特殊染色技术的应用

特殊染色技术的应用

特殊染色技术的应用现代病理学中免疫组织化学技术.电子显微镜技术以及其它细胞及分子生物学技术应用日益广泛，但由于这些技术要求一定的实验条件以及所需的试剂价格较为昂贵，对于一部分病人以及某一些基层医院是比较难以接受的。而组织化学技术则具有无需复杂的实验条件以及较为昂贵的试剂操作又比较简单的优势，在临床病理学诊断中具有重要的应用价值。

比如，当细胞中出现色素，是黑色素还是含铁血黄素以及当组织中出现均一化学物质是否为淀粉类物质等，用组织化学技术区别起来很简单，所以组织化学技术，虽然已有几年到几百年的历史，仍是一个很有实用价值的技术。

组织化学染色的方法很多，我们仅介绍几种常用的组织化学染色在病理诊断中的应用。

一.胶原纤维的染色凡是间叶组织细胞都可产生网织纤维，也可产生胶原纤维，纤维母细胞是产生胶原纤维的主要细胞。胶原纤维是结缔组织中的主要纤维，是结缔组织中起支持作用的重要部分，具有一定的韧性和坚固性，能抵抗一定的牵引力而不致撕裂。胶原纤维是原胶原互相错开1/4平行排列交联成胶原原纤维，胶原原纤维再聚合成较宽的结构。按胶原的化学成分可分为15种，间质中的胶原纤维主要由I.Ⅱ.Ⅲ型胶原组成，新鲜时呈白色，故又称为白纤维。在HE染色中呈均一的粉红色，与周围间

质区分不是很清楚。染色后，便可明显区别开来，易于观察病变时胶原纤维的变化。

应用： (1)器官硬化性疾病的观察：如肝硬变.心肌瘢痕的观察，胶原染色更易于观察诊断。

(2)瘢痕与淀粉样物质鉴别：前者胶原纤维染色为阳性，后者为阴性。

(3)骨纤维异常增殖病与骨纤维化的鉴别：利用胶原纤维染色可较易观察前者胶原纤维紊乱，纵横交错，后者较规则。

二.网状纤维染色网状纤维是非常细而短的纤维，大量堆积时则形成致密的网状，故有网状纤维之称。疏松组织中网状纤维比较少，它多分布在结缔组织与其它组织交界处，如在上皮组织与结缔组织交界处的基膜内，毛细血管周围以及造血器官，内分泌腺的腺细胞团索和外分泌腺的腺末房周围等处均有丰富的网状纤维。

网状纤维的变化，反映了疾病的发生和发展的不同过程，对疾病的诊断有极大意义。网状纤维的多少.粗细紧密.疏松或断裂，都是病理检验的重要指标，尤其是在临床病理诊断中，可根据其存在和分布来鉴别癌与肉瘤。而在HE染色标本上，网状纤维不易显色。所以网状纤维的组织化学染色，在临床病理诊断上占着相当重要的位置。

应用： (1)癌与肉瘤的鉴别：在网状纤维染色下可清楚显示出肉瘤每一个细胞周围有网状纤维围绕，或似为团状或巢状的瘤

组织，但团巢内仍有破碎的网状纤维，癌显示为明显巢或索状，

巢内无网状纤维。

(2)骨基质与浓缩的分泌物.血浆或水肿液的鉴别：骨基质内

有网状纤维，而后者无。

(3)炎症细胞与癌细胞的鉴别：在支气管活检中有时挤压较重，一些深染的细胞挤压成团，难以判断是受挤压的炎症细胞。

这种病例染网状纤维有利于鉴别，炎症细胞不成巢，小细胞癌可

有巢状或索状结构。

(4)坏死与死后自溶的鉴别：在胰腺是生前坏死还是死后自溶有时很难鉴别，染网状纤维，前者网状纤维支架破坏较严重，结

构塌陷，而后者虽然死后自溶严重，但网状纤维支架结构常可保存。

(5)血管性肿瘤的鉴别：有时血管内皮细胞瘤与血管周围细胞瘤常规染色较难鉴别，网状纤维染色，可显示清楚的血管结构，

看清肿瘤细胞与血管关系有利于鉴别。内皮细胞性肿瘤，肿瘤位

于血管壁的网状支架内，而外周细胞则围绕着血管壁或与之呈放

射状排列。

(6)肝硬化及慢性肝炎肝细胞碎片状坏死或纤维化的鉴别： a.慢性活动性肝炎坏死灶有时较难辨认，染网状纤维显示局部有网

状支架的破坏与崩解，结合HE切片较易判断小灶状坏死。b .慢

性活动性肝炎轻度纤维化，在网状纤维染色下较易判断。c .慢性淤血性肝硬变有时较难判断，网状纤维较易观察中央静脉及小叶

下静脉通道上的网状纤维增生。增生较明显，有反包围现象，形成假小叶结构，就可诊断淤血性肝硬变。

(7)萎缩性胃炎的诊断：在HE染色胃粘膜有无萎缩较难判断，网状纤维染色可较清楚显示胃粘膜正常结构破坏，间质纤维增生，有助于胃粘膜萎缩的诊断。

(8)有助于癌浸润的诊断，有些上皮性肿瘤是否早期突破基底膜形成浸润，HE染色难以确诊，而网状纤维染色可较清楚显示基底膜，较易确定基底膜有无早期浸润破坏现象。

(9)脑内原发瘤与转移瘤的鉴别：脑内绝大多数肿瘤网状纤维很少，只有血管周围有少量网状纤维，而转移癌及肉瘤都有明显的网状纤维，故有利于鉴别。

(10)非干酪性结核与结节病的鉴别：后者结节内及结节周围较早出现明显的网状纤维，观察此有利于二者鉴别。

(11)淋巴结病变的判断： a.良性滤泡性反应性增生与滤泡性淋巴瘤鉴别，染网状纤维后显示：后者滤泡间网状纤维减少且有受挤压现象，前者网状纤维增加且较紊乱。b .判断淋巴结的正常结构：有时HE切片较难判断正常结构是否完整，染网状纤维。皮髓质及窦的结构较清楚，若为炎症或肿瘤性破坏则较难辨认。

三.弹力纤维染色弹力纤维是结缔组织发生形成较晚的一种纤维，在创伤修复中一般在45周才有较明显的弹力纤维形成。弹力纤维艰固.较小而弹性较大，容易伸展，在结缔组织起弹性作用。弹力纤维由弹性蛋白组成，新鲜时呈黄色又称黄纤维。弹力

纤维纤维分枝连成网，折光性强，含量多时在HE染片上呈折光性强的粉红色，量少的不显色。故量多时与胶原纤维不易区别，量少则不能观察。弹力纤维染色主要用于观察弹力纤维有无增生.肿胀.断裂.破碎及萎缩或缺如等病变。

应用： (1)动静脉的辨认：在血管病变时是动脉还是静脉以及是否为血管壁难辨认时，弹力纤维染色有助于辨认。有弹力板者为动脉，有弹力纤维构成血管轮廓者为血管。弹力纤维抗损伤能力较强，故弹力性纤维构成血管轮廓不易损坏。

(2)弹力纤维瘤的诊断：弹力纤维染色可见瘤样病变内有大量弹力纤维增生，非真性肿瘤。

(3)心血管先天性弹力组织增生，这组疾病有先天性内膜炎及冠状动脉的弹力纤维组织增生。弹力纤维染色有助于诊断。

(4)弹力纤维损伤性疾病：这组疾病有肺气肿.动脉粥样硬化.大动脉中层炎症等，弹力纤维染色有助于这些疾病的观察诊断。

(5)一些与弹力纤维变化有关的皮肤疾病的诊断与鉴别诊断：这组疾病有皮肤松驰症，萎缩性硬化性苔藓等，其诊断与鉴别诊断常依赖于弹力纤维染色，以观察弹力纤维变化。

四.脂质染色脂肪和类脂统称为脂类，它是构成机体的正常成份，脂肪主要积于脂肪组织中，并以油滴状的微粒存在于脂肪细胞胞浆内。因脂肪溶于酒精，故在HE染色中则被溶解掉，因此对某些疾病不能判断，所以必须进行脂肪染色。