降压物质检查法

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降压物质检查法
（猫血压法）
BP EP ChP
组胺检查法
（豚鼠回肠法）
BP EP
《中国药典》2010版二部附录 XIX M化学药品注射剂安全性 评价应用指导原则中收载了组胺类物质检查法。
一、基本概念及原理
降压物质检查法
原理
方法
优点
•利用降压物质可引 起猫血压下降，通 过比较组胺对照品 与供试品引起麻醉 猫血压下降的程度， 以确定供试品中降 压物质含量是否超 出限度
2ml ----------------->0.5ug/ml (SM)
6mlNacl*
3ml --------------->0.75ug/ml (SH)
5mlNacl*
如品种项下规定给药体积：1ml/kg，磷酸组胺应配置的终浓度相应变为：0.05、0.1、0.15ug/ml 如品种项下规定给药体积：0.5ml/kg，磷酸组胺应配置的终浓度相应变为：0.1、0.2、0.3ug/ml
注： 对照品割开时勿使玻璃屑掉入瓶内 折算系数：0.342,即1mg磷酸组胺相当于组胺的mg数 储存液冷藏保存，使用时取出放置至室温
检查法—溶液制备
例：称取磷酸组胺21.26mg×0.342=7.27mg即相当于组胺7.27mg，加灭 菌注射用水7.27ml使溶解，即得1mg/ml。
0.5ml
0.5ml
检查法—溶液制备
2.供试品溶液
按品种项下规定的剂量，配成适当浓度的供试品溶液。实验时， 要求供试品溶液与对照品稀释液的注入体积相等。
注：除另有规定外，一般供试品与对照品注入体积为0.2ml/kg 供试品和对照品如体积相差过大，可通过补充生理盐水量调整。
举例：阿奇霉素注射液，标准规定每kg体重注入2000U，则实际应配成 10000U/ml，按0.2ml/kg注入，给药量即为2000U/kg。
降压物质检查法
主要内容
1 基本概念及原理 2 降压物质检查法收载及修订情况 3 降压物质检查法 4 降压物质检查法适用性研究 5 组胺类物质检查法
一.基本概念及原理
一、基本概念及原理
降压物质：
组胺、缓激肽一类的物质具有兴奋支气管、肠管平滑 肌，扩张小动脉、小静脉及毛细血管的作用，注入体内后 能导致人、狗、猫或猴的血压快速下降。临床上注射含有 此类降压物质的注射液后，将引起面部潮红、脉搏加速和 血压下降甚至休克等不良反应。
2ml
1ml
1mg/ml---------------->100ug/ml --------------->10ug/ml --------------->2ug/ml---------------->0.25ug/ml (SL)
4.5mlNacl*
4.5mlNacl*
8mlNacl*
7mlNacl*
二、降压物质检查法修订情况
2010版
1、经验证保持活性符合要求的条件下
2、制备
3、按品种项下规定的限值，且供试品 溶液与对照品稀释液的注入体积应相 等的要求，制备适当浓度的供试品溶 液。
4、一般为13.3～20.0kPa
5、每次注射应在前一次反应恢复稳定 以后进行，且相邻两次注射的间隔时 间应尽量保持一致
一、基本概念及原理
生化药物
动物源
抗生素
发酵产物
中药
植物源
一些来源于动物、植物、微生物的非肠道给药的注射剂药品，如 抗生素、中药注射剂、氨基酸、多肽类等可能含有使血压下降的 组胺或组织胺类物质。为了确保此类制剂的质量和临床用药安全， 对其进行限量控制非常必要。
一、基本概念及原理
现有检查方法及收载情况
检查法—动物麻醉
以后进行，而不强调要3～5分钟之内。
三.降压物质检查法
检查法—实验材料
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
1.仪器：
血压记录装量：
记录仪、汞柱血压计（定标用）、压力传感器或多导生理记录仪。
经校准合格
电子天平：
精度0.01mg或0.1mg 对照品或供试品称量用
精度1mg
试剂称量用
精度100g
动物称量用
检查法—实验材料
2.实验用具 注射器(1ml精度0.02ml、5ml精度0.2m1)、吸管、移液管
检查法—实验材料
5.试验动物质量要求：
健康合格的猫 体重2kg以上（3kg以上更好，血压稳定） 雌雄均可，雌者无孕 来源：目前可为市售家猫
检查法—溶液制备
1.对照品：
名称：磷酸组胺，编号：150510-200412，来源：中国食品药品检定研究院
对照品储备液的制备：精密称取磷酸组胺对照品适量，按组胺计，加水使溶解 成每1ml中含1.0mg的溶液，分装于适宜的容器内，置4-8℃保存。经验证保持 活性符合要求的条件下 ，可在3个月内使用。
•整体动物实验与临 床不良反应相关性 好，可真实反应供 试品对动物血压的 影响
•模型经典操作简单
局限
•动物来源不可控
•药品自身药理作用 干扰
•动物整体试验本身 的局限
二.降压物质检查法标准修订情况
二、降压物质检查法修订情况
◆ 1985版药典首次收载 ◆ 2005版对试验动物进行了修订（去掉了狗） ◆ 2010版进行了一些内容的修订 ◆ 2015版未作修订
（移液器）、容量瓶、带塞小瓶、安瓿、测量尺、三通开关、 脱脂棉、线、绳。 3.手术器械
手术台、剪毛剪、手术剪、眼科直镊、眼科弯镊、止血 镊、手术刀、气管插管、动脉夹及动脉插管（细的硬塑料 管）、静脉插管（12号钝针头）。 4.试剂
氯化钠注射液、苯巴比妥钠、戊巴比妥钠、肝素钠（针 剂或原料均可）及其他试剂。
对照品稀释液的制备：精密量取对照品溶液适量，用生理盐水配成10μg/ml的 稀释液，再分别稀释成0.25、0.5、0.75μg/m1的组胺溶液，按照动物体重给 药0.2ml/kg(剂量即为0.05、0.10、0.15μg/kg)。特殊情况可调整给药体积 （0.2～1.0ml/kg），但每公斤动物体重给组胺的量不能改变。
6、则判定
2005版
如无沉淀析出
配制
按品种项下规定的限量，配成适当浓度 的供试品溶液。试验时，一般要求供试 品溶液与对照品稀释液的注入体积应相 等
一般为13.3~16.0kPa
相邻两次注射的间隔时间应一致（3~5 分钟），每次注射应在前一次反应恢复 稳定以后进行
即认为
修订背景
1、强调对照品的降压活性要符合要求 2、强调猫的正常血压范围为13.3～20.0kPa 3、强调每次注射应在前一次反应恢复稳定