粗品溶于pH2的水中，用氨水调pH4.5—4.6，28－30℃保温，即有四环素沉淀结晶析出 。此沉淀方法称为 （ B ） A 、有机溶剂结晶法 B 、等电点法 C 、透析结晶法 D 、盐析结晶法 三、判断题（每小题1分，共10分）

1．当某一蛋白质分子的酸性氨基酸残基数目等于其碱性氨基酸残基数目时，此蛋白质的等电点为7.0。（ √ ） 2．采用氧化铝为吸附剂时，用洗脱剂应从高极性开始，逐渐减低，洗脱剂的极性。（× ） 3．冻结的作用是破坏细胞膜的疏水键结构，降低其亲水性和通透性。（× ） 4．有机溶剂与水混合要在低温下进行。（√ ）

5．盐析是利用不同物质在高浓度的盐溶液中溶解度的差异，向溶液中加入一定量的中性盐，使原溶解的物质沉淀析出的分离技术。（√ ） 6．对强酸性树脂一般选择氨水、甲醇及甲醇缓冲液等作洗脱剂。（√ ）

7．分离纯化极性小的有机分子（有机酸、醇、酚等）多采用正相色谱（或反相柱）。（× ） 8．任何情况都优先选择较小孔隙的交换剂。（× ）

9．某结晶物质经硅胶薄层色谱，用一种展开剂展开，显示单一斑点，所以该晶体为一单体。（ × ） 10．蛋白质变性后溶解度降低，主要是因为电荷被中和及水膜被去除所引起的。（× ）

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四、填空题（每小题1分，共15分）

1．盐析用盐的选择需考虑（盐析作用强）、（溶解度大）、（生物学惰性）和（来源丰富、经济） 等几个方面的因素； 2．分配色谱的基本构成要素有（载体）、（固定相）和（流动相）。

3．根据膜结构的不同，常用的膜可分为（对称性膜）、（非对称膜）和（复合膜）三类； 4．结晶的前提是（过饱和溶液的形成）；结晶的推动力是（溶液的过饱和度）； 5．大孔网状吸附剂有（非极性）、（中等极性）和（极性）三种主要类型； 五、简答题（每小题7分，共35分） 1．等电点沉析注意事项？ （一）等电点的改变 （二）目的物的稳定性 （三） 盐溶作用 （四）pH 的调节

2．交换容量及其影响因素？

交换容量是指离子交换剂能提供交换离子的量，它反映离子交换剂与溶液中离子进行交换的能力。通常所说的离子交换剂的交换容量是指离子交换剂所能提供交换离子的总量，又称为总交换容量，它只和离子交换剂本身的性质有关。

影响交换容量的因素很多，主要可以分为两个方面，一方面是离子交换剂颗粒大小、颗粒内孔隙大小以及所分离的样品组分的大小等影响。另一些影响因素如实验中的离子强度、pH 值等主要影响样品中组分和离子交换剂的带电性质。 3．气相色谱的条件选择？ （一）固定相的选择 （二）载气流速的选择 （三）柱温的选择

（四）进样量与进样时间的影响 （五）色谱柱形、柱内径及柱长的选择 4．提高晶体质量的方法有哪些？ （一）晶体大小的控制 （二）晶体形状的控制 （三）晶体纯度的控制 （四）晶体结块的控制 5．生物分离技术的特点？ 1、产物的快速分离纯化。 2、对原料液进行高度浓缩。 3、借助新型的分离技术 4、除去有害人类健康的物质

5、采用利于保持目标产物产品质量的操作条件 六、案例分析题（共10分） 孔膜过滤技术的应用

微孔滤膜孔径在0.025 -14µm 范围内操作压力在1---10磅／英寸2之间。

孔径为0.01-0.05µm 的膜可以截留噬菌体、较大病毒或大的胶体颗粒，可用于病毒分离。 孔径为0.1µm 的膜用于试剂的超净、分离沉淀和胶体悬液，也有作生物膜模拟之用。 孔径为0.2µm 的膜用于高纯水的制备、制剂除菌、细菌计数、空气病毒定量测定等。

孔径为0.45µm 的微孔滤膜用得最多，常用来进行水的超净化处理、汽油超净、电子工业超净、注射液的无菌检查、饮用水的细菌检查、放射免疫测定、光测介质溶液的净化以及锅炉水中Fe （OH ）3的分析等。