核酸提取试剂盒剖析
剖析达安28min新冠核酸快检产品,为何如此神奇!
剖析达安28min新冠核酸快检产品,为何如此神奇!达安基因9月23日发布公告,其新取得新冠核酸检测试剂试剂盒国家药品监督管理局颁发的医疗器械注册证1项(注册证号:国械注准20203400749)。
据其公告显示,该产品与2月份取得注册证的产品主要差异为以下几点:(1)本试剂盒包含单管单人份的包装规格,使用者无需进行反应体系配制,可直接加入样本核酸后进行PCR反应,简化了操作流程;(2)反应体系中添加了UDG酶,可以起到防污染作用(3)反应体系使用经过改造的酶,可以缩短检测时间;(4)本试剂盒推荐配套使用的本公司生产的核酸提取或纯化试剂,简单操作即可在短时间内获得咽拭子样本中的核酸,缩短样本检测时间随后达安旗下微信公众号享赢分子诊断发布题为“颠覆!达安基因28分钟新冠核酸快检刷新行业新标准”的文章,剧透了该产品上机后能够在28分钟出具检测结果。
随后在IVD资讯发布的文章中资料可知,该试剂采用的技术为达安基因称为“鲲鹏极速扩增体系”,估计是模仿华为的命名套路,该体系使用特殊处理的酶,缩短了高低温恒温时间,同时搭配AGS8830荧光定量PCR仪以8℃/秒的速度进行升降温,整个扩增检测时间只需要28分钟。
AGS8830荧光定量PCR仪(国械注准20203220748)也是达安基因最新获得的一个注册证,最大可支持16个样本检测通量。
从试剂方面方面来看,也采用了一些比较前沿的技术,比如单管单人份包装采用的固体封盖技术,这个技术我还是第一次听到,以前我们在解决单管单人份包装的时候最常采用的方法是冻干粉球或者石蜡油。
另一个比较新颖的设计是吧采样和提取放在了同一个管子里,并不是这项技术很新颖,在很早以前其实就有这个技术了,自带裂解功能的病毒保存液,但因为控制不好送检时间,多少对核酸得率还是有一定的影响。
这里觉得新颖的原因是达安应该将其做过一些优化之后,并取得了一些进展。
增加UNG酶这个改进,算是产品性能的一种完善,在降低假阳性方面还是有一定作用的,当然这个点也可以被营销为卖点之一。
从ffpe样本中提取核酸的试剂、试剂盒及其应用的制作方法 概述及说明
从ffpe样本中提取核酸的试剂、试剂盒及其应用的制作方法概述及说明1. 引言1.1 概述随着科技的不断进步和医学研究的深入,从固定、包埋和切片的组织样本中提取核酸已成为一项重要的技术。
其中,FFPE(固定、石蜡包埋)样本是最常见的病理组织样本,具有保存较久和丰富的临床信息等优点。
因此,从FFPE样本中提取核酸并应用于癌症研究、遗传性疾病诊断等领域具有重要意义。
1.2 文章结构本文将全面介绍从FFPE样本中提取核酸所需的试剂和试剂盒,并详细描述其制作方法。
接着,我们将阐述选择合适的核酸提取方法以及各个步骤的具体操作步骤。
此外,文章还会探讨在癌症研究、遗传性疾病诊断以及其他医学领域中应用这一技术所取得的结果和发展趋势。
最后,我们将总结已有研究成果,并提出未来发展方向,并对FFPE样本提取核酸技术的意义进行思考。
1.3 目的本文的目的是向读者介绍从FFPE样本中提取核酸所需的试剂、试剂盒及其制作方法。
通过详细描述核酸提取步骤和应用领域,使读者能够全面了解并掌握该技术的操作流程以及在临床医学研究中的重要性。
此外,我们希望通过分析已有研究成果和未来发展方向,进一步促进该技术在临床诊断和治疗中的应用,并为相关领域的科学家和医生提供指导。
2. ffpe样本提取核酸的试剂和试剂盒2.1 试剂概述在从FFPE(Formalin-Fixed Paraffin-Embedded)样本中提取核酸时,需要使用一系列试剂来实现。
这些试剂主要包括脱水剂、消除固定物的溶解剂、核酸分离和纯化的缓冲液等。
2.2 试剂盒分类及特点为了方便操作和提高提取效率,市场上有许多不同种类的FFPE样本提取核酸的专用试剂盒可供选择。
这些试剂盒根据其工作原理和应用领域,可以分为以下几种类型:a) 磁珠法:通过表面修饰的磁性微珠吸附并纯化核酸。
具有操作简便、快速高效等特点,适用于小样本量或高通量处理。
b) 柱式纯化法:利用离心柱内填充物对DNA/RNA进行特异性吸附和洗脱。
核酸试剂盒 组成
核酸试剂盒组成
【最新版】
目录
一、核酸试剂盒的组成
1.核酸提取酶
2.缓冲液
3.逆转录酶
4.引物
5.探针
6.荧光标记物
7.定量 PCR 仪
正文
核酸试剂盒是一种用于检测特定基因序列的生物技术工具,它主要由以下几部分组成:
1.核酸提取酶:核酸提取酶是核酸试剂盒中的关键成分之一,它可以从样品中提取出目标核酸,为后续的扩增反应做好准备。
2.缓冲液:缓冲液在核酸试剂盒中起到稳定 pH 值的作用,确保核酸扩增反应在一个适宜的环境中进行。
3.逆转录酶:对于某些核酸试剂盒(如新型冠状病毒核酸试剂盒),需要将病毒的 RNA 逆转录为 DNA,以便进行 PCR 扩增。
因此,逆转录酶也是试剂盒中的一个重要成分。
4.引物:引物是核酸扩增反应的关键组成部分,它能够与目标核酸序列特异性地结合,并引导 Taq 酶进行扩增。
5.探针:探针是一种荧光标记的核酸片段,它能够与扩增产物结合,
并通过荧光信号检测到目标核酸的存在。
6.荧光标记物:荧光标记物用于标记探针,使得扩增产物与探针结合后能够产生荧光信号,从而实现对目标核酸的检测。
7.定量 PCR 仪:定量 PCR 仪是核酸试剂盒中用于进行扩增反应的设备,它可以根据荧光信号的强度,对目标核酸的数量进行定量。
核酸试剂盒的操作通常需要在医生的指导下或按照说明书进行,采集样本后,将样本与试剂盒中的成分混合,进行 PCR 扩增反应。
核酸提取试剂盒
核酸提取试剂盒1. 简介核酸提取试剂盒是一种用于提取生物样品中的核酸(DNA 或 RNA)的化学试剂盒。
核酸提取是分子生物学和基因组学研究中的基础步骤,其目的是从细胞或组织中分离出纯净的核酸样品,以进行后续的分析和研究。
核酸提取试剂盒通常包含一系列化学试剂和特定步骤的操作流程,能够有效地提取出高质量的核酸样品。
本文将介绍核酸提取试剂盒的原理、操作流程、其在科研和临床应用中的重要性,并讨论一些相关的注意事项。
2. 原理核酸提取试剂盒的提取原理一般分为以下几个步骤:2.1 细胞破碎和裂解核酸提取的第一步是将细胞或组织完全破碎和裂解,以释放内部的核酸。
这一步可以通过机械方法(如研钵研磨或超声破碎)或化学方法(如细胞裂解酶)来实现。
2.2 蛋白质消化核酸提取试剂盒中通常包含蛋白酶,用于消化细胞中的蛋白质。
蛋白质消化可以使细胞的蛋白质分解,从而使核酸得以保护和纯化。
2.3 核酸沉淀经过细胞破碎和蛋白质消化后,核酸会以溶液的形式存在。
为了使核酸得以沉淀,可以加入酒精等有机溶剂,通过离心将核酸沉淀下来。
2.4 核酸洗提核酸沉淀后,需要进行洗提步骤以去除杂质和残余的试剂。
这一步可以使用酒精洗涤或盐-酒精洗涤方法,以获得高质量的核酸样品。
2.5 核酸溶解和保存最后一步是将沉淀的核酸重新溶解在适当的缓冲溶液中,以使其稳定并便于后续的实验操作。
溶解的核酸样品可以在低温下长期保存。
3. 操作流程以下是通常使用核酸提取试剂盒的操作流程的简要介绍:1.准备样品:收集细胞或组织样品,并将其保存在适当的条件下,以保持核酸的完整性。
2.细胞破碎和裂解:使用试剂盒提供的适当方法,将样品完全破碎和裂解,以释放内部的核酸。
3.蛋白质消化:添加试剂盒中提供的蛋白酶,消化样品中的蛋白质。
4.核酸沉淀:向细胞裂解产物中加入适量的有机溶剂,使核酸沉淀下来。
5.核酸洗提:使用试剂盒提供的洗提方法,去除杂质和残留的试剂。
6.核酸溶解和保存:将沉淀的核酸重新溶解在适当的缓冲溶液中,并在低温下保存。
核酸检测试剂盒原理
核酸检测试剂盒原理核酸检测的发展与进步是近年来许多生物学研究的重要基石,为生物科学的进步和研究学术做出了重大贡献。
近年来,核酸检测技术发展迅速,已由早期的基于手工方法的检测技术发展到以遗传和分子生物学技术为基础的检测技术。
研究人员已经开发出一系列的核酸检测试剂盒,以应对各种研究场景中的检测需求。
其中,核酸检测试剂盒的使用越来越广泛,为复杂的科学问题提供了一种快速可靠的检测方法,从而极大地提高了研究的效率与准确性。
二、核酸检测试剂盒的原理核酸检测试剂盒是一种以基因分析技术为基础的检测技术,其原理是利用等位基因的概念,将特定基因序列的多态性来识别和检测目标基因,并以此来指导病理分类、预测其功能性和健康状况以及决策的建议。
核酸检测试剂盒的技术能够有效检测和分析多种基因序列,而且具有易操作、易于保存、精确度高等优点。
具体而言,首先,核酸检测试剂盒需要利用DNA复制机制对目标基因序列进行分析,生成两个一模一样的DNA链,其中一条作为参照链,另一条作为受检链。
接着,受检链需要通过假酶介导试剂盒中的反应体系,以DNA加强剂作为联合剂,完成受检链与参照链的情况,使得受检链能够与参照链建立起良好的结合关系,从而实现对受检链的检测。
最后,所得到的反应结果(等位基因的特性)通过计算机完成分析,最终给出结果分析和功能预测性决策建议。
三、核酸检测试剂盒的应用核酸检测试剂盒可以应用于各种生物学研究,以检测特定基因的变异和差异,为研究者们提供重要的线索,以便于了解和研究基因组特性以及其中的变异情况。
例如,在医学领域,可以利用核酸检测试剂盒来检测各种遗传相关疾病发病机制,并以此来给出具有参考性的疾病分类推荐。
此外,还可以利用核酸检测试剂盒来检测和分析植物和动物的遗传变异,以及对各种基因编辑技术的支持。
四、结论核酸检测试剂盒作为一种现代生物技术检测手段,其原理和应用已经广泛应用于各种研究中,为行业发展提供了一定的支持。
该技术受到了研究人员的高度重视和认可,为研究者们提供了便利的解析手段,同时也为研究领域提供了新的发展机遇。
核酸提取试剂盒说明书
核酸提取试剂盒说明书标题:核酸提取试剂盒说明书一、产品概述本产品是一款适用于各种生物样本的核酸提取试剂盒,能够高效、快速地从各种类型的样本中提取出高质量的DNA/RNA。
广泛应用于基因检测、分子生物学研究、疾病诊断等领域。
二、产品组成1. 核酸提取液A:用于裂解细胞和溶解核酸。
2. 核酸提取液B:用于去除蛋白质等杂质。
3. 洗涤液:用于洗涤核酸。
4. 乙醇溶液:用于沉淀核酸。
5. RNA酶抑制剂:防止RNA降解。
6. DNA/RNA分离柱:用于核酸的吸附和洗脱。
三、操作步骤1. 样本处理:根据样本类型进行相应的前处理。
2. 核酸提取:将处理后的样本加入到核酸提取液A中,涡旋混合后静置,然后加入核酸提取液B,再次涡旋混合并静置。
3. 细胞破碎与核酸释放:将混合液离心,取上清液转移到新的离心管中。
4. 去除杂质:向上述上清液中加入洗涤液,涡旋混合后离心。
5. 核酸吸附:将上清液转移到DNA/RNA分离柱中,离心吸附核酸。
6. 洗涤核酸:使用洗涤液对DNA/RNA分离柱进行洗涤,以去除剩余的杂质。
7. 核酸洗脱:加入适量的无菌水或TE缓冲液到DNA/RNA分离柱中,离心洗脱核酸。
8. 核酸保存:将提取出的核酸立即使用或-20℃保存。
四、注意事项1. 所有操作应严格遵守实验室生物安全规定。
2. 核酸提取过程中应避免产生气溶胶,以防交叉污染。
3. 提取后的核酸应尽快使用,长期保存时要避免反复冻融。
4. 试剂盒中的所有成分都应在室温下回温至室温后再使用。
五、质量保证我们承诺该产品经过严格的质量控制,如有任何质量问题,请联系我们的客户服务部。
六、联系方式感谢您选择我们的产品,如有任何问题或需要进一步的信息,请随时联系我们。
rna提取试剂盒原理
rna提取试剂盒原理标题:RNA提取试剂盒原理及其在分子生物学中的应用引言:RNA(核糖核酸)是生物体内的重要分子之一,它承担着转录和翻译过程中的信息传递和表达功能。
为了研究RNA的结构、功能和调控机制,科学家们发展了各种RNA提取试剂盒,通过这些试剂盒可以将RNA从生物样本中提取出来。
本文将重点介绍RNA提取试剂盒的原理及其在分子生物学研究中的应用。
一、RNA提取试剂盒的原理1. 细胞破碎与裂解:在RNA提取过程中,首先需要对细胞进行破碎和裂解,以释放细胞内的RNA。
这一步可以通过物理方法(如超声波处理、高压破碎)或化学方法(如细胞裂解缓冲液)来实现。
2. RNA的选择性结合:细胞裂解后,需要将RNA与其他细胞成分(如DNA、蛋白质)分离。
RNA提取试剂盒通常使用硅胶或磁珠等材料,通过其表面带有的亲和基团与RNA特异性结合,实现RNA的选择性分离。
3. 杂质的去除:在RNA分离过程中,还常伴随着DNA、蛋白质等杂质的存在。
为了获得纯度较高的RNA样品,RNA提取试剂盒会添加特定的缓冲液或柱子材料,能够去除这些杂质。
4. RNA的洗脱与回收:经过前面几步处理后,RNA会被特定的洗脱缓冲液溶解,并从材料表面或柱子中释放出来,最终得到高纯度的RNA可用于后续实验分析。
二、RNA提取试剂盒在分子生物学中的应用1. 基因表达分析:RNA提取试剂盒是进行基因表达分析的重要工具。
通过提取细胞或组织中的RNA,可以进一步通过定量PCR、实时荧光定量PCR或基因芯片等方法来测量特定基因的表达水平。
2. RNA测序:随着高通量测序技术的发展,RNA提取试剂盒在RNA 测序(RNA-seq)中的应用越来越广泛。
通过提取RNA,可以对全转录组进行测序,从而揭示基因的组成、结构和表达模式。
3. miRNA研究:miRNA(微小RNA)在基因调控中发挥着重要作用。
RNA提取试剂盒可以用于提取细胞或组织中的miRNA,并进一步研究其在疾病发生机制、肿瘤诊断和治疗等方面的功能。
核酸提取试剂盒评判标准
核酸提取试剂盒评判标准一、核酸提取试剂盒概述核酸提取试剂盒是应用于分子生物学实验中的一种重要试剂,主要用于从各种样本(如血液、唾液、组织等)中提取核酸。
核酸提取质量直接影响到后续的基因检测、基因编辑等实验,因此选择一款性能优越的核酸提取试剂盒至关重要。
二、评判标准概述1.提取效率提取效率是衡量核酸提取试剂盒性能的关键指标。
高效的核酸提取试剂盒能够在短时间内从样本中提取到大量的核酸,为后续实验提供充足的模板。
评判时可对比不同品牌试剂盒的提取效率,选择提取效果最佳的试剂盒。
2.提取纯度提取纯度是指提取到的核酸中杂质的含量。
高纯度的核酸有利于减少实验误差,保证实验结果的准确性。
评判时可通过电泳检测提取到的核酸纯度,选择纯度较高的试剂盒。
3.样本交叉污染风险核酸提取过程中,试剂盒应具备较低的交叉污染风险,确保实验结果的可靠性。
评判时可关注试剂盒的设计和生产工艺,选择具有较低交叉污染风险的试剂盒。
4.操作简便性操作简便性是衡量核酸提取试剂盒实用性的重要指标。
评判时应关注试剂盒的操作步骤、所需实验器材和实验时间等方面,选择操作简便、实验效率高的试剂盒。
5.试剂盒稳定性试剂盒稳定性是指试剂盒在储存和运输过程中的稳定性。
评判时可关注试剂盒的生产工艺、储存条件要求等方面,选择稳定性较好的试剂盒。
三、具体评判方法1.实验设计在进行评判实验时,应设计合理的实验方案,包括实验分组、样本选择、提取试剂盒品牌等。
确保实验的公正性和可比性。
2.实验操作按照实验方案进行实验操作,严格控制实验条件,确保实验过程的无菌性和准确性。
3.数据处理与分析实验结束后,对数据进行处理和分析,计算各组实验的提取效率、纯度等指标,对比各核酸提取试剂盒的性能。
四、总结与建议根据实验结果,总结各核酸提取试剂盒的优缺点,为实验室选择合适的核酸提取试剂盒提供参考建议。
核酸试剂盒使用方法
核酸试剂盒使用方法核酸试剂盒是现代分子生物学特别是分子病毒学研究中不可缺少的仪器和耗材,其中最常用的是核酸提取试剂盒,以用于提取RNA 和DNA等核酸进行RT-PCR等实验。
它可以方便地帮助生物学家从细胞中提取所需要的核酸物质,从而为分子病毒研究实验提供重要的帮助。
本文将详细介绍核酸试剂盒的使用方法,以期使更多的生物学家在进行病毒研究时能得心应手。
一、核酸提取试剂盒的原理核酸提取试剂盒采用了多种技术,以提取和分离完整的核酸,其中最常用的是脉冲电泳(PE)技术。
PE技术是指将核酸放入一种特殊的试剂盒中,经过高压条件下的脉冲电流作用,就可以分离出单个dNTPs组成的高分子量链,脉冲电泳能够有效地将核酸从混合物中分离出来,这对于提取RNA和DNA有非常重要的意义。
二、核酸提取试剂盒的用途核酸提取试剂盒可用于提取核酸,是病毒研究中经常使用的试剂盒。
其主要应用包括:1.于核酸诊断:核酸提取试剂盒可以检测病毒或其他微生物,从而更准确地诊断某种疾病。
2.于生物测序:经过核酸提取,可以将核酸序列提取出来,进行基因测序分析。
3.于分子病毒学实验:核酸提取试剂盒可以用于分子病毒学实验,为病毒研究提供样品。
三、核酸提取试剂盒的使用方法1.备样品:将要提取的样品(如血液、唾液、尿液、细胞)放入容器中,搅拌均匀,加入适量的提取液,振荡均匀,再加入总液以预处理样品。
2.接管路:将样品预处理装置的出口管路连接核酸提取试剂盒的入口,调节管路压力,使提取液能够顺利进入试剂盒。
3.放电脉冲:将按照试剂盒上的指示进行脉冲设置,释放电脉冲,以将样品中的核酸分离出来。
4.却及脱水:提取试剂盒进行冷却和脱水,以终止试剂盒内的反应,使样品中的核酸得到充分提取。
5.离:将提取试剂盒内的核酸用分离清洗液冲洗,用超声波器将提取的核酸分离出来,然后完成核酸提取。
四、核酸提取试剂盒的注意事项1. 使用前,请务必仔细阅读说明书,按照说明操作,以免造成不必要的错误。
一.核酸提取纯化试剂盒技术参数
病毒核酸保存时间
DNA病毒30天,RNA15天,10min可以灭活病毒
8
拭子
植绒材质,采样柄为非木质材料,为ABS(丙烯腈-丁二烯-苯乙烯),折断点:76mm
9
采集方法
擦拭双侧扁桃体及咽后壁,应避免触及舌部
*10
医疗器械注册证
具备
*11
欧盟CE认证
有
一.核酸提取纯化试剂盒技术参数
1
规格类型
16T/32T/48T/96T;50T/100T
2
储存条件
2-25℃ 储存
3
有效期
12个月
4
样本类型
组织、粪便、全血、血清、血浆和体液样本、采样拭子等
5
是否预封装
是
6
病毒核酸提取试剂中是否加 carrier RNA
无
7
病毒核酸提取试剂中是否加蛋白酶 K
无
8
处理样本量
10-300μL
*9
病毒核酸提取时间
≤8min
*10
灵敏度
RNA病毒≥50IU/mL
11
重复性
同一提取模板16个重复PCR的CT值重复性误差CV<1%
12
板间重复性
同批3个深孔板16个提取模板PCR的CT值重复性误差CV<1%
13
提取方法
通过转移磁珠进行各种不同操作
14
洗脱体积
70-100μL
15
磁珠粒径
纳米级
*16
磁珠回收率
≥98%
17
能否加热
能
*18
医疗器械注册证
具备
*19
欧盟CE认证
具备二.样本保存ຫໍສະໝຸດ 技术参数1规格类型
微生物核酸提取试剂
微生物核酸提取试剂
微生物核酸提取试剂是用于从微生物样本(如细菌、真菌、病毒等)中提取核酸(如DNA或RNA)的化学试剂盒。
这些试剂盒通常包括提取核酸所需的所有试剂和材料,以及提取步骤的详细说明。
以下是一些常见的微生物核酸提取试剂:
1.酚-氯仿提取法试剂盒:这是一种传统的核酸提取方法,利用酚和氯仿对细胞进行溶解,然后通过离心分离核酸。
试剂盒通常包括酚、氯仿、等体积比例的缓冲液,以及其他必要的试剂。
2.硅胶柱提取法试剂盒:这种方法利用硅胶柱的亲合性捕获核酸,然后通过洗脱步骤提取纯净的核酸。
试剂盒通常包括裂解缓冲液、洗涤缓冲液、洗脱缓冲液等。
3.磁珠提取法试剂盒:这种方法利用磁珠的亲和性捕获核酸,然后通过磁场的作用分离核酸。
试剂盒通常包括磁珠悬浊液、洗涤缓冲液、洗脱缓冲液等。
4.离心管法提取试剂盒:这种方法直接在离心管中进行核酸提取,通常包括预填充的离心管,以及核酸提取缓冲液、洗涤缓冲液、洗脱缓冲液等。
5.化学裂解法提取试剂盒:这种方法利用化学试剂将细胞溶解,然后通过离心或其他方式分离核酸。
试剂盒通常包括裂解缓冲液、洗涤缓冲液、洗脱缓冲液等。
这些微生物核酸提取试剂盒具有不同的优缺点,可以根据实验需要和样本特性选择适合的提取方法。
值得注意的是,选择试剂盒时应考虑其提取效率、纯度、操作简便性以及成本等因素。
BIOG拭子核酸提取试剂盒说明书
BIOG 唾液DNA 提取试剂盒说明书运输条件:常温运输 货 号:51043:50次反应51044:100次反应 储存条件:室温(15-25℃),消化液、DNA Carrier 请于-20℃存放产品特点 试剂盒组成 组分 50次 100次 吸附柱和收集管各50个 各100个 裂解液 12 mL 24 mL 洗涤液A 21mL 42 mL 洗涤液B 9 mL 18 mL 洗脱液 3mL 6 mL 消化液 1.2 mL 2.4 mL DNA Carrier 0.24 mL 0.48 mL 说明书1份1份产品介绍BIOG DNA Saliva Kit 是常州百代生物科技有限公司研制的专门用于提取唾液的DNA 的试剂盒。
BIOG DNA Saliva Kit 采用了最新的优质进口离子膜,裂解液和洗脱液经过多次优化,能高效地分离DNA 。
提取得到的DNA 较其它品牌的同类试剂盒产量更大,纯度更高,最大限度地去除了蛋白、色素、脂类等杂质污染,可以直接应用于PCR 、荧光定量PCR 和各种酶切试验等。
操作步骤1. 请自行准备:无水乙醇、离心管。
2. 取出析出液和洗涤液,按以下操作:a) 洗涤液A :21mL 加入9mL 无水乙醇;42mL 加入18mL 无水乙醇。
b) 洗涤液B :9mL 加入21mL 无水乙醇;18mL 加入42mL 无水乙醇。
c) 配制好的洗涤液如出现沉淀,可在37℃溶解,摇匀后使用。
3. 取300μL 唾液至离心管中,加入4μL DNA Carrier 混合均匀,加入200μL 裂解液及20μL 消化液,振荡混匀,56℃水浴10 分钟。
4. 加入1000μL 无水乙醇,轻轻颠倒混匀,如有半透明悬浮物,不影响DNA 的提取与后续实验。
5. 将吸附柱放入收集管内,将760μL 上述溶液转入吸附柱内,静置2 分钟,12,000 rpm 4℃离心1 分钟,弃收集管内废液;6. 将吸附柱放回收集管内,将剩余760μL 溶液转移至吸附柱内,重复步骤5。
RM401病毒DNA RNA提取试剂盒2.0 (预包装)说明书
本试剂盒可从血液、血清、血浆、拭子洗液等多种液体样本中快速提取高纯度的病毒核酸(DNA/RNA),实现平行样本的高通量处理。
试剂盒采用独特包埋的超顺磁性硅基磁珠,在独特的缓冲液系统中,通过氢键和静电吸附核酸,而不吸附蛋白和其他杂质,吸附了核酸的磁珠经洗涤去除剩余的蛋白和盐离子,当使用低盐缓冲液时,磁珠释放核酸,从而达到快速分离纯化核酸的目的。
整个操作过程简单、快速且安全高效,获得的核酸可直接用于逆转录、PCR、荧光定量PCR、RT-PCR、RT-qPCR、二代测序、生物芯片分析等下游相关实验。
15 ~ 25℃保存,室温运输。
产品概述▲ 使用本试剂盒时,请穿戴实验服、一次性乳胶手套、一次性口罩,使用Nuclease-free耗材等,最大程度避免DNase、RNase污染。
Virus DNA/RNA Reagents 2.0(Prepackaged For RM401)组 分8 × 1 T/条RM401-012 × 8 T/板RM401-022 × 16 T/板RM401-036 × 16 T/板RM401-04产品组分保存条件诺唯赞生物网址/ 咨询热线/400-600-9335 销售技术支持适用于全自动核酸提取仪(Vazyme#VNP-32P/VNP-32,奥盛 #Auto-Pure32A)及同类型仪器(加热槽位为1、6、7、12)。
适用仪器1. 适用样本类型:血液、血清、血浆、拭子洗液、组织匀浆等。
2. 样本投入体积:100 - 400 μl。
3. 样本保存:可立即进行提取,也可4℃保存待测,保存期不超过24 h,长期保存需置于-20℃。
样本要求注意事项Version 21.11. 本试剂盒提取产物为DNA/RNA,操作过程要特别注意防止RNase对RNA的降解,所使用的器皿、加样器等均为专用,所使用的离心管、枪头等一次性耗材应高压灭菌,且不含DNase和RNase。
用于从样本中提取核酸的方法和试剂盒与流程
核酸提取是分子生物学研究中非常重要的步骤,其影响着后续实验的结果。
目前,有许多不同的方法和试剂盒可以用于从样本中提取核酸,但每种方法都有其优缺点。
本文将介绍常见的核酸提取方法和试剂盒,并详细说明其使用流程。
希望能帮助读者更好地理解核酸提取的原理和操作步骤。
一、常见的核酸提取方法1.酚-氯仿提取法酚-氯仿提取法是最经典的核酸提取方法之一。
其原理是利用酚和氯仿两种有机溶剂与水相不相溶的特性,将核酸从样本中分离出来。
虽然酚-氯仿提取法具有成本低、操作简单等优点,但由于酚和氯仿均具有毒性,对实验人员的健康造成潜在风险,且提取效率较低。
2.硅基离子交换法硅基离子交换法是一种通过硅胶基质固相吸附核酸分离纯化的方法。
其原理是利用硅胶质地的吸附能力,将核酸固定在硅胶表面,然后通过洗涤和洗脱的方式得到纯化的核酸。
硅基离子交换法具有提取效率高、纯度好等优点,但需要使用硅基离子交换柱和大量有机溶剂,成本较高。
3.磁珠法磁珠法是近年来发展起来的一种核酸提取方法,其原理是将在不同条件下具有不同亲和性的磁珠与核酸结合,然后通过磁力分离的方式将核酸提取出来。
磁珠法具有操作简便、提取效率高、易于自动化等优点,目前被广泛应用于临床诊断和科研领域。
二、常见的核酸提取试剂盒1.常规核酸提取试剂盒常规核酸提取试剂盒是市面上最常见的一种提取试剂盒,适用于各种类型的样本。
其操作流程一般包括细胞破碎、蛋白酶处理、核酸结合、洗脱等步骤,提供了一整套的实验操作说明。
常规核酸提取试剂盒通常包括硅基离子交换柱、试剂液、配套的离心管等。
2.血浆/血清核酸提取试剂盒血浆/血清核酸提取试剂盒是专门用于提取血浆或血清中的核酸的试剂盒。
由于血浆/血清中的核酸含量较低,且受到抗凝剂和其他成分的干扰,因此需要专门设计的提取试剂盒。
血浆/血清核酸提取试剂盒一般包括了特殊的蛋白酶和离心管。
3.病毒核酸提取试剂盒病毒核酸提取试剂盒是专门用于提取病毒中的核酸的试剂盒,适用于临床病毒检测和科研领域。
核酸提取或纯化试剂说明书
核酸提取或纯化试剂说明书【产品名称】 MagaBio 组织基因组DNA纯化试剂盒(英文名称:Magabio Tissue Genomic DNA Purification Kit)【包装规格】32人份/盒、50人份/盒、100人份/盒【预期用途】从各种动物组织、细胞样本中分离出高产量高纯度的基因组DNA。
【检验原理】样品中的基因组DNA在裂解液和蛋白酶K的作用下被释放出来,通过RNase A消化RNA;在结合液的作用下,释放出来的DNA特异性的结合在磁珠上,结合了DNA 的磁珠粒子被磁性材料捕获,通过三次的洗涤过程将污染物除去,最后在洗脱液的作用下DNA从磁珠上被洗脱收集。
【主要组成成份】注:20ml去蛋白漂洗液使用前加入30ml无水乙醇。
15ml洗涤液使用前加入35ml无水乙醇。
【自备试剂】无水乙醇(分析纯)。
【储存条件及有效期】1)试剂盒可在常温下运输。
2)试剂盒保存:试剂盒2℃-8℃保存。
3)有效期:本试剂盒有效期12个月,请在有效期内使用。
【适用仪器】磁性分离架或博日NPA-32+核酸纯化仪,恒温金属浴或恒温水浴,漩涡振荡器。
【样本要求】可以提取各种动物组织(心脏、肝、脾、肺、肾、脑、尾等)、细胞中的基因组DNA。
【检验方法】一、组织、细胞样本的裂解:A:温浴裂解↘取动物组织不多于50 mg,尽量剪成小块;或离心收集细胞不多于107个。
↘加入650μl 裂解液和10μl 蛋白酶K,充分混匀后56℃温浴过夜(注:如液氮研磨,56℃温浴时间可缩短至30min)。
↘温浴完成后加入2μl RNase A并振荡混匀,然后12000g离心5min,然后取500μl 上清液至新的1.5ml离心管或96孔试剂板第1、7列中。
B:研磨管裂解↘加入不多于50mg的组织样本或离心收集不多于107个细胞到研磨管,加入650μl 裂解液和10μl 蛋白酶K,研磨仪研磨后56℃温浴1h。
↘温浴完成后加入2μl RNase A并振荡混匀,然后12000g离心5min,然后取500μl 上清液至新的1.5ml离心管或96孔试剂板第1、7列中。
核酸检查实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握核酸检查的基本原理和方法。
2. 学会使用核酸提取试剂盒和核酸检测仪器进行核酸提取和定量分析。
3. 了解核酸在生物学研究中的重要作用。
二、实验原理核酸是生物体内重要的生物大分子,包括DNA和RNA。
核酸检查是通过提取样品中的核酸,然后对其进行定量分析,以了解样品中核酸的浓度和种类。
本实验采用核酸提取试剂盒和核酸检测仪器,通过比色法测定样品中核酸的浓度。
三、实验器材与试剂1. 实验器材:- 核酸提取试剂盒- 核酸检测仪器- 旋涡混合器- 离心机- 移液器- 试管- 烧杯- 水浴锅- 酒精灯- 酸碱滴定管- 比色皿- 酶标仪2. 实验试剂:- 样品- 核酸提取试剂盒(含缓冲液、酶、洗涤剂等)- 标准核酸溶液- 检测试剂- 水浴加热剂- 酸碱指示剂四、实验步骤1. 样品处理:取适量样品,加入适量的缓冲液,进行充分搅拌,使样品充分溶解。
2. 核酸提取:将提取好的样品按照试剂盒说明书进行操作,提取核酸。
3. 核酸纯化:将提取的核酸溶液进行离心,弃去上清液,保留沉淀。
4. 核酸定量:将纯化的核酸沉淀溶解于适量的缓冲液中,按照试剂盒说明书进行核酸定量。
5. 比色法测定:将标准核酸溶液和样品核酸溶液按照一定比例混合,加入检测试剂,进行比色反应。
6. 数据分析:使用酶标仪测定吸光度,根据标准曲线计算样品中核酸的浓度。
五、实验结果与分析1. 样品处理:样品处理过程中,样品溶解度较好,无明显的沉淀现象。
2. 核酸提取:核酸提取过程中,提取效率较高,核酸提取量符合实验要求。
3. 核酸纯化:核酸纯化过程中,沉淀物纯净,无杂质。
4. 核酸定量:根据标准曲线,样品中核酸浓度为X ng/μL。
5. 数据分析:通过比较标准核酸溶液和样品核酸溶液的吸光度,得出样品中核酸的浓度为X ng/μL。
六、实验总结1. 本实验成功提取了样品中的核酸,并对其进行了定量分析。
2. 通过比色法测定,得到了样品中核酸的浓度,为后续的生物学研究提供了数据支持。
核酸提取试剂盒简介1.0
Tel :(021)64856008-755·Fax :64953253上海市宜山路1289号·邮编:200233· FOSUN PHARMACEUTICAL (GROUP )CO. LMT . 上海复星医药(集团)股份有限公司 核酸提取试剂盒简介TRIZOL 抽提试剂1. 试剂介绍:为酚和异硫氰酸胍的均相溶液,能迅速破碎细胞或组织,抑制其释放出的核酸酶。
2. 试剂优点:■ 获得高纯度RNA (A260/A280>1.9)■ 在1小时内分离RNA ;在3小时内分离DNA 或蛋白质■ 鲜明的红色染料使去除含RNA 的液相简单便捷■ 无论是小量的细胞(5×106)或组织(50-100mg )还是大量的细胞(107)或组织(>1g )都可得到出色的结果■ 在4℃条件下可稳定保存两年以上3. 应用:可直接用于从人类、动物、植物、细菌等的细胞或组织中提取总RNA 、DNA 或蛋白质。
纯化的RNA 可用于PCR 、RNA 印迹分析、poly(A)+筛选或斑点杂交。
纯化的DNA 和蛋白质分别适用于DNA 和蛋白质印迹分析。
ROCHE FOSUN )1. 基本原理:采用蛋白酶K 等对样本进行消化,在盐酸胍条件下核酸被玻璃纤维膜所吸附。
经过清洗去除细胞碎片、蛋白或血红素等杂质,核酸在低离子强度下从玻璃纤维膜上解离释放到洗脱液中。
2. 试剂优点:3. 应用:可用于从液相中提取病毒、细菌核酸,从全血中提取人类基因组核酸。
纯化的RNA 可用于PCR 、RNA 印迹分析、poly(A)+筛选或斑点杂交。
纯化的DNA 和蛋白质分别适用于DNA 和蛋白质印迹分析。
核酸提取试剂盒介绍28页PPT
6、最大的骄傲于最大的自卑都表示心灵的最软弱无力。——斯宾诺莎 7、自知之明是最难得的知识。——西班牙 8、勇气通往天堂,怯懦通往地狱。——塞内加 9、有时候读书是一种巧妙地避开思考的方法。——赫尔普斯 10、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。——笛卡儿
核酸提取试剂盒介绍
41、实际上,我们想要的不是针对犯 罪的法 律,而 是针对 疯狂的 法律。 ——马 克·吐温 42、法律的力量应当跟随着公民,就 像影子 跟随着 身体一 样。— —贝卡 利亚 43、法律和制度必须跟上人类思想进 步。— —杰弗 逊 44、人类受制于法律,法律受制于情 理。— —托·富 勒
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物质,可用玻璃漫漫绕成一团,取出。此法的特点是使提取的DNA保持天然状态 。
DNA提取方法
5.水抽提法:利用核酸溶解于水的性质,将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去RNA,然后将沉淀溶于 水中,使DNA充分溶解于水中,离心后收集上清液.在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M.加入2倍体 积95%乙醇,立即用搅拌法搅出.然后分别用66% ,80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥
化纳提取,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的 氯仿一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时 蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间,而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将 DNA 钠盐沉淀出来。
DNA提取方法
4.苯酚抽提法: 苯酚作为蛋白变性剂,同时抑制了DNase的降解作用.用苯酚处理匀浆液
时,由于蛋白与DNA 联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。
核酸提取试剂盒
DNA提取试剂盒 RNA提取试剂盒
DNA提取方法
DNA提取方法
1.碱裂解法:碱裂解法是基于DNA的变性与复性差异而达到分离目的。 2.煮沸法:煮沸时将样品中的DNA通过核酸裂解液的作用释放出来,离心沉淀后将杂质去 除,上清液即可用作pcr扩增。
3.浓盐法:利用RNA和DNA在电解溶液中溶解度不同,将二者分离,常用的方法是用1M 氯
核酸提取试剂盒
洛阳惠尔纳米科技有限公司 狄光辉
试剂盒
试剂盒分类
核酸提取
磁珠法,离心柱法,DNA和RNA,不同样本
蛋白检测
elisa试剂盒,免疫共沉淀试剂盒,化学发光试剂盒,免疫组化试剂盒,放射免疫试剂盒,免疫荧光试剂盒
重金属检测
不同重金属离子检测,不同样本中重金属离子检测
其他
PH检测,污染气体检测等等
,即得DNA样品.此法提取的DNA中蛋白质含量较高,故一般不用.为除蛋白可将此法加以改良,在提取
过程中加入SDS。 6.阴离子去污剂法:用SDS或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,可以直接从生物材料中提取DNA .
由于细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合,因为阴离子去污剂能够破坏这种价键,所
向物质。
核酸提取试剂盒
• 离心柱子法
•柱子•来自磁珠法•生物磁珠
离心柱试剂盒(细菌)概述
本试剂盒用于极大部分革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌细胞基因组DNA的提取。该试剂 盒提供的方法简单易行,通过去垢剂处理和特殊的液体系统将裂解细胞后产生的DNA 结合在柱材上,避免酚仿抽提。所获的基因组DNA具有完整性好、产量大、纯度高和 稳定性好作步骤
7.对于革兰氏阴性菌70℃保温15分钟(革兰氏阳性菌需70℃保温30分钟)。等溶液变成清亮后,离心数秒去除管壁上的 水珠。如果溶液未变清凉,说明细菌裂解不充分,起始菌量太大,需要适当调整。 8.加入220µl的无水乙醇,剧烈振荡,充分混匀,此时可能会出现絮状沉淀。 9.将离心柱装在收集管上,然后将所得的溶液及沉淀都转移入离心柱中。12,000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的滤液。 10. 加入500µl蛋白清洗液PWB,12,000rpm离心1分钟。倒掉收集管中的滤液。并将离心柱放回收集管中。 11. 加入500µl洗涤液WB,12,000rpm离心30秒。(使用前请检查是否已经加入无水乙醇) 12. 重复步骤11的操作一次。 13. 12,000离心1分钟,去掉离心柱中的所有液体。将离心柱放在一个干净的新的1.5ml离心管中,置于37℃ 烘箱放置5‐10分钟,待管中的乙醇全部挥发为止。 14. 往离心柱中央悬空滴加经70℃水浴预热的100-200µl洗脱液EB。室温放置2分钟后,12,000rpm离心30秒,洗脱 DNA到离心管中。为了得到更多的DNA,可以再加100‐200µl洗脱液EB,室温放置2分钟后, 再次洗脱DNA。
需要。
离心柱试剂盒组成
离心柱及收集管 溶菌酶缓冲液 ELB
各 xxx个 xxxml
裂解液 GDL
缓冲液 GDB 蛋白洗涤液 PWB 洗涤液 WB 蛋白酶 K
xxxml
xxxml xxxml xxxml xxxml
洗脱液 EB
xxxml
离心柱操作步骤
所有离心步骤皆使用台式离心机,为室温下操作。 第一次使用前请先参考试剂瓶上的标签,在洗涤液WB中加入无水乙醇。 1.取适量的细菌培养液(最多提取的细菌数量为2×109个),10,000rpm离心1分钟,弃上清,留细菌沉淀备用。 2.提取的细菌为革兰氏阴性菌,可以在菌体沉淀中加入200µl裂解液GDL。用吸头吹打几下,充分混匀。然后进入步骤4 3.提取的细菌为革兰氏阳性菌,必须要进行溶菌酶破壁处理(如不确定为何种菌属,请按处理革兰氏阳性菌的方法进行 )。具体操作如下:称20mg溶菌酶,置于1.5ml离心管中,取1ml溶菌酶缓冲液ELB,反复吹打几次将溶菌酶完全 溶解,配制成溶菌酶裂解液。向细菌沉淀中加入200µl溶菌酶裂解液(未用完的溶菌酶裂解液可保存于‐20℃,以备 下次使用),吹打重悬细菌沉淀。37℃破壁处理30分钟以上,一些较难处理的细菌可以延长处理时间。破壁处理完 成后便可以将水浴温度调至70℃备用。 4.RNA清除处理,补加5µlRNase A溶液,充分混匀。 5.加入15µl蛋白酶K,充分混匀。 6.加入220µl缓冲液GDB充分混匀。加入缓冲液GDB可能会出现白色沉淀,放置于70℃水浴时便会消失。
核酸提取试剂盒
核酸
核酸广泛存在于所有动物、植物细胞、微生物内、生物体内核酸常与蛋白质结合形成核蛋白。 根据化学组成不同,核酸可分为核糖核酸,简称RNA和脱氧核糖核酸,简称DNA。 DNA是储存、复制和传递遗传信息的主要物质基础。 RNA在蛋白质合成过程中起着重要作用,其中转移核糖核酸,简称tRNA。 起着携带和转移活化氨基酸的作用;信使核糖核酸,简称mRNA,是合成蛋白质的模板。 核糖体的核糖核酸,简称rRNA,是细胞合成蛋白质的主要场所。
以常用阴离子去污剂提取DNA。
DNA提取方法
磁珠法:生物磁珠是一种新型的功能化固体载体,其表面包被有活性基团,可以与多 种生物活性物质发生偶联,兼具有液体的流动性和固体磁性材料等特点,在外磁场的 作用下可以定向移动和集中,当撤去外磁场后,稍加振荡或抽吸又可均匀分散于液体 中,从而使固液相的分离变的十分快捷方便,通过简单的洗脱可以得到纯度很高的靶