膜型基质金属蛋白酶在胃癌中的表达意义
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１ 材 料 与 方 法 １ １ 组 织 标 本 收集 ．
收集我院 ２ ０ 年 ￣２ １ 年存 档的蜡块 １０例 ， 中包括 ０６ ００ ６ 其 １ ０ 胃癌组 织和 ２ ４例 ０例非癌性 胃黏膜组织 （０例正 常 胃黏 膜 １ 和 １ 例慢性萎 缩性 胃炎伴 肠上 皮化 生） 所 有标本 术 前均未 Ｏ ， 进行放 、 化疗 治疗 。所有 病理 诊 断结果 经两名 以上病 理 医师 再进行确认 。Ｌ ｕｅ ａ ｒｎ分型包括 ： 型 胃癌 １４例 ， 肠 ０ 弥漫型 胃癌 ３ 例 。胃癌 患者中 ， ６ 男性 ９ 例 ， ８ 女性 ４ ， 龄 ２ ￣７ （ ２例 年 ８ ５ 中位
ｄｉ１ ． ９９ ．ｓｎ ０４４ ３ ． ０ １０ ． １ ｏ：０３ ６ ／Ｊｉ ．１０ －３ ７ ２ １ ． ５ ０ ０ ｓ
胃癌是严 重危害人类健康 的常 见恶性肿 瘤之一 。胃癌 的 扩散及转 移是导致患者死亡的重要 原 因。肿瘤 细胞对 细胞外
Ｃｕ ｒｚ公司产品 ， 工作 浓度分别为 １ １ ０ ， ：０ ） 即用型二 步法 （ 生 非 物素 ） 检测试剂盒 （ Ｖ－０ ２均购 自武汉珈 源量子 点技术有 限 Ｐ ６０） 公 司。 日本 Ｏ ｙ ｕ Ｘ５ ｌｍｐ ｓＢ １荧 光显 微镜 （ 高清 Ｃ Ｄ Ｄ ７ ） 带 Ｃ Ｐ ２ 由武汉珈 源量 子点技术开发有限责任公 司提供 。 １３ 免疫组织化学方法及结果 判断 ． 采用 二 步 法 ， 本 步 骤 如 下 ： 织 芯 片 脱 蜡 至 水 ； ０ 基 组 １ ｍｍｏ／ ｌＬ的柠 檬 酸 缓 冲 液 （ Ｈ６ ０ ， 波 法 修 复 抗 原 ； ｐ ． ）微 ３
基质成分及基 底膜 的降解是肿瘤浸 润转移 的关键步骤 。基质
金属蛋 白酶（ ｔｉ ｔｌ ｐｏｅ ａｅ ， ｍａｒ ｍｅａｌ ｒｔｉ ｓｓ ＭＭＰ ） ｘ ｏ ｎ ｓ是一组重要 的 细胞外基 质降解酶 ， 它通过对 细胞外 基质 中不 同成分 的降解 ， 在肿瘤浸 润 转 移 中 起 重 要 作 用 。膜 型 基 质 金 属 蛋 白 酶一 １
的表达及与 胃癌临床病理特征的关系。方法 ： 用免疫组织化学方法 （ ６ ０ 法 ） Ｐ ０ ２ 检测 １ ０例 胃癌手术病 人及 ２ ４ Ｏ例非癌性 胃组织 中 ＭＴ１ＭＭＰ的表达 。结果 ： 一 非癌性 胃黏膜和 胃癌组织 中的 ＭＴ 一 １ＭＭＰ蛋 白表达 的 阳性 率分别 为 １ ． （／ ｏ 和 ５ ． （ ６ １ ０ ， ０Ｏ ｚｚ） ４ ３ ７／４ ）
Ｊ ｕ ｌ ｆＭ ａｈ ｍａ ｉａ ｄｃｎ ｏ ｍａ ｔ ｅ ｔｃ ｌ ｏ Ｍｅ ｉｉｅ
Ｖｏ． ４ Ｉ２
Ｎｏ ．５
２ １ ０１
文章编号 ：０ ４４ ３ （０ １０ —５ ００ １０ —３ ７ ２ １ ） ５０ ３ —２
中图分 类号 ： ３ ． Ｒ７５ ２
文献标识码 ：Ａ
Ｈｚ ２去离 子水 孵育 ５ ｎ 以阻断 内源 性过 氧化物酶 ， Ｂ ０ ｍｉ， Ｐ Ｓ冲
洗； 滴加 ＭＴ 一 １ＭＭＰ一抗 ，３ ℃孵 育 ９ ｍｉ， Ｂ ７ ０ ｎ Ｐ Ｓ冲洗 ， ｉ ２ｒ ｎ ａ ×３滴加抗 小 鼠 ＩＧ抗 体 （ ａ ； ｇ Ｆ ｂ段 ）ＨＲ － Ｐ多 聚体 ，３ ￣ 育 ７ Ｃ孵 ２ ｎ Ｐ Ｓ冲洗 ， ｎ ； Ａ ０ｍｉ， Ｂ ２ｍｉｘ３ Ｄ Ｂ显色 ， 木素复 染 ， 水 ， 苏 脱 透 明， 中性树胶 封固并镜检 分析结果 。空 白对照 用 Ｐ Ｓ取代 一 Ｂ 抗， 其余步骤不变 ， 已知 的阳性切 片作 为阳性对 照 。 ＭＴ１ＭＭＰ蛋 白阳性 信号 定 位 于 细胞 胞 膜 和或 胞 质 内 一 （ 间质表达不 包括 ） 。高倍 镜下 每片 选 ４个视 野 ， 照文 献［ 参 ３ ］
呈递增的趋势 ， 两者差异有显著性 （ —Ｏ ０ １ 。ＭＴ 一 Ｐ ．０ ） １ＭＭＰ蛋 白表 达与 Ｌ ｕｅ ａｒ ｎ分型 、 肿瘤浸 润深度 、 Ｎ 分期和淋 巴结转 移均呈 Ｔ Ｍ
显著相关 （ ＜ Ｏ ０ ） Ｐ ． ５ 。结论 ： ＭＴ１ＭＭＰ与 胃癌的发生发展有关 ， 一 高表达提高 了胃癌 的侵袭转移能力 。 关键词 ： 胃癌 ； 膜型基质金属蛋 白酶－ ； 侵袭转移 １
进行 半 定 量 评 分 ： 先 将 染 色 强 度 打 分 ： 为 无 色 ， 首 ０分 １分 为 淡
于它介 导 ＭＭＰ ２ － 酶原 的激活 以及通 过其表 达上 调血 管 内皮
生长因子促进血管 生长 和血管 生成 ， 同参 与 了多种肿 瘤 的 协 侵袭和转移 过程ｌ ］ ＿ 。本 文主要研 究 ＭＴ１ＭＭＰ在 胃癌 和非 】 一 癌性 胃组织中的表达及与 胃癌临床病理特征 的关 系。
（ ｍｂ ａ ｅｔ ｐ ｔ ｘ ｍｅａ ｏ ｒ ｔｉａ ｅ１ ｍｅ ｒ ｎ － ｅ ｍａｒ ｔｌ ｐ ｏ ｅ ｓ － ，ＭＴ１ＭＭＰ） ｙ ｉ ｌ ｎ 一 是
第一 个发 现 的具 有跨膜 序列 的 ＭＭＰ ， 且是膜 型蛋 白酶 中 ｓ并
最重要 的一员。研究 发现 ， １ＭＭＰ的 主要生 物 学功 能在 ＭＴ 一
红色 ， ２分为红色 ， 分 为亮 红色 ； 按 阳性 细胞所 占百分 比打 ３ 再 分： 阴性 为 ０分 ， 阳性 细胞 数 １ ～ １ 为 １分 ， Ｏ 阳性 细胞 数 １ ～５ 为 ２分 ， １ Ｏ 阳性细胞数 ５ ～７ 为 ３分 ； １ ５ 阳性 细胞 数＞７ 为 ４分 。染色强 度与 阳性细胞 百分 比的乘积≥ ２为 ５ 免疫荧光组织化学 反应 阳性 。 Ｉ ４ 统计学分析 ． 采用 Ｓ Ｓ １ ． Ｐ Ｓ ３ ０软件进行统计学分析 ， ＭＴ１ＭＭＰ蛋 白表 一
・基础 医学研 究 ・
路 明
武 汉 ４ ０ ７） ３ ０ １
（ 汉 大学基 础 医学 院病理 学教 研 室 武
摘
要 ： 目的 ： 探讨 膜型基质金 属蛋白酶一 （ ｍｂａ ｅｔｐ ｔｉ ｔｌ ｐｏｅｎ ｓ－，ＭＴ１ＭＭＰ） １ ｍｅ ｒｎ － ｅｍａｒ ｍｅａｏ ｒｔｉａｅ１ ｙ ｘ ｌ 一 在胃癌 和非癌性 胃组织 中
收集我院 ２ ０ 年 ￣２ １ 年存 档的蜡块 １０例 ， 中包括 ０６ ００ ６ 其 １ ０ 胃癌组 织和 ２ ４例 ０例非癌性 胃黏膜组织 （０例正 常 胃黏 膜 １ 和 １ 例慢性萎 缩性 胃炎伴 肠上 皮化 生） 所 有标本 术 前均未 Ｏ ， 进行放 、 化疗 治疗 。所有 病理 诊 断结果 经两名 以上病 理 医师 再进行确认 。Ｌ ｕｅ ａ ｒｎ分型包括 ： 型 胃癌 １４例 ， 肠 ０ 弥漫型 胃癌 ３ 例 。胃癌 患者中 ， ６ 男性 ９ 例 ， ８ 女性 ４ ， 龄 ２ ￣７ （ ２例 年 ８ ５ 中位
ｄｉ１ ． ９９ ．ｓｎ ０４４ ３ ． ０ １０ ． １ ｏ：０３ ６ ／Ｊｉ ．１０ －３ ７ ２ １ ． ５ ０ ０ ｓ
胃癌是严 重危害人类健康 的常 见恶性肿 瘤之一 。胃癌 的 扩散及转 移是导致患者死亡的重要 原 因。肿瘤 细胞对 细胞外
Ｃｕ ｒｚ公司产品 ， 工作 浓度分别为 １ １ ０ ， ：０ ） 即用型二 步法 （ 生 非 物素 ） 检测试剂盒 （ Ｖ－０ ２均购 自武汉珈 源量子 点技术有 限 Ｐ ６０） 公 司。 日本 Ｏ ｙ ｕ Ｘ５ ｌｍｐ ｓＢ １荧 光显 微镜 （ 高清 Ｃ Ｄ Ｄ ７ ） 带 Ｃ Ｐ ２ 由武汉珈 源量 子点技术开发有限责任公 司提供 。 １３ 免疫组织化学方法及结果 判断 ． 采用 二 步 法 ， 本 步 骤 如 下 ： 织 芯 片 脱 蜡 至 水 ； ０ 基 组 １ ｍｍｏ／ ｌＬ的柠 檬 酸 缓 冲 液 （ Ｈ６ ０ ， 波 法 修 复 抗 原 ； ｐ ． ）微 ３
基质成分及基 底膜 的降解是肿瘤浸 润转移 的关键步骤 。基质
金属蛋 白酶（ ｔｉ ｔｌ ｐｏｅ ａｅ ， ｍａｒ ｍｅａｌ ｒｔｉ ｓｓ ＭＭＰ ） ｘ ｏ ｎ ｓ是一组重要 的 细胞外基 质降解酶 ， 它通过对 细胞外 基质 中不 同成分 的降解 ， 在肿瘤浸 润 转 移 中 起 重 要 作 用 。膜 型 基 质 金 属 蛋 白 酶一 １
的表达及与 胃癌临床病理特征的关系。方法 ： 用免疫组织化学方法 （ ６ ０ 法 ） Ｐ ０ ２ 检测 １ ０例 胃癌手术病 人及 ２ ４ Ｏ例非癌性 胃组织 中 ＭＴ１ＭＭＰ的表达 。结果 ： 一 非癌性 胃黏膜和 胃癌组织 中的 ＭＴ 一 １ＭＭＰ蛋 白表达 的 阳性 率分别 为 １ ． （／ ｏ 和 ５ ． （ ６ １ ０ ， ０Ｏ ｚｚ） ４ ３ ７／４ ）
Ｊ ｕ ｌ ｆＭ ａｈ ｍａ ｉａ ｄｃｎ ｏ ｍａ ｔ ｅ ｔｃ ｌ ｏ Ｍｅ ｉｉｅ
Ｖｏ． ４ Ｉ２
Ｎｏ ．５
２ １ ０１
文章编号 ：０ ４４ ３ （０ １０ —５ ００ １０ —３ ７ ２ １ ） ５０ ３ —２
中图分 类号 ： ３ ． Ｒ７５ ２
文献标识码 ：Ａ
Ｈｚ ２去离 子水 孵育 ５ ｎ 以阻断 内源 性过 氧化物酶 ， Ｂ ０ ｍｉ， Ｐ Ｓ冲
洗； 滴加 ＭＴ 一 １ＭＭＰ一抗 ，３ ℃孵 育 ９ ｍｉ， Ｂ ７ ０ ｎ Ｐ Ｓ冲洗 ， ｉ ２ｒ ｎ ａ ×３滴加抗 小 鼠 ＩＧ抗 体 （ ａ ； ｇ Ｆ ｂ段 ）ＨＲ － Ｐ多 聚体 ，３ ￣ 育 ７ Ｃ孵 ２ ｎ Ｐ Ｓ冲洗 ， ｎ ； Ａ ０ｍｉ， Ｂ ２ｍｉｘ３ Ｄ Ｂ显色 ， 木素复 染 ， 水 ， 苏 脱 透 明， 中性树胶 封固并镜检 分析结果 。空 白对照 用 Ｐ Ｓ取代 一 Ｂ 抗， 其余步骤不变 ， 已知 的阳性切 片作 为阳性对 照 。 ＭＴ１ＭＭＰ蛋 白阳性 信号 定 位 于 细胞 胞 膜 和或 胞 质 内 一 （ 间质表达不 包括 ） 。高倍 镜下 每片 选 ４个视 野 ， 照文 献［ 参 ３ ］
呈递增的趋势 ， 两者差异有显著性 （ —Ｏ ０ １ 。ＭＴ 一 Ｐ ．０ ） １ＭＭＰ蛋 白表 达与 Ｌ ｕｅ ａｒ ｎ分型 、 肿瘤浸 润深度 、 Ｎ 分期和淋 巴结转 移均呈 Ｔ Ｍ
显著相关 （ ＜ Ｏ ０ ） Ｐ ． ５ 。结论 ： ＭＴ１ＭＭＰ与 胃癌的发生发展有关 ， 一 高表达提高 了胃癌 的侵袭转移能力 。 关键词 ： 胃癌 ； 膜型基质金属蛋 白酶－ ； 侵袭转移 １
进行 半 定 量 评 分 ： 先 将 染 色 强 度 打 分 ： 为 无 色 ， 首 ０分 １分 为 淡
于它介 导 ＭＭＰ ２ － 酶原 的激活 以及通 过其表 达上 调血 管 内皮
生长因子促进血管 生长 和血管 生成 ， 同参 与 了多种肿 瘤 的 协 侵袭和转移 过程ｌ ］ ＿ 。本 文主要研 究 ＭＴ１ＭＭＰ在 胃癌 和非 】 一 癌性 胃组织中的表达及与 胃癌临床病理特征 的关 系。
（ ｍｂ ａ ｅｔ ｐ ｔ ｘ ｍｅａ ｏ ｒ ｔｉａ ｅ１ ｍｅ ｒ ｎ － ｅ ｍａｒ ｔｌ ｐ ｏ ｅ ｓ － ，ＭＴ１ＭＭＰ） ｙ ｉ ｌ ｎ 一 是
第一 个发 现 的具 有跨膜 序列 的 ＭＭＰ ， 且是膜 型蛋 白酶 中 ｓ并
最重要 的一员。研究 发现 ， １ＭＭＰ的 主要生 物 学功 能在 ＭＴ 一
红色 ， ２分为红色 ， 分 为亮 红色 ； 按 阳性 细胞所 占百分 比打 ３ 再 分： 阴性 为 ０分 ， 阳性 细胞 数 １ ～ １ 为 １分 ， Ｏ 阳性 细胞 数 １ ～５ 为 ２分 ， １ Ｏ 阳性细胞数 ５ ～７ 为 ３分 ； １ ５ 阳性 细胞 数＞７ 为 ４分 。染色强 度与 阳性细胞 百分 比的乘积≥ ２为 ５ 免疫荧光组织化学 反应 阳性 。 Ｉ ４ 统计学分析 ． 采用 Ｓ Ｓ １ ． Ｐ Ｓ ３ ０软件进行统计学分析 ， ＭＴ１ＭＭＰ蛋 白表 一
・基础 医学研 究 ・
路 明
武 汉 ４ ０ ７） ３ ０ １
（ 汉 大学基 础 医学 院病理 学教 研 室 武
摘
要 ： 目的 ： 探讨 膜型基质金 属蛋白酶一 （ ｍｂａ ｅｔｐ ｔｉ ｔｌ ｐｏｅｎ ｓ－，ＭＴ１ＭＭＰ） １ ｍｅ ｒｎ － ｅｍａｒ ｍｅａｏ ｒｔｉａｅ１ ｙ ｘ ｌ 一 在胃癌 和非癌性 胃组织 中