变态反应性疾病的诊断方法

近年来强调变应原的标准化，即皮试液组分和各组分间的比例、含 量、活性均恒定。随着分子克隆技术的发展，已有重组变应原问世， 使皮试质量更加完善。
2. 血清特异性IgE检测
特异性IgE（sIgE）的测定在变态反应性疾病体 外诊断中占有重要地位,现已被广泛使用。由于血 中IgE含量甚微，仅为血中IgG的十几万分之一， sIgE含量则更微，因此采用一般的免疫学方法并 不能检测到sIgE，需采用由标记上同位素或酶的 抗人IgE抗体（作为二抗）以及固相化的各种变应 原所建立标记免疫分析技术进行测定。
（1）皮内试验
是目前应用最广、结果较可靠、测试剂量控制较严格的一种 试验方法，也是皮肤试验的经典方法。近年来，由于此法较繁琐， 有一定痛感，不适合于小儿患者，已逐渐被点刺试验所取代。
（2）. 点刺试验 它是将抗原导入皮肤更浅表水平的一种简便的皮肤试验。
在受试者前臂曲侧经消毒的 皮肤上，滴一滴变应原浸液
+
Dendritic cell
Th1 cell
inflammatory mediators
Eosinophil
Mechanism of type 1 Allergy related to spec allergy vaccine (IT)
IgE
Allergen
IL-4
B-cell
APC
Th2
Eosinophils
皮肤反应差的老年人及3岁以下儿童； 3. 没有用昆虫、动物皮屑等变应原作皮试时产生的全身不适感。
缺点是： ❖ 费用较昂贵,需一定设备；费时，一般需一天时间才能得出结果； ❖ 血清中存在非IgE抗体，如脱敏治疗过程中所产生的IgG类阻断
抗体也可与变应原结合，干扰了IgE抗体与变应原的结合； ❖ 不是所有的变应原都适用，如药物和细菌等并不适用；
然后用消毒的点刺针在滴有抗原的皮肤中央进行
点刺。点刺针是定型设计的，该针长3cm左右，端 部针尖长1mm，以柄肩限制针刺皮肤的深度。用 该针在皮肤上垂直压破表皮，1秒后将针提起，随即 擦去皮试液。20分钟左右观察结果。试验时应同时 作阴阳性对照。
组胺当量级别： 以变应原及组胺所致丘疹面积比而定其反应级别
+
CD80/86 CD28
HLA CD3
IT
T cell
CD4 IT
--
Th3
IL-5
TGF- b IL-10
+
Allergic
+ response
-
IgG
Th1
IFN-
B-cell
Durham, AAAAI, NY, 2019
变态反应性疾病的诊断方法
（一）变应原检测
变态反应性疾病由变应原所引发，因此确定致病的变应原对防治此病 有着十分重要的作用。
组胺所致丘疹面积
无反应或与阴性对照相同者为(-) 为组胺丘疹25%- 50%者为(+) 50%- 100%者为(++)
100%- 200%者为(+++)
200%以上者或 出现伪足者为(++++)
以（++），或以上判定阳性
❖ 运用点刺试验，受试者几乎没有疼痛，小儿患者也能接受，且快速、 简便，适合于一次进行多个变应原的测定。
❖ 它所采用的变应原制剂稳定期长。 ❖ 点刺针若操作正确，皮肤不会出血，而且深度一致，易于自身或异
体对照。 ❖ 皮试液立即被擦去，其进入皮肤的量和作用时间比较一致，用量易
于控制而且节省。
❖ 不会出现非特异性的皮肤反应、具有特异性高、重复性和对比性 好等优点，并且点刺试验几乎不会出现全身反应。
❖ 由于点刺试验不向皮内用力推入皮试液，避免了对皮肤的刺激， 所以假阳性结果很少，与其他检测特异性变应原的试验符合率较 高，因此，有替代皮内试验法的趋势。
假阴性的原因有： 1. 受试者年龄过大或过小； 2. 皮试变应原效价降低或注入变应原剂量太少； 3. 药物因素的影响，如皮试前应用抗组胺类药物； 4. 近期刚发生过强过敏反应，患者体内的过敏性抗体处于暂时“耗竭”
状态。
国外目前推广将各种已包被了不同变应原并密闭包装的点刺器具， 使用时只要打开包装，无需再滴加变应原，并备有阴阳性对照。这种 试验被称之为“干点刺试验”。该试验操作极为方便，且由于变应原 处于干燥状态而不易被降解，故有效期长。
变态反应性疾病的诊断方法
成都市妇女儿童中心医院 儿童呼吸内科 鲁正荣
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变应性鼻炎
荨麻疹
支气管哮喘
变应性疾病
眼结膜炎
Fra Baidu bibliotek
食物过敏
湿疹
变应性疾病是一个全球性的公共健康问题 在世界各地均很常见 全球发病率高达 40％ 并且患病人数仍在继续增加
粗略估计
变应性疾病的发病率
正以每10年 2～3 倍的速度增加
sIgE＋固相化的变应原 变应原- sIgE复合物＋标记的抗人 --IgE抗体
固相化的变应原-sIgE-标记的抗人IgE抗体的复合物
若标记物为同位素，则应用γ-计数仪测定结合的同位素 活性；若标记物为酶，则通过酶催化底物产生的颜色， 或发光（包括荧光），再经特定仪器灵敏地进行检 测。
sIgE检测的优点是： 1. 不受对症治疗用药的影响，也不受过敏症状的干扰； 2. 适用于皮试呈现假阳性的划痕症患者、严重皮炎不能作皮试者以及
❖ 但由于点刺试验敏感性较皮内试验差，因而所需用的变应原浓度 比皮内试验高出100倍。
皮试有时可出现假阳性和假阴性反应 假阳性的原因有： 1. 变应原浓度太高； 2. 变应原本身含有大量组胺或促组胺释放的物质； 3. 溶剂的非特异刺激，如pH和渗透压有偏差，或甘油浓度过高； 4. 患者皮肤敏感性过高，如划痕症阳性者。
I型变态反应
B cell
Dendritic cell
Th2 cell
allergen
-
IL-12
IL-10
-
+ IL-4 + IL-13
IgE IL-3, IL-4 IL-6, IL-9
IFN-
-
IL-3, IL-5 GM-CSF
机制
allergen
Mast cell
bacteria
IL-12
viruses
皮肤试验（简称皮试）
血清中特异性IgE(sIgE )
检测吸入性过敏原，如尘螨、猫皮屑、犬皮屑、树花粉、草花粉、真 菌和少数其他途径进入的药物（如青霉素等）
1.皮肤试验
问世于1909年，具有简单、快速、低花费和高敏感性的特点，因 而至今仍可作为变态反应疾病变应原诊断不可缺少的重要手段。皮肤 试验主要分为皮内试验和点刺试验两种 。