液相色谱仪常用操作步骤.

液相色谱仪常用操作步骤

1)．首先对流动相进行过滤，根据需要选择不同的滤膜，一般为有机系和水系，常用的

孔径为0.22um和0.45um。

2)．对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。

3)．正常情况下，仪器首先用甲醇冲洗10-20分钟，然后再进入测试用流动相(如流动相

为缓冲试剂，则要二次重蒸水冲洗10-20分钟，直至色谱柱中有机相冲净为止) 。

4)．一般情况下，流动相冲洗20-30分钟后，仪器方可稳定，最重要的是仪器基线走后，

方可进样测试。

5)．同时进两针标样，将其结果相比较，其结果的比值在0.98-1.02之间后，就可以正

式进行样品的测试了。

6)．样品测试结束后，就要进行色谱仪及色谱柱的清洗和维护。如流动相为缓冲试剂，

同样也要用重蒸水清洗10-20分钟，方可用有机相进行保护，否则，有损色谱柱。

7)．关机时，先关计算机，再关液相色谱。

8)．填写登记本，由负责人签字。

注意事项：

1)．流动相均需色谱纯度，水用20M的去离子水。脱气后的流动相要小心振动尽量不引

起气泡。

2). 柱子是非常脆弱的，第一次做的方法，先不要让液体过柱子。

3)．所有过柱子的液体均需严格的过滤。

4)．压力不能太大，最好不要超过150kgf/cm2 .

5). 因为缓冲试剂遇有机溶剂，会结晶，有损色谱柱，所以，每次由有机相变流动相或

流动相变有机相均需用蒸馏水清洗。

气相色谱仪操作规程

的使用规程

分类保管，直立因定，远离热源，避免暴晒及强烈震动，氢气室内存放量不得超过二瓶。

专用工具严禁与油类接触。

氧气表要专用，安装时螺扣要上紧。

禁敲打，发现漏气须立即修好。

的剩余残压不应少于980 kPa。

表系反螺纹，安装拆卸时应注意防止损坏螺纹。

使用及注意事项器仪表同

分析中，钢瓶供气压力在9.8-14.7 MPa。

钢瓶配套使用，不同气体钢瓶所用的减压阀是不同的。氢气减压阀接头为反向螺纹，安装时需小心。，使用权后必须旋松调节手轮和关闭钢瓶阀门。

时，先关闭减压阀，后关闭钢瓶阀门，再开启减压阀，排出减压阀内气体，最后松开调节螺杆。

器的使用及注意事项

器是易碎器械，使用时应多加小心，不用时要洗净放入合内，不要随便玩弄，来回空抽，否则会严重低准确度。

器在使用前后都须用丙酮等溶剂清洗。

微升的注射器，如遇针尖堵塞，宜用直径为0.1 mm的细钢丝耐心穿通,不能用火烧的方法。

在几十次进样后，容易漏气，需及时更换。

射器取液体试样，应先用少量试样洗涤多次，再慢慢抽入试样，并稍多于需要量。如内有气泡则将针出，再将过量的试样排出，用泸纸吸去针尖外所沾试样。注意切勿使针头内的试样流失。

应立即进样，进样时，注射器应与进样口垂直，针尖刺穿硅橡胶垫圈，插到底后迅速注入试样，完成个动作应进行得稳当，连贯，迅速。针尖在进样器中的位置，插入速度，停留时间和拔出速度等都会作时应注意。

测器的使用及注意事项

电源前，必须先通载气，实验结束时，把桥电流调到最小值，再关闭热导电源，最后关闭载气。

针形阀的调节须缓慢进行。稳压阀不工作时，必须放松调节手柄。针形阀不工作时，应将阀门处于“要缓慢，防止超温。

室密封垫片时，应将热导电源关闭。若流量计浮子突然下落到底，也应首先关闭该电源。

得超过允许值。

测器的使用及注意事项

，待管道中残余气体排出后，应及时点火，并保证火焰是点着的。

时，离子室外罩须罩住，以保证良好的屏蔽和防止空气侵入。如果离子室积木，可将端盖取下，待离。工作状态下，取下检测器罩盖，不能触及极化极，以防触电。

度应大于100℃，待层析室温度稳定后，再点火，否则离子室易积水，影响电极绝缘而使基线不稳。

液相色谱仪的使用和维护注意事项

液相色谱仪色谱柱使用及维护

更换色谱柱滤网和玻璃棉过滤片（同时可以修补色谱柱）

一、泵的使用和维护

1、防止固体微粒进入泵内。因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞杆、密封环、缸体和单砂滤棒，输液棒的滤器经常清洗或更换。

2、流动相不应含有任何腐蚀性物质。例如氯仿、丙酮、二氯甲烷等，这些溶剂将会Peek树脂的流动相或能产生卤离子的流动相，如果使用了，分析结束后，应立即用去离子水清洗整个管路，或管路。流动相含有缓冲盐不应停泵保留在泵内时间过长，由于蒸发甚至由于溶液的净置就可能析

3、泵工作时要注意流动相不要被用完，否则空泵运转会加快磨损柱塞杆和密封圈。输液泵的压封圈变形，降低密封圈使用寿命。

4、在使用双泵过程中，如果不是梯度洗脱，尽量先混合。如果一个是有机溶剂，一个是含盐溶可能会析出晶体。

5、在使用缓冲盐作流动相实验结束之前和结束后，都要用含10％甲醇水溶液冲洗管路，不能子造成损坏。进样阀要用适宜的溶剂进行清洗。

二、色谱柱的使用和维护

1、避免压力和温度的急剧变化以及机械震动。在进样的时候，进样阀扳手不能转动太慢，更不中间，泵内压力剧增，这时再转动到进样位置时，过高的压力会损坏色谱柱。如出现机械震动（掉填状态。

2、在使用色谱柱过程中，不应直接从有机溶剂到水，反之，也不要从水直接改变到有机溶剂。

3、色谱柱一般不能反冲，除非生产者指明。

4、冲洗色谱柱时，每种溶剂至少冲洗50ml。

5、装在机子上的色谱柱，应每隔4～5天冲洗15分钟，可以避免长菌，保护色谱柱。

6、PH的调节尽量在2～9之间

7、保存色谱柱时，柱接头要拧紧。

三、输液泵产生故障及排除方法

1、没有流动相流出，又无压力显示。原因可能是泵内有大量气体，这时打开排液阀，使泵在较出，也可用一个针筒在泵出口处帮助抽出气体。另一个原因使密封圈损坏。

2、压力和流量不稳。原因①可能有气泡；②单向阀污染，可卸下单向阀，浸入异丙醇内超声清微生物堵塞，可将沙滤棒浸入流动相中超声清洗，也可将滤头放入4mol/l硝酸溶液中，迅速除去微可放入水中清洗；④在线过滤器堵塞⑤进样阀损坏；⑥密封圈性能不好。

3、压力过高。①管路堵塞；②保护柱堵塞；③检测池堵塞，发生情况立即停泵，否则会损坏流通池

四、与检测器有关的故障及其排除

1、流通池内有气泡。如果有气泡连续不断通过检测池，将其噪音增大。如有较大气泡，则会在可加大流量排出气体。如果检测池有停留的气泡，可采用突然增大流量的方法排除气体（不连接色

2、检测池被污染。检测池被污染了，可能产生噪音，或基线漂移，可以使用适当溶剂清洗，如果硝酸溶液、水和新鲜溶剂进行清洗。

3、光源灯出现故障。检测器的光远灯不能满足正常样品分析时，可能产生严重噪音污染，基线基线不回零。

4、出现倒峰。如果流动相有紫外吸收的杂质，使用紫外检测器时，就会产生倒峰，必须用高纯测器的极性接反了，也会出现倒峰。