天然产物活性评价方法概述
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2019/8/18
应用实例
多糖促进睡眠功能的动物实验方案
2019/8/18
直接睡眠实验
实验动物
成年小鼠、性别单一，18-22g，每组12只。
剂量分组及受试样品给予时间
三个剂量组（人体推荐剂量5倍、10倍、20倍）和一个空白
对照组，给药30天。
实验方法：睡眠以翻正反射消失为指标。i.g.给药，
3. 大白鼠饲养与药物刺激 用常规方法饲养大白鼠，用适当计量的药物喂养大白鼠，不同的时间取大白鼠的 适当器官（根据所筛选的药物而定），抽提刺激前后的mRNA;
4. 刺激前后的mRNA的制备即标记 5. 杂交及扫描 6. 数据分析及学分析
用表达谱数据库及配套软件分析受药物诱导的基因，针对这些基因的功能确定药 物的疗效。
2019/8/18
生物活性评价新方法
基因组法生物活性评价新方法
1. 基因的选择与实验设计 根据表达谱数据库选择5000-10000个与发育及疾病相关的基因;
2. 细胞的培养与药物刺激 根据目的药物及表达谱数据库种细胞表达谱选择适当的细胞系，用适当计量的药 物加入液中，不同的时间取样，抽提刺激前后的mRNA;
2019/8/18
参考文献
Abood R.R. Pharmacy practice and the law. Gaithersburg, Md. : Aspen, 1994.
Kayser Oliver. Pharmaceutical biotechnology:drug discovery and clinical applications. John Wiley, c2004.
(动物)体内评价方法 给药(administration)
灌胃给药(intragastric injection，i.g.) 腹腔注射(intraperitoneal injection,i.p.) 肌肉注射（(intramuscular injection，i.m.） 静脉给药(intravenous injection,i.v.) 皮下注射(subcutaneous injection，s.c.)
0.4ml/20gBW。
结果分析：比较对照组与实验组入睡动物数及睡眠时间的
差异。
2019/8/18
分组
随机原则 实验组、对照组（空白、阳性） 重复实验 动物标记：染色法（苦味酸、中性红）、耳孔法、烙印法、挂
牌法等标记编号方式
2019/8/18
（动物）体内评价方法
动物模型的确立
正常动物 麻醉动物 病症动物模型
确定剂量
剂量折算 剂量范围
2019/8/18
2019/8/18
生物活性评价新方法
生物大分子相互作用法
原理：生物大分子与靶蛋白特异结合而产生生物活性，通
过一种基于表面等离子共振技术的生物传感免疫分析系统 （BIA）系统对生物大分子与靶蛋白结合动力学过程的描述， 表征生物大分子的活性大小，实现对生物大分子活性的在 线监测。
特点：直接、快速 应用：药物筛选 建立以受体、酶为作用靶的分子水平的药物筛选系统
天然产物活性评价方法概述
2019ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ8/18
天然产物生物活性评价程序
活性的一般筛选 治疗的潜力 长期给药的作用评价
2019/8/18
天然产物生物活性评价方法
体外评价方法 例：小柴胡汤对人肝癌细胞株和胆管细胞癌株的抑制作用。 动物体内评价动物体内评价 例：小柴胡汤致有丝分裂直接加到细胞培养基中具有致有丝分裂作用。但血清
实验动物
小白鼠(mouse) 大白鼠(rat) 豚鼠(cavy) ） 蛙或蟾蜍(frog or toad) 家兔(rabbit) 狗(dog)
2019/8/18
（动物）体内评价方法
实验动物的选取
种类 鼠、兔、猫、狗（选择敏感动物，例催吐） 性别、年龄、纯种 新生鼠缺乏许多酶系统。
2019/8/18
(动物)体内评价方法
麻醉(anesthesia)
局部麻醉（local anesthesia）例：以0.5～2%普鲁卡因(procaine)给
兔颈部皮下作浸润麻醉。
全身麻醉（general anesthesia） (1) 吸入麻醉（inhalation anesthesia） (2) 注射麻醉（injection anesthesia）
药理则无此作用, 其原因可能由一些大分子物质不能从胃肠道吸收或其有效成 分经消化道及肝脏代谢失效所致。
基因组学方法对疾病相关基因的研究为药物筛选提供靶基因 例：香港科技大学生物技术研究所利用基因芯片技术筛选知母的有效成份. 生物大分子相互作用新方法
例：抗凝血药物筛选。
2019/8/18
体外评价方法
2019/8/18
（动物）体内评价方法
采血
尾尖取血 眶动脉和眶静脉取血（摘眼球） 球后静脉丛(post-glomus venous plexus)取血 心脏取血 断头取血
处死
2019/8/18
（动物）体内评价方法
研究内容
时效性 量效性
数据分析
显著性分析
体外评价方法
生化实验方法 例：抗氧化活性、抗凝血。 细胞培养方法 例：抗肿瘤活性、免疫活性。 离体器官法 例：抗血栓活性、药物对心脏活动的影响。
特点
简便、敏感性高、用药量少、成本低、间接
2019/8/18
（动物）体内评价程序
一般动物法 动物模型法
2019/8/18
（动物）体内评价方法
2019/8/18
动物实验技能的视频
动物实验
http://myweb.polyu.edu.hk/~bcmybio/bio/abct_bio.html
细胞培养
http://www.polyu.edu.hk/abct/teaching.php ； 点击Physiology Online ； 点击Excel with Laboratory Edge ； 选择Tissue Culture
应用实例
多糖促进睡眠功能的动物实验方案
2019/8/18
直接睡眠实验
实验动物
成年小鼠、性别单一，18-22g，每组12只。
剂量分组及受试样品给予时间
三个剂量组（人体推荐剂量5倍、10倍、20倍）和一个空白
对照组，给药30天。
实验方法：睡眠以翻正反射消失为指标。i.g.给药，
3. 大白鼠饲养与药物刺激 用常规方法饲养大白鼠，用适当计量的药物喂养大白鼠，不同的时间取大白鼠的 适当器官（根据所筛选的药物而定），抽提刺激前后的mRNA;
4. 刺激前后的mRNA的制备即标记 5. 杂交及扫描 6. 数据分析及学分析
用表达谱数据库及配套软件分析受药物诱导的基因，针对这些基因的功能确定药 物的疗效。
2019/8/18
生物活性评价新方法
基因组法生物活性评价新方法
1. 基因的选择与实验设计 根据表达谱数据库选择5000-10000个与发育及疾病相关的基因;
2. 细胞的培养与药物刺激 根据目的药物及表达谱数据库种细胞表达谱选择适当的细胞系，用适当计量的药 物加入液中，不同的时间取样，抽提刺激前后的mRNA;
2019/8/18
参考文献
Abood R.R. Pharmacy practice and the law. Gaithersburg, Md. : Aspen, 1994.
Kayser Oliver. Pharmaceutical biotechnology:drug discovery and clinical applications. John Wiley, c2004.
(动物)体内评价方法 给药(administration)
灌胃给药(intragastric injection，i.g.) 腹腔注射(intraperitoneal injection,i.p.) 肌肉注射（(intramuscular injection，i.m.） 静脉给药(intravenous injection,i.v.) 皮下注射(subcutaneous injection，s.c.)
0.4ml/20gBW。
结果分析：比较对照组与实验组入睡动物数及睡眠时间的
差异。
2019/8/18
分组
随机原则 实验组、对照组（空白、阳性） 重复实验 动物标记：染色法（苦味酸、中性红）、耳孔法、烙印法、挂
牌法等标记编号方式
2019/8/18
（动物）体内评价方法
动物模型的确立
正常动物 麻醉动物 病症动物模型
确定剂量
剂量折算 剂量范围
2019/8/18
2019/8/18
生物活性评价新方法
生物大分子相互作用法
原理：生物大分子与靶蛋白特异结合而产生生物活性，通
过一种基于表面等离子共振技术的生物传感免疫分析系统 （BIA）系统对生物大分子与靶蛋白结合动力学过程的描述， 表征生物大分子的活性大小，实现对生物大分子活性的在 线监测。
特点：直接、快速 应用：药物筛选 建立以受体、酶为作用靶的分子水平的药物筛选系统
天然产物活性评价方法概述
2019ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ8/18
天然产物生物活性评价程序
活性的一般筛选 治疗的潜力 长期给药的作用评价
2019/8/18
天然产物生物活性评价方法
体外评价方法 例：小柴胡汤对人肝癌细胞株和胆管细胞癌株的抑制作用。 动物体内评价动物体内评价 例：小柴胡汤致有丝分裂直接加到细胞培养基中具有致有丝分裂作用。但血清
实验动物
小白鼠(mouse) 大白鼠(rat) 豚鼠(cavy) ） 蛙或蟾蜍(frog or toad) 家兔(rabbit) 狗(dog)
2019/8/18
（动物）体内评价方法
实验动物的选取
种类 鼠、兔、猫、狗（选择敏感动物，例催吐） 性别、年龄、纯种 新生鼠缺乏许多酶系统。
2019/8/18
(动物)体内评价方法
麻醉(anesthesia)
局部麻醉（local anesthesia）例：以0.5～2%普鲁卡因(procaine)给
兔颈部皮下作浸润麻醉。
全身麻醉（general anesthesia） (1) 吸入麻醉（inhalation anesthesia） (2) 注射麻醉（injection anesthesia）
药理则无此作用, 其原因可能由一些大分子物质不能从胃肠道吸收或其有效成 分经消化道及肝脏代谢失效所致。
基因组学方法对疾病相关基因的研究为药物筛选提供靶基因 例：香港科技大学生物技术研究所利用基因芯片技术筛选知母的有效成份. 生物大分子相互作用新方法
例：抗凝血药物筛选。
2019/8/18
体外评价方法
2019/8/18
（动物）体内评价方法
采血
尾尖取血 眶动脉和眶静脉取血（摘眼球） 球后静脉丛(post-glomus venous plexus)取血 心脏取血 断头取血
处死
2019/8/18
（动物）体内评价方法
研究内容
时效性 量效性
数据分析
显著性分析
体外评价方法
生化实验方法 例：抗氧化活性、抗凝血。 细胞培养方法 例：抗肿瘤活性、免疫活性。 离体器官法 例：抗血栓活性、药物对心脏活动的影响。
特点
简便、敏感性高、用药量少、成本低、间接
2019/8/18
（动物）体内评价程序
一般动物法 动物模型法
2019/8/18
（动物）体内评价方法
2019/8/18
动物实验技能的视频
动物实验
http://myweb.polyu.edu.hk/~bcmybio/bio/abct_bio.html
细胞培养
http://www.polyu.edu.hk/abct/teaching.php ； 点击Physiology Online ； 点击Excel with Laboratory Edge ； 选择Tissue Culture