旋光度测定标准操作规程

范围：原辅料、半成品及成品

职责：检验室对本规程的实施负责

正文：

1.原理

旋光度测定法是利用平面偏振光，通过含有某些光学活性化合物的液体或溶液时，能引起旋光现象，使偏振光的平面向左或右旋转，此种旋转在一定条件下有一定度数，称为旋光度。使偏振光向右旋转者（须时针方向）称为右旋物质，常以“+”号表示。使偏振光向左旋转者（反时针方向）称为左旋物质，常以“-”号表示。影响物质旋光度的因素很多，除化合物特性外，还有偏振光通过供试品液层的浓度和厚度，通过光线波长和测定时的温度。当偏振光通过长1dm、每1ml中含有旋光性物质1g的溶液，使用光线波长通常为钠光D线（589.3nm）或汞的404.7、546.1nm

表示。比旋等谱线，测定温度为20℃时，测得的旋光度称为物质的比旋度，以[a]20

D

度是物质的物理常数。因此可用以区别或检查某些药品的光学活性和药品的纯杂程度。由于旋光在一定条件下与浓度呈线性关系，故而还可以用来测定含量。

平面偏振光的产生，过去都是使用尼科尔棱镜，这是用一种天然的晶体如方解石等经切割后制成，现在大都用塑料膜涂上某些具有光学活性的化学物质使其产生偏振光。最早的圆盘旋光仪，就是由钠光灯光源、起偏镜、检偏镜、测试管、半影板调零装置和支架六部分组成。由于用人的眼睛观察视野光强是否一致，比较费力，而且主观误差也大，因此目前大都被光电机相互结合组成的自动指示旋光仪或数字显示旋光仪所取代。

2.样品测定操作法

旋光度测定法主要用于药典某些品种性状项下比旋度的测定，或一些制剂的含量测定。

2.1比旋度测定按各品种项下规定的方法配制供试品溶液，在规定的温度和放置时间内测定。中国药典要求：如无特殊规定，旋光度的测定温度，应为20±0.5℃。测定前首先应将室温调至规定温度，然后用配制供试品的空白溶液校正零点或测定停点，以便扣除空白数。如调节室温有困难，宜用具有夹层可联通恒温水溶的试样管，盛供试品溶液，恒温后测定。不得已时，可在恒温水浴中配制供试品溶液，再迅速移入试样管测定。药典规定常用测定比旋度的溶液多为水溶液，有时也用稀释的盐酸溶液或氢氧化钠试液，或有机溶剂如乙醇、氯仿、二氧六环等溶液主要是按照供试品在各种溶剂中情况决定。药典配制溶液的浓度大都根据药品的比旋度大小使配成的测定液旋光度一般应左旋或右旋2～8℃范围，测定值太小，在读取旋光度时容易造成误差，且在称量上也易产生误差，一些溶解小的可以例外，用旋光法作含量测定时应当称取2份做平行试验。装入测定溶液时应避免产生气泡，旋紧测试管两端螺帽时，不应用力过大以免产生应力，造成误差，测定旋光度应重复读取3次，取平均值，按规定公式计算结果。

2.2用旋光法测定供试品的含量测定时要求按照各该品种含量测定项下规定

操作，配制浓度太大或太小，有时会影响测定结果的准确度，其它操作可参考2.1。

3.测定操作注意事项

3.1温度对旋光度影响不大的供试品，一般可在室温测定。对温度有严格要求的供试品，必须按规定执行，否则会造成误差。

3.2未接通电源前应检查仪器样品室内有无异物，钠光灯和其它示数开关是否放在关或规定的位置，仪器放置位置是否合适。钠光灯启辉后仪器不许搬动，以免损坏钠光灯。具有直流极性开关的仪器应适当选择转换方向。

3.3钠光灯启辉后至少20分钟后发光才能稳定，测定或读数时应在钠光灯稳定后读取，测定时钠光灯尽量使用直流电路供电。有的仪器规定不测定时间间隔较长时，可置于交流供电，以延长钠灯寿命。

3.4测定零点或停点时，必须按动复测按纽数次，使检偏镜分别向左或向右偏离光学零位减少仪器的机械误差。同时通过观察左右复测数次的停点，检查仪器的重复性和稳定性，必要时也可用旋光标准石英管校正仪器的准确度。

3.5测定管若有气泡，应先使气泡浮于凸颈处或除去。透光面两端的玻璃应用布擦干，测定置两端的螺帽应旋至适中位置，过紧容易产生应力，过松容易漏液。测定管旋转时应注意标记的位置和方向。读取零点或停点应重复3次。

3.6往测试管加入供试品溶液时，应反复用供试品溶液冲洗测试管数次，以免供试浓度改变。

3.7浑浊或含有小颗粒的溶液不能测定，应先将溶液离心或滤过，弃去初滤液后取滤液测定。在测定液长有强吸收的溶液也不能测定。

3.8有些化合物见光后旋光度变化很大，应绝对避光操作，有些化合物对放置时间要求很严格，必须完全按照规定的时间测定读数。

3.9仪器的各个光学镜片应保持干燥清洁，防止灰尘和油污的污染，钠灯有一定的使用寿命，连续使用一般不超过4小时，亦不准瞬间内反复开关。

3.10测定结束后测试管必须洗净晾干，以备下次再用，不准许将盛有供试品的测试管长时间的放置在仪器的样品室内。仪器不使用时样品室可放硅胶吸潮。

4.计算与结果判断

4.1供试品的比旋度[a]按下列公式计算：

液体样品[a]=

固体样品[a] =

式中 D为钠光谱的D线；

t为温度；

l为测试管长度dm；

a为测得的旋光度；

d为液体的相对刻度；

c为100ml溶液中含有被测物质的重量，g（按干燥品或无水物计算）。

4.2结果的判断旋光法多用于比旋度测定，药典规定的比旋度多有上下限度或最低限度，可根据上述计算公式得出供试品比旋度，判断样品是否合格。测定含量时，2份供试品测定读数结果其极度差应在0.02°以内，否则应重做。