毛细管电泳出现问题分析
SSR标记荧光毛细管电泳在种子检测中常见问题分析
SSR标记荧光毛细管电泳在种子检测中常见问题分析李巧英（山西省种业发展中心，太原030006）摘要：SSR分子标记荧光毛细管电泳在农作物种子质量检测中常用于种子真实性检测、种子纯度鉴定和指纹数据库的构建。
试验过程中模板DNA浓度、特异峰型的统计分析以及仪器设备运行和维护、试验结果与指纹数据库的比对等关键环节都直接影响待测样品的结果判定。
就检测中遇到的问题进行分析，并提出相应的解决方法，以期为农作物种子质量检测荧光毛细管电泳技术平台提供参考。
关键词：SSR标记；荧光毛细管电泳；种子检测；问题；分析分子标记技术是近年来发展较快的基因检测技术，随着新标记方法的开发和试验技术的改进，在基因水平上检测农作物种子信息逐渐成为监控种子质量的一个重要手段。
由于分子标记法不受自然条件和表现性状的约束，实现了种子品种遗传信息室内快速检测，受到大家的青睐。
SSR作为第2代分子标记方法，是一种共显性标记，具有重复性好、等位变异多、数据分析简便、易操作等优点，在农作物种子质量检测中被广泛使用。
荧光毛细管电泳技术将荧光检测的高灵敏度和毛细管电泳的高效性结合，利用电泳和电渗流的电动力学原理，在毛细管中灌满胶分离PCR产物，检测荧光信号，数据软件分析系统将其转化成峰图，显示试验结果。
该技术自动化程度高，检测通量高，试验操作简单，数据统计程序化，避免人为估算的主观性，结果精确到1bp[1]，直接显示扩增产物片段的大小，实现了指纹图谱与碱基序列长短之间的对应转换，易于实验室间结果比对，常用GeneMapper 和GeneMarker分析SSR扩增片段[2]。
本文就试验中遇到的荧光信号强度、特异峰型的统计分析以及毛细管电泳仪运行和维护、试验结果与数据库比对等问题进行分析，为SSR分子标记荧光毛细管电泳检测农作物种子质量试验技术标准化提供参考。
拟，为所有专业方提供可控管、无破坏性、性价比高、低风险并允许反复运用的可行性方法。
BIM技术可以有效地提高施工技术水准，预防施工事故，减少施工成本浪费并缩短时程，强化施工过程中决策、控管能力。
毛细管电泳荧光检测中的异常电泳类型及原因分析
通讯 作者。ｉ ａ ＠２ ３ｎ ｔ ｊｕ ｎ ６ ． ｒ ｅ
摘
要
采用 毛 细管 电泳 荧光检 测 技 术进 行 玉米 Ｓ Ｒ标 记 的 片段 分析 。利 用 峰 型 、 Ｓ 峰面 积和 其 它荧 光 干扰
峰等 方 面 的特 征对 特异 峰和 非 特异 峰 进 行甄 别 。 分析 了特异 峰 的具 体 表现 类 型 及 原 因 ： Ｒ ． Ｓ ，
玉米标准 Ｄ Ａ指纹数据库的构建是一个 复杂 析 ， Ｆ Ｍ、 Ｎ 以 Ａ ⅥＣ、 Ｅ 和 Ｐ Ｔ４种 不 同颜 色 的荧 光 ＮＤ Ｅ
的系 统 工程 ， Ｐ Ｒ扩 增 产物 的分 析 方法 提 出 了更 染 料 标记 Ｓ Ｒ 引物 ， Ｉ 记 分 子量 内标 ， 不 同 荧 对 Ｃ Ｓ ＬＺ标 将
峰 、 续 多峰 、 峰和高 低 峰等 。 连 三 探讨 了片段扩 增 产物 大 小与异 常 峰型 的关 系 。 为保证 玉 米 品种 ＤＮ 指 纹库 Ａ
构建 的标 准化 ， 出了数据 统计 规 范化 的解 决方 案 。 提
关键 词 毛细 管 电泳， 荧光 检测 ， 米， Ｓ 玉 ＳＲ
Ａｎ ｌ ｓｓｏ ｅＡｂ ｏ ｍ ａ ｅ ｋ Ｔｙ ｅ ｐ ｌ ｒ ｅ ｔｏ ｈ ｒ ｓｓｗｉ ｌ — ａｙ ｉ ｆ ｈ ｎ ｒ ｌ ａ ｐ ｓｉ Ｃａ ｉ ａ ｙ Ｅｌｃｒ ｐ ｏ ｅ ｉ ｔ Ｆ ｕ ｔ Ｐ ｎ ｌ ｈ ｏ ｅ ｃ ｎ 一 ｂ ｌｄ ｒ ｓ ｅ ｔ１ ｅｅ ａ
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Ｃ ｒ ｓｏ ｄｎ ｕｈｒｊｕａ ＠２ ３ｎｔ ｏｒ ｐ ｎ ｉｇａｔｏ，ｉ ｎ ６ ． ｅ ｒ ｅ
毛细管电泳出现问题分析
一、无样品峰出现A、检查电流是否稳定：①没有电流。
可能原因——毛细管堵塞或断裂。
解决方法——用水冲洗毛细管，并观察是否有水流出，若无水流出请拆下卡盒检查毛细管两端和窗口是否断裂；毛细管没有断裂的话可以用水反向高压冲洗以试图解决此问题。
缓冲溶液需要过滤，将样品过滤或者离心去除其中的颗粒。
②电流波动很大，直至几乎消失。
可能原因——缓冲溶液中有气泡产生或者区带中样品析出。
解决方法——将缓冲溶液超声脱气，如果还有此现象发生，则可能是样品区带有析出，可以通过降低样品浓度/延长ramptime来试图解决这一问题；对于在缓冲溶液中溶解度不高的样品则需要在缓冲溶液中加入添加剂以解决此问题。
③电流初始值较小，后逐渐增大。
可能原因——样品进样量过大。
解决方法——减少进样量，通常进样参数设置在0.5psi,5sec 左右。
④电流正常。
可能原因：a样品浓度过低：使用高浓度样品测试，如果无法解决则有可能是以下其他原因。
b检测波长设置不正确：请确认被分析物的特征吸收，检查方法中的检测波长设置。
c分离极性错误：对于蛋白样品，请注意蛋白在分离条件下其PI及所带电荷；对于核酸样品，通常条件下会带负电荷。
d样品在毛细管内壁吸附：对于蛋白及核酸样品应尽量采用涂层毛细管分离，或采用极端pH条件或动态涂层防止样品吸附。
e光学检测器或光纤损坏：进行标准样品的测试，如果没有对应的结果出现，则有可能存在硬件问题，请联系工程师。
B、检查毛细管窗口，是否有透明窗口：可能原因——忘记开毛细管窗口或窗口位置不正。
解决方法——重新开毛细管检测窗口，或将窗口调整到正确位置。
二、样品峰出现拖尾可能原因——样品在毛细管内壁吸附。
解决方法——对于蛋白及核酸样品应尽量采用涂层毛细管分离，或采用极端pH条件或动态涂层防止样品吸附。
三、样品峰形不对称A、检查毛细管入口：可能原因——毛细管入口切口不平齐。
解决方法——重新切割毛细管入口，注意毛细管切割方法，不可以用力过猛或反复刮擦。
多重荧光PCR-毛细管电泳进行微卫星不稳定性分析中的常见问题
PCR
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来茂 德 男 博 士 教 授 通 讯 作 者
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临 床 与 实验 病 理 学 杂 志
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扩 增 目标 位 点 无 荧 光 信 号
可 能 原 因及 解 决 方 案 ： ( 1 )
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3 收稿 1 期
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基 金 项 目 ：浙 江 省 科 技 厅 国 际 合 作 项 目 ( 2 0 0 7 C2 4 0 0 9 ) 浙 江 省 科 技 厅 重 大 科技专 项 和 优先 主 题 项 目 ( 2 0 0 7 C 1 3 0 2 0 )
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电泳中断原因分析
电泳中断原因分析毛细管电泳（capillary electrophoresis，CE）又称高效毛细管电泳（high perform ance capillary electrophoresis，HPCE），是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术。
毛细管电泳实际上包含电泳、色谱及其交叉内容，它使分析化学得以从微升水平进入纳升水平，并使单细胞分析，乃至单分子分析成为可能。
毛细管电泳技术的不断发展，毛细管电泳仪也越来越多的得到了大家的认同，但往往我们在试验的过程中经常会遇到一些问题，如样品的重现性，运行时的电流波动，阻碍电泳进一步发展的重要问题，及时的解决电泳的相关问题，对电泳的发展乃是分析化学的未来有这重要的现实意义。
毛细管电泳是在高压的作用下，以毛细管为分离通道，柱子中充满着缓冲溶液，毛细管两端浸泡在缓冲溶液的小瓶中，如图1所示，这样就构成了回流，对应的回流也就有了电流，但往往在试验的过成中电流并不像我们想的那样稳定，甚至有断流的现象，接下我们分析一下产生这种现象可能的原因。
图1 毛细管电泳仪示意图可能导致断流的原因：1、毛细管电泳柱子1.1柱子断裂毛细管柱子外壁涂有聚亚酰胺涂层，有很好的韧性，一段这层涂层脱落，毛细管柱子将失去原有的韧性，变得很脆，很容易折断。
取毛细管柱子时千万不要用利器划柱子，否则柱子很容易在划痕处断开。
毛细管柱子断裂后，缓冲溶液从断裂处流出色谱柱子，进而不能构成回路，从而导致电流迅速下降，致使电流中断，分离分析中断。
解决方法：更换柱子（平时更换柱子特别注意，不要用利器划到柱子）图2 断了柱子的毛细管电泳示意图1.2毛细管电泳柱子堵了常用的毛细管电泳柱子内径有50微米、75微米及100微米，内径很小，如果我们在试验的过场中不注意缓冲溶液及样品的纯度，或是使用了粘度很大的缓冲溶液，很容易堵死毛细管柱子，造成电流的中断。
图3柱子被堵后毛细管电泳示意图解决方法：压力反向冲洗柱子、样品及缓冲溶液使用前过滤2、气泡问题2.1缓冲溶液中的气泡我们在配置缓冲溶液时，所选用的水及在配置的过程中会使缓冲溶液溶解少量的气体，当这部分缓冲溶液进入到毛细管柱子内部时，两端加高压，运行一段时间会是缓冲溶液中的气体溢出，使柱子内产生气泡，从而使电流中断。
Sebia MINICAP毛细管电泳仪的常见故障及维护
盘 的 １号 位 必 须是 空 的 ． 转 盘 的 ２号 位 放 １ 不 带 条 形 码 在 个
的试 管 ： ３ 检 查 ＭＩ Ｉ Ａ （） Ｎ Ｃ Ｐ的 转 盘是 否正 确 放 置 了 。
２ 定 标 （ ） 择 ‘ ３ ａ ｌ ｕ ｅＳ ｎｏ ｌ ｒｔ ｎ’ １选 Ｃ ２ Ｓ ｍｐｅ Ｔ ｂ ｅ ｓ ｒＣａｉ ａｉ ： ｂ ｏ
・
２ ７４ ・
第 ２ 卷 第 ３期 ８ ２１ ０ ０年 ６月
实 验 与 检 验 医 学
ＥＸＰ ＲＩ ＮＴ ＡＮＤ Ｅ ＭＥ ＡＬ Ｌ ＯＲＡ ＡＢ Ｔ０Ｒ Ｙ ＭＥ Ｃ ＮＥ ＤＩ Ｉ
Ｖ １ ８Ｎ ． ｏ ． ｏ３ ２
Ｊｎ ２ １ ｕ．００
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实验室管・
ＳｂａＭＩ ＩＡ ｅｉ Ｎ Ｃ Ｐ毛细管 电泳仪的常见 故障及维 护
供参 考
１ ５ｌ 个 ｍ 的试 管 ．在 此 管 中放 １个 加 有 ｌ ｏ １ 馏 水 的 子 弹 ｏ￣ 蒸
头。 ２ 定标 （ ） 择 Ｃ ７ ‘ａ ｐｅ Ｐｏ ｅ Ｃ ｐ ｃｔ ｅ Ｄ ｔ ｔ ｎ １选 ２ Ｓ ｍ ｌ ｒｂ ａ ａ ｉ ｖ ｅ ｃ ｏ ｉ ｅｉ
Ｃ ｌ ｒｔ ｎ（ Ｃ ）；２ 检 查 并 选 上 ‘ａｔ１ ｙｌ’（ ） 查 并 ａ ｂａ ｏ Ｄ Ｎ ’（ ） ｉ ｉ ｓ ｒ ｃｅ ；３ 检 ｔ ｃ
１ 准备
（ ） 行 １ Ｃ ｐｃ ａ １运 次 ａ ｉ ｅ ｎ循 环 清 洗 取 样 针 ； ２ 进 入 ｌ （）
测 试 模 式 ， 择 ‘ ｅｔ ｙ ｌ ’ 口 ； ３ 在 转 盘 的 ２ 选 Ｔ ｓ Ｃ ｃｅ 窗 （） ８号 位 ， 上 放
白 电泳 该 仪 器设 计 理 念新 。 度 快 ， 果 精 确 ， 定 性 好 并 速 结 稳 且 维 护 简单 ． 一款 理 想 的 电泳 仪 。对 该 仪 器使 用 近 一 年 来 ． 是 总 体 运行 良好 ．然 而在 日常 工 作 中 也 出现 一些 报警 和 故 障 。 现 将 使 用 过程 中 出 现 的 故 障 和处 理 方法 及 经 验 介 绍 给 大 家 ．
影响毛细管电泳分析结果精密度的因素及其控制-中国现代应用药学
石英毛细管的清洗 毛细管首次使用或长时间不用后重新使用 应清洗毛细
管内壁表面并用稀碱液活化 因为迁移时间的精密度与分析 前或分析中毛细管内表面的预处理有关 ∀ 一般使用浓度为
∗ #
≈
的盐酸 !氢氧化钠溶液和高纯水按一定程序 因为酸液中的 对管壁上吸附的阳离子有很
冲洗即可
6 2
强的置换能力 碱液对去污及活化管壁作用显著 ∀ 石英毛细管的冲洗 石英毛细管内壁具有硅羟基 它是构成氢键吸附并使毛 细管内电解质产生电渗流的重要原因 ∀ 电泳分析过程中的 管壁吸附现象通常不可避免并具有很大的随机性 ∀ 当吸附 发生时 被吸附的分子影响毛细管的表面性质 使电渗流改 变 液流紊乱并影响到组分的峰形 出现谱带展宽 !响应及分 离度下降 !迁移时间改变等现象 ∀ 冲洗程序可以清除记忆效 应 使管壁状态复原 ∀ 具体的冲洗程序应根据实验情况灵活 设计 ∀ ∞ 等 ≈ 系统地研究了不同冲洗技术在多种离子 测定中对迁移时间和校正峰面积精密度的影响 结果表明 冲洗操作可稳定和改善迁移时间的重复性 ∀ 通过选择合适 的冲洗措施 毛细管内表面被恢复 吸附的溶质分子被消除 从而提高了迁移时间的重复性 ∀ 采用 氧化钠溶液 !
4 3
进样的影响
≤ ∞ 的进样方式有流体动力学进样和电迁移进样 前者
值可起到
是最常用的进样方法 它主要是压力进样 当用压力进样时 进样体积是样品缓冲液黏度 !所用压力及进样时间的函数 进样量与淌度无关 所用压力的变化通过调整进样时间自动 补偿 ∀ 文献 ≈ 给出了三种进样时间进样重复性的比较 结 果表明 进样 的重复性优于 及
的吸收低 ≈ 自身的淌度低 即分子大而荷电小 以减少电流 的产生 …为了达到有效的进样和合适的电泳淌度 缓冲液 的 位∀ 值至少必须比被分析物质的等电点高或低 个 单 只要条件允许就尽可能采用酸性缓冲液 因在低 缓冲体系 ∀ 的
毛细管电泳实验报告（含预习报告）
毛细管电泳实验报告（含预习报告）
系别____________ 学号 ________ 姓名 _________
组别 ____ 同组姓名 ___________________
实验日期年月日星期____ 得分____
1 实验目的
2 实验原理
3 预习报告
3.1请试回答以下问题
试列举影响电渗流(大小和/或方向)的几个主要因素：___________________；
决定离子电泳淌度的参数：，，。
3.2 查找下列物质的pKa值，并初步判断出峰顺序
苯甲醇：，苯甲酸：，水杨酸：，对氨基苯甲酸：
预测出峰顺序：
3.3进样前使用三种溶液对毛细管冲洗的目的分别是什么？
3.4 试列举毛细血管电泳的主要优势和劣势。
4 实验仪器及条件
仪器型号：
毛细管总长：毛细管有效长度：检测波长：
分析电压：进样压力：进样时间：
5 实验内容
6 数据处理
6.1 数据记录
6.2 各组分浓度计算(单点外标定量法)
计算公式：
6.3 各组分淌度计算
表观淌度计算公式：
有效淌度计算公式：
7 结论及讨论
（试讨论：1.判断在另外两种缓冲液下，各个峰的归属，并对各个组分迁移时间的变化做出合理分析和讨论;2. 判断哪个组分可以作为电渗流标记物，并试根据淌度结果说明之)
8 参考文献
（附：电泳谱图）。
影响毛细管电泳分离生物大分子的因素_刘勇
综 述影响毛细管电泳分离生物大分子的因素刘 勇1,2 王 荣1,2 高 岚2 贾正平1,2 辛晓婷2 谢 华1 马 骏1(1.兰州军区兰州总医院临床药理基地,兰州,730050;2.兰州大学生命科学学院,兰州,730000) 摘 要 目前毛细管电泳在分离方面的应用越来越广泛,但重复性一直是制约其应用的主要问题。
随着毛细管电泳技术的发展,影响毛细管电泳结果的因素也发生着变化。
本文对影响毛细管电泳分离生物大分子的因素进行综述,希望对使用毛细管电泳的使用者者有所帮助。
关键词 毛细管电泳 分离 影响因素基金项目:国家自然科学基金项目(No .20775089)。
作者简介:刘勇,男,1984年6月出生,硕士,辽宁抚顺人,主要从事毛细泳和分子生物学研究工作。
E -mail :liuy .8406@ 毛细管电泳(CE )现在已经广泛应用于分子生物学、分子医学和生命科学等领域,近年来在生物大分子分离方面应用更为突出。
CE 顾名思义,就是在一根毛细管中完成电泳过程,这种方法的灵敏度是非常高的,但就是这种高灵敏性对于条件的改变特别敏感,影响了重复性。
如果对其条件进行严格控制并仔细操作的话,CE 确实是一种非常高效、快速、简易的检测方法。
本文查阅20年来毛细管电泳相关文献,对影响CE 结果的因素进行综述,以期对毛细管电泳的使用者有所帮助。
1 检测器检测器是毛细管电泳仪的关键部件之一,它的作用是将毛细管柱流出物中样品组分的含量随时间的变化转化成易测量的电信号。
用记录仪记录电信号,得到样品组分的电泳图。
根据组分峰的位置、大小和形状进行定性、定量分析,以及分离优劣的判断。
目前使用最广的两种检测器为紫外检测器和荧光检测器。
紫外吸收检测器是毛细管电泳最早选用的检测器,它因结构简单、操作方便、灵敏度适中而应用广泛。
但其最大缺点是检测光程短,难以进一步提高检测的灵敏度,最低检测限一般在10-5～10-6m ol /L 之间。
荧光检测器特别是激光诱导的荧光检测器(LIFD ),是在普通荧光检测器的基础上发展起来的,从1987年开始才有应用于毛细管电泳的报道[1],因其灵敏度极高、性能可靠、易操作、使用成本低而迅速得到广泛的应用[2],尤其适合应用于氨基酸、DNA 片段等生化样品的检测。
电泳仪的故障
高效毛细管电泳仪实验过程中常见问题解答序号现象可能原因纠正措施1电源开启后毫无反应1.电源没接通2.保险丝已断将仪器插头从电源插座中取出，确认插座里有电，检查保险丝，更换电源线。
2 电流指示为零电极断掉，弯曲或没有插对更换、校正、重插。
3仪器实验过程中电流不稳或电流指示远底于正常值，但电压值正常1.毛细管堵塞2.毛细管中无缓冲溶液3.毛细管破裂4.电压未加5.仪器参数设定错误6.柱内有大气泡7.用水做溶剂配样，在压力进样时将一部分水压入缓冲溶液中重新用HCl、NaOH清洗毛细管或剪去进样端小段毛细管，如果仍旧不能清洗，更换毛细管。
检查毛细管是否浸在缓冲溶液中。
更换毛细管。
检查电压值。
重新设定仪器参数。
重新注入缓冲溶液。
用稀释的运行缓冲溶液代替水配样。
4 电流指示过高毛细管柱过热用干净缓冲溶液冲洗毛细管柱，使之冷却。
5电流指示不断变化1.毛细管内有许多小气泡2.环境温度过高或过底，通风不好重新注入缓冲液。
调整环境温度，最好使用控温装置。
6恒压操作时电压显示值闪动电流设置过底重新设置电流值。
7电泳谱图上没有出现峰1.样品浓度太低或体积太小2.样品被管壁严重吸附3.毛细管检测窗与检测器光路未对准4.信号线连接错误增加样品浓度或样品体积。
对毛细管壁进行修饰处理。
取出毛细管，重新安装。
检查信号线连接情况。
8基线漂移或噪声较大1.毛细管被污染或未清洗2.毛细管柱的光学窗口被污染3.有小气泡4.操作电压太高5.缓冲溶液浓度太大6.缓冲溶液或样品中有小颗粒物质7.毛细管有很小裂缝8.检测器灯源老化9.接地问题10.检测器参数设定错误11.数据系统设定错误用0.5mol/LNaOH溶液、水、缓冲液清洗毛细管。
取下检测池，清洗光学透镜。
缓冲溶液脱气。
降低操作电压。
降低冲溶液浓度。
过滤缓冲溶液或样品溶液并检查缓冲溶液与样品是否发生作用。
更换毛细管。
更换灯源。
将检测仪和电泳仪连接在同一电源上。
检查检测器参数设定值。
重新设定数据处理参数。
高效毛细管电泳思考题和答案解析
【参考答案】对蛋白质而言，有较多的疏水基，吸附问题特别严重，减小毛细管对 蛋白质的吸附作用的方法和途径：1）增加缓冲溶液浓度；2）加入两性离子物质代替强 电解质，两性离子一端带正电，另一端带负电，带正电一端与管壁负电中心作用，浓度 约为溶质的 100-1000 倍时，抑制对蛋白质吸附，又不增加溶液电导，对电渗流影响不 大；3）在极端 pH 下电泳；4）对毛细管内壁改性。 11、简述自由溶液毛细管区带电泳中常用添加剂的种类及其作用。 【参考答案】见表 9
【参考答案】问题出现的原因：1）毛细管内产生的焦耳热过高；2）毛细管壁对溶 质产生了的吸附作用过强；3）近样方式不正确；4）没有提高运行缓冲溶液的更换频率； 5）没有优化冲洗程度和缓冲液组成。 4、什么是焦耳热？焦耳热的存在对毛细管电泳有什么影响？在毛细管电泳中，可以采 取哪些方法降低焦耳热？ 【参考答案】焦耳热是指电流通过电泳介质而产生的热量；焦耳热的存在对毛细管 电泳产生的影响： 使电泳分离介质温度分布不均匀， 引起溶液对流， 从而导致区带展宽， 降低分离效率。焦耳热随电压的升高而增大，柱内径是影响焦耳热的一个重要因素， 内 径越小，焦耳热的影响越小，缓冲溶液的浓度增加，焦耳热也越大，故可以采取降低焦 耳热的措施有：使用较低的操作电压，采取尽可能小的柱内径、使用较低浓度的缓冲溶 液和控制散热。 5、高效毛细管电泳与高效液相色谱在分离方面有那些差异？ 【问题分析】高效毛细管电泳是以高压电场为驱动力，毛细管为载体（分离通道） ，依据样品
【问题分析】毛细管电泳(CE)又称高效毛细管电泳(HPCE)，是指以毛细管为分离室，以高压电 场为驱动力的一类新型现代电泳技术。毛细管电泳引入高的电场强度，改善了分离质量，具有分离 效率高、速度快和灵敏度高等特点，而且所需样品少、成本低，更为重要的是，它又是一种自动化 的仪器分析方法。毛细管电泳法与高效液相色谱一样同是液相分离技术，在很大程度上两者互为补 充，但无论从效率、速度、用量和成本来说，毛细管电泳法都显示了它独特的优势。毛细管电泳分 离技术与传统的平板电泳和现代液相色谱分离技术相比具有很多优点：1.高效（105-107 理论塔板数 /米） ；2.快速（几十秒至几十分钟） ；3.分离模式多，选择自由度大；4.分析对象广，从无机离子到整 个细胞；5.高速自动化；6.样品需量小，无环境污染，运行成本低。 毛细管电泳的分离条件一般包括缓冲液、电渗控制、电场强度、温度、分离模式等。 1)分离电压， 一般在毛细管柱的长度确定时，随着分离电压的增加，电渗流和电泳速度的绝对 值都将增加。迁移时间缩短。同时升高电压，毛细管电泳电流增加，产生的焦耳热增加，使溶液内 部产生温度梯度，从而影响柱效。因此适宜的电压是毛细管电泳所必须的。 2）电泳缓冲液 ：电泳 分离过程是在缓冲液中进行的，缓冲液直接影响离子的迁移和最后的分离，甚至影响进样过程。选 择缓冲液要遵循如下原则： （1）在所选择的 pH 范围内有很好的缓冲容量（2）较低的背景吸收（3） 自身的淌度低，即分子体积大，电荷小，这样产生的焦耳热小，有利于提高柱效（4）只要条件允许， 尽量采用酸性溶液，有利于获得较小的电渗流淌度和较大的分离度。缓冲液的浓度是一个很重要的 指标，增加浓度，可以使离子强度增加，可以明显增加缓冲液的容量，减小溶质组分与毛细管内壁 的相互作用，改变迁移时间，改善分离。但是当浓度增加时，毛细管电泳电流增加，焦耳热增加， 影响分离度。 添加剂 ：添加剂是 CE 中一个十分重要的控制因素，表面活性剂是使用最多的一种。表面活性 剂均可用于毛细管区带电泳和毛细管胶速电动色谱中，前者的表面活性剂的浓度低于其临界胶速浓 度，后者则相反。后者主要用作准固定相。常用的有 SDS、十六烷基三甲基季氨溴、三羟基甲基氨 基甲烷（Tris） 、2-（吗啉）乙烷磺酸（MES） 、甲基纤维素、PEG 等。 有机溶剂也可被广泛用作添加剂，不同有机溶剂的作用各不相同。有机溶剂的加入可以明显的 减少电渗流速度，使分离度增加。它还可以增加有机样品的溶解度，改变选择性。常用的有甲醇、 乙醇、乙腈、三氟乙酸酐等。 4）温度 ：在 CE 中，温度的影响主要通过粘度体现出来，淌度是粘 度的函数，因此温度的控制非常重要。
毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造-PPT课件
CE-ESI-MS接口主要分为鞘液接口和 无鞘液接口两种。
鞘液接口技术
鞘液接口技术是最早出现，其优点在于通过提高样 品流速使得喷雾更加稳定,有利于形成稳定的电流回 路,同时可改变CE运行缓冲液的组成, 使其满足ESI 源的检测要求。主要有低流速( low-flow )鞘液接口， 多通道的CE-ESI-MS联用鞘液接口。Chang等设计 了低流速鞘液接口,他们将毛细管末端套在装有鞘液 的离心管中,鞘液低速流出与CE 流出物混合,离心管 中插入一铂丝作为电极以构成电流回路; 低流速可 以降低鞘液的稀释作用,同时铂丝构成电流回路可以 避免因流速低所造成的断流。
CE-MS的结构
电喷雾技术
用来产生MS分析的所需的离子技术，特别适 用于与大分子的质谱分析，采用ESI，大分子 在离子化过程中不会碎裂。
电喷雾技术的优点
接口技术
接口技术是实现CE-MS 联用的关键所在。CE-MS 联用分为在线联用和离线联用。CE-MS离线联用的 关键是对已分离样品的有效收集,并不涉及真正意义 上的联用接口技术;而且与离线联用相比, CE-MS在 线联用具有样品损失少、自动化程度高、分析速度 快等优点,其应用要比离线联用广泛得多。CE-MS 在线联用需要设计合适的接口,能够将已分离的样品 全部转移到质谱仪中,同时实现样品快速高效的离子 化，同时接口对技术要求很高。
芯片CE与ESI-MS联用的方法主要分 为两类:
一类是将ESI源和CE 微芯片整合在一起, 另 一类是把毛细管喷雾器附加在CE 微芯片内。 后者的应用更为广泛, 其
毛细管电泳(CE)与质谱(MS) 联用技术(CE-MS)
能快速分离微体积样品中的化合物，及其高效分离 和基于分子量鉴定化合物的能力，使它成为分析复 杂生物样品的一种非常有价值的方法。 另外，在各种广泛的诸如毛细管区域电泳，毛细管 等电点调焦，和在线等速电泳等技术已经和MS结 合。这些优点使得CE-MS在分析复杂生物混合物中 广泛使用。CE-MS已经成功地广泛应用于复杂化合 物地分析包括氨基酸，蛋白质消化，蛋白质混合物， 单个细胞，寡核苷酸，和各种小分子相关的制药工 业。
毛细管电泳原理及分析策略CE
电源系统
电源要求
毛细管电泳仪的电源系统需要提供稳定的直流电，以保证仪器的 正常运行和实验结果的准确性。
电压调节
毛细管电泳仪的电压调节范围通常很宽，可以从几千伏到几十万伏， 以满足不同实验条件的需求。
电流控制
为了保护仪器和保证实验结果的准确性，电源系统通常需要具备电 流控制功能，能够限制电流的大小和方向。
工业废水等。
重金属离子分析
02
毛细管电泳可以用于分离和测定环境中的重金属离子，如铅、
汞、镉等。
营养物质与毒素分析
03
毛细管电泳可以用于分离和测定环境中的营养物质与毒素，如
硝酸盐、亚硝酸盐等。
04 毛细管电泳的优缺点
CHAPTER
优点
高分离效率
毛细管电泳采用微米级别的分离通道， 能够实现高分离效率，尤其适用于复 杂样品的分析。
毛细管电泳可以分为多种类型， 如自由溶液毛细管电泳、凝胶毛 细管电泳、等电聚焦毛细管电泳、
亲和毛细管电泳等。
根据检测方式分类
毛细管电泳也可以分为多种类型， 如紫外可见吸收光谱检测、荧光检 测、质谱检测等。
根据应用领域分类
毛细管电泳还可以分为临床检测、 生物分子分析、环境监测等领域。
02 毛细管电泳仪器
在药物分析中的应用
药物成分分离
毛细管电泳能够快速分离和测定药物中的有效成分和杂质。
药物代谢产物分析
毛细管电泳可以用于药物代谢产物的分离和鉴定，有助于药物代 谢动力学研究。
药物质量控制
毛细管电泳可用于药物质量控制，确保药物的有效性和安全性。
在环境监测中的应用
有机污染物分析
01
毛细管电泳可以用于分离和测定环境中的有机污染物，如农药、
毛细管区带电泳分析
CZE在PSL微球中的应用
CZE分离不同组成成分的PSL微球混合 物 CZE测定PSL微球的电泳淌度 CZE用于研究两种不同组成成分的胶乳 粒子之间的相互作用。
微球的表观电泳淌度与 粒子的表面电荷（或荷质 比）之间无线性关系。
VanOman提出PSL微球的分离是因为 各粒子与毛细管内壁相互作用造成不同程 度的粒子滞后而产生的 Ballou认为PSL微球的分离与粒子自身 的性质有关
脂质体有包封脂溶性药物或水溶性药物 的特性，药物被脂质体包封后有主要特 点： 靶向性和淋巴定向性 缓释性 细胞亲和性与组织相容性 降低药物毒性 保护药物提高稳定性
脂质体的评价指标
脂质体的形态、粒径及其分布
包封率的测定
渗透率的测定 药物体内分布的测定
CZE在脂质体中的应用
微粒体－膜微囊
细胞在水溶液中通过机械力让其破裂产 生胞内膜，该膜包裹于微粒体表面而形 成微囊即称为线粒体－膜微囊
Radkon等利用CZE（Tris-硼酸电泳缓冲 液，pH 8.3，检测波长 280nm）研究微粒 体－膜微囊
检测器
CZE分析脂质体的在线检测方法有多种： 如UV，可见光吸收（合适的染剂嵌入在 膜内）、LIF（荧光染剂嵌入在膜内或包 裹于脂质体内）、柱后化学发光法等。
毛细管区带电泳分析 微米级和亚微米级粒子
粒子在电泳中迁移的机制 CZE在各种类型的粒子中应用 粒子在CZE中的特殊电泳行为
胶体粒子的电学性质
胶体粒子表面带有电荷 电泳
电离
离子吸附
离子溶解
Gouy-Chapman-Stern 模型
Smoluchowski 认为在电场中粒
子的运动是带电粒子表面的静电力F1 及阻力F2的综合结果。
毛细管电泳中毛细管对结果的影响1
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毛细管电泳技术的优化及应用研究
毛细管电泳技术的优化及应用研究毛细管电泳技术是一种基于毛细管内分离某些电荷、形状或大小不同的分子物质的方法，这项技术已经广泛应用于治疗癌症、检测药物以及环境监测等方面。
随着科技的不断发展，毛细管电泳技术的优化及其应用研究也在不断深入进行。
一、毛细管电泳技术的优化尽管毛细管电泳技术在分析某些更复杂的分子物质方面取得了成功，但其检测灵敏度和分离效率还有需要改进的地方。
在优化毛细管电泳技术时，对于改善检测灵敏度和分离效率的方法，我们需要考虑如下几个方面：1、分离柱质量的选择毛细管电泳是一种基于柱填料的方法。
因此，分离柱的质量对于毛细管电泳分析的影响很大。
2、检测器的选择检测器的敏感度对于毛细管电泳分析结果的准确性和稳定性有着极大的影响。
在选择检测器时，需要考虑其灵敏度、响应时间和稳定性等因素。
3、毛细管的制备和修整毛细管的制备和修整不仅会影响毛细管电泳分析过程中的分离效率和检测灵敏度，还会影响分离柱的寿命。
4、电泳缓冲液的选择电泳缓冲液对于毛细管电泳的分离效率、灵敏度和稳定性等方面都有很大的影响。
因此，在选择电泳缓冲液时需要考虑其PH值和离子强度等因素。
二、毛细管电泳技术在药物检测中的应用毛细管电泳技术在药物分析和检测方面得到了广泛的应用。
药物分析中，毛细管电泳技术可以用于对药物的定量和质量分析。
例如，对于一些具有毒副作用，易于滥用或者难以检测的药物，如海洛因和可卡因等，毛细管电泳技术可以快速，准确地检测出药物的存在，并定量分析其浓度。
此外，毛细管电泳技术在药物分析和检测方面还可以用于药物无害性研究、新药研发以及药物代谢研究等方面。
三、毛细管电泳技术在环境监测中的应用毛细管电泳技术在环境监测领域的应用也越来越广泛。
它可以用于快速、准确地检测环境中某些污染物的存在。
毛细管电泳技术可以用于检测水、土壤和大气中的环境污染物，如重金属、农药、环境荷尔蒙等。
除了可以检测这些污染物存在的问题外，毛细管电泳技术还可以帮助我们研究产生这些污染物的原因。
毛细管分析常见问题的解决教程文件
毛细管分析常见问题的解决一、峰丢失可能的原因及应采用的排除方法1.注射器有毛病，用新注射器验证。
2.未接入检测器，或检测器不起作用，检查设定值3.进样温度太低，检查温度，并根据需要调整4.柱箱温度太低，检查温度，并根据需要调整5.无载气流，检查压力调节器，并检查泄漏，验证柱进品流速6.柱断裂，如果柱断裂是在柱进口端或检测器末端，是可以补救的，切去柱断裂部分，重新安装二、前沿峰1.柱超载，减少进样量2.两个化合物共洗脱，提高灵敏度和减少进样量，使温度降低10~20度，以使峰分开3.样品冷凝，检查进样口和柱温，如有必要可升温4.样品分解，采用失活化进样器衬管或调低进样器温度三、拖尾峰1.进样器衬套或柱吸附活性样品：更换衬套。
如不能解决问题，就将柱进气端去掉1~2圈，再重新安装2.柱或进样器温度太低：升温（不要超过柱最高温度）。
进样器温度应比样品最高沸点高25度3.两个化合物共洗脱：提高灵敏度，减少进样量，使温度降低10~20度，以使峰分开4.柱损坏：更换柱5.柱污染：从柱进口端去掉1~2圈，再重新安装四、只有溶剂峰1.注射器有毛病：用新注射器验证。
2.不正确的载气流速（太低）：检查流速，如有必要，调整之3.样品太稀：注入已知样品以得出良好结果。
如果结果很好，就提高灵敏度或加大注入量。
4.柱箱温度过高：检查温度，并根据需要调整5.柱不能从溶剂峰中解析出组分：将柱更换成较厚涂层或不同极性6.载气泄漏：检查泄漏处（用肥皂水）7.样品被柱或进样器衬套吸附：更换衬套。
如不能解决问题，就从柱进口端去掉1~2圈，并重新安装五、宽溶剂峰1.由于柱安装不当，在进样口产生死体积：重新安装柱。
2.进样技术差（进样太慢）：采用快速平稳进样技术。
3.进样器温度太低：提高进样器温度。
4.样品溶剂与检测相互影响（二氯甲烷/ECD）：更换样品溶剂。
5.柱内残留样品溶剂：更换样品溶剂6.隔垫清洗不当：调整或清洗7.分流比不正确（分流排气流速不足）：调整流速六、假峰1.柱吸附样品，随后解吸：更换衬管，如不能解决问题，就从柱进样口端去掉1~2圈，再重新安装。
毛细管电泳仪器的相关问题
毛细管电泳仪器的相关问题1：电源部分问题现有的毛细管芯片电源作为芯片毛细管电泳系统的一部分，在整个系统的产品化之前还需要进行相应的改进。
除了整体功能上需要进行一些小的改动之外，在体积、外形、外观以及如何与系统中其他部分进行系统集成，成为一个完整的整体仪器方面还需要做很多工作。
1）现有电源设计方案及功能：现有电源已经实现的功能有：●两个0－20kV CZE系列电源模块输出控制●两个0－2kV MP系列电源模块输出控制以及8路开关信号输出。
●软件控制四路电源输出及实时监测四路电源输出信号。
（软件部分还包括光电倍增管信号的采集）2）现有电源可以改进的部分：（1）去掉CZE系列电源模块，只使用MP系列电源模块。
由于CZE系列电源模块的体积较大，而且现在芯片毛细管电泳使用的电压MP系列的电源模块已经可以满足要求。
（2）电源信号监测部分的改进。
将原来的8位AD改为12位AD，可以监测提高精度，而且如果精度足够，可以将光电倍增管信号采集电路合并进来，可以省去目前光电倍增管信号采集使用的AD转换卡。
（3）控制电路电源的改进。
控制电路需要＋15V、＋5V、－5V直流电源，MP系列电源模块需要＋24V直流电源。
现有电源分别使用两个变压器，并且＋24V直流电源使用风扇降温。
可以考虑将两部分合并，减小总体积。
3）改进方案从时间和成本上考虑，我们设计了两种改进方案。
（1）改进方案一：考虑项目的整体时间进度，只对（1）进行改进。
具体工作内容及时间安排如下：●MP系列电源模块直接购买。
●电路原理图及PCB图改进设计（1周）●电路板加工（7－10天）●PC端软件改动（一周以内）●焊接及调试（一周）（2）改进方案二：对1、2、3项都进行改进具体工作及时间安排：●MP系列电源模块购买●电路原理图及PCB图改进设计（2周）●电路板加工（7－10天）●单片机程序改动（1周）●PC端软件改动（1周以内）●焊接及调试（2－3周）2：芯片定位问题1）现有结构需要改进的地方（1）现有芯片结构简单，制造完全靠手工实现，没有定位的基准，导致每块芯片上的毛细管道位置千差万别，在应用时只能够依靠显微镜观察并调整平台位置来进行毛细管道位置的调整，操作起来相对繁琐。
毛细管分析常见问题的解决.doc
毛细管分析常见问题的解决一、峰丢失可能的原因及应采用的排除方法1.注射器有毛病，用新注射器验证。
2.未接入检测器，或检测器不起作用，检查设定值3.进样温度太低，检查温度，并根据需要调整4.柱箱温度太低，检查温度，并根据需要调整5.无载气流，检查压力调节器，并检查泄漏，验证柱进品流速6.柱断裂，如果柱断裂是在柱进口端或检测器末端，是可以补救的，切去柱断裂部分，重新安装二、前沿峰1.柱超载，减少进样量2.两个化合物共洗脱，提高灵敏度和减少进样量，使温度降低10~20度，以使峰分开3.样品冷凝，检查进样口和柱温，如有必要可升温4.样品分解，采用失活化进样器衬管或调低进样器温度三、拖尾峰1.进样器衬套或柱吸附活性样品：更换衬套。
如不能解决问题，就将柱进气端去掉1~2圈，再重新安装2.柱或进样器温度太低：升温（不要超过柱最高温度）。
进样器温度应比样品最高沸点高25度3.两个化合物共洗脱：提高灵敏度，减少进样量，使温度降低10~20度，以使峰分开4.柱损坏：更换柱5.柱污染：从柱进口端去掉1~2圈，再重新安装四、只有溶剂峰1.注射器有毛病：用新注射器验证。
2.不正确的载气流速（太低）：检查流速，如有必要，调整之3.样品太稀：注入已知样品以得出良好结果。
如果结果很好，就提高灵敏度或加大注入量。
4.柱箱温度过高：检查温度，并根据需要调整5.柱不能从溶剂峰中解析出组分：将柱更换成较厚涂层或不同极性6.载气泄漏：检查泄漏处（用肥皂水）7.样品被柱或进样器衬套吸附：更换衬套。
如不能解决问题，就从柱进口端去掉1~2圈，并重新安装五、宽溶剂峰1.由于柱安装不当，在进样口产生死体积：重新安装柱。
2.进样技术差（进样太慢）：采用快速平稳进样技术。
3.进样器温度太低：提高进样器温度。
4.样品溶剂与检测相互影响（二氯甲烷/ECD）：更换样品溶剂。
5.柱内残留样品溶剂：更换样品溶剂6.隔垫清洗不当：调整或清洗7.分流比不正确（分流排气流速不足）：调整流速六、假峰1.柱吸附样品，随后解吸：更换衬管，如不能解决问题，就从柱进样口端去掉1~2圈，再重新安装。
毛细管电泳分析微量有机污染物的方法改进
毛细管电泳分析微量有机污染物的方法改进毛细管电泳（Capillary Electrophoresis，CE）作为一种高效、快速、灵敏的分析技术，已经广泛应用于各个领域。
在环境科学中，CE被用于分析微量有机污染物，如农药残留、水中有机污染物等。
然而，由于样品复杂性和分析条件的限制，CE在分析微量有机污染物时面临一些挑战。
为了克服这些挑战，研究人员不断努力改进CE的方法。
首先，改进毛细管涂层材料是提高CE分析微量有机污染物灵敏度的一种方法。
传统的涂层材料如聚乙烯醇（Polyvinyl Alcohol，PVA）和聚丙烯酰胺（Polyacrylamide，PAA）在分析有机物时存在一定的限制。
近年来，研究人员提出了一些新的涂层材料，如聚合物纳米颗粒、金属有机骨架材料（Metal-Organic Frameworks，MOFs）等。
这些新的涂层材料具有更好的分离性能和更高的灵敏度，可以有效提高CE分析微量有机污染物的准确性和可靠性。
其次，改进电泳缓冲液的组成也是提高CE分析微量有机污染物灵敏度的一种方法。
传统的电泳缓冲液主要由盐和缓冲剂组成，但这种缓冲液在分析有机物时容易产生背景噪音。
为了解决这个问题，研究人员提出了一些新的电泳缓冲液，如离子液体缓冲液、聚合物缓冲液等。
这些新的电泳缓冲液具有更低的背景噪音和更高的分离效果，可以提高CE分析微量有机污染物的检测灵敏度。
此外，改进分析条件也是提高CE分析微量有机污染物灵敏度的一种方法。
传统的CE分析条件如电压、温度等对于微量有机污染物的分离和检测效果有一定的限制。
为了提高CE的分析性能，研究人员通过优化分析条件，如改变电压梯度、调整温度等，来提高CE分析微量有机污染物的灵敏度和分离效果。
此外，还可以结合其他技术如质谱联用等，进一步提高CE的分析能力。
综上所述，毛细管电泳作为一种高效、快速、灵敏的分析技术，已经被广泛应用于微量有机污染物的分析。
然而，由于样品复杂性和分析条件的限制，CE在分析微量有机污染物时面临一些挑战。
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无样品峰出现
A、检查电流是否稳定：
①没有电流。
可能原因——毛细管堵塞或断裂。
解决方法——用水冲洗毛细管，并观察是否有水流出，若无水流出请拆下卡盒检查毛细管两端和窗口是否断裂；毛细管没有断裂的话可以用水反向高压冲洗以试图解决此问题。
缓冲溶液需要过滤，将样品过滤或者离心去除其中的颗粒。
②电流波动很大，直至几乎消失。
可能原因——缓冲溶液中有气泡产生或者区带中样品析出。
解决方法——将缓冲溶液超声脱气，如果还有此现象发生，则可能是样品区带有析出，可以通过降低样品浓度/ 延长ramp time 来试图解决这一问题；对于在缓冲溶液中溶解度不高的样品则需要在缓冲溶液中加入添加剂以解决此问题。
③电流初始值较小，后逐渐增大。
可能原因——样品进样量过大。
解决方法——减少进样量，通常进样参数设置在0.5psi,5sec 左右。
④电流正常。
可能原因：a 样品浓度过低：使用高浓度样品测试，如果无法解决则有可能是以下其他原因。
b 检测波长设置不正确：请确认被分析物的特征吸收，检查方法中的检测波长设置。
c 分离
极性错误：对于蛋白样品，请注意蛋白在分离条件下其PI及所带
电荷；对于核酸样品，通常条件下会带负电荷。
d样品在
毛细管内壁吸附：对于蛋白及核酸样品应尽量采用涂层毛细管分
离，或采用极端pH条件或动态涂层防止样品吸附。
e光学检测器或光纤损坏：进行标准样品的测试，如果没有对应的结果出现，则有可能存在硬件问题，请联系工程师。
B、检查毛细管窗口，是否有透明窗口：
可能原因一一忘记开毛细管窗口或窗口位置不正。
解决方法一一重新开毛细管检测窗口，或将窗口调整到正确位置。
二、样品峰出现拖尾
可能原因一一样品在毛细管内壁吸附。
解决方法一一对于蛋白及核酸样品应尽量采用涂层毛细管分离，或
采用极端pH条件或动态涂层防止样品吸附。
三、样品峰形不对称
A、检查毛细管入口：
可能原因一一毛细管入口切口不平齐。
解决方法一一重新切割毛细管入口，注意毛细管切割方法，不可以
用力过猛或反复刮擦。
B、检查更改样品溶剂：
可能原因——缓冲溶液与样品溶液电解率差别过大。
解决方法一一可采用缓冲溶液作为样品溶剂
四、样品峰过宽
降低样品进样量：
a有改善：可能原因一一样品浓度太大。
解决方法一一可降低样品浓度或减少进样量。
b无改善：可能原因一一样品本身性质不均一。
解决方法一一此原
因主要是针对蛋白样品，小分子样品发生的概率较低。
五、迁移时间不稳定
①出峰时间不稳定且无规律：可能原因一一缓冲溶液与毛细管内壁
平衡较慢。
解决方法一一每次样品运行之间避免用NaOH中洗毛细管。
②出峰时间依次后延：可能原因一一样品中有物质易发生吸附。
解决方法——首先在每次样品运行之前用0.1N NaOH短时间冲洗毛细管，看迁移时间能否重复，如果效果不佳请使用涂层毛细管来改善结果或者将样品再次处理，以去除样品中易吸附的组分。
六、峰形和出峰时间不稳定
更换缓冲溶液种类：
①峰形和时间稳定：可能原因一一缓冲溶液不稳定，易电解，或者是样品在原缓冲溶液条件下不稳定。
解决方法一一更换其它种类的缓冲溶液。
②峰形和出峰情况仍不稳定：可能原因一一样品中物质易在毛细管内壁吸附。
解决方法一一可采用涂层毛细管来克服此问题，或对样品进行前处理。
七、无法加气压
检查瓶塞是否盖紧或更换瓶塞。
①更换后问题解决。
可能原因a瓶塞老化，失去弹性。
解决方法一
—请购买新的瓶塞，并注意瓶塞不可烘干，只能自然晾干。
b瓶颈处有液体，导致瓶塞易滑。
解决方法——向瓶中装液体时不要过满，也不要沾湿瓶颈。
②若瓶塞无问题，可先采用真空方式，若真空方式可以使用，但压力仍不可用。
可能原因一一压力系统问题。
解决方法一一请联系工程师。
八、迁移时间可重复但峰面积重复性不好
重新切割毛细管两端。
①若问题解决。
可能原因一一毛细管入口处不平。
解决方法一一重新切割毛细管入口，注意毛细管切割方法，不可以用力过猛或反复
刮擦②问题依然存在，尝试电动进样。
可能原因——若电动进样可保持重现，则压力控制或气路存在问题。
解决方法——请联系工程师。
九、毛细管或电极易折断
①检查瓶盖是否老化。
可能原因——瓶盖老化。
解决方法——购买新的瓶盖。
②电极是否不垂直。
可能原因电极不垂直。
解决方法将电
极拉直。
十、谱图基线不稳定
①先用0.1N NaOH中洗毛细管，然后不进样运行原方法。
a 基线改善。
可能原因——则为样品中物质有吸附。
解决办法——重新预处理样品或更改电泳条件。
b基线未改善。
可能原因一一毛细管内有强烈吸附，或缓冲体系不稳定。
解决办法——更换新的毛细管，不进样，只运行缓中，观察基线情况。
②更换新毛细管后基线仍然不稳，可采用Run Buffer A测试。
a基线改善。
可能原因一一缓冲溶液与毛细管内壁平衡较慢。
解决办法——更换缓中溶液种类，若基线变化对检测无干扰，可保持原来电泳条件。
b 基线未改善。
可能原因——检测光源或其他光学器件不正常。
解
决办法请联系工程师。