核酸染色剂

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PH0621 GoldView 核酸染色剂 (10000×)操作手册

PH0621 GoldView 核酸染色剂 (10000×)操作手册

1PH0621|GoldView 核酸染色剂(10000×)货号:PH0621规格:☐1ml 保存:Store@RT ●产品简介GoldView 是一种可替代溴化乙锭(EB )的新型核酸染料,采用琼脂糖凝胶电泳检测DNA 时,其与DNA 发生结合并产生很强的荧光信号,灵敏度与EB 相当,使用方法与之完全相同。

在紫外透射光下双链DNA 呈现绿色荧光,而单链DNA 呈现红色荧光。

GoldView 特别适合大片段(>1kb )DNA 的检测,灵敏度高。

也可用于RNA 的染色。

●产品存储常温保存,有效期至少一年●使用方法1)将100ml 琼脂糖凝胶溶液(浓度一般为0.8%-2%)在微波炉中融化。

2)加入5-10μl GoldView (若背景过高可以适当减少用量;若灵敏度过低,可以适当增加用量),轻轻摇匀,避免产生气泡。

3)冷却至不烫手时倒胶,待琼脂糖凝胶完全凝固后上样电泳。

4)电泳完毕,使用凝胶成像系统或可见光透射仪观测。

注:若使用凝胶成像系统照相时,通过调节光圈、曝光时间选择合适的滤光片,可得到成像清晰、背景较低的照片。

●注意事项1)胶厚度不宜超过0.5cm ,胶太厚会影响检测的灵敏度。

2)加入GoldView 的琼脂糖凝胶反复融化可能会对核酸检测的灵敏度产生一定影响。

3)GoldView 特别适用于大片段(>1kb )DNA 的检测。

对于更小片段的DNA ,特别是<500bp 检测信号可能很弱或者无信号。

对于<500bp 的DNA 染色,建议使用SYBR Green I 核酸染料。

4)含GoldView 的凝胶不适合进行胶回收实验。

5)Goldview 的主要成分是吖啶橙,具有细胞渗透性,有一定的细胞毒性。

建议操作人员使用时做好防护措施,带上手套和口罩。

并妥善处理好废弃物。

6)GoldView 在pH3.6-7.0之间能更好地与核酸结合,因此电泳时最好使用新鲜的电泳缓冲液。

7)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

核酸凝胶染色剂-GelRed

核酸凝胶染色剂-GelRed

环境安全、极其灵敏的核酸凝胶染色试剂GelRed&GelGreen-真正的EB替代者水溶性包装产品通过美国环保标准的安全测试,废弃物可直接倒入下水道,而不会造成环境污染。

G elRedTM和GelGreenTM是由美国 BIOTIUM 公司开发的两种集高灵敏度、低毒性和超稳定性于一身的,极佳的核酸凝胶荧光染色试剂。

目前,大多数商业化的核酸凝胶染色试剂总是在安全性、稳定性和灵敏性等方面不能完全令人满意。

例如,EB 作为使用最广泛的核酸凝胶染色试剂,能够在多数应用中提供可以接受的灵敏度,但它是一种高诱变性的化学物质,且染色后背景荧光信号较高(图1)。

SYBR Green I 和 SYBR Gold 也被宣传为最灵敏的凝胶染色试剂。

但 SYBR Green I尤其是 SYBR Gold 在常用的微碱性电泳缓冲溶液或预制凝胶中会快速降解,稳定性差导致染色效果极不可靠。

SYBRsafe 被认为是市场上较为安全的核酸染料,但它的染色效果还远不及 SYBR Green I,且毒性依然较高(图3)。

GelRed和GelGreen无论用于预制凝胶染色还是凝胶电泳后染色,都表现出了极高的灵敏度。

为配合312nm-UV凝胶成像系统而设计的GelRed,在使用了我们新开发的具有专利的试验步骤后(该试验步骤中使用稀释的NaCl溶液替代传统的TBE缓冲溶液),在凝胶电泳后染色中优于或者至少相当于 SYBR Gold。

但与SYBR Gold 不同,GelRed在预制凝胶中使用时仍然有极高的灵敏度。

我们新开发的GelGreen可以满足使用 488 nm 激光凝胶扫描仪或者可见光激发的 Dark Reader 的研究人员的使用要求。

GelGreen 无论是在预制凝胶还是凝胶电泳后染色中都与 SYBR Green I 灵敏度相当,但不存在后者的稳定性问题。

实际上,GelRed 和 GelGreen ,特别是GelRed非常稳定,可以长期在室温下保存。

核酸染色剂SYBR-Gold染色特性分析

核酸染色剂SYBR-Gold染色特性分析

核酸染色剂SYBR-Gold染色特性分析金磊【摘要】Objective It is analyse two method for staining DNA fragments in agarosewith SYBR-Gold.Methods It used poststaining and prestaining to dye double strand DNA in agarose gel electrophoresis.The same way is used to stain DNA with EB as a control.And we analysed the results by the gel imaging system.Results We found SYBR-Gold was much more sensitive than EB to detect double strand DNA.But the effect of resolution and the mobility of DNA fragments were affiliated to the concentration of the samples in precasting SYBR-Gold in gels.And it was low accurate in measuring the size of DNA fragments through the agarose gel with adding SYBR-Gold in loading buffer.Conclusion We do not recommend that you stain the sample with SYBR-Gold before agarose gel electrophoresis.It is also not suitable to precast SYBR-Gold in gels when the concentration of samples is too high.However,the poststain with SYBR-Gold is an ideal method.%目的:检测 SYBR-Gold前染色与后染色的优缺点。

dapi最大激发波长

dapi最大激发波长

dapi最大激发波长DAPI是一种常用的核酸荧光染色剂,其最大激发波长为358纳米。

它广泛应用于生物学、医学和遗传学研究中,用于检测和分析DNA 和RNA的存在和分布情况。

DAPI的发现和应用对于深入了解生命的基本单位——细胞核的结构和功能具有重要意义。

细胞核是细胞中最重要的器官之一,包含着遗传物质DNA和RNA,控制着细胞的生长、分裂和功能。

DAPI的最大激发波长为358纳米,使其能够被紫外线激发并发出蓝紫色荧光。

这种荧光可以与DNA和RNA结合,并在显微镜下观察到。

DAPI荧光染色可以提供关于细胞核形态、染色体结构和DNA含量等重要信息,有助于揭示细胞核的组织和功能。

DAPI的应用范围非常广泛。

在细胞生物学研究中,科学家们经常使用DAPI来观察细胞核的形态和结构变化。

通过DAPI染色,可以清晰地观察到细胞核的大小、形状和核仁的位置。

此外,DAPI还可以用于检测和分析细胞核中DNA的含量和分布情况。

这对于研究细胞的生长、分裂和分化过程以及细胞周期的调控机制非常重要。

在医学研究中,DAPI也被广泛应用于病理学诊断和肿瘤学研究中。

通过DAPI染色,医生可以观察到肿瘤细胞中DNA的异常分布和数量变化,从而帮助判断肿瘤的类型和恶性程度。

此外,DAPI还可以用于检测病毒感染和细菌感染等疾病的诊断。

除了在细胞生物学和医学研究中的应用外,DAPI还被广泛应用于遗传学研究中。

通过与其他荧光染料的联合应用,可以实现多种核酸分子的检测和分析,从而揭示基因的结构和功能。

这对于理解遗传变异和疾病的发生机制有重要意义。

DAPI作为一种常用的核酸荧光染色剂,其最大激发波长为358纳米。

它在生物学、医学和遗传学研究中发挥着重要作用,能够提供关于细胞核形态、染色体结构和DNA含量等重要信息。

通过DAPI染色,科学家们可以更加深入地了解细胞核的结构和功能,揭示生命的奥秘。

甲基绿派洛宁染色原理

甲基绿派洛宁染色原理

甲基绿派洛宁染色原理甲基绿是一种常用的核酸染色剂,它能够与DNA发生特异性的结合,因此在生物学实验和临床诊断中得到了广泛的应用。

而派洛宁则是一种经常与甲基绿一起使用的染色剂,它们的结合可以增强染色效果,使得细胞核和染色体更加清晰可见。

本文将介绍甲基绿派洛宁染色原理,以及其在实验和临床中的应用。

甲基绿派洛宁染色的原理主要是基于甲基绿和派洛宁与DNA的特异性结合。

甲基绿是一种碱性染料,它可以与DNA的磷酸基团发生静电作用,从而使得DNA分子呈现出深蓝色。

而派洛宁则可以与甲基绿形成复合物,增强染色效果,使得细胞核和染色体更加清晰可见。

这种染色原理使得甲基绿派洛宁在核酸染色实验中得到了广泛的应用。

在实验室中,甲基绿派洛宁染色常常用于核酸电泳实验。

核酸电泳是一种常用的生物学实验方法,用于分析DNA或RNA的大小和数量。

在核酸电泳实验中,样品中的DNA或RNA经过电泳分离后,需要进行染色以观察其分离情况。

甲基绿派洛宁染色可以使得DNA 或RNA在凝胶中呈现出明显的条带,便于分析和识别。

此外,甲基绿派洛宁染色还常用于细胞核染色和染色体观察,能够帮助研究人员观察细胞结构和染色体形态,从而进行细胞生物学和遗传学研究。

除了在实验室中的应用,甲基绿派洛宁染色在临床诊断中也具有重要意义。

在临床病理学中,医生常常需要观察组织切片中的细胞核和染色体,以帮助诊断疾病。

甲基绿派洛宁染色可以使得细胞核和染色体清晰可见,有助于医生进行病理诊断。

此外,在肿瘤细胞学检查中,甲基绿派洛宁染色也常用于观察肿瘤细胞的形态和结构,为临床诊断提供重要依据。

总的来说,甲基绿派洛宁染色原理是基于甲基绿和派洛宁与DNA的特异性结合,能够使得细胞核和染色体清晰可见。

在实验室和临床中,甲基绿派洛宁染色被广泛应用于核酸电泳实验、细胞核染色、染色体观察以及临床病理诊断等领域,为科研工作者和医生提供了重要的帮助。

通过对甲基绿派洛宁染色原理的深入了解,可以更好地掌握其在实验和临床中的应用,为科研和医学工作提供更多的可能性。

核酸染色剂SYBR—Gold染色特性分析

核酸染色剂SYBR—Gold染色特性分析

wa s mu c h mo r e s e n s i t i v e t h a n EB t O d e t e c t d o u b l e s t r a n d DNA. B u t t h e e f f e c t o f r e s o l u t i o n a n d t h e mo b i l i t y o f DNA
u s e d po s t s t a i ni ng a n d p r e s t a i n i n g t O dy e d ou bl e s t r a nd DN A i n a ga r os e ge l el e c t r op ho r e s i s . Th e s am e way i s us e d t o s t a i n D NA wi t h EB a s a c on t r o 1 . A nd we a n a l y s e d t he r e s ul t s by t h e g e l i ma g i n g s ys t e m .Re s ul t s We f ou nd SYBR— Go l d
中图分类号 : R3 9 2 . 3 文 献标 识码 : A
Th e Ch a r a c t e r i z a t i o n o f S YB R Go l d n u c l e i c a c i d d y e J I N Le i .( Exp e r i me n t a l c e n t e r f o r Me d i c a l Bi o c h e mi s t r y a n d
Mo l e c u l a r Bi o l o gy Te a c h i n g. Xu z h o uM e di c a l C o l l e ge , Xu z h o u, Ji a n g s u 2 2 1 0 0 2, Ch i n a )

M5 Hipure Next III Gelred 第三代胶红核酸染料(各种机型通用)说明书

M5 Hipure Next III Gelred 第三代胶红核酸染料(各种机型通用)说明书

101422-186M5Hipure Next III Gelred 第三代胶红核酸染料(10000X )(各种机型通用)使用说明书产品名称单位货号M5Hipure Next III Gelred 第三代胶红核酸染料(10000X )500µl MF380-01【储存条件】2-8˚C 保存【产品简介】M5Hipure Next III Gelred 第三代胶红核酸染料(各种机型通用)是聚合美最新开发的花菁类核酸染料。

M5Hipure Next III Gelred 第三代胶红核酸染料(各种机型通用)将花菁素基体苯环改良成链式结构的油性大分子,这种独特的油性大分子,不能穿透细胞膜进入活体细胞内,也不易挥发而被吸入人体,且在凝胶染色浓度下没有诱变性,具有使用安全无毒、检测灵敏等特点。

同时改善了花菁素类核酸染料电泳条带弯曲和迁移的缺点,可以作为各种核酸电泳的染色剂,适用于各种片段大小染色。

与标准紫外凝胶成像系统和可见光激发的凝胶观察装置都可完美兼容,适用于紫外凝胶成像系统或蓝色可见光激发的凝胶观察和安全切胶,是一种安全无毒、高灵敏的全新核酸染料。

【产品特点】1.安全无毒:独特的油性大分子特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内,艾姆斯氏试验结果也表明该染料的诱变性远小于EB 。

2.灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响较小。

3.稳定性高:适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶;室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定,耐光性强。

4.信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。

5.操作简单:在预制胶和电泳过程中不降解,可直接用可见光凝胶透射仪观察。

6.适用范围广:可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法);适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳;可用于dsDNA 、ssDNA 或RNA 染色。

7.完美兼容:适用于使用254nm 激发的紫外凝胶成像系统或蓝色可见光激发的凝胶观察装置。

【注意事项】1.由于M5Hipure Next III Gelred 第三代胶红核酸染料(各种机型通用)具有良好的热稳定性,可以在热的琼脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷却。

结晶紫和甲基紫 生物膜

结晶紫和甲基紫 生物膜

结晶紫和甲基紫生物膜全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:结晶紫和甲基紫是两种常用的生物染料,它们广泛应用于生物膜的制备和研究中。

生物膜是一种由生物组织或细胞所表现出的具有特定结构和功能的薄膜,它在生物学研究中起着重要的作用。

本文将重点介绍结晶紫和甲基紫在生物膜中的应用及其制备方法,希望能够为相关领域的研究者提供参考和帮助。

让我们先来了解一下结晶紫和甲基紫这两种染料的特性。

结晶紫是一种有机化合物,呈现出深紫色的结晶状,其具有良好的渗透性和亲和性,能够与生物膜中的各种成分相互作用,起到染色和标记的作用。

甲基紫则是一种具有类似特性的染料,它也可以与生物膜中的蛋白质、核酸等成分结合并发挥其染色效果。

在生物膜的制备过程中,结晶紫和甲基紫通常被用作染色试剂,它们可以通过与生物膜中的特定分子发生化学反应或物理吸附的方式,将其染色成特定颜色,从而方便观察和分析生物膜的结构和功能。

在生物膜的研究领域中,结晶紫和甲基紫还可以作为荧光标记物,通过与荧光显微镜等设备结合使用,实现对生物膜中特定分子的高度灵敏的检测和成像。

结晶紫和甲基紫的制备方法也是生物膜研究中值得关注的一个重要方面。

一般来说,这两种染料可以通过合成和提纯的方式来获得。

在合成过程中,要注意合成反应条件的控制,以确保产品的纯度和稳定性。

在提纯过程中,可以通过溶剂抽提、结晶分离等方法,获得高纯度的结晶紫和甲基紫。

为了确保染料的质量和稳定性,还可以通过对其物理化学性质进行分析和检测,确保其符合应用要求。

第二篇示例:结晶紫和甲基紫是两种常用的染料,它们在生物膜研究中有着重要的应用。

生物膜是由生物多聚物构成的一种复合材料,具有特殊的结构和功能。

在生物膜的研究中,染料的选择和使用对于研究结果的准确性和可靠性起着至关重要的作用。

结晶紫是一种常用的核酸染色剂,在实验室中经常用于DNA和RNA的染色。

它是一种亲合性染料,可以与DNA和RNA中的磷酸基团结合,形成深紫色的复合物。

常用的核酸染料有哪些

常用的核酸染料有哪些

常用的核酸染料有哪些EB(溴化乙锭):溴化乙锭是一种高度灵敏的嵌入性荧光染色剂,为强致癌诱变剂,但价格便宜。

它与DNA的结合几乎没有碱基序列特异性。

在高离子强度的饱和溶液中,大约每2.5个碱基插入一个溴化乙锭分子。

EB的这种特性使其成为一种核酸染料,常用于琼脂糖凝胶电泳中的核酸染色。

溴化乙锭在紫外区302nm和366nm处有吸收峰,在紫外光的照射下,溴化乙锭可被激发出橙红色的荧光(590nm)。

结合有DNA的溴化乙锭复合物的荧光强度要比没有结合DNA的染料高出20-30倍,因此溴化乙锭可检测到少至10ng的DNA条带,非常灵敏。

Gel Green和Gel Red:GelRed 和 GelGreen 是两种集高灵敏、低毒性和超稳定性于一身的极佳的荧光核酸凝胶染色试剂。

其特点有:高灵敏度:GelRed 和 GelGreen 是目前市场中最灵敏的凝胶核酸染料之一;稳定性极好:可以使用微波炉加热,可以在室温下保存;更安全:艾姆斯氏试验结果表明,该染料的诱变性远小于溴化乙锭(EB);广泛的适应性:适用于预制凝胶和凝胶电泳后染色;染色过程简单:与EB一样,在预制胶和电泳过程中不必担心染料降解;而电泳后染色过程也只需30分钟且无需脱色或冲洗;对DNA 和RNA 的迁移影响小:对核酸迁移的影响小于SYBR Green 。

与标准凝胶成像系统以及可见光激发的凝胶观察装置完美兼容:使用 312nm 激发的 UV 凝胶成像系统时,GelRed 可以完美的替代EB;使用254nm 激发的UV 凝胶成像系统或可见光激发的凝胶观察装置时,GelGreen 足以替代任意一种SYB染料。

但该染料会使小片段DNA迁移慢一些(与EB相比).Gold View I型/II型:Goldview对于大片段DNA的染色效果良好,但是在对于500bp 以下的片段效果不是很好,还有一个很致命的弱点是它的荧光基团在紫外灯下非常容易淬灭,一般5-10min条带就会消失。

核酸染料成分

核酸染料成分

核酸染料成分核酸染料是一类广泛应用于生物学和化学领域的重要物质,其可以用来检测、标记和研究生物分子,如DNA和RNA。

核酸染料的成分多种多样,下面将介绍几种常见的核酸染料成分及其应用。

1. 乙溴蓝(Ethidium Bromide):乙溴蓝是一种常用的核酸染料,可以通过与DNA或RNA分子的双螺旋结构相互作用而发出荧光。

乙溴蓝主要用于琼脂糖凝胶电泳中的核酸分离和检测。

它可以在紫外光照射下与DNA分子结合并发出橙红色荧光,从而可以直观地观察到DNA分离带或RNA分离带。

2. SYBR Green:SYBR Green是一种常用的核酸染料,它与DNA或RNA结合后能发出绿色荧光。

SYBR Green广泛应用于实时荧光定量PCR(qPCR)技术中,用于检测和定量PCR反应体系中产生的DNA分子。

其优点是灵敏度高、特异性好,可以实时监测PCR反应的进程,并定量分析反应体系中的DNA含量。

3. GelRed:GelRed是一种相对较新的核酸染料,它具有与乙溴蓝类似的性质,但更加安全和稳定。

GelRed可以在琼脂糖凝胶电泳中用于检测和定量DNA或RNA分子。

与乙溴蓝相比,GelRed对生物体和环境的毒性更低,使用更加方便和安全。

4. Methylene Blue:亚甲基蓝是一种常用的核酸染料,可以通过与DNA或RNA分子的碱基相互作用而发出蓝色荧光。

亚甲基蓝可以用于琼脂糖凝胶电泳中的核酸分离和检测。

与乙溴蓝相比,亚甲基蓝对生物体和环境的毒性较低,但其荧光强度相对较弱。

5. acridine orange:吖啶橙是一种双功能核酸染料,可以发出绿色荧光或橙色荧光,具有荧光探针和核酸染色剂的双重作用。

吖啶橙可以用于细胞核酸的染色和细胞活力的检测。

在荧光显微镜下观察,吖啶橙可以染色细胞核酸,并显示出不同类型的细胞核和胞质。

6. Propidium Iodide:碘化丙啶是一种常用的核酸染料,主要用于细胞凋亡和细胞周期分析。

核酸染色剂对dna在琼脂糖凝胶电泳中迁移速度的影响

核酸染色剂对dna在琼脂糖凝胶电泳中迁移速度的影响

To analyze the ePect on monilito of DNA fraamepts in agarose with ethidium bromide(EB) ang GelRee, we uscP pre-
ang post-staining with the two Syes, aS the aaarose gel electrophoresis wae uscP at the Setection methon. Thee the gel imaaing system took
moro sePsitive , gontoxia ang epviroumeptalty safe than EB. In conclusion , prestaining with EB ang poststaining can measure the DNA fraamePts
accurately. Ang we can use GelReS to replace EB wheP the concePtration oS the samples is Rw ang an ePvironmePt-safe Sye is geeSeP.
收稿日期22190928的移动情况ogston模型认为较小分子量的dna片段可以凝胶它们的迁移速度与凝胶的数量以及dna分子量有关系4oreptation理论认为dna分子会反复的凝胶孔径这些凝胶际就像了一根管子因此可以看成dna在一根管子中移动真功地小于40kb的dna分子在琼脂糖凝胶中的移动情况其迁移率和碱基对的倒数成正比46ogelrep是一种核酸染色剂使用方法简便染色优越稳定性好
BO Xin-met (National Basic Meeical ExpeOmental Teaching Demonstration Ceeteo, Basic Meeical College, XuzUou Meeical University,

核酸染色剂

核酸染色剂

电泳后,核酸需经染色才能显色出带型,常用以下核酸染色剂:1. 溴化乙锭(ethidium bromide, EB)最常用的核酸荧光染料,这种扁平分子可嵌入核酸双链的配对碱基之间,在紫外线激发下,发出桔红色荧光。

激发荧光的能量来源于两个方面,一是核酸吸收波长为 260nm的紫外线后能将能量传送给溴化乙锭,二是结合在DNA分子中的EB本身,主要吸收波长为 300nm和360nm的紫外线的能量,来源于这两方面的能量,最终激发EB发射出波长为590nm的可见光谱红橙区的红色荧光。

EB-DNA 复合物中的EB发出的荧光,比游离的凝胶中的EB发出的荧光强度大10倍,因此无需洗净背景即可清楚观察核酸带型。

若EB背景太深,可将凝胶浸泡于1mmol/LMgSO仲1h或10mmol/L MgCI2中5min,使非结合的 EB褪色,这样可检查到 10ng的DNA羊品, EB也可用于检测单链 DNA或 RNA但其对单链核酸的亲和力相对较小,荧光产率也相对较低。

在凝胶或电泳缓冲液中加入终浓度为0.5卩g/ml的EB,染色可在电泳过程中进行,能随时观察核酸的迁移情况,这种方法使用于一般性的核酸检测。

但EB带正电荷,嵌入碱基后增加了核酸分子的刚性,使迁移率减慢,故不宜用于测定核酸分子量的大小,这时应在电泳后将凝胶浸入0.5卩g/ml的EB水溶液中10min进行染色。

EB见光易分解,应于4 C避光保存。

2. 吖丫啶橙(acridine orange,AO ):吖丫啶橙可嵌入双链核酸碱基对之间,在254nm紫外线激发下发出530nm的绿色荧光;还通过静电与单链核酸的磷酸基结合,在254nm紫外线激发下产生640nm的红色荧光。

因此可区分单链和双链核酸,灵敏度分别为0.1卩g 和0.05卩g。

但吖丫啶橙的染色操作要求严格,应在22 C, 0.01mol/L 磷酸钠缓冲液(pH7.0 )中避光浸泡30min,然后在搪瓷盘中用该缓冲剂 4 C脱色过夜或22 C脱色1~2 小时。

gelred吸收波长

gelred吸收波长

gelred吸收波长
GelRed是一种广泛应用于DNA凝胶电泳的核酸染色剂,其吸收波长为500 nm左右的蓝色光。

它是一种改良型的库克红,可以更加快速、高效地染色DNA分子,并且可以减少毒性和突变率。

GelRed的吸收波长与它的化学结构密切相关。

它是一种类似库克红的分子,但是它的结构中含有吡啶环,这使得它能够吸收到500 nm
左右的蓝色光。

当GelRed和DNA结合时,它会发生染色,从而使DNA
分子在凝胶电泳过程中显露出来。

GelRed吸收波长的优点在于它可以使用常规的UV凝胶成像系统
进行检测,而无需特殊的染色设备或显色步骤。

此外,它可以减少DNA 封链和突变率,从而更加安全和高效地进行核酸染色。

总之,GelRed的吸收波长是其成为DNA凝胶电泳染色剂的关键因素之一。

它的设计使其可以快速、准确地染色DNA分子,从而在生物
学研究中发挥着重要作用。

ethidium homodimer-1染色原理

ethidium homodimer-1染色原理

ethidium homodimer-1染色原理ethidium homodimer-1(简称EthD-1)是一种常用的核酸染料,广泛用于细胞和组织的染色分析。

本篇文章将一步一步回答ethidium homodimer-1染色原理,并详细解释其作为染料的原因及其在生物医学研究中的应用。

第一步:介绍ethidium homodimer-1染色的背景ethidium homodimer-1是由同类染料EthD-1构成的,具有荧光性质。

EthD-1属于DNA结合染料,其分子结构包含两个乙基铜和一个亚硝基乙基基团。

这种染料常用于荧光显微镜下的细胞和组织染色,特别用于检测死细胞和细胞凋亡。

第二步:解释染色原理EthD-1通过与DNA结合来实现染色。

DNA的分子结构中包含腺嘌呤(A)和胸腺嘧啶(T)等碱基,而EthD-1染料可以与这些碱基进行特异性结合。

当EthD-1与DNA结合后,会发生荧光共振能量转移(FRET)现象,从而使染料的荧光增强。

这种现象使得EthD-1染料成为一种非常理想的细胞凋亡染色剂。

第三步:解释EthD-1作为染料的原因EthD-1作为一种核酸染料,其选择性结合DNA的特性使其具有独特的应用优势。

EthD-1通过其迅速穿过细胞膜进入细胞,然后在细胞内结合到DNA分子上。

活细胞的细胞膜完整,不容易使EthD-1渗透,因此只会染色死细胞。

这种特定的细胞染色方式使EthD-1特别适用于检测和区分活细胞和死细胞。

第四步:解释EthD-1染色在生物医学研究中的应用由于EthD-1的特殊染色性质,它在生物医学研究中得到广泛应用。

以下是一些常见的应用领域:1. 细胞凋亡检测:EthD-1可以用来检测和分析细胞凋亡,通过区分活细胞和死细胞的能力,可以评估药物或生物过程对细胞凋亡的影响。

2. 组织损伤研究:EthD-1在组织学研究中也广泛应用,可以用于评估组织损伤程度和病理变化。

3. 肿瘤研究:EthD-1可以用于评估肿瘤细胞的存活率和细胞凋亡水平,为肿瘤生物学研究提供重要的信息。

乙烯基-β-紫罗兰醇用途

乙烯基-β-紫罗兰醇用途

乙烯基-β-紫罗兰醇用途乙烯基-β-紫罗兰醇(Ethyl Violet)是一种有机化合物,属于紫罗兰类染料,在生命科学、医药领域和工业应用中具有广泛的用途。

其独特的化学性质使其成为生化实验、组织学研究以及微生物学分析的重要工具。

本文将深入探讨乙烯基-β-紫罗兰醇的用途及其在不同领域中的应用。

一、生化实验中的用途:乙烯基-β-紫罗兰醇在生化实验中作为染色剂广泛用于核酸分析和分离。

其主要用途包括:凝胶电泳:乙烯基-β-紫罗兰醇可与DNA或RNA结合,使其在凝胶电泳中呈现出紫色或蓝色条带,从而方便核酸的可视化和分析。

核酸分离:乙烯基-β-紫罗兰醇可在核酸分离中作为标记,帮助分离不同长度的DNA或RNA分子。

核酸定位:乙烯基-β-紫罗兰醇染色后的核酸条带可用于在凝胶上定位目标分子,有助于分析和研究。

二、组织学研究中的应用:乙烯基-β-紫罗兰醇在组织学研究中常用于染色,以便观察和分析细胞和组织结构:细胞核染色:乙烯基-β-紫罗兰醇可染色细胞核,使其呈现出紫色,有助于研究细胞核的形态和数量。

组织切片染色:在医学和生物学研究中,乙烯基-β-紫罗兰醇常用于染色组织切片,以便观察组织结构和细胞排列。

组织分类:根据染色后的细胞和组织颜色和形态特征,可以进行组织分类和研究。

三、微生物学分析中的应用:乙烯基-β-紫罗兰醇在微生物学中具有重要作用,用于微生物鉴别和分类:细菌染色:乙烯基-β-紫罗兰醇染色可以帮助鉴别细菌的形态和特征,从而分辨不同种类的细菌。

真菌鉴定:对于真菌的研究,乙烯基-β-紫罗兰醇也可以作为染色剂,帮助识别不同的真菌种类。

四、医药领域的潜在应用:除了上述应用外,乙烯基-β-紫罗兰醇在医药领域也有一些潜在应用:抗菌作用研究:一些研究表明,乙烯基-β-紫罗兰醇可能对一些细菌产生抗菌作用,因此被用于抗菌药物的研究和开发。

药物载体:由于其化学性质,乙烯基-β-紫罗兰醇在药物传递和释放领域可能有潜在的应用,用于药物的载体或释放系统。

核酸染色剂对DNA在琼脂糖凝胶电泳中迁移速度的影响

核酸染色剂对DNA在琼脂糖凝胶电泳中迁移速度的影响

核酸染色剂对DNA在琼脂糖凝胶电泳中迁移速度的影响引言琼脂糖凝胶电泳是生物学和生物化学领域中常用的一种分离和检测核酸分子的技术方法。

在琼脂糖凝胶电泳中,核酸分子会根据其大小和电荷迁移速度的不同而在凝胶中进行分离,之后通过染色剂的染色就可以进行可视化检测。

核酸染色剂在琼脂糖凝胶电泳中扮演着至关重要的角色,它能够使得核酸分子在凝胶中更为清晰地展现出来。

在实际操作中,使用不同种类的核酸染色剂是否会对DNA在琼脂糖凝胶电泳中迁移速度产生影响一直是个备受学者们关注的问题。

本文将以此为研究对象,通过实验方法探讨核酸染色剂对DNA在琼脂糖凝胶电泳中迁移速度的具体影响。

材料与方法实验方法如下:首先准备琼脂糖凝胶电泳所需的试剂和设备,包括琼脂糖、TBE缓冲液、DNA样品、电泳槽和电源装置。

接着将琼脂糖和TBE缓冲液按比例混合后进行熔化和凝固,得到凝胶板。

接下来分别取不同种类的核酸染色剂并将其与DNA样品混合,然后在凝胶板上进行琼脂糖凝胶电泳。

在电泳过程结束后,使用不同种类的染色剂进行染色,并观察DNA在凝胶中的迁移情况。

最后得出实验数据并进行统计分析,以验证核酸染色剂对DNA在琼脂糖凝胶电泳中迁移速度的影响。

结果实验结果显示,不同种类的核酸染色剂对DNA在琼脂糖凝胶电泳中迁移速度确实产生了影响。

尤其是一些高效的核酸染色剂,如SYBR Green等,在染色后可以使得DNA在凝胶中的迁移速度更快。

相反,一些常规的核酸染色剂则对DNA的迁移速度影响不大,甚至有可能较慢。

这一结果表明,核酸染色剂的选择对琼脂糖凝胶电泳中DNA的迁移速度有着重要的影响。

不同的核酸染色剂对DNA的染色效果和电泳迁移速度存在明显的差异,有些核酸染色剂可能会影响DNA的电泳迁移速度。

实验结果也提示我们在进行琼脂糖凝胶电泳实验时需要选择合适的核酸染色剂,以充分发挥其在实验中的作用。

在选择核酸染色剂时,除了考虑其染色效果和成本外,还应该考虑其对DNA迁移速度的影响。

核酸电泳的指示剂与染色剂

核酸电泳的指示剂与染色剂

核酸电泳的指⽰剂与染⾊剂
核酸电泳的指⽰剂与染⾊剂
1.指⽰剂:核酸电泳常⽤的指⽰剂有溴酚兰和⼆甲苯青及银染⾊.溴酚兰在碱性液体中呈紫兰⾊,在0.6%、1%、1.4%和2%琼脂糖凝胶电泳中,溴酚兰的迁移率分别与1Kb、 0.6Kb、0.2Kb和0.15Kb的双链线性DNA⽚段⼤致相同.⼆甲苯青的⽔溶液呈兰⾊,它在 1%和1.4%琼脂糖中电泳时,其迁移速率分别与2Kb和1.6Kb的双链线性DNA⼤致相似.
指⽰剂⼀般与蔗糖、⽢油或聚蔗糖400组成载样缓冲液.载样缓冲液的作⽤有①增加样品密度,使其⽐重增加,以确保DNA均匀沉⼊加样孔内.②在电泳中形成⾁眼可见的指⽰带,可预测核酸电泳的速度和位置.③使样品呈⾊,使加样操作更⽅便. 染⾊剂:核酸电泳后,需经染⾊后才能显现出带型,最常⽤的是溴化⼄锭染⾊法,其次是银染⾊.
溴化⼄锭(ethidium bromide,EB)是⼀种荧光染料,EB分⼦可嵌⼊核酸双链的碱基对之间,在紫外线激发下,发出红⾊荧光.根据情况可在凝胶电泳液中加⼊终浓度为 0.5ug/ml的EB,有时亦可在电泳后,将凝胶浸⼊该浓度的溶液中染⾊10~
15min.琼脂糖凝胶EB染⾊,⾁眼可见核酸电泳带,其DNA量⼀般>5ng,当溴化⼄锭太多,凝胶染⾊过深,核酸电泳带看不清时,可将凝胶放⼊蒸馏⽔浸泡30min后再观察.
银染⾊:银染⾊液中的银离⼦(Ag+)可与核酸形成稳定的复合物,然后⽤还原剂如甲醛使Ag+还原成银颗粒,可把核酸电泳带染⾊⿊褐⾊.主要⽤于聚丙烯酰胺凝胶电泳染⾊. 也⽤于琼脂糖凝胶染⾊.其灵敏度⽐EB⾼200倍.但银染⾊后,DNA不宜回收.。

核酸染色剂对DNA在琼脂糖凝胶电泳中迁移速度的影响

核酸染色剂对DNA在琼脂糖凝胶电泳中迁移速度的影响

核酸染色剂对DNA在琼脂糖凝胶电泳中迁移速度的影响摘要:核酸染色剂在琼脂糖凝胶电泳中扮演了非常重要的角色,它可以在电泳过程中对DNA进行染色,使得DNA在凝胶中更加清晰可见。

本文将探讨不同核酸染色剂对DNA在琼脂糖凝胶电泳中迁移速度的影响,以及可能的影响机制。

一、引言二、核酸染色剂的选择对DNA迁移速度的影响在琼脂糖凝胶电泳实验中,常用的核酸染色剂包括乙溴化蒽酮(EtBr)和SYBR Green 等。

这些核酸染色剂都可以与DNA结合并发出荧光信号,从而使得DNA在凝胶中呈现出明显的条带。

不同的核酸染色剂对DNA的迁移速度可能会产生差异。

一些研究表明,使用EtBr染色的DNA在琼脂糖凝胶电泳中的迁移速度要比使用SYBR Green染色的DNA略快。

这一现象可能与染色剂本身的性质有关。

EtBr是一种间亚硝基化合物,它在琼脂糖凝胶中的扣缝上结合,从而产生荧光信号。

而SYBR Green则是一种更为灵敏的染色剂,它可以与DNA的双螺旋结构发生特异性结合,并产生更加强烈的荧光信号。

使用SYBR Green染色的DNA可能会在电泳中受到更大的阻力,从而导致其迁移速度稍慢于EtBr染色的DNA。

核酸染色剂的浓度和使用方法也会对DNA的迁移速度产生影响。

一些研究表明,适当增加EtBr的浓度可以显著加快DNA的迁移速度,但过高的浓度则可能对DNA的迁移造成不利影响。

在实际的琼脂糖凝胶电泳实验中,需要根据具体情况调整核酸染色剂的浓度和使用方法,以达到最佳的效果。

三、可能的影响机制四、结论在琼脂糖凝胶电泳实验中,核酸染色剂是必不可少的试剂之一,它可以对DNA进行染色,使得DNA在凝胶中清晰可见。

不同的核酸染色剂对DNA的迁移速度可能会产生影响。

EtBr染色的DNA在电泳中的迁移速度可能会略快于SYBR Green染色的DNA,这可能与染色剂本身的性质和与DNA的结合方式有关。

在实际的实验中,需要根据具体情况选择合适的核酸染色剂和使用方法,以最大限度地保证实验结果的准确性和可靠性。

核酸凝胶染色剂-GelRed

核酸凝胶染色剂-GelRed

环境安全、极其灵敏的核酸凝胶染色试剂GelRed&GelGreen- 真正的EB 替代者水溶性包装产品通过美国环保标准的安全测试,废弃物可直接倒入下水道,而不会造成环境污染。

GelRedTM和GelGreenTM是由美国BIOTIUM公司开发的两种集高灵敏度、低毒性和超稳定性于一身的,极佳的核酸凝胶荧光染色试剂。

目前,大多数商业化的核酸凝胶染色试剂总是在安全性、稳定性和灵敏性等方面不能完全令人满意。

例如,EB 作为使用最广泛的核酸凝胶染色试剂,能够在多数应用中提供可以接受的灵敏度,但它是一种高诱变性的化学物质,且染色后背景荧光信号较高(图1)。

SYB R Green I 和SYBR Gold 也被宣传为最灵敏的凝胶染色试剂。

但SYBRGreen I 尤其是SYBR Gold 在常用的微碱性电泳缓冲溶液或预制凝胶中会快速降解,稳定性差导致染色效果极不可靠。

SYBRsafe 被认为是市场上较为安全的核酸染料,但它的染色效果还远不及SYBR Green I ,且毒性依然较高(图3)o GelRed和GelGreen无论用于预制凝胶染色还是凝胶电泳后染色,都表现出了极高的灵敏度。

为配合312 nm-U凝胶成像系统而设计的GelRed,在使用了我们新开发的具有专利的试验步骤后(该试验步骤中使用稀释的NaC溶液替代传统的TBE缓冲溶液),在凝胶电泳后染色中优于或者至少相当于SYBRGold。

但与SYBRGold不同,GelRec在预制凝胶中使用时仍然有极高的灵敏度。

我们新开发的GelGreen可以满足使用488 nm激光凝胶扫描仪或者可见光激发的Dark Reader的研究人员的使用要求。

GelGreen无论是在预制凝胶还是凝胶电泳后染色中都与SYBRGreen I 灵敏度相当,但不存在后者的稳定性问题。

实际上,GelRed和GelGreen,特别是GelRed非常稳定,可以长期在室温下保存。

当这两种染料稀释在TBE或者类似的电泳缓冲溶液中时甚至可以使用微波炉加热,便于采用常规方法制备预制凝胶。

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核酸染色剂
集团文件版本号:(M928-T898-M248-WU2669-I2896-DQ586-M1988)
电泳后,核酸需经染色才能显色出带型,常用以下核酸染色剂:
1.(ethidium?bromide,?EB)最常用的核酸,这种扁平分子可嵌入核
酸双链的配对碱基之间,在紫外线激发下,发出桔红色荧光。

激发荧光的能量来源于两个方面,一是核酸吸收波长为260nm的紫外线后能将能量传送给,二是结合在DNA分子中的EB本身,主要吸收波长为300nm和360nm的紫外线的能量,来源于这两方面的能量,最终激发EB发射出波长为590nm的可见光谱红橙区的红色荧光。

EB-DNA复合物中的EB发出的荧光,比游离的凝胶中的EB发出的荧光强度大10倍,因此无需洗净背景即可清楚观察核酸带型。

若EB背景太深,可将凝胶浸泡于1mmol/LMgSO4中1h或10mmol/L?MgCl2中5min,使非结合的EB褪色,这样可检查到10ng的DNA样品,EB也可用于检测或RNA,但其对单链核酸的亲和力相对较小,荧光产率也相对较低。

在凝胶或电泳缓冲液中加入终浓度为0.5μg/ml的EB,染色可在电泳过程中进行,能随时观察核酸的迁移情况,这种方法使用于一般性的核酸检测。

但EB带正电荷,嵌入碱基后增加了核酸分子的刚性,使迁移率减慢,故不宜用于测定核酸分子量的大小,这时应在电泳后将凝胶浸入0.5μg/ml的EB水溶液中10min进行染色。

EB见光易分解,应于4℃避光保存。

2.(acridine?orange,AO):吖啶橙可嵌入双链核酸碱基对之间,在
254nm紫外线激发下发出530nm的绿色荧光;还通过静电与单链核酸的磷酸基结合,在254nm紫外线激发下产生640nm的红色荧光。

因此可区分单链和双链核酸,灵敏度分别为0.1μg和0.05μg。

但吖啶橙的染色操作要求严格,应在 22℃,0.01mol/L(pH7.0)中避光浸
泡30min,然后在搪瓷盘中用该缓冲剂4℃脱色过夜或22℃脱色1~2小时。

3.银(Ag+)试剂: Ag+与核酸形成稳定复合物,然后用甲醛使Ag+还原
成银颗粒。

AgNO3等试剂可使上的单链,及 RNA都染成黑褐色。

银染法的灵敏度比EB染色高200倍左右,比染色高100~1000倍,在小于
0.5mm厚的凝胶中,能检测出0.5ng的 RNA,其缺点是专一性不强,
能与蛋白质,去污剂反应也产生褐色,而且对DNA的染色定量不准确。

银与DNA稳定结合,对DNA有破坏作用,不适于DNA 片段回收的制备。

4.亚甲蓝(methylene?blue):可将RNA染成蓝色,但灵敏度不高,
而且操作时间长。

染色过程:胶浸泡于0.02%的亚甲蓝,
10mmol/L?Tris-Ac(pH8.3),4℃放置1~2h,用净水洗5-8h(反复换水),带型肉眼可见,最低检测量为 250ng。

5.Gold View Ⅰ型核酸染色剂与溴化乙锭:Gold View是一种可代替溴
化乙锭(EB)的新型DNA燃料,其灵敏度与EB相当,使用方法与之完全相同。

在紫外灯下双链DNA呈现绿色荧光,而单链DNA成红色荧光。

通过小鼠皮下注射实验,尚未发现Gold View有致癌作用,而溴化乙锭(EB)是一种强致癌剂。

因此用Gold View代替EB不失为一种明智的选择。

实验操作步骤:100mL溶胶液在微波炉中融化,冷却至60℃左右(不烫手)后加入10vL Gold View,轻轻摇匀后倒胶,待胶完全凝固后上样电泳,电泳完毕在紫外灯下观察。

注意事项:
1)胶厚度不要超过0.5cm,胶太厚会影响检测灵敏度
2)加入Gold View的琼脂样凝胶反复融化可能会对DNA检测的灵敏度产
生一定影响,但不明显。

3)Gold View在pH 3.6-7.0之间能更好的与核酸结合,因此电泳时最好
使用新鲜的电泳缓冲液。

4)由于Gold View产生绿色荧光,因此不适合于用一般单色胶卷拍照,
可以使用凝胶成像系统保存图像。

5)含有Gold View的凝胶不适合于进行凝胶回收试验。

要进行回收试
验,请使用EB胶或supper GreenⅠ型核酸染色剂。

6)Gold View特别适合于大片段DNA的检测(大于1kb的片段,检测灵
敏度与EB相当);当DNA片段小于1kb时,检测灵敏度低于EB,特别是低于500bp的片段,Gold ViewⅠ型可能亮度很弱或者检测不
到,如要检测小片段的DNA,请选用supper GreenⅠ型核酸染色剂,该染色剂适合检测所有片段大小的DNA片段。

7)虽然尚未发现Gold View有致癌作用,但由于Gold View溶液酸性较
强,一次对皮肤,眼睛会有一定的刺激,操作是应戴手套。

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