马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基配制
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酒精： ⑴ 70%酒精：一般用于手、种菇表面消毒； 酒精 一般用于手、种菇表面消毒； 升汞： ⑵ 0.1%升汞：常用于玻璃器皿、非金属器械 升汞 常用于玻璃器皿、 及种菇表面消毒； 种菇表面消毒； 一般用于用具、器皿消毒； ⑶ 0.1%KMnO4：一般用于用具、器皿消毒；
三、菌种生产常用的设备和用具 6、常用的消毒药品 、
石炭酸： ⑷ 5%石炭酸： 喷洒墙壁 、 地面及擦洗桌面等 ， 也 石炭酸 喷洒墙壁、地面及擦洗桌面等， 可用来苏尔代替； 可用来苏尔代替； ⑸ 2%来苏尔、新洁尔灭：用法同上； 来苏尔、 来苏尔 新洁尔灭：用法同上； 甲醛（福尔马林） ⑹ 甲醛 （ 福尔马林 ） ： 用于菇房和接种箱等空气消 毒； 方法：关闭门窗消毒，自行气化； 方法：关闭门窗消毒，自行气化； 用量： 甲醛＋ 立方米。 用量：10ml甲醛＋5g KMnO4／立方米。 甲醛
四、母种生产技术
②综合马铃薯培养基 马 铃 薯 200g 、 葡 萄 糖 （ 或 蔗 糖 ） 20g 、 KH2PO4 2g、MgSO4 0.5g、维生素B1 10mg、 、 、维生素 、 琼脂20g、H2O 1000ml、pH自然。 自然。 琼脂 、 、 自然 适合培养草菇、猴头菌、 适合培养草菇、猴头菌、灵芝及各种食用菌菌 种分离、保藏。 种分离、保藏。
四、母种生产技术
食用菌母种培养基的种类繁多， 食用菌母种培养基的种类繁多 ，由于不同营养 类型的食用菌对营养物质的要求不同， 所以， 类型的食用菌对营养物质的要求不同 ， 所以 ， 在 培养不同食用菌母种时， 培养不同食用菌母种时 ， 应选择适宜该菌种的培 养基。 养基。 母种培养基要求营养丰富、 完全、 氮源、 母种培养基要求营养丰富 、 完全 、 氮源 、 维生 素的比例应高。 素的比例应高。 现将食用菌常用的母种培养基列举如下 ：
母 种
原种和 栽培种
三、菌种生产常用的设备和用具 1、接种设备 、 ⑴ 接种室 ⑵ 接种箱 ⑶ 超净工作台
超净工作台
三、菌种生产常用的设备和用具 2、灭菌设备 、
Ⅰ 高 压 蒸 气 灭 菌 锅
1）手提式：容量小，适于斜面试 ）手提式：容量小， 管及玻璃器皿等； 管及玻璃器皿等； 2）立式： 容量大，投资大； ）立式： 容量大，投资大； 3）卧式：容量大，投资大； ）卧式：容量大，投资大； 4）家用24或26 cm压力锅：母种、 ）家用 或 压力锅： 压力锅 母种、 原种培养基 。
二、食用菌的制种程序
孢子分离 种菇 组织分离 接种→母种（一级） 接种 母种（一级） 母种 接种→ 原种 二级） 原种（ 接种 →原种（二级） 接种→→栽培种（三级） 接种 栽培种（三级） 栽培种
培养 培养
经过这样三级培养，食用菌菌丝数量大大增加。 经过这样三级培养，食用菌菌丝数量大大增加。 一般1支试管菌种可繁殖 瓶原种， 一般 支试管菌种可繁殖4~6瓶原种， 每瓶原种又 支试管菌种可繁殖 瓶原种 可扩大繁殖60~100瓶栽培种。 瓶栽培种。 可扩大繁殖 瓶栽培种
四、母种生产技术
③胡萝卜葡萄糖琼脂培养基 胡萝卜200g、葡萄糖 （ 或蔗糖 ） 18~20g、 、 葡萄糖（或蔗糖） 胡萝卜 、 琼脂20g、H2O 1000ml、pH自然。 自然。 琼脂 、 、 自然
⑵ PDA培养基配制方法 培养基配制方法
马铃薯（去皮、去芽眼） 切成片 玉米大小） 切成片（ 马铃薯（去皮、去芽眼）→切成片（玉米大小） 煮沸15-20min →双层纱 →称取 称取200g＋1000mL H2O→煮沸 煮沸 双层纱 称取 ＋ 布过滤→取滤液并补足 熔化＋ 布过滤 取滤液并补足1000mL＋琼脂 熔化＋其它 取滤液并补足 ＋琼脂→熔化 营养物质→调节 （用HCl或NaOH）→分装试管 分装试管→ 营养物质 调节pH（ 调节 或 ） 分装试管 塞上棉塞→捆扎 灭菌 高压蒸气灭菌15-30min）→ 塞上棉塞 捆扎→灭菌（高压蒸气灭菌 捆扎 灭菌（ ） 制成斜面→检查灭菌效果（ 制成斜面 检查灭菌效果（即28~30℃培养 检查灭菌效果 ℃培养2~3d） ）
实验一 马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基配制 马铃薯葡萄糖琼脂（ ）
一、食用菌菌种种类
人工培育的菌种有母种、原种和栽培种之分。 人工培育的菌种有母种、原种和栽培种之分。 1） 母种 （ 一级菌种 ） ： 用孢子分离或组织分 ） 母种（ 一级菌种） 离等培育的菌丝体称为母种。 离等培育的菌丝体称为母种。 2） 原种 （ 二级菌种 ） ： 把母种扩大到木屑 、 ） 原种（ 二级菌种） 把母种扩大到木屑、 棉籽壳等为主的培养料上的菌种称为原种。 棉籽壳等为主的培养料上的菌种称为原种。 3） 栽培种 （ 三级菌种 ） ： 由原种扩大培养成 ） 栽培种（ 三级菌种） 为生产上使用的菌种称为栽培种。 为生产上使用的菌种称为栽培种。 4） 菌种 ： 实质上就是经过人工培养并进一步 ） 菌种： 繁殖的食用菌的纯菌丝体。 繁殖的食用菌的纯菌丝体。
三、菌种生产常用的设备和用具
3、培养设备 、 ⑴ 培养室 ⑵ 生化培养箱
三、菌种生产常用的设备和用具
4、培养菌种的容器 、
母 种 ： 试 管 ， 常 用 规 格 20×180~200mm ， × 18×180mm等。 × 等 菌种瓶：盐水瓶、罐头瓶 菌种瓶：盐水瓶、 原种、 原种、栽培种 菌种袋 聚丙稀袋 聚乙稀袋
（3） 作业 ）
支试管斜面。 （1）每人制 支试管斜面。 ）每人制5支试管斜面 （2）什么叫食用菌菌种？它又有哪些类型？ ）什么叫食用菌菌种？它又有哪些类型？ （3）食用菌菌种生产常用的设备和用具有哪些？ ）食用菌菌种生产常用的设备和用具有哪些？ （4）写出食用菌的制种程序。 ）写出食用菌的制种程序。 （5）常用的消毒药品有哪些？ ）常用的消毒药品有哪些？
规格有： 规格有：12~15×30~35 cm， × ， 17×35~45 cm ×
菌种瓶
三、菌种生产常用的设备和用具 5、接种工具 、
移植菌种于培养基上的工具称接种工 主要有以下几种： 具，主要有以下几种： 接种针、环、刀、钩、铲、锄、枪等； 接种针、 枪等；
三、菌种生产常用的设备和用具 6、常用的消毒药品 、
2）、 ）一般在菌种场或研究所应用。 ）、3）一般在菌种场或研究所应用。 ）、 优点：省时、省燃料、 优点：省时、省燃料、 效果好
灭菌设备
Ⅰ高压蒸气灭菌锅
三、菌种生产常用的设备和用具 2、灭菌设备 、
Ⅱ 常压灭菌锅
目前农村生产栽培种的必备设备， 目前农村生产栽培种的必备设备，实际上 是一种大型蒸笼式煮灶。 底部为铸铁大锅， 是一种大型蒸笼式煮灶 。 底部为铸铁大锅 ， 上部为圆形木桶， 上部为圆形木桶 ， 桶内装数层供放培养基的 格架。 桶盖装有活络搭及密闭的橡皮圈， 格架 。 桶盖装有活络搭及密闭的橡皮圈 ， 由 于锅内温度最高是100℃，所以灭菌时间需维 ℃ 于锅内温度最高是 持10~12h，才能达到灭菌效果。 ，才能达到灭菌效果。
四、母种生产技术
（一）母种培养基 马铃薯葡萄糖琼脂培养基（ ①马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA） ） 马铃薯200g、 葡萄糖 （ 或蔗糖 ） 20g、 琼 、 葡萄糖（ 或蔗糖） 马铃薯 、 脂20g、H2O 1000 mL、pH 6.5。 、 、 。 适用于一般食用菌母种分离与培养， 适用于一般食用菌母种分离与培养，但草 猴头菌等在此培养基上生长不良。 菇、猴头菌等在此培养基上生长不良。
三、菌种生产常用的设备和用具 6、常用的消毒药品 、
石炭酸： ⑷ 5%石炭酸： 喷洒墙壁 、 地面及擦洗桌面等 ， 也 石炭酸 喷洒墙壁、地面及擦洗桌面等， 可用来苏尔代替； 可用来苏尔代替； ⑸ 2%来苏尔、新洁尔灭：用法同上； 来苏尔、 来苏尔 新洁尔灭：用法同上； 甲醛（福尔马林） ⑹ 甲醛 （ 福尔马林 ） ： 用于菇房和接种箱等空气消 毒； 方法：关闭门窗消毒，自行气化； 方法：关闭门窗消毒，自行气化； 用量： 甲醛＋ 立方米。 用量：10ml甲醛＋5g KMnO4／立方米。 甲醛
四、母种生产技术
②综合马铃薯培养基 马 铃 薯 200g 、 葡 萄 糖 （ 或 蔗 糖 ） 20g 、 KH2PO4 2g、MgSO4 0.5g、维生素B1 10mg、 、 、维生素 、 琼脂20g、H2O 1000ml、pH自然。 自然。 琼脂 、 、 自然 适合培养草菇、猴头菌、 适合培养草菇、猴头菌、灵芝及各种食用菌菌 种分离、保藏。 种分离、保藏。
四、母种生产技术
食用菌母种培养基的种类繁多， 食用菌母种培养基的种类繁多 ，由于不同营养 类型的食用菌对营养物质的要求不同， 所以， 类型的食用菌对营养物质的要求不同 ， 所以 ， 在 培养不同食用菌母种时， 培养不同食用菌母种时 ， 应选择适宜该菌种的培 养基。 养基。 母种培养基要求营养丰富、 完全、 氮源、 母种培养基要求营养丰富 、 完全 、 氮源 、 维生 素的比例应高。 素的比例应高。 现将食用菌常用的母种培养基列举如下 ：
母 种
原种和 栽培种
三、菌种生产常用的设备和用具 1、接种设备 、 ⑴ 接种室 ⑵ 接种箱 ⑶ 超净工作台
超净工作台
三、菌种生产常用的设备和用具 2、灭菌设备 、
Ⅰ 高 压 蒸 气 灭 菌 锅
1）手提式：容量小，适于斜面试 ）手提式：容量小， 管及玻璃器皿等； 管及玻璃器皿等； 2）立式： 容量大，投资大； ）立式： 容量大，投资大； 3）卧式：容量大，投资大； ）卧式：容量大，投资大； 4）家用24或26 cm压力锅：母种、 ）家用 或 压力锅： 压力锅 母种、 原种培养基 。
二、食用菌的制种程序
孢子分离 种菇 组织分离 接种→母种（一级） 接种 母种（一级） 母种 接种→ 原种 二级） 原种（ 接种 →原种（二级） 接种→→栽培种（三级） 接种 栽培种（三级） 栽培种
培养 培养
经过这样三级培养，食用菌菌丝数量大大增加。 经过这样三级培养，食用菌菌丝数量大大增加。 一般1支试管菌种可繁殖 瓶原种， 一般 支试管菌种可繁殖4~6瓶原种， 每瓶原种又 支试管菌种可繁殖 瓶原种 可扩大繁殖60~100瓶栽培种。 瓶栽培种。 可扩大繁殖 瓶栽培种
四、母种生产技术
③胡萝卜葡萄糖琼脂培养基 胡萝卜200g、葡萄糖 （ 或蔗糖 ） 18~20g、 、 葡萄糖（或蔗糖） 胡萝卜 、 琼脂20g、H2O 1000ml、pH自然。 自然。 琼脂 、 、 自然
⑵ PDA培养基配制方法 培养基配制方法
马铃薯（去皮、去芽眼） 切成片 玉米大小） 切成片（ 马铃薯（去皮、去芽眼）→切成片（玉米大小） 煮沸15-20min →双层纱 →称取 称取200g＋1000mL H2O→煮沸 煮沸 双层纱 称取 ＋ 布过滤→取滤液并补足 熔化＋ 布过滤 取滤液并补足1000mL＋琼脂 熔化＋其它 取滤液并补足 ＋琼脂→熔化 营养物质→调节 （用HCl或NaOH）→分装试管 分装试管→ 营养物质 调节pH（ 调节 或 ） 分装试管 塞上棉塞→捆扎 灭菌 高压蒸气灭菌15-30min）→ 塞上棉塞 捆扎→灭菌（高压蒸气灭菌 捆扎 灭菌（ ） 制成斜面→检查灭菌效果（ 制成斜面 检查灭菌效果（即28~30℃培养 检查灭菌效果 ℃培养2~3d） ）
实验一 马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基配制 马铃薯葡萄糖琼脂（ ）
一、食用菌菌种种类
人工培育的菌种有母种、原种和栽培种之分。 人工培育的菌种有母种、原种和栽培种之分。 1） 母种 （ 一级菌种 ） ： 用孢子分离或组织分 ） 母种（ 一级菌种） 离等培育的菌丝体称为母种。 离等培育的菌丝体称为母种。 2） 原种 （ 二级菌种 ） ： 把母种扩大到木屑 、 ） 原种（ 二级菌种） 把母种扩大到木屑、 棉籽壳等为主的培养料上的菌种称为原种。 棉籽壳等为主的培养料上的菌种称为原种。 3） 栽培种 （ 三级菌种 ） ： 由原种扩大培养成 ） 栽培种（ 三级菌种） 为生产上使用的菌种称为栽培种。 为生产上使用的菌种称为栽培种。 4） 菌种 ： 实质上就是经过人工培养并进一步 ） 菌种： 繁殖的食用菌的纯菌丝体。 繁殖的食用菌的纯菌丝体。
三、菌种生产常用的设备和用具
3、培养设备 、 ⑴ 培养室 ⑵ 生化培养箱
三、菌种生产常用的设备和用具
4、培养菌种的容器 、
母 种 ： 试 管 ， 常 用 规 格 20×180~200mm ， × 18×180mm等。 × 等 菌种瓶：盐水瓶、罐头瓶 菌种瓶：盐水瓶、 原种、 原种、栽培种 菌种袋 聚丙稀袋 聚乙稀袋
（3） 作业 ）
支试管斜面。 （1）每人制 支试管斜面。 ）每人制5支试管斜面 （2）什么叫食用菌菌种？它又有哪些类型？ ）什么叫食用菌菌种？它又有哪些类型？ （3）食用菌菌种生产常用的设备和用具有哪些？ ）食用菌菌种生产常用的设备和用具有哪些？ （4）写出食用菌的制种程序。 ）写出食用菌的制种程序。 （5）常用的消毒药品有哪些？ ）常用的消毒药品有哪些？
规格有： 规格有：12~15×30~35 cm， × ， 17×35~45 cm ×
菌种瓶
三、菌种生产常用的设备和用具 5、接种工具 、
移植菌种于培养基上的工具称接种工 主要有以下几种： 具，主要有以下几种： 接种针、环、刀、钩、铲、锄、枪等； 接种针、 枪等；
三、菌种生产常用的设备和用具 6、常用的消毒药品 、
2）、 ）一般在菌种场或研究所应用。 ）、3）一般在菌种场或研究所应用。 ）、 优点：省时、省燃料、 优点：省时、省燃料、 效果好
灭菌设备
Ⅰ高压蒸气灭菌锅
三、菌种生产常用的设备和用具 2、灭菌设备 、
Ⅱ 常压灭菌锅
目前农村生产栽培种的必备设备， 目前农村生产栽培种的必备设备，实际上 是一种大型蒸笼式煮灶。 底部为铸铁大锅， 是一种大型蒸笼式煮灶 。 底部为铸铁大锅 ， 上部为圆形木桶， 上部为圆形木桶 ， 桶内装数层供放培养基的 格架。 桶盖装有活络搭及密闭的橡皮圈， 格架 。 桶盖装有活络搭及密闭的橡皮圈 ， 由 于锅内温度最高是100℃，所以灭菌时间需维 ℃ 于锅内温度最高是 持10~12h，才能达到灭菌效果。 ，才能达到灭菌效果。
四、母种生产技术
（一）母种培养基 马铃薯葡萄糖琼脂培养基（ ①马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA） ） 马铃薯200g、 葡萄糖 （ 或蔗糖 ） 20g、 琼 、 葡萄糖（ 或蔗糖） 马铃薯 、 脂20g、H2O 1000 mL、pH 6.5。 、 、 。 适用于一般食用菌母种分离与培养， 适用于一般食用菌母种分离与培养，但草 猴头菌等在此培养基上生长不良。 菇、猴头菌等在此培养基上生长不良。