石蜡切片实验指导
实验八石蜡切片法一
盐酸、蛋清、甘油。 • 3、材料 • 各类你感兴趣的固定标本。
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四、实验步骤
• 1、取材 • 2、固定 • 3、漂洗 • 4、脱水 • 5、透明 • 6、透蜡 • 7、包埋 • 8、修块 • 9、切片 • 10、染色
实验八 石蜡切片法
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一 、实验目的
• 学习石蜡切片法 • 了解组织染色原理
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二、实验原理
• 用石蜡渗透固化组织;
• 用碱性染料如苏木精、碱性品红等,使细 胞核着色;
• 用酸性染料如伊红、酸性品红等,使细胞 中的嗜酸性成分着色,如蛋白质。
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三 、实验用品
• 1、器材: • 切片机、水浴锅、染色缸、玻片、显微镜、试剂瓶、剪刀、
• 未注明时间的一律处理2-3min。
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五、作业
• 简述石蜡切片过程,绘制你所观察到的细 胞形态。
• 提交一张你认为制作较好的玻片。
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பைடு நூலகம்
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取材到切片
• 取材——固定(Cannoy’s),材料厚度 2mm。
• 100%酒精——100%酒精——二甲苯:酒精 (1:1)——二甲苯——二甲苯——二甲苯: 石蜡(65℃ 1:1)——石蜡(65℃)——石 蜡(65℃),以上处理各10-30min,视材 料大小而定,最后一步石蜡20min 。
• 包埋——修块——切片——贴片
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脱蜡与复水
• 二甲苯——二甲苯——二甲苯/无水乙醇 (1/1)——无水乙醇 ——无水乙醇——95% 乙醇——80%乙醇——70%乙醇——50% 乙醇——蒸馏水。
石蜡切片及染色实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握石蜡切片的基本操作步骤。
2. 了解石蜡切片的染色原理和方法。
3. 观察细胞组织的结构特征。
二、实验器材与试剂1. 器材:- 石蜡切片机- 石蜡包埋机- 恒温箱- 显微镜- 载玻片- 盖玻片- 毛笔- 镊子- 刀片- 染色缸- 烤片机- 试剂瓶2. 试剂:- 4%多聚甲醛固定液- 无水乙醇- 二甲苯- 苏木素染液- 伊红染液- 1%盐酸酒精溶液- 1%氨水溶液- 甘油蛋白粘片剂- 中性树胶三、实验步骤1. 取材与固定:取新鲜组织,用4%多聚甲醛固定24小时以上。
2. 脱水:将固定好的组织放入脱水盒,依次用75%、85%、90%、95%、无水乙醇进行脱水,每级酒精处理1小时。
3. 浸蜡:将脱水后的组织放入二甲苯中浸泡,每缸浸泡1小时。
4. 包埋:将浸好蜡的组织块放入包埋机中,加入融化的石蜡,待石蜡凝固后取出,修整蜡块。
5. 切片:将修整好的蜡块固定在切片机上,切成4微米厚的切片。
6. 水化:将切片放入水中,用毛笔轻轻搅动,使切片展平。
7. 脱蜡:将水化的切片放入二甲苯中,依次浸泡30分钟,然后放入无水乙醇中,浸泡10分钟。
8. 苏木素染色:将脱蜡后的切片放入苏木素染液中,染色0.5-1分钟。
9. 自来水漂洗:将染色后的切片放入自来水中漂洗。
10. 盐酸酒精分化:将漂洗后的切片放入1%盐酸酒精溶液中分化数秒。
11. 自来水漂洗:将分化后的切片放入自来水中漂洗。
12. 氨水返蓝:将漂洗后的切片放入1%氨水溶液中返蓝1分钟。
13. 自来水漂洗:将返蓝后的切片放入自来水中漂洗。
14. 伊红染色:将漂洗后的切片放入伊红染液中染色1分钟。
15. 自来水漂洗:将染色后的切片放入自来水中漂洗。
16. 梯度酒精脱水:将漂洗后的切片依次放入70%、80%、90%、95%、无水乙醇中,每级酒精处理5分钟。
17. 透明:将脱水后的切片放入二甲苯中,依次浸泡5分钟,然后放入无水乙醇中,浸泡5分钟。
实验九 石蜡切片制作
组织固定后的处理
①冲洗或漂洗:组织固定后应充分水洗,除去留在组 织内的固定液及其结晶沉淀,否则会影响以后的染 色效果。
②材料经过固定后,需要保存下来以备利用,通常使 用的保存剂是70%的酒精溶液,可以使一般的材料 保存较长的时间而不至于变坏。
③通常在冰箱中4℃存放。
3. 脱水
• 水和透明剂不能互溶,只有脱去水分后,才能让透 明剂进入。
蒸馏水 100毫升 甘油 15毫升 苯酚 2克 乙液:甲醛 4毫升 蒸馏水 100毫升
8. 脱蜡及复水
干燥后的切片需脱蜡及复水才能在水溶性染 液中进行染色。 用二甲苯脱蜡,再逐级经梯度酒精复水。
• 脱蜡(溶蜡):将切片上的石蜡溶去。一般都用二 甲苯溶脱蜡。如果脱蜡不彻底,材料的染色就困难。
• 复水:脱蜡后的材料从高浓度的酒精溶液(100%) 开始,逐级进入低浓度的酒精溶液,最后一级通常 是30%酒精或水,使材料中的水分逐渐增加。如果 不经过复水,材料脱蜡后直接进入染色剂中,材料 将会严重变形,甚至难以染色。
5.浸蜡与包埋
• 用石蜡取代透明剂,使石蜡浸入组织而起支持作用。 • 通常先把组织材料块放在熔化的石蜡和二甲苯的等
量混合液浸渍1~2小时或者过夜,再先后移入熔化 的石蜡液中浸渍几天。 • 浸蜡应在高于石蜡熔点3℃左右的温箱中进行,以 利石蜡浸入组织内。
• 石蜡熔点: 45-50℃ 软蜡 55-60℃ 硬蜡
实验九 石蜡切片制作
一、实验目的与要求: 掌握石蜡切片制作的基本过程及其注意事项。
二、实验材料和仪器: 实验材料: 向日葵幼茎、石蜡、酒精、二甲苯、番红/固
绿染色液等;实验仪器和器皿:石蜡切片机、展片机、染色 缸、载玻片、盖玻片等。 三、实验内容与方法:
石蜡切片的实验报告
一、实验目的1. 掌握石蜡切片的制作过程,包括组织固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片和染色等步骤。
2. 了解石蜡切片技术在生物学研究中的应用。
3. 学会使用显微镜观察石蜡切片,识别不同组织结构。
二、实验原理石蜡切片技术是一种重要的生物学制片方法,用于观察组织、细胞等微观结构。
其基本原理是将组织固定后,通过一系列的脱水、透明、浸蜡等步骤,使组织在石蜡中充分浸渍,然后用切片机切成薄片,最后进行染色和观察。
三、实验材料1. 实验动物:小鼠2. 组织:肝脏、肾脏、心肌、骨骼肌等3. 试剂:卡诺氏固定液、FAA固定液、各种浓度的酒精、二甲苯、石蜡、蜂蜡、埃利希苏木精染液、1%伊红酒精溶液、1%盐酸酒精溶液、甘油蛋白粘片剂、郝普特氏粘片剂、中性树胶、1%番红、1%固绿、1%过碘酸、Schiff 试剂、0.5%偏重亚硫酸钠溶液、醋酸酐-吡啶混合液、0.5%~1%淀粉糖化酶溶液等4. 器材:切片刀、切片机、恒温箱、温台、熔蜡炉、蜡杯、酒精灯、蜡铲、展片台、解剖刀、解剖针、解剖剪、解剖盘、培养皿、吸管、镊子、单面刀片、台木、毛笔、洒精灯、包埋纸盒、染色缸、盖玻片、载玻片、玻片盘、树胶、树胶瓶、显微镜、温度计、脸盆、水浴锅等四、实验步骤1. 取材:取新鲜组织,固定于4%多聚甲醛24小时以上。
2. 脱水:将固定后的组织依次放入75%、85%、90%、95%酒精中浸泡1小时,然后放入无水乙醇I、无水乙醇II中浸泡30分钟,最后放入醇苯中浸泡5-10分钟。
3. 透明:将组织放入二甲苯I、二甲苯II中浸泡5-10分钟。
4. 浸蜡:将组织放入熔化的石蜡中浸泡1小时。
5. 包埋:将浸好蜡的组织放入包埋机内进行包埋,待石蜡凝固后取出并修整蜡块。
6. 切片:将修整好的蜡块置于石蜡切片机上切片,片厚约4微米。
7. 展片:将切片漂浮于摊片机40℃温水上,将组织展平,用载玻片将组织捞起,并放进60℃烤箱内烤片。
8. 染色:将烤干的切片进行染色,如苏木精-伊红染色。
石蜡切片实验报告
石蜡切片实验报告实验目的:通过对石蜡切片的制备和观察,掌握石蜡切片的制备方法和观察技术,了解细胞的结构和形态。
实验材料和仪器:1. 细胞组织样本。
2. 甲醇、乙醇、异丙醇。
3. 石蜡。
4. 切片刀。
5. 显微镜。
6. 石蜡切片染色试剂。
实验步骤:1. 细胞组织样本的固定,将细胞组织样本放入甲醇中固定24小时,然后分别在乙醇和异丙醇中固定24小时。
2. 组织脱水,将固定的细胞组织样本放入逐渐浓度增加的乙醇中脱水,最后在100%乙醇中脱水。
3. 组织透明化,将脱水后的细胞组织样本放入逐渐增加的异丙醇中透明化,最后在100%异丙醇中透明化。
4. 组织浸渍,将透明化后的细胞组织样本放入熔化的石蜡中浸渍,使其充分渗透。
5. 石蜡切片制备,将浸渍好的细胞组织样本放入切片模具中,倒入熔化的石蜡,待其凝固后取出石蜡块,用切片刀切割成薄片。
6. 石蜡切片染色,将切好的石蜡切片放入染色试剂中染色。
7. 石蜡切片观察,将染色后的石蜡切片放入显微镜下观察,记录细胞结构和形态。
实验结果:经过以上步骤制备的石蜡切片,观察到细胞结构清晰,细胞核、细胞质等细胞器官清晰可见,染色后的细胞结构更加鲜明。
实验结论:通过本次实验,我们成功制备了石蜡切片,并观察到了细胞的结构和形态。
石蜡切片制备技术和染色技术对于细胞学研究具有重要意义,能够帮助科研人员更深入地了解细胞的结构和功能,为细胞学研究提供重要的技术支持。
实验注意事项:1. 在制备石蜡切片时,要注意细胞组织样本的固定和脱水过程,确保样本的完整性和稳定性。
2. 切片时要使用尖锐的切片刀,避免损坏样本。
3. 在染色和观察过程中,要注意操作细致,避免污染和误操作。
实验改进方向:在今后的实验中,可以尝试不同的染色试剂,比较不同染色方法对细胞结构的影响,以及尝试使用其他切片制备方法,提高石蜡切片的质量。
总结:本次实验通过制备石蜡切片,观察了细胞的结构和形态,掌握了石蜡切片制备技术和观察技术,为以后的细胞学研究打下了基础。
石蜡切片实验报告
石蜡切片实验报告实验目的,通过石蜡切片实验,观察细胞的形态结构和组织构成,掌握石蜡切片技术的操作方法,提高细胞学实验操作技能。
实验仪器与试剂,显微镜、石蜡切片、染色剂、玻璃片、显微镜载玻片、酒精、甘油、显微镜盖玻片。
实验步骤:1. 取一块石蜡切片,将其放置在玻璃片上,用酒精浸泡片切片5分钟,使其软化。
2. 用刮刀将石蜡切片刮至薄如纸张。
3. 将切好的石蜡切片浸泡在染色剂中,染色10分钟,使细胞染色。
4. 将染色后的石蜡切片放入酒精中脱水,然后放入甘油中固定。
5. 取一个显微镜载玻片,将固定好的石蜡切片放在载玻片上,盖上显微镜盖玻片。
6. 将载玻片放置在显微镜上,调节倍率,观察石蜡切片下的细胞结构。
实验结果与分析:经过显微镜观察,我们发现石蜡切片下的细胞结构清晰可见,细胞核、细胞质、细胞壁等结构清晰可辨。
通过不同染色剂的染色,我们可以清晰地观察到不同细胞器的形态和分布,比如细胞核的形态、染色颜色的深浅等。
此外,我们还可以观察到细胞在不同发育阶段的变化,对于研究细胞生物学和组织学具有重要意义。
实验总结:通过本次石蜡切片实验,我们掌握了石蜡切片技术的操作方法,提高了细胞学实验操作技能。
在实验中,我们需要注意石蜡切片的切割技巧和染色方法,以保证观察到的细胞结构清晰、准确。
在未来的实验中,我们将继续加强对细胞结构和组织构成的观察,不断提高实验操作技能,为细胞生物学和组织学的研究工作做出更多的贡献。
参考文献:1. 高等学校生物学实验教学指导委员会. 生物学实验指导[M]. 北京,高等教育出版社,2003.2. 张三等. 细胞生物学实验指导[M]. 上海,上海科学技术出版社,2005.。
石蜡切片实验报告小结(3篇)
第1篇一、实验背景石蜡切片实验是生物学、医学等领域常用的技术手段之一,主要用于观察组织细胞的结构和形态。
本实验旨在通过石蜡切片技术,对组织进行切片、染色和观察,以了解组织细胞的细微结构和病理变化。
二、实验目的1. 掌握石蜡切片的制作方法,包括取材、固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色等步骤。
2. 熟悉HE染色原理及操作过程,学会对石蜡切片进行染色和观察。
3. 了解组织细胞的结构和形态,为后续研究提供依据。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜组织、4%多聚甲醛固定液、乙醇、二甲苯、石蜡、苏木素染液、伊红染液等。
2. 实验仪器:组织固定箱、手术刀、脱水机、包埋机、石蜡切片机、显微镜、载玻片、染色缸等。
四、实验步骤1. 取材:将新鲜组织固定于4%多聚甲醛24小时以上,取出后用手术刀修整组织,并贴上标签。
2. 脱水:将组织放入脱水机内,依次用75%、85%、90%、95%酒精进行脱水,最后用无水乙醇I、无水乙醇II进行脱水。
3. 透明:将脱水后的组织放入醇苯中进行透明处理,再用二甲苯进行透明。
4. 浸蜡:将透明后的组织放入石蜡中进行浸蜡,每缸1小时。
5. 包埋:将浸好蜡的组织放入包埋机内进行包埋,待石蜡凝固后取出蜡块并修整。
6. 切片:将修整好的蜡块固定在石蜡切片机上,切片厚度为4微米。
7. 染色:将切片放入苏木素染液中染色0.5-1分钟,然后用自来水漂洗,再用1%盐酸酒精分化数秒,再用自来水漂洗,最后用1%氨水溶液返蓝1分钟,流水冲洗数秒。
8. HE染色:将切片放入伊红染液中染色1-2分钟,然后用自来水漂洗。
五、实验结果与分析1. 切片质量:切片厚度均匀,无明显皱褶和断裂,染色效果良好。
2. 组织结构:通过显微镜观察,可以清晰地看到组织细胞的形态和结构,如细胞核、细胞质、细胞器等。
3. 病理变化:观察切片,可以判断组织是否存在病理变化,如炎症、肿瘤等。
六、实验总结1. 本实验成功制作了高质量的石蜡切片,为后续研究提供了良好的材料。
石蜡切片实验报告(一)
石蜡切片实验报告(一)石蜡切片实验报告摘要•石蜡切片实验是一种常用的组织学技术,用于研究生物组织的结构和功能。
•本报告通过对石蜡切片实验的描述和结果分析,总结了该实验的步骤和注意事项。
引言•石蜡切片实验是一种常用的技术,被广泛应用于医学、生物学等领域。
•本报告旨在总结石蜡切片实验的基本原理、步骤和注意事项,并分析实验结果。
实验原理•石蜡切片实验是一种将生物组织固定、浸泡、包埋和切割的方法。
•通过该实验可以获取生物组织的切片,用于观察细胞结构和功能。
实验步骤1.生物组织固定:将待实验组织固定在适当的固定液中,以保持细胞的形态。
2.组织浸泡:将固定后的组织浸泡在逐渐浓度上升的酒精溶液中,以去除水分。
3.组织包埋:将浸泡后的组织置于熔化的石蜡中,使其逐渐渗透和包埋。
4.组织切割:将包埋好的组织用切片机切割成薄片,通常为5-10微米厚。
5.切片染色:将切割好的组织片进行染色,以突显细胞结构和功能。
6.切片封装:将染色好的组织片放置在玻璃载板上,并用封片剂封装,以保护切片。
实验注意事项•实验过程中需注意个人安全,避免与切割仪器和刀片直接接触。
•切片时需控制切片机的速度和厚度,以获得理想的切片质量。
•染色时需掌握适当的染色时间和浓度,避免染色过度或不足。
实验结果与讨论•通过石蜡切片实验,我们成功获取了生物组织的切片。
•切片经过染色后,细胞核、细胞质和细胞器可以清晰地观察到,有助于进一步研究组织的结构和功能。
•实验结果表明,石蜡切片实验是一种可靠、高效的技术,适用于各种生物组织的研究。
结论•本报告总结了石蜡切片实验的步骤和注意事项,并分析了实验结果。
•通过石蜡切片实验,我们可以观察和研究生物组织的结构和功能,为相关领域的研究提供重要数据支持。
石蜡切片实验报告结论(3篇)
第1篇一、实验背景石蜡切片技术是生物组织学研究中常用的一种技术手段,它能够将组织样本固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色等一系列步骤处理后,制作成可用于显微镜观察的切片。
本实验旨在通过石蜡切片技术,对组织样本进行切片处理,以观察其细胞结构、组织形态等特征。
二、实验目的1. 掌握石蜡切片的基本操作流程。
2. 了解石蜡切片技术在组织学研究中的应用。
3. 通过观察石蜡切片,了解组织样本的细胞结构、组织形态等特征。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜组织样本、固定液、梯度酒精、二甲苯、无水乙醇、石蜡、切片机、摊片机、载玻片、烤箱、显微镜等。
2. 实验仪器:石蜡切片机、摊片机、烤箱、显微镜、载玻片、盖玻片、染色缸、水浴锅、烧杯、滴管等。
四、实验步骤1. 取材:将新鲜组织样本固定于4%多聚甲醛24小时以上。
2. 脱水:将固定好的组织样本依次放入75%、85%、90%、95%酒精溶液中脱水,每级酒精溶液中处理1小时。
3. 透明:将脱水后的组织样本放入无水乙醇中处理30分钟,然后放入醇苯中处理5-10分钟。
4. 浸蜡:将透明后的组织样本放入二甲苯中处理30分钟,然后放入无水乙醇中处理10分钟,依次放入95%、90%、85%、75%酒精溶液中处理10分钟,最后放入石蜡中处理1小时。
5. 包埋:将浸好蜡的组织样本放入包埋机中,待蜡凝固后取出,修整蜡块。
6. 切片:将修整好的蜡块置于石蜡切片机上切片,片厚4微米。
7. 摊片:将切片漂浮于摊片机40℃温水上,将组织展平,用载玻片将组织捞起,放入60℃烤箱中烤片。
8. 染色:将烤干的切片放入染色缸中,进行HE染色。
9. 观察与拍照:使用显微镜观察染色后的切片,并拍照记录。
五、实验结果与分析1. 切片质量:经过石蜡切片技术处理的组织样本切片,切片质量良好,细胞结构清晰,组织形态明显。
2. 细胞结构:通过显微镜观察,可观察到组织样本中的细胞核、细胞质、细胞器等结构。
3. 组织形态:通过观察切片,可了解组织样本的组织形态,如纤维组织、腺体组织、血管等。
石蜡切片实验报告目的(3篇)
第1篇一、实验背景石蜡切片技术是组织学、病理学等领域中常用的制片方法之一。
通过石蜡切片,可以观察到组织细胞的细微结构和形态变化,为疾病的诊断、治疗和科研提供重要的依据。
本实验旨在通过石蜡切片技术的操作,掌握石蜡切片的制作过程,了解其原理和应用,为后续相关实验和研究奠定基础。
二、实验目的1. 理解石蜡切片技术的原理,掌握石蜡切片的制作步骤。
2. 学习并熟练使用石蜡切片相关实验器材,如切片机、烤箱、显微镜等。
3. 掌握组织固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色等石蜡切片技术的基本操作。
4. 通过石蜡切片观察,了解组织细胞的结构和形态变化,为后续实验和研究提供参考。
5. 提高实验操作技能,培养严谨的实验态度和团队协作精神。
6. 掌握石蜡切片技术在临床病理诊断和科研中的应用价值。
三、具体实验目的1. 理解并掌握组织固定、脱水、透明、浸蜡、包埋等石蜡切片技术的基本原理和操作步骤。
2. 熟练使用切片机、烤箱、显微镜等实验器材,确保实验操作的顺利进行。
3. 学习并掌握石蜡切片的染色技术,如苏木精-伊红染色法(H.E染色法),以便观察组织细胞的细微结构和形态变化。
4. 通过石蜡切片观察,了解不同组织、不同疾病状态下细胞的结构和形态变化,为临床病理诊断提供依据。
5. 分析实验结果,总结石蜡切片技术在临床病理诊断和科研中的应用价值。
6. 结合实验操作,探讨石蜡切片技术在实际应用中可能遇到的问题及解决方法。
7. 通过实验报告撰写,提高写作能力和实验总结能力。
四、实验内容1. 组织固定:采用4%多聚甲醛固定新鲜组织,确保组织结构的完整性。
2. 脱水:将固定后的组织依次浸入不同浓度的酒精溶液中,去除组织中的水分。
3. 透明:将脱水后的组织浸入不同浓度的醇苯溶液中,使组织达到透明状态。
4. 浸蜡:将透明后的组织浸入石蜡中,使组织完全浸渍在石蜡中。
5. 包埋:将浸蜡后的组织放入融化的石蜡中,制成蜡块。
6. 切片:将蜡块置于切片机上,进行切片,切片厚度为4μm。
石蜡切片实验报告
石蜡切片实验报告一、实验目的本次实验旨在研究石蜡切片的制备方法及其在显微镜下的观察。
二、实验原理石蜡是一种固体烷基烃化合物,常用于组织学中的切片制备。
在制备石蜡切片时,需将所需组织样本固定于载玻片上,并使用石蜡作为嵌塑剂进行与样本的包埋。
待到石蜡固化后,便可使用石蜡切片机或手动微调器进行切片。
切片后,可对切片进行染色及显微镜观察。
三、实验步骤1、取一张干净的载玻片,涂上少量的胶水并晾干。
2、取所需组织样本进行处理。
如为植物组织,可直接在生长期较长的表皮或叶片上进行取样;如为动物组织,可通过手术操作或解剖等方法获取所需组织。
取出组织样本后,清洗干净并切成合适大小。
3、将固定好的组织样本倒入石蜡中,将组织样本包埋于石蜡内。
4、等待石蜡凝固,调整切片机或手动微调器,进行切片。
5、将石蜡切片玻片用甲苯或二甲苯进行脱蜡。
6、选择所需颜色及染料进行染色。
7、将染色后的玻片用苏木精固定,晾干后进行显微镜观察和取像。
四、实验结果通过本次实验,成功制备出石蜡切片,并选择了适合的颜色进行染色。
显微镜观察后,能够清楚地看到组织细胞、细胞核等结构,对于组织学研究具有很大的帮助。
五、实验结论本次石蜡切片实验证明了石蜡作为组织学研究中的嵌塑剂是非常重要的。
选择合适的嵌塑剂与染料,在切片之后可以得到良好的显微镜照片,有助于对细胞和组织的进一步分析和研究。
总之,石蜡切片制备是组织学研究的一个重要方法,这个实验的成功进行,不仅让我们深入理解了组织切片的制备过程,也提高了我们对组织细胞结构的深入认识。
植物石蜡切片实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握植物石蜡切片的制作方法,熟悉实验操作流程。
2. 了解植物细胞和组织结构,为后续研究提供可靠的实验材料。
3. 提高实验操作技能,培养严谨的实验态度。
二、实验原理植物石蜡切片是显微镜技术中常用的一种制片方法,通过将植物组织固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色等步骤,将植物组织制成透明、薄而均匀的切片,以便于在显微镜下观察。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜植物材料(如叶片、茎、花等)。
2. 实验仪器:石蜡切片机、烘箱、显微镜、染色缸、小培养皿、镊子、毛笔、吸水纸、纱布、载玻片、盖玻片等。
3. 实验试剂:10%番红水溶液、0.5%固绿(用95%的酒精配制)、酒精(100%、95%、80%、70%、50%)、二甲苯、蒸馏水、甘油、中性树胶等。
四、实验步骤1. 取材:选择新鲜植物材料,用锋利的刀片切取适当大小的组织,迅速固定于FAA固定液中。
2. 固定:将固定后的组织块放入70%酒精中浸泡24小时,以固定细胞结构。
3. 洗涤:将固定后的组织块用蒸馏水冲洗,去除固定液。
4. 脱水与硬化:将组织块依次放入70%、85%、95%、100%酒精中浸泡,每步浸泡1-2小时,直至组织块完全脱水。
然后将组织块放入100%酒精中浸泡24小时,以硬化组织。
5. 脱酒精:将组织块依次放入100%、95%、90%、80%、70%、50%酒精中浸泡,每步浸泡1-2小时,以脱去酒精。
6. 透明:将组织块依次放入95%、100%的酒精和二甲苯中浸泡,每步浸泡1-2小时,直至组织块完全透明。
7. 浸蜡:将组织块放入熔化的石蜡中浸泡,使组织块完全浸入石蜡。
8. 包埋:将浸蜡后的组织块放入石蜡包埋盒中,加入熔化的石蜡,待石蜡凝固后取出。
9. 切片:将包埋好的蜡块放入石蜡切片机中,切片厚度为4-6微米。
10. 粘片:将切片从蜡块上剥离,用载玻片将切片粘附于载玻片上。
11. 脱蜡:将切片放入二甲苯中浸泡,去除切片上的石蜡。
石蜡切片的步骤实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 熟悉石蜡切片的制作流程。
2. 掌握石蜡切片的基本操作步骤。
3. 了解石蜡切片在组织学、病理学等领域的应用。
二、实验器材与试剂1. 实验器材:- 组织切片机- 石蜡切片机- 脱水机- 摊片机- 载玻片- 烤片机- 石蜡- 二甲苯- 无水乙醇- 4%多聚甲醛- 70%、85%、95%、100%乙醇- 75%、85%、90%、95%酒精- 0.1mol/L盐酸- 苏木精- 伊红- 柠檬酸缓冲液- HE染色试剂三、实验步骤1. 取材与固定- 将新鲜组织固定于4%多聚甲醛24小时以上。
- 将组织从固定液中取出,在通风橱内用手术刀将目的部位组织修平整。
- 将修切好的组织和对应的标签放入脱水盒内。
2. 脱水- 将脱水盒放入吊篮里,于脱水机内依次梯度酒精进行脱水。
- 脱水过程:75%酒精1小时,85%酒精1小时,90%酒精1小时,95%酒精1小时,无水乙醇I 30分钟,无水乙醇II 30分钟,醇苯5-10分钟,二甲苯I 5-10分钟,二甲苯II 5-10分钟,蜡I 1小时,蜡II 1小时,蜡III 1小时。
3. 包埋- 将浸好蜡的组织放入包埋机内进行包埋。
- 先将融化的蜡放入包埋框,待蜡凝固之前将组织从脱水盒内取出,按照包埋面的要求放入包埋框并贴上对应的标签。
- 于-20℃冻台冷却,蜡凝固后将蜡块从包埋框中取出并修整蜡块。
4. 切片- 将修整好的蜡块置于石蜡切片机上切片,片厚4微米。
- 切片漂浮于摊片机40℃温水上将组织展平,用载玻片将组织捞起,并放进60℃烤箱内烤片。
- 待水烤干蜡烤化后取出,常温保存备用。
5. 脱蜡至水- 依次将切片放入二甲苯30分钟,二甲苯30分钟,无水乙醇10分钟,无水乙醇10分钟,95%酒精5分钟,90%酒精5分钟,80%酒精5分钟。
- 苏木精染色:将切片放入苏木精染液中染色5-10分钟。
- 水洗:将切片放入清水中清洗。
- 伊红染色:将切片放入伊红染液中染色1-2分钟。
石蜡切片实验报告
石蜡切片实验报告石蜡切片实验报告石蜡切片是一种常见的实验技术,广泛应用于生物学、医学和材料科学等领域。
本实验旨在探索石蜡切片的制备方法、切片技术以及应用领域。
一、石蜡切片的制备方法石蜡切片的制备方法主要包括固定、脱水、浸渗和包埋四个步骤。
首先,需要将待切割的样本进行固定处理,常用的方法有福尔马林固定和乙醛固定等。
固定处理的目的是保持样本的形态结构和化学组成,以便后续的处理。
接下来,进行脱水处理,将固定的样本逐渐置于浓度递增的酒精溶液中,以去除样本中的水分。
然后,进行浸渗处理,将脱水后的样本逐渐浸渗于石蜡中,以增加样本的硬度和刚性。
最后,进行包埋处理,将浸渗后的样本置于石蜡中,使其完全包裹。
制备好的石蜡块可以进行切片处理。
二、石蜡切片的切片技术石蜡切片的切片技术主要包括石蜡块修整、切片机操作和切片收集三个步骤。
首先,需要对石蜡块进行修整,将其切割成适当大小的块,以便放置于切片机中。
修整过程需要注意保持切片块的平整和规整,以确保切片的质量。
接下来,进行切片机操作,将石蜡块固定在切片机上,并设置好切片机的切割参数,如切片厚度和切割速度等。
切片机通常使用旋转刀片进行切割,通过旋转刀片与石蜡块的接触,将石蜡块切割成薄片。
最后,进行切片收集,将切割好的石蜡切片收集起来,可以用于后续的染色、观察和分析。
三、石蜡切片的应用领域石蜡切片在生物学、医学和材料科学等领域有着广泛的应用。
在生物学研究中,石蜡切片可以用于组织学研究,通过切割和染色石蜡切片,可以观察和分析生物组织的形态结构和细胞组织的分布情况,从而揭示生物组织的功能和病理变化。
在医学诊断中,石蜡切片可以用于病理学检查,通过切割和染色石蜡切片,可以观察和分析患者组织样本中的异常变化,为医生提供诊断依据。
在材料科学研究中,石蜡切片可以用于材料分析,通过切割和染色石蜡切片,可以观察和分析材料的微观结构和组分分布,从而揭示材料的性质和特性。
总结起来,石蜡切片是一种重要的实验技术,具有广泛的应用领域。
生物显微重点技术实验指导
实验一石蜡切片技术——取材、包埋一、实验目旳掌握制作石蜡切片中取材、包埋旳基本操作技术。
二、实验用品1、实验材料:鱼2、实验试剂:10%甲醛溶液(40%甲醛10ml,蒸馏水90ml)、50%酒精、70%酒精、80%酒精、90%酒精、95%酒精、100%酒精、二甲苯、石蜡。
3、实验器具:解剖器,双面刀片,小瓶,牛皮纸、电热恒温箱、脱水机、包埋机。
三、实验环节1、取材:用任何杀生旳措施把鱼杀死,将腹腔打开,切取0.5cm3左右大小旳肝脏、肠等组织。
2、固定:将切好旳组织直接投入10%甲醛固定液中,固定24h。
3、脱水:50%酒精→70%酒精→80%酒精→90%酒精→95%酒精→100%酒精→100%酒精。
每级1-2h。
70%酒精处可长期保存。
4、透明:1/2二甲苯+1/2100%酒精(1-2h) →纯二甲苯(1h) →纯二甲苯(1h)5、浸蜡:石蜡先置于60℃旳温箱中,倒入含二甲苯及材料旳小瓶中置于37℃温箱中,放置2-4小时。
6、包埋:先提高恒温箱旳温度至60℃,换纯蜡3次,每次1-2h,用牛皮纸叠纸盒,置于45-60℃旳烫板上,倒入材料,摆放好材料,把标签(正面向外置于底部),补足石蜡,倒好后轻轻旳置于冷水盆中,注意底面要接触盆中凉水,待石蜡所有凝固后可取出晾干,也可在凉水盆中放置过夜。
四、作业分析总结石蜡切片技术中固定和包埋旳操作注意事项有哪些?附:折纸盒按下列顺序折叠:(1) 折AA'及BB';(2) 折CC'及DD';(3) 折CE'与AE'、向外夹出EE'。
同样折出FF',GG'及HH';(4) 使CE'E与E'IE两三角形相叠,并沿E'C和EI重叠旳折痕向后转折。
同样折其他三只角;(5)折RIJF向外,同样折出GKLH,即折成所需旳纸盒。
实验二石蜡切片技术——切片、贴片一、实验目旳掌握制作石蜡切片中切片、贴片旳基本操作技术。
石蜡切片制作实验报告(一)
石蜡切片制作实验报告(一)石蜡切片制作实验报告概述本次实验是制备组织学切片中使用的石蜡切片。
石蜡切片是组织学研究中常用的一种切片制备方法,通过将组织固定、脱水、浸蜡以及切片等一系列步骤使组织固定在切片上,以供观察。
实验流程本次实验按照以下流程进行:1.取出组织标本,进行固定处理;2.固定后的组织在不断升级的酒精浓度溶液中脱水处理;3.使用排除气泡的炉子将组织浸泡至石蜡中,使其渐渐浸润;4.开始制作切片,将浸润的石蜡切片头制作成适当的角度,再使用切片机器进行切割即可。
具体步骤如下:固定处理1.取出标本,大小适中,保证可以在容器中完全浸润。
2.采用福尔马林-10%缓冲液进行固定,时间不宜过久。
3.在80%乙醇、95%乙醇、100%乙醇各中脱水15min,最后再脱水30min。
石蜡浸渗1.将组织标本放入去离子水中洗涤;2.放入甲醇2小时,2次更换甲醇;3.放入Pure-Lab99嵌入剂:甲醇(2:1、1:1、1:2)中渗透2小时,每次更换的比例变化,最后放在纯浸润剂中浸润15h以上。
4.上蜡,10min90℃,2h60℃接着重复2次10min90℃,最后重复最后一次的操作3次。
制作石蜡切片1.根据需要顺序排布组织标本,并将其固定在切片支架上。
2.制作切片头,可用吹软机将石蜡制软。
3.使用切片机器对浸润好的石蜡进行切割,厚度一般为5-8μm。
实验结果经过以上步骤,我们制得的石蜡切片呈现出清晰、平整、稳定的状态,对组织结构的观察达到了预期目的。
总结本次实验是比较基础的组织学实验,对于相关领域的学习和研究有很大的帮助。
在实验过程中,需要注意每一个步骤的顺序和时间,并根据实际情况做出适当的调整。
同时,在实验结束后需要及时清理相关设备和处理化学废品,保持实验室的安全和整洁。
参考文献•Junqueira, L. C., Bignolas, G., & Brentani, R. R. (1979).Picrosirius staining plus polarization microscopy, aspecific method for collagen detection in tissuesections. The Histochemical Journal, 11(4), 447-455. •Kohno, Y., & Ohtani, S. (1996). Aging of the adrenal glands: microarchitectural changes and cellproliferation in the rat adrenal cortex underadrenocorticotropic hormone stimulation. Archives ofHistology and Cytology, 59(4), 411-422.•Stearns, M. E. (1989). Histology and histochemistry of human prostate. The Prostate, 14(4), 303-317.致谢在实验过程中,我们受到了教师和同学们的悉心指导和帮助,在此谨向他们致以最诚挚的感谢。
石蜡切片实验报告
石蜡切片实验报告
实验目的:
1. 掌握石蜡切片的制备方法;
2. 观察石蜡切片下细胞结构的形态变化。
实验器材:
1. 细胞样品(如植物组织或动物组织);
2. 甲苯;
3. 石蜡;
4. 切片机;
5. 切片夹;
6. 显微镜。
实验步骤:
1. 准备样品:取一块大小适中的组织样品,将其固定在甲醛中。
2. 组织脱水:将固定的组织样品放入不同浓度的醇中,逐渐提高浓度,直至浓度达到100%的醇。
3. 渗透:将脱水后的组织样品浸泡在甲苯中,使其充分渗透。
4. 包埋:将渗透后的组织样品放入熔化的石蜡中,使其完全包埋,并将其固化。
5. 制备切片:将固化的组织样品放入切片机中,用切片夹固定,并使用切片刀将其切割成薄片。
6. 切片上染:将切片浸泡在甲醛中进行染色处理,使细胞结构更加鲜明可见。
7. 盖玻片:将染色后的切片移至玻片上,并在上方加一两滴甲醛。
8. 干燥:将盖玻片放入带有热盖玻片机中,将其加热至切片周
围甲醛完全蒸发。
9. 观察:将干燥后的切片放置在显微镜下,利用透明光源进行观察。
实验结果与讨论:
经过石蜡切片制备方法处理后的样品,能够更加清晰地观察到细胞的形态和结构。
石蜡切片使细胞得到了固定和保护,使细胞结构更加稳定,方便观察和研究。
同时,切片上染的染色处理也增强了细胞结构的对比度,使其更加明显可见。
结论:
石蜡切片制备方法可以有效地固定和保护细胞结构,使其在显微镜下观察得更为清晰和明确。
通过石蜡切片制备方法,可以进一步探究细胞结构和功能,为细胞学研究提供基础。
石蜡切片实验报告
石蜡切片实验报告一、实验目的石蜡切片技术是组织学、病理学等研究中常用的实验方法,通过本实验,旨在掌握石蜡切片的制作流程,了解组织的微观结构,为后续的研究和诊断提供可靠的样本。
二、实验原理石蜡切片是将组织经过固定、脱水、透明、浸蜡、包埋等一系列处理后,制成薄切片,再进行染色和封片,以便在显微镜下观察组织的形态和结构。
其原理是利用石蜡的渗透性和可塑性,将组织包裹在其中,制成均匀的薄片,使细胞和组织的形态得以保存。
三、实验材料与设备1、实验材料新鲜组织样本(如肝脏、肾脏、肌肉等)固定液(如甲醛溶液)乙醇(不同浓度梯度)二甲苯石蜡苏木精染液伊红染液中性树胶2、实验设备切片机恒温箱显微镜移液器染色缸载玻片和盖玻片四、实验步骤1、取材与固定选取新鲜的组织样本,大小约为 10cm×10cm×03cm。
将组织迅速放入固定液中,固定时间根据组织的大小和性质而定,一般为 12 24 小时,以确保组织中的蛋白质等成分得以固定,保持细胞和组织的原有形态。
2、脱水从固定液中取出组织,依次放入 70%、80%、90%、95%和 100%的乙醇中进行脱水,每个浓度梯度浸泡 1 2 小时,以去除组织中的水分。
3、透明脱水后的组织放入二甲苯中进行透明处理,透明时间约为30 分钟,使组织变得透明,以便石蜡能够渗透。
4、浸蜡将透明后的组织放入已融化的石蜡中,在 60℃恒温箱中浸蜡 2 3小时,使石蜡充分渗透到组织中。
5、包埋预先准备好包埋模具,将浸蜡后的组织放入模具中,注入融化的石蜡,冷却凝固后形成蜡块。
6、切片使用切片机将蜡块切成厚度为4 6μm 的薄片。
7、展片与贴片将切好的薄片放入 40℃左右的温水中展平,然后用载玻片将其捞出,使切片贴附在载玻片上。
8、烤片将贴有切片的载玻片放入 60℃恒温箱中烤片 1 2 小时,使切片牢固地贴附在载玻片上。
9、染色脱蜡至水:将切片依次放入二甲苯、不同浓度的乙醇中进行脱蜡和复水。
石蜡切片实验报告
石蜡切片实验报告石蜡切片实验报告实验目的:熟悉石蜡切片技术的操作方法,了解石蜡切片制备的过程,并观察切片的结构。
实验原理:石蜡切片是一种常用的组织学检查方法,常用于生物组织的切片制备。
石蜡可以通过渗透,浸渍和固化来固定生物组织,并使其变硬,便于切割。
切片制备过程中,石蜡会填充生物组织的间隙,使组织保持形状和结构,便于显微镜下的观察。
实验材料:1. 组织样本:动物组织片或植物组织片2. 10% 罗丹明B 染液3. 显微镜玻片和盖玻片4. 切片刀、切片夹、玻璃棒5. 石蜡实验步骤:1. 取出石蜡块并加热至熔化状态。
注意,石蜡的熔点通常在60-65°C。
2. 取出组织样本,并用10% 罗丹明B 染液浸泡片段10-15分钟,以染色组织。
3. 将熔化的石蜡倒入切片模具中,随后将组织样本放入石蜡中,确保完全浸没。
4. 将切片模具放入冷却器中,降温至室温,使石蜡凝固。
5. 取出切片模具,用切片刀将切片切下。
切割时,角度和刀的质量对切片质量都有影响,所以操作要尽量快速、准确。
6. 将切片用切片夹固定在显微镜玻片上。
7. 用玻璃棒平均地将切片摊开,以避免切片叠合。
8. 将切片放入加热板上烘干至石蜡融化。
9. 取出加热板,用盖玻片覆盖在切片上。
实验结果:通过显微镜观察切片,可以清晰地看到组织的细胞结构和细胞器,以及组织之间的关系。
切片的质量和染色效果会受到操作技术和实验条件的影响。
实验总结:本实验通过熟悉石蜡切片技术的操作方法,使我了解了石蜡切片制备的过程,并通过观察切片的结构,加深了对生物组织的了解。
同时,实验也提示了切片制备中的一些注意事项,例如切割角度和切片刀的质量对切片质量的影响等,这将为今后的实验操作提供有益的参考。
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组织石蜡切片技术
(编写者:艾鹏飞)
原理:以石蜡作为包埋剂,用旋(回)转切片机切成薄片,经脱水、染色、再脱水、通明、封片等处理制成永存切片,便于在显微镜下观察组织、细胞内的显微形态和结构。
药品与试剂:
福尔马林、二甲苯、石蜡、乙醇(50%、70%、80%、95%、100%)、蒸馏水、合成树脂、鲜蛋白、纯甘油、麝香草酚、冰醋酸、硫酸铝钾、碘酸钠、伊红Y、苏木精。
仪器及设备:
恒温水浴箱、金属包埋框(或玻璃平皿、硬纸折叠小盒等)、酒精灯、毛笔铅笔、小刀、持蜡器、擦布、切片刀、切片机、载玻片、盖玻片、玻璃棒、滴管、烧杯、无菌手术器械(包括眼科剪刀、眼科镊子、小脂肪夹)、2毫升注射器、显微镜、接物测微计、接目测微计。
1、取材:
组织块长1.0厘米,宽0.5厘米,厚0.5厘米,注明样本(根尖、叶片、花药、子房等)名称、编号。
如用种子萌发的根尖,在根长至1-2厘米时,切取靠近根尖端部根茎约0.5厘米。
2、固定:
用FAA固定液(5%福尔马林+5%冰醋酸+90%的70%酒精)固定24h。
3、冲洗:
用70%酒精换洗3次,每次1-2h。
4、脱水:
80%、90%乙醇1—2h,再分别用无水乙醇(A)、(B)各脱水1—2h。
5、透明:
无水乙醇:二甲苯(1:1)透明1-2h,二甲苯(A)、(B)各透明1—2h。
6、透蜡:
买来的新蜡需经过煮炼方可使用,方法是:加温至60℃熔化,待凝固后再熔化,反复加温多次以除去石蜡内的水分,增加石蜡的密度,最后经过滤后使用。
依次用1:1、1:2二甲苯石蜡各浸泡15—20min(55℃),再分别用石蜡(A)、(B)各浸泡20—30min(60℃)。
此过程在恒温水浴箱中进行。
7、包埋:
包埋,即将浸透石蜡的组织块铸成蜡块的过程。
目的是增加组织的硬度,以便制成微薄的切片,其过程如下:
(1)将所用器械,包括金属包埋框(或是玻璃平皿,硬纸折叠小盒等),包埋用解剖镊等放入熔蜡箱内,烘热待用。
(2)将酒精灯点燃,从熔蜡箱中取出包埋框,于包埋框及其底板(通常用金属板或玻璃板)上涂一层液状石蜡或甘油,然后将熔化了的石蜡小心注入包埋器内。
(3)用热镊子取出渗透石蜡的组织块,平置于包埋器内,注意将所需要的切面向上,平贴于包埋器的底部。
(4)将组织埋妥后及时将标本标记紧贴于所包组织的蜡块边缘,以免混乱。
标记可用铅笔、毛笔书写,千万不可用钢笔或圆珠笔。
(5)当于室温下包埋器表层的石蜡凝固后,将包埋器平稳拿起,放入冷水中,以便包埋蜡块快速冷却凝固。
注意一定要等表层石蜡凝固后再放,否则水浸入蜡块内,使蜡块内出现水泡,致包埋失败。
(6)包埋好的蜡块应进行修整,从包埋框取出蜡块,用小刀依照组织大小,切去边缘余蜡。
注意蜡块四边均要平切,组织周围留下适度蜡边,底部平切,使成平整方块,其高度不宜超过1厘米,切忌损伤组织块。
(7)包埋好的蜡块应呈均匀的半透明状,若蜡块中组织出现混浊,则可能是由于组织脱水、透明不充分所致。
若蜡块中出现白色冰花样结晶,则可能是由于包埋动作太慢,放入组织块时石蜡已出现部分凝固,或是包埋用石蜡中含有过多的二甲苯,还可能是冷却用水温度高,石蜡包埋完好后不能快速凝固而引起。
8、切片及粘片:
(1)将修整好的包埋组织蜡块固定于持蜡器上。
(2)准备好毛笔,盛蜡带的玻璃纸盒(或木盘),清洁机件和刀的擦布,眼科
镊子,小解剖刀及粘附刀片用的温水和“蛋白甘油”。
(3)从盒中取出切片刀,用布擦去油迹,必要时在显微镜下检查刀刃。
将切片刀装上切片机持刀台。
然后将预定使用的刀口移至蜡块胶块的下方。
刀的倾角一般以4-6度为适当(倾角是指刀刃与蜡块平面所成的角)。
如倾角过大则切片上卷,过小则切不成完整切片。
(4)固定好切片刀后,松开转轮固定器,使转轮缓慢下降至蜡块胶块稍离刀口为止,然后调整厚度指针(5-10微米)即可切片。
(5)石蜡切片的粘贴方法:
①展片台法:
展片前取干净载玻片滴“蛋白甘油”一滴于切片中央,用小指轻轻涂抹均匀,然后滴加蒸馏水1滴,用小镊子夹取切好的蜡片,使其浮于水面上,摆正位置后在酒精灯火焰上方适度加热至蜡片舒展。
或放置于预先加热的展片台上(温度保持在40~45℃)。
此时蜡片因受热而伸展摊平。
放入温箱(37℃)一昼夜使其干燥,蜡片即可以粘牢。
②捞取法:
以器皿盛温水或用恒温水浴锅使温度保持约48℃左右,将蜡片摊于水面上,蜡片受热便自然打开,然后用涂有“甘油蛋白”的载片伸入水中,将蜡片移至玻片上,调整位置,倾区多余的水分后温箱干燥。
蛋白甘油的配制:
鲜蛋白30毫升,纯甘油30毫升,麝香草酚0.1—0.2克。
将鲜蛋白放入烧杯内,加入麝香草酚,然后用玻璃棒充分搅拌,再加入甘油继续搅拌,最后用粗滤纸或棉花过滤即可使用,此液放入冰箱可保存数月。
8、脱蜡复水:
石蜡切片经二甲苯(A)(B)脱蜡各5~10min,然后放入100%、95%、90%、80%、7%0等各级酒精溶液中各3~5min,再放入蒸馏水3min.
8、染色:
苏木精—伊红染色法(H.E染色法):
(1)苏木精染液(Mayer苏木精染液改良法的配制):
甲液—苏木精 1g
无水乙醇 50ml 冰醋酸 5ml 甘油 50ml 乙液—钾矾(硫酸铝钾) 5g
蒸馏水 50ml
后加碘酸钠 0.2g
配制时,苏木精溶于约15ml无水乙醇中,加冰醋酸后搅拌。
当苏木精溶解后倒入甘油并摇动容器,同时加入其余的酒精(甲液)。
钾矾在研钵中研碎后加热,然后将它溶解于水中(乙液)。
将温热的乙液一滴一滴地加入到甲液中,并随时搅动。
混合完毕后,加入0.2g碘酸钠,使其成熟。
(2)伊红染液(酒溶性伊红):
伊红Y 1克
95%酒精 100毫升
冰醋酸 10滴
把伊红溶于酒精中,后加入冰醋酸一小滴。
还可以加入少许麝香草酚以防腐。
(3)染色步骤:
苏木精染色:氧化苏木精染液染细胞核20~30min(20℃)。
自来水冲洗15min后,蒸馏水洗5分钟(冲洗过程中,镜检见切片颜色发蓝)。
伊红染色:苏木精染色水洗后,切片在50%、70%、80%、90%乙醇中各3~5min 后,伊红染细胞质2—5分钟。
染色后再次脱水透明(步骤如下):
脱水透明
9、封固:
切片经染色、脱水、透明后即可用封藏剂把它封固起来。
封固目的为使切片能永久保存便于镜检。
作为封固剂必须要能与透明剂相混合,又要对染料无影响,并且折光率须与玻片相似,还必须具有粘性。
封藏剂选用合成树脂。
从透明剂中取出切片擦去多余二甲苯,然后滴一滴封藏剂于切片上,用盖片夹夹取盖片,将盖片一侧先与封藏剂接触,然后轻轻放下盖片即可。
切勿将盖片急速投下,以免产生气泡,影响观察。