叶绿素的提取ppt
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一、实验目的 • 掌握叶绿体色素的提取方法;
• 掌握纸层析法分离叶绿体色素的原理和 步骤;
• 掌握叶绿体色素的部分理化性质。
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二、实验原理
• 1.叶绿体中的色素能溶解在丙酮(有机 溶剂:酒精、汽油、苯、石油醚等)中, 所以用丙酮可提取叶绿体中色素。
• 2.色素在层析液中溶解度不同,溶解度 高的色素分子随层析液在滤纸条上的 扩散得快,溶解度低的色素分子随层 析液在滤纸条上的扩散得慢,因而可 用层析液将不同的色素分离。
➢实验报告
(西安交通大学实验报告纸) (写清姓名、班级、实验名称、日期等) 一、实验目的 二、实验原理 三、实验记录 1.讲义中的表格(改动见下页) 2.画图 四、讨论及思考题 1.谈谈你在实验过程中的成功经验,或失败的教训 2.思考题
叶绿体中色素的提取和分离
➢ 思考题
1.研磨时要使叶绿素能够提取出来,要破坏多少 层膜? 2.滤纸剪角的目的是什么? 3.到了秋天叶色变黄、变红的原因是什么?
无水乙醇后迅速、充分研磨至糊状。 将糊状研磨物倒入放有尼龙布的漏斗中,
用研钵锤挤压,将滤液收集到小玻璃瓶中, 并盖上瓶盖。
2、叶绿体色素的分离——(纸层析法)
用滤纸条浸色素提取液(试管1),吹干,反复多 次;将带色素的滤纸条卷成灯芯,将表面皿放在培养 皿内,注上汽油,把灯芯浸在汽油内,加盖,色素层 分清后,取下吹干,即可看到分离的各种色素。
2.在研磨时要加少许二氧化硅,目的是为了研 磨充分,有利于色素的提取;加少许碳酸钙 的目的是为了防止研磨过程中,叶绿体中的 色素受到破坏。
3.分离色素时,一定不要让滤纸条上的滤液细 线接触到层析液,这是因为色素易溶解在层 析液中,导致色素带不清晰,影响实验效果。
叶绿体中色素的提取和分离
➢ 实验结果
四、实验材料与试剂
• 新鲜的菠菜叶片。 • 95%乙醇 、CaCO3、醋酸铜结晶、浓盐酸、汽油。 • 量筒,滤纸,大培养皿一只,小培养皿一只,长滴管,
剪刀。
五.实验步骤
1. 提取叶绿素
研磨法 材料剪碎
加入有机溶剂
研磨、匀浆 过滤 提取液
研磨法提取光合色素
➢具体实验步骤(提取色素)
将深绿色的菠菜叶剪碎放入研钵中。 放入少量的SiO2和CaCO3,再加入3滴管
实验关键
1.选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁的 叶片。如菠菜叶、棉花叶、洋槐叶等。
2.画滤液细线时应以细、齐、直为标准,重复 画线时必须等上次画线干燥后再进行,重复 2-3次。
3.层析时不要让滤液细线触及层析液。
1.因丙酮和层析液都是易挥发且有一定毒性的 有机溶剂,所以研磨要快,收集的滤液要用 棉塞塞住,层析时要加盖,尽量减少有机溶 剂的挥发。
四种色素的化学性质
• 均为亲脂性>亲水性: 均不溶于水,而溶于有机溶剂,故可用乙醇、丙
酮等有机溶剂提取。 • 极性大小:
叶绿素b>叶绿素a>叶黄素>胡萝卜素 根据相似相溶原理,在有机溶液中的溶解度:
叶绿素b<叶绿素a <叶黄素<胡萝卜素
三、叶绿素的光学性质
叶绿素与类胡萝卜素都具有光学活性,表现出一定 的吸收光谱,可用分光光度计精确测定。