常用的核酸染料有哪些
实验室常用染料性能介绍及常用药品试剂和培养基的配制
实验室常用染料性能介绍及常用药品试剂和培养基的配制一、实验室常用染料性能介绍1.苏木精：苏木精是一种常用的组织染料，其主要成分是吡啶类化合物。
苏木精具有很好的亲水性，对细胞核染色效果好，特别适用于观察细胞的核结构和形态。
2.基本蓝1：基本蓝1是一种亲水性染料，也是常用的组织染料。
它能与细胞内核酸结合，使细胞核显色。
基本蓝1在显微镜下观察时呈现出暗蓝色，有良好的穿透性，可以用来观察细胞的核仁、蛋白质沉积等。
3.伊红：伊红是一种细胞染色常用的酸碱指示剂。
它在碱性条件下呈红色，在酸性条件下呈黄色，可以用来染色观察细胞的酸性和碱性成分。
4.甲磺酸伊地洛尔：甲磺酸伊地洛尔是一种常用的荧光染料，可以与细胞膜结合，形成荧光标记的细胞，用于细胞增殖、迁移等研究。
在实验室中，还有很多常用的药品试剂和培养基需要配制。
下面介绍一些常见的配制方法：1.X溶液的配制：X溶液通常是用于细胞培养的培养基中的一种添加剂。
具体的配制方法是将X溶液的粉末称取适量加入适量的去离子水中，搅拌均匀即可。
X溶液可以用于抗菌、抗霉等作用。
2.磷酸缓冲盐水的配制：磷酸缓冲盐水经常用于细胞培养中的一种缓冲液。
配制磷酸缓冲盐水需要称取适量的氢磷酸盐和二氢磷酸盐加入适量的去离子水中，搅拌均匀并调节pH值即可。
3.阿霉素的配制：阿霉素是一种常用的抗生素，常用于细胞培养中的抗菌作用。
阿霉素的配制需要将相应的阿霉素粉末加入适量的溶剂中，搅拌均匀形成阿霉素溶液。
4.LB培养基的配制：LB培养基是著名的富含营养成分的培养基，常用于大肠杆菌等细菌的培养。
LB培养基的配制需要称取适量的草莓粉末、酵母粉末、纯化骨粉和氯化钠加入适量的去离子水中，通过高压灭菌形成LB培养基。
以上仅为常用染料性能介绍及部分常用药品试剂和培养基的配制方法，实验室中还有很多其他药品试剂和培养基需要进行配制或选购，要根据实际需要进行选择和使用。
常用核酸染料
特别的“染料”给特别的你：Invitrogen独家的SYBR GreenER【字体：大中小】 时间：2006年05月23日来源：生物通------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------摘要：要解决SYBR Green的非特异问题，当然不是只有一条途径。
所谓条条道路通罗马，不同于Qiagen或者ABI利用的是提高DNA聚合酶的特异性，“曲线救国”，Invitrogen公司采用直接改造SYBR Green的方法，发展出更特异更灵敏的荧光染料——SYBR® GreenER™ qPCR Reagent System。
SYBR Green系列荧光染料由于低毒、灵敏度度优于EB而日渐受到科研用户的欢迎，这个原属于Molecular Probes公司的专利随着Probes被并购进入Invitrogen 的大家庭，Invitrogen要优化它自然更方便啦。
SYBR® GreenER™被Invitrogen称为新一代定量PCR荧光检测方法的核心技术之一，相比原有的SYBR Green，最大的优势的发光强度更强更明亮，使得原来检测不到的低丰度DNA 的信号更容易被检测到——这也就意味着荧光染料的检测灵敏度提高了，从原来的0.1ng左右提高到6pg，应用在定量PCR检测中就使得基因表达数据分析更为可靠。
此外，对荧光染料构造的修饰使得减少了染料分子对PCR反应的抑制作用。
SYBR GreenER和原有的SYBR Green一样适用相同的滤光片，并不需要增加新的仪器或者新滤光片(filters)。
SYBR GreenER可以看作是SYBR Green的兼容升级版了，具体的升级优化如下：RealTime ready 智力大冲浪！答对5题，即获赠美国傲仕优质保温杯！升级step one：快速反应与高灵敏度增加结果可靠性SYBR GreenER这种新颖的DNA结合染料的一个显著特点就是在检测信号上有了大幅度提高，同时也由于SYBR GreenER消除了一些原有SYBR Green对PCR反应的影响（荧光染料结合入DNA小沟，阻碍扩增反应），因此反应时间得到了提升。
核酸染料简介
★★★★★SUPER Green Ⅰ（10,000× DMSO溶液，电泳级）SUPER Green Ⅰ核酸染料特点●无毒性：属花箐类染料，容易生物降解，无致癌毒性。
●灵敏度高：至少可检出20pg DNA，高于EB染色法25～100倍。
●信噪比高：样品荧光信号强，背景信号低。
●操作简单：无须脱色或冲洗，即可直接用紫外凝胶透射仪或可见光透射仪观察。
●适用范围广：可适用于多种凝胶电泳方法：琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶电泳、脉冲电场凝胶电泳和毛细管电泳等。
●使用方便：对分子生物学中常用的酶（如：Taq 酶、反转录酶、内切酶、T4连接酶等）没有抑制作用。
● 经济：价格比银染便宜。
SUPER Green Ⅰ使用方法简介1．胶染法（用法同EB）（推荐方法，见图1）（1）制胶时加入SUPER Green I 核酸染料。
冷却胶至50℃左右，每100mL胶中加入3～5μL SUPER Green I 核酸染料。
（2）按照常规方法进行电泳即可。
◆注：此方法染色可以准确确定片段分子量，用量相对较少。
1mL染料大约可以做300块100mL的胶。
2．点染法（见图3）（1）该方法适于琼脂糖凝胶电泳和PAGE凝胶电泳。
（2）工作液的配制：用电泳缓冲液将10000×的SUPER Green Ⅰ稀释100倍，即为SUPER Green Ⅰ工作液。
SUPER Green Ⅰ工作液可以置2～8℃保存一个月以上。
（3）制胶：按常规方法制胶，不含任何染料。
（4）样品染色：向分析样品中加入SUPER Green Ⅰ工作液和载样缓冲液，室温放置10分钟，使SUPER Green Ⅰ与样品中DNA充分结合。
SUPER Green Ⅰ工作液加入量为总上样量的1/10。
（5） DNA Marker染色：将5μL DNA Marker和5μL DNA Marker稀释液和1μLSUPER Green Ⅰ工作液混匀，室温放置5分钟，使SUPER Green Ⅰ与DNA充分结合。
常见核酸染料选择浅析
常见核酸染料选择浅析（李路军河南农业职业学院植物科学系河南郑州450000）摘要：由于只需简单温和的物理方法（光照）激发和检测，荧光染料是研究生物学微观世界特别是核酸时最常用的示踪工具之一。
DNA电泳后检测凝胶的EB大概是最为人熟知的荧光核酸染料。
除了染胶，荧光核酸染料还可用于荧光原位杂交中作为常见的复染剂。
下面比较一下在分子生物学实验和细胞学实验中常用的荧光染料。
关键词：核酸染料、EB、GeneFinder、Goldview、SYBER greenI、GelRed、GelGreen引言：作为生物体内的重要的大分子，核酸是研究生命现象与本质的物质基础，通过对它们的理化性质、复制与转录、表达与调控等的研究，可以了解生命有关的本质规律。
因此，对核酸的研究具有及其重要的意义。
但核酸肉眼不可见，对其的研究主要是借助一定的仪器来观察它的形态、大小、表达量，其中最常见的也是最简单的是琼脂糖凝胶电泳。
EB(溴化乙锭)是实验室最常用的核酸染料，有着简单、快速、灵敏度高的特点，但是由于其有着强烈的致突变能力和中度致癌性，对实验者和周围环境都有着较大的危害。
溴化乙锭(EB)是分子生物学实验室常用的一种核酸荧光染料。
但是，由于EB是一种强烈的致癌物，因此，如何消除EB对实验室的污染，是分子生物学实验室安全所必须面对的一个难题。
A bstract：Because only needs the simple temperate physical method(illumination)to stimulate and the examination,the fluorescent dye studies the biology microcosm is when specially the nucleic acid one of most commonly used tracing tools.After DNA electrophoresis,examines the gelatin EB is the fluorescence nucleic acid dye which probably the most person knew very well. Except dyes the rubber,the fluorescence nucleic acid dye may also use in the fluorescence home position hybrid taking the common counterstain.Following compares in the molecular biology experiment and the cytology experiment the commonly used fluorescent dye.Key word:Nucleic acid dye,EB,GeneFinder,Goldview,SYBER greenI,GelRed,GelGreenIntroduction：In the achievement organism's important macro-molecule,the nucleic acid is studies the biological phenomena and the essential material base,through to their physics and chemistry nature,the duplication and the duplication,the expression and the regulation and so on research,may understand the life related essence rule.Therefore,has and the vital significance to the nucleic acid research.But the nucleic acid naked eye is not obvious,is mainly draws support from certain instrument to its research to observe its shape,the size,the expression quantity,what most common is also the simple is the agarose gel electrophoresis.EB(bromination second grade spindle)is the laboratory most commonly used nucleic acid dye,has simply,fast,the sensitivity high characteristic,but because it has intense sends the sudden change ability and the moderatecarcinogenicity,has the big harm to the laboratory technician and the environment.Bromination second grade spindle(EB)is the molecular biology laboratory commonly used one kind of nucleic acid fluorescent dye.But,because EB is one kind of intense careinogen,therefore,how to eliminate EB to the laboratory pollution,is a difficult problem which the molecular biology laboratory security must face.1.EB核酸染料溴化乙锭（EB）是一种常规核酸染料，被广泛应用于观察、检测琼脂糖凝胶与聚丙烯酰胺凝胶中的DNA或RNA。
核酸染料与核酸的结合原理
核酸染料与核酸的结合原理核酸染料是一种可以与核酸结合并在电泳分离中用于检测和分析核酸分子的化合物。
常用的核酸染料有乙溴化孔雀石绿（Ethidium Bromide，简称EB）、SYBR Green、GelRed等。
核酸染料通常具有极性较强的环状结构，能够与核酸分子中的氮碱基发生静电作用，从而与核酸分子结合。
常用的核酸染料EB和SYBR Green，能够与DNA和RNA中的腺嘌呤和胸腺嘧啶发生氢键和静电相互作用，形成染色体复合物。
在电泳分离中，核酸染料被加入凝胶或样品中，通过电泳将核酸分子分离开来。
由于核酸染料与核酸分子结合后具有较强的荧光发射特性，可以使用紫外线照射或荧光成像仪来检测和分析核酸分子。
需要注意的是，核酸染料在一定浓度下会对核酸分子的结构和功能产生影响，因此在实验设计中需要谨慎使用，并且避免暴露于核酸染料中过长时间。
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结晶紫和甲基紫 生物膜
结晶紫和甲基紫生物膜全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：结晶紫和甲基紫是两种常用的生物染料，它们广泛应用于生物膜的制备和研究中。
生物膜是一种由生物组织或细胞所表现出的具有特定结构和功能的薄膜，它在生物学研究中起着重要的作用。
本文将重点介绍结晶紫和甲基紫在生物膜中的应用及其制备方法，希望能够为相关领域的研究者提供参考和帮助。
让我们先来了解一下结晶紫和甲基紫这两种染料的特性。
结晶紫是一种有机化合物，呈现出深紫色的结晶状，其具有良好的渗透性和亲和性，能够与生物膜中的各种成分相互作用，起到染色和标记的作用。
甲基紫则是一种具有类似特性的染料，它也可以与生物膜中的蛋白质、核酸等成分结合并发挥其染色效果。
在生物膜的制备过程中，结晶紫和甲基紫通常被用作染色试剂，它们可以通过与生物膜中的特定分子发生化学反应或物理吸附的方式，将其染色成特定颜色，从而方便观察和分析生物膜的结构和功能。
在生物膜的研究领域中，结晶紫和甲基紫还可以作为荧光标记物，通过与荧光显微镜等设备结合使用，实现对生物膜中特定分子的高度灵敏的检测和成像。
结晶紫和甲基紫的制备方法也是生物膜研究中值得关注的一个重要方面。
一般来说，这两种染料可以通过合成和提纯的方式来获得。
在合成过程中，要注意合成反应条件的控制，以确保产品的纯度和稳定性。
在提纯过程中，可以通过溶剂抽提、结晶分离等方法，获得高纯度的结晶紫和甲基紫。
为了确保染料的质量和稳定性，还可以通过对其物理化学性质进行分析和检测，确保其符合应用要求。
第二篇示例：结晶紫和甲基紫是两种常用的染料，它们在生物膜研究中有着重要的应用。
生物膜是由生物多聚物构成的一种复合材料，具有特殊的结构和功能。
在生物膜的研究中，染料的选择和使用对于研究结果的准确性和可靠性起着至关重要的作用。
结晶紫是一种常用的核酸染色剂，在实验室中经常用于DNA和RNA的染色。
它是一种亲合性染料，可以与DNA和RNA中的磷酸基团结合，形成深紫色的复合物。
GelRed-核酸电泳用染料
GelRed-核酸电泳用染料GelRed核酸染料（10,000×水溶液）GelRed核酸染料特点● 无毒性：GelRed独特的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内，艾姆斯氏试验结果也表明，该染料的诱变性远远小于EB。
● 灵敏度高：适用于各种大小片段的电泳染色，对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。
● 稳定性高：适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶；室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定，耐光性强。
● 信噪比高：样品荧光信号强，背景信号低。
● 操作简单：与 EB 一样，在预制胶和电泳过程中染料不降解；而电泳后染色过程也只需30 分钟且无需脱色或冲洗，即可直接用紫外凝胶透射仪观察。
● 适用范围广：可选择电泳前染色（胶染法）或电泳后染色（泡染法）；适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳；可用于 dsDNA 或 ssDNA 或 RNA 染色。
●无需改变滤光片及观察装置：标准的 EB 滤光片或 SYBR 滤光片都适用，使用与观察EB相同的普通紫外凝胶透射仪观察即可，在 300nm 紫外光附近可得到最佳激发。
GelRed使用方法简介1．胶染法（用法同EB）（推荐方法）（1）制胶时加入GelRed核酸染料。
每50mL胶中加入5μL GelRed 核酸染料。
（2）按照常规方法进行电泳即可。
◆注：此方法染色染料用量相对较少。
500 μL染料大约可以做100块50mL的胶。
当染料稀释在TBE 或者类似的电泳缓冲溶液中时可以使用微波炉加热，从而与通常制备预制凝胶的方法相同。
含有染料的预制凝胶可以成批制备，并可以长期保存直到使用。
2．泡染法（1）按照常规方法进行电泳。
（2）用0.1M的NaCl水溶液按照3300﹕1的比例稀释GelRed 浓缩液，混匀，制成3×GelRed染色溶液。
（例如：在45mL水溶液中加入5mL 1M的NaCl溶液及15μL10,000× GelRed水溶液。
染色标记法
染色标记法简介染色标记法（Staining and labeling method）是一种在生物学和医学研究中常用的实验技术。
通过使用染色剂或标记物，可以对细胞、组织或分子进行可视化和定量分析。
染色标记法广泛应用于细胞形态学、免疫组化、蛋白质定位等领域，为研究者提供了重要的工具。
染色剂的选择在染色标记法中，选择合适的染色剂对于实验结果的准确性和可靠性至关重要。
常用的染色剂包括荧光染料、酶联染料和核酸染料等。
1.荧光染料：荧光染料具有较高的亮度和稳定性，可以通过荧光显微镜直接观察样品。
常用的荧光染料有DAPI、FITC、TRITC等。
2.酶联染料：酶联染料可以与特定抗体结合，并通过酶反应产生可见的颜色变化。
常用的酶联染料有HRP（辣根过氧化物酶）和AP（碱性磷酸酶）等。
3.核酸染料：核酸染料可用于DNA和RNA的检测和定量。
常用的核酸染料有Ethidium Bromide、SYBR Green等。
选择染色剂时需要考虑实验目的、样品类型和设备条件等因素，确保染色剂的选择与实验要求相匹配。
染色标记方法在染色标记法中，常用的方法包括直接染色法、间接染色法和原位杂交法。
1.直接染色法：直接染色法是指将染料直接与待测物质进行反应，形成可见的颜色或荧光信号。
这种方法操作简单快捷，适用于大部分实验需求。
例如，在免疫组化实验中，可以直接将抗体与荧光标记物结合，观察样品中特定蛋白质的分布情况。
2.间接染色法：间接染色法是指通过两步反应来完成标记过程。
首先使用一种特异性抗体结合到待测物质上，然后再使用带有荧光或酶联标记的二抗进行检测。
间接染色法可以增强信号强度并提高灵敏度，适用于信号较弱的实验。
例如，在免疫组化实验中，可以使用一抗与目标蛋白结合，然后使用带有荧光标记的二抗进行检测。
3.原位杂交法：原位杂交法用于检测DNA或RNA的特定序列。
通过将标记的探针与待测样品进行杂交反应，可以观察到目标序列的位置和分布情况。
原位杂交法在基因表达研究和遗传学研究中具有重要应用。
核酸染料
EB溴化乙锭(EB)是一种荧光染料，这种扁平分子可以嵌入核酸双链的配对的碱基之间，在紫外线激发下，发出红色荧光。
单链DNA、RNA分子常存在自身配对的双链区，也可以嵌入EB分子，但嵌入量少，因而，荧光较低，其最低检测量为0.1μgSYBR Green ISYBR Green I是一种结合于所有dsDNA双螺旋小沟区域的具有绿色激发波长的染料。
在游离状态下，SYBR Green I发出微弱的荧光，但一旦与双链DNA结合后，荧光大大增强。
因此，SYBR Green I的荧光信号强度与双链DNA的数量相关，可以根据荧光信号检测出PCR体系存在的双链DNA数量。
SYBR Green I 的最大吸收波长约为497nm，发射波长最大约为520nm。
1.在"SYBR GreenⅠ预染色方法"中，电泳时间不要超过2小时，否则SYBR GreenⅠ会从DNA上分离出来，会产生弥散状条带。
2.在紫外照射透视下，与双链DNA 接合的SYBR Green I 呈现绿色荧光。
如果胶中含有单链DNA 则颜色为橘黄而不是绿色。
3.SYBR Green对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。
建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。
SYBR Green I ISYBR Green I I可以对RNA或单链的DNA进行染色。
SYBR Green I IRNA染料并不是特异性的结合RNA或DNA单链，但是其对单链的结合效率是双链的约2倍，。
GoldViewGoldView™是一种可代替溴化乙锭（EB）的新型核酸染料，采用琼脂糖电泳检测DNA 时，GoldView™与核酸结合后能产生很强的荧光信号，其灵敏度与EB相当，使用方法与之完全相同。
在紫外透射光下双链DNA呈现绿色荧光，而且也可用于染RNA。
GoldViewⅠ特别适合于大片段DNA的检测(大于1kb的片段,检测灵敏度与EB相当);当DNA片段小于1kb时,检测灵敏度低于EB,特别是低于500bp的片段, GoldViewⅠ型可能亮度很弱或检测不到。
3种常见核酸染料的安全性和灵敏度研究
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３ ． 普 宁市人 民 医院检 验 科 ， 广 东普 宁 ５ １ Ｂ ３ ０ ０ ； ４ ． 广 东医学 院 医学检验 学院 ， 广 东东莞 ５ ２ ３ ８ ０ ８ ）
摘 要 ： 目的 探 讨 （ ； ｏ ｌ ｄ Ｖｉ ｅ ｗ、 化 乙锭 （ Ｅ Ｂ ） 、 Ｓ ＹＢ Ｒ Ｇ ｒ ｅ ｅ ｎ ｌ ３种 实验 室 常 用核 酸 染料 的 安 全 性 与 灵 敏 度 ， 筛 选 出 具 有 较
新型核酸染料-gelred、EB替代品
核酸染料！EB?Gelred?你还有其他选择！EB替代品！你还只知道Gelred的吗？那么你已经out了！新型核酸染料强势来袭！本人郑重推荐两款全进口核酸染料有两个分类，全都是安全无毒的花青类的染料。
第一类：RS-138Safe DNA Stain(核酸安全染色剂)1经Ames-test测试，不透过细胞膜，安全无毒，美国认证；2与EB使用方法一致，灵敏度高，在紫外光及蓝光下均可观察实验结果，发出绿色荧光，效果好；3耐热，可加在缓冲液里，100℃溶解凝胶，防止染色剂没充分混匀；4电泳时染色均匀，靠近负极凝胶和靠近正极端的亮度一样；5稳定性好，不像EB、Goldview放久（一天）了会淬灭，电泳时间过长（>30min）会变暗；6含有Safe DNA Stain的琼脂糖凝胶在4℃可存放7天；7无毒性，不进入细胞内，是花菁染料成分；8EB替代品，与之使用方法一样，可前染，可后染第二类：Red/Green Safe DNA Loading Dye特色：1安全无毒（Ames-test污染物致突变性检测），可替代EB；2电泳时有3条指示带：蓝（4000bp），紫（300bp），黄（50bp），一般的只含有两种3无需添加额外的上样液，只需将本品与DNA按1:5的比例混合直接上样即可；4在紫色或蓝色荧光灯下均可视，条带清晰、明亮；5Red Safe DNA Loading Dye显示红色荧光，Green Safe DNA Loading Dye显示绿色荧光。
优势价格某公司gelred促销信息Table A.促销信息Cat#Product Name Unit Size Unit Price促销价品牌41001GelRedTM Nucleic Acid Gel Stain''3X in water 4.0L¥2411¥1326Biotium 41002GelRedTM Nucleic Acid Gel Stain''10''000X in DMSO0.5mL¥1176¥647Biotium 41003GelRedTM Nucleic Acid Gel Stain''10''000X in water0.5mL¥1235¥679Biotium 41003-1GelRedTM10''000X solution in water''bulk pack10mL¥19757¥10866Biotium 41004GelGreenTM Nucleic Acid Gel Stain''10''000X in DMSO0.5mL¥1058¥582Biotium 41005GelGreenTM Nucleic Acid Gel Stain''10''000X in water0.5mL¥1176¥647Biotium Table B.以下标签可以极好地配合以上产品使用：Cat#Product Name Unit Size Unit Price促销价品牌310211KB DNA Ladder(100ng/uL)30ug/300ul¥647¥517Biotium 31022Ready-to-Use1KB DNA Ladder150applications(1.5ml)¥764¥612Biotium创英生物产品价格：Catlog No.Product Name Size Official Price RS-138Safe DNA Stain Reagent0.5ml520RSG Green Safe DNA Loading Dye1ml780RSG-100Green Safe100bp DNA Loading Dye1ml Marker+1ml Dye860RSG-1KB Green Safe1KB DNA Loading Dye1ml Marker+1ml Dye860 RSR Red Safe DNA Loading Dye1ml780RSR-100Red Safe100bp DNA Loading Dye1ml Marker+1ml Dye860RSR-1KB Red Safe1KB DNA Loading Dye1ml Marker+1ml Dye860可以明显的比较出来，gelred的价格促销后的价格仍然比较贵，而此的两款产品价格比较亲民！欢迎大家选购！。
常用的核酸染料有哪些
EB（溴化乙锭）：溴化乙锭是一种高度灵敏的嵌入性荧光染色剂，为强致癌诱变剂，但价格便宜。
它与DNA的结合几乎没有碱基序列特异性。
在高离子强度的饱和溶液中，大约每2.5个碱基插入一个溴化乙锭分子。
EB的这种特性使其成为一种核酸染料，常用于琼脂糖凝胶电泳中的核酸染色。
溴化乙锭在紫外区302nm和366nm处有吸收峰，在紫外光的照射下，溴化乙锭可被激发出橙红色的荧光（590nm）。
结合有DNA的溴化乙锭复合物的荧光强度要比没有结合DNA的染料高出20-30倍，因此溴化乙锭可检测到少至10ng的DNA条带，非常灵敏。
Gel Green和Gel Red：GelRed 和 GelGreen 是两种集高灵敏、低毒性和超稳定性于一身的极佳的荧光核酸凝胶染色试剂。
其特点有：高灵敏度：GelRed 和 GelGreen 是目前市场中最灵敏的凝胶核酸染料之一；稳定性极好：可以使用微波炉加热，可以在室温下保存；更安全：艾姆斯氏试验结果表明，该染料的诱变性远小于溴化乙锭（EB）；广泛的适应性：适用于预制凝胶和凝胶电泳后染色；染色过程简单：与EB一样，在预制胶和电泳过程中不必担心染料降解；而电泳后染色过程也只需30分钟且无需脱色或冲洗；对 DNA 和 RNA 的迁移影响小：对核酸迁移的影响小于 SYBR Green 。
与标准凝胶成像系统以及可见光激发的凝胶观察装置完美兼容：使用 312nm 激发的 UV 凝胶成像系统时，GelRed 可以完美的替代EB；使用 254nm 激发的 UV 凝胶成像系统或可见光激发的凝胶观察装置时，GelGreen 足以替代任意一种 SYB染料。
但该染料会使小片段DNA迁移慢一些（与EB相比).Gold View I型/II型：Goldview对于大片段DNA的染色效果良好，但是在对于500bp以下的片段效果不是很好，还有一个很致命的弱点是它的荧光基团在紫外灯下非常容易淬灭，一般5-10min条带就会消失。
ethidium homodimer-1染色原理
ethidium homodimer-1染色原理ethidium homodimer-1（简称EthD-1）是一种常用的核酸染料，广泛用于细胞和组织的染色分析。
本篇文章将一步一步回答ethidium homodimer-1染色原理，并详细解释其作为染料的原因及其在生物医学研究中的应用。
第一步：介绍ethidium homodimer-1染色的背景ethidium homodimer-1是由同类染料EthD-1构成的，具有荧光性质。
EthD-1属于DNA结合染料，其分子结构包含两个乙基铜和一个亚硝基乙基基团。
这种染料常用于荧光显微镜下的细胞和组织染色，特别用于检测死细胞和细胞凋亡。
第二步：解释染色原理EthD-1通过与DNA结合来实现染色。
DNA的分子结构中包含腺嘌呤（A）和胸腺嘧啶（T）等碱基，而EthD-1染料可以与这些碱基进行特异性结合。
当EthD-1与DNA结合后，会发生荧光共振能量转移（FRET）现象，从而使染料的荧光增强。
这种现象使得EthD-1染料成为一种非常理想的细胞凋亡染色剂。
第三步：解释EthD-1作为染料的原因EthD-1作为一种核酸染料，其选择性结合DNA的特性使其具有独特的应用优势。
EthD-1通过其迅速穿过细胞膜进入细胞，然后在细胞内结合到DNA分子上。
活细胞的细胞膜完整，不容易使EthD-1渗透，因此只会染色死细胞。
这种特定的细胞染色方式使EthD-1特别适用于检测和区分活细胞和死细胞。
第四步：解释EthD-1染色在生物医学研究中的应用由于EthD-1的特殊染色性质，它在生物医学研究中得到广泛应用。
以下是一些常见的应用领域：1. 细胞凋亡检测：EthD-1可以用来检测和分析细胞凋亡，通过区分活细胞和死细胞的能力，可以评估药物或生物过程对细胞凋亡的影响。
2. 组织损伤研究：EthD-1在组织学研究中也广泛应用，可以用于评估组织损伤程度和病理变化。
3. 肿瘤研究：EthD-1可以用于评估肿瘤细胞的存活率和细胞凋亡水平，为肿瘤生物学研究提供重要的信息。
常用的核酸染料
常用的核酸染料
核酸染料是用于检测DNA和RNA分子的荧光染料。
在生物医学研究和诊断中，常用的核酸染料包括以下几种：
1. 基于亚甲基蓝的染料：如Ethidium bromide（EB）和SYBR Green。
EB进入DNA分子中，使其发生荧光，SYBR Green则可以与DNA结合形成荧光复合物。
这些染料广泛应用于凝胶电泳，PCR检测和细胞成像等领域。
2. 基于Cy系列染料的染料：如Cy3和Cy5。
这些染料具有较高的荧光强度和稳定性，广泛应用于荧光原位杂交和蛋白质-核酸相互作用研究等领域。
3. 基于蓝莓素的染料：如Hoechst 33258。
这些染料可以与DNA 结合形成荧光复合物，常用于染色体染色和细胞核染色等领域。
4. 基于荧光素的染料：如Fluorescein和Tetramethylrhodamine（TMR）。
这些染料具有高荧光强度和较短的激发波长，广泛应用于DNA测序和细胞成像等领域。
总的来说，选择合适的核酸染料要根据实验需要和染料的特性进行考虑。
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hoechst染色原理
hoechst染色原理Hoechst染色原理。
Hoechst染色是一种常用的核酸染色方法，它可以将细胞核内的DNA染成蓝色，对于细胞核的观察和分析具有重要意义。
Hoechst染色原理的了解对于科研工作者和临床医生都具有重要的意义。
下面我们就来详细了解一下Hoechst染色的原理。
Hoechst染色的原理主要是利用Hoechst染料与DNA结合的特性。
Hoechst染料是一类荧光染料，它可以与DNA中的腺嘌呤结合形成复合物，从而发出蓝色荧光。
Hoechst染料有Hoechst 33342和Hoechst 33258两种，它们在DNA中的结合方式略有不同，但都能够有效地染色细胞核。
在进行Hoechst染色时，首先需要将Hoechst染料溶解在适当的溶剂中，制备成一定浓度的染色液。
然后将待染细胞放置在含有Hoechst染色液的培养基中，经过一定时间的孵育，细胞核内的DNA就会被Hoechst染料染成蓝色。
之后，可以通过荧光显微镜观察染色效果，细胞核会发出蓝色荧光，从而可以清晰地看到细胞核的形态和数量。
Hoechst染色的原理非常简单，但是它在细胞生物学和分子生物学研究中有着广泛的应用。
通过Hoechst染色，可以清晰地观察细胞核的形态和数量，对于细胞周期的研究和细胞凋亡的检测都非常有帮助。
此外，Hoechst染色还可以用于细胞分选和细胞核的提取等实验操作中。
在临床医学领域，Hoechst染色也具有重要的应用价值。
通过Hoechst染色，可以对肿瘤细胞进行染色观察，帮助医生进行癌细胞的鉴定和分类。
同时，Hoechst染色还可以用于临床病理学的检测中，对于一些细胞核异常的疾病具有辅助诊断的作用。
总的来说，Hoechst染色原理简单易懂，但是在科研和临床中具有非常重要的应用价值。
通过Hoechst染色，可以清晰地观察细胞核的形态和数量，对于细胞生物学和分子生物学研究有着重要的意义。
希望大家能够充分了解Hoechst染色的原理和应用，为科研工作和临床诊断提供更多的帮助。
琼脂糖凝胶电泳的试剂
琼脂糖凝胶电泳的试剂
琼脂糖凝胶电泳是一种常用于生物化学和分子生物学实验的技术，用于分离和鉴定DNA、RNA和蛋白质等生物大分子。
在进行琼脂糖凝胶电泳实验时，需要使用以下试剂：
1.琼脂糖：作为凝胶基质，用于制作凝胶板。
2.缓冲液：用于维持样品和电泳过程中的pH值稳定。
常用的缓冲液有Tris-乙酸（TAE）和Tris-甘氨酸（TG）等。
3.核酸染料：用于染色和可视化核酸样品。
常用的核酸染料有乙酰胺蓝、考马斯亮蓝、荧光染料（如SYBR Green）等。
4.蛋白质染料：用于染色和可视化蛋白质样品。
常用的蛋白质染料有考马斯亮蓝、银染料等。
5.电泳缓冲液：用于在电泳过程中提供离子和能量。
常用的电泳缓冲液有Tris-乙酸（TAE）和Tris-甘氨酸（TG）等。
6.琼脂糖凝胶制备试剂：用于制备琼脂糖凝胶，如凝胶板。
常用的试剂有TAE缓冲液、琼脂糖、DNA酶抑制剂等。
7.样品加载试剂：用于将样品加载到凝胶板上，如DNA Loading Buffer、Protein Loading Buffer等。
8.终止剂：用于终止电泳过程，如琼脂糖凝胶电泳终止剂（如Ethidium bromide）。
9.洗涤剂：用于清洗实验器材，如70%乙醇、缓冲液等。
10.其他辅助试剂：如移液器、吸头、离心管、DNA Marker、蛋白质Marker等。
分子生物学常用荧光核酸染料
由于只需简单温和的物理方法（光照）激发和检测，荧光染料是研究生物学微观世界特别是核酸时最常用的示踪工具之一。
这里的荧光核酸染料主要指能特异结合核酸并改变发光特性的化合物，DNA电泳后检测凝胶的EB大概是最为人熟知的荧光核酸染料吧。
除了染胶，荧光核酸染料还可用于荧光原位杂交中作为常见的复染剂，它们能以非共价键的方式与DNA/RNA结合从而显示原位杂交中的细胞背景信息。
根据它们能否穿透细胞膜进入活细胞体内，还可分为两大类：通透性核酸染料和非通透性核酸染料。
生物通在此简单比较一下在分子生物学实验和细胞学实验中常用的荧光染料。
分子生物学常用荧光核酸染料荧光核酸染料在分子生物学最常见的应用无疑是电泳凝胶染色，以及定量PCR。
EBEB（溴化乙锭）本身在紫外下不发光，能与单链、双链甚至三链DNA高效结合并发出明亮的橙色荧光。
因其廉价且灵敏度高，一直是琼脂糖核酸电泳最常用的荧光染料。
EB的使用非常简单方便，电泳结束后染色可获得最佳效果，也可以在制胶时加入进行前染。
前染有利于节约时间，但是易出现条带变形拖尾等问题。
EB-DNA结合物会导致染料的光漂白和DNA单链断裂，且具有潜在的诱变作用。
虽说以前的实验室里总会有个别做起实验来“精神可嘉，行为可怕”的家伙，一时找不到手套他们敢徒手拿EB胶，但大多数人对EB还是“敬而远之”的，没事谁都不愿靠近实验室里跑胶、看胶那一块地方。
偏偏对于搞分子生物学的人来说，跑胶就像吃饭一样平常，于是大家只能硬着头皮天天和EB打交道，盼望EB的替代品早点出现在实验室。
生物通在此简单回顾一下这几年纷纷登场的EB替代品。
SYBR系列染料说到EB的替代物，首先想到的是Invitrogen旗下Molecular Probes专利持有的SYBR系列。
自1993年SYBR核酸染料推出以来，就因其灵敏度和易用性而迅速大受欢迎，成为明星产品之一。
这一系列包括4种染料：SYBR Safe、SYBR Gold、SYBR Green I和SYBR Green II。
核酸染色剂
电泳后，核酸需经染色才能显色出带型，常用以下核酸染色剂：1.溴化乙锭（ethidium bromide, EB）最常用的核酸荧光染料，这种扁平分子可嵌入核酸双链的配对碱基之间，在紫外线激发下，发出桔红色荧光。
激发荧光的能量来源于两个方面，一是核酸吸收波长为260nm的紫外线后能将能量传送给溴化乙锭，二是结合在DNA分子中的EB本身，主要吸收波长为300nm和360nm的紫外线的能量，来源于这两方面的能量，最终激发EB发射出波长为590nm的可见光谱红橙区的红色荧光。
EB-DNA 复合物中的EB发出的荧光，比游离的凝胶中的EB发出的荧光强度大10倍，因此无需洗净背景即可清楚观察核酸带型。
若EB背景太深，可将凝胶浸泡于1mmol/LMgSO4中1h或10mmol/L MgCl2中5min，使非结合的EB褪色，这样可检查到10ng的DNA样品，EB也可用于检测单链DNA或RNA，但其对单链核酸的亲和力相对较小，荧光产率也相对较低。
在凝胶或电泳缓冲液中加入终浓度为0.5μg/ml的EB，染色可在电泳过程中进行，能随时观察核酸的迁移情况，这种方法使用于一般性的核酸检测。
但EB带正电荷，嵌入碱基后增加了核酸分子的刚性，使迁移率减慢，故不宜用于测定核酸分子量的大小，这时应在电泳后将凝胶浸入0.5μg/ml的EB水溶液中10min进行染色。
EB见光易分解，应于4℃避光保存。
2.吖啶橙（acridine orange,AO）：吖啶橙可嵌入双链核酸碱基对之间，在254nm紫外线激发下发出530nm的绿色荧光；还通过静电与单链核酸的磷酸基结合，在254nm紫外线激发下产生640nm的红色荧光。
因此可区分单链和双链核酸，灵敏度分别为0.1μg 和0.05μg。
但吖啶橙的染色操作要求严格，应在 22℃，0.01mol/L磷酸钠缓冲液（pH7.0）中避光浸泡30min，然后在搪瓷盘中用该缓冲剂4℃脱色过夜或22℃脱色1~2小时。
gelstain核酸染料的分子式
gelstain核酸染料的分子式Gelstain核酸染料是一种常用于核酸凝胶电泳分析的荧光染料。
它具有高亲和力和高选择性，可用于可视化DNA和RNA在琼脂糖凝胶中的位置。
Gelstain核酸染料的分子式是C14H17CIN4。
它的化学结构包含一个苯环和一个咪唑环，其中氯原子与苯环相连，而咪唑环的氮原子与苯环中的碳原子相连。
Gelstain染料通过与DNA或RNA中的核酸碱基发生π-π堆积作用和静电相互作用，实现核酸的染色。
它可以在紫外光激发下产生荧光，并且与琼脂糖凝胶中的核酸区分度高，使得核酸带能够清晰可见。
Gelstain核酸染料具有许多优点。
首先，它对核酸的敏感性高，只需极少量的染料即可获得明亮的信号。
其次，Gelstain染料对琼脂糖凝胶没有破坏性，可以直接在凝胶中染色，避免了传统染料需要在电泳后进行染色的繁琐操作。
此外，Gelstain染料与DNA或RNA的结合是可逆的，因此可以通过几次洗涤步骤将染料从核酸中去除，使得核酸可以进行下一步的实验操作。
Gelstain核酸染料是一种方便易用且高效的染料，适用于核酸凝胶电泳分析。
它的分子式为C14H17CIN4，通过与核酸碱基发生作用实现核酸的染色，能够提供清晰可见的核酸带。
使用Gelstain染料可以有效地简化实验流程，并且具有良好的染色效果。
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EB（溴化乙锭）：
溴化乙锭是一种高度灵敏的嵌入性荧光染色剂，为强致癌诱变剂，但价格便宜。
它与DNA
的结合几乎没有碱基序列特异性。
在高离子强度的饱和溶液中，大约每2.5个碱基插入一个
溴化乙锭分子。
EB的这种特性使其成为一种核酸染料，常用于琼脂糖凝胶电泳中的核酸染色。
溴化乙锭在紫外区302nm和366nm处有吸收峰，在紫外光的照射下，溴化乙锭可被激发出橙红色的荧光（590nm）。
结合有DNA的溴化乙锭复合物的荧光强度要比没有结合DNA的染
料高出20-30倍，因此溴化乙锭可检测到少至10ng的DNA条带，非常灵敏。
Gel Green和Gel Red：
GelRed 和 GelGreen 是两种集高灵敏、低毒性和超稳定性于一身的极佳的荧光核酸凝胶染色
试剂。
其特点有：
高灵敏度：GelRed 和 GelGreen 是目前市场中最灵敏的凝胶核酸染料之一；
稳定性极好：可以使用微波炉加热，可以在室温下保存；
更安全：艾姆斯氏试验结果表明，该染料的诱变性远小于溴化乙锭（EB）；
广泛的适应性：适用于预制凝胶和凝胶电泳后染色；
染色过程简单：与EB一样，在预制胶和电泳过程中不必担心染料降解；而电泳后染色过程
也只需30分钟且无需脱色或冲洗；
对 DNA 和 RNA 的迁移影响小：对核酸迁移的影响小于 SYBR Green 。
与标准凝胶成像系统以及可见光激发的凝胶观察装置完美兼容：使用 312nm 激发的 UV 凝胶
成像系统时，GelRed 可以完美的替代EB；使用 254nm 激发的 UV 凝胶成像系统或可见光激
发的凝胶观察装置时，GelGreen 足以替代任意一种 SYB染料。
但该染料会使小片段DNA迁
移慢一些（与EB相比).
Gold View I型/II型：
Goldview对于大片段DNA的染色效果良好，但是在对于500bp以下的片段效果不是很好，
还有一个很致命的弱点是它的荧光基团在紫外灯下非常容易淬灭，一般5-10min条带就会消失。
另外Goldview不适用于胶回收。
Goldview其实就是AO（丫啶橙，一种剧毒产品）且荧
光效果远不如EB，灵敏度差，本底色严重，不利用于回收，不稳定，在紫外灯下其诱导突
变能力极高
SYBR Green 和SYBR Gold：
稳定性差，也有毒性。
它属于花箐素类核酸染料，花箐类染料不是无毒的，而只是低毒的，
电泳级别的是经过修饰的，
修饰有三种：
1.加入卤素或氰基。
2.2.插入环羟基。
3.3.加入稳定剂。
SYBR Green I是高灵敏的DNA荧光染料，适用于各种电泳分析，操作简单：无须脱色或冲洗。
至少可检出20pg DNA，高于EB染色法25-100倍。
SYBR Green I 与dsDNA 结合荧光信号会增强800-1000倍，用SYBR Green I染色的凝胶样品荧光信号强，背
景信号低。
SYBR Green和SYBR Gold相对于EB的稳定性要差很多。
SYBR系列的染料也能进入细胞染色线粒体以及核内的DNA，从而产生危害。
SYBR Green I已被证实在紫外光下
将会产生强诱变能力，使DNA或其他物质发生突变。