尿糖测定ppt课件

葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法检测血 糖浓度
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葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法原理
（1）葡萄糖＋O2＋ H2O
葡萄糖氧化酶
（GOD） 葡萄糖酸＋H2O2
（2）H2O2＋4-氨基安替吡啉＋苯酚
过氧化物酶 （POD）
H2O ＋ O2 ＋ 红色醌类化合物
Trinder反应
相对血糖浓度
光吸收法测定
505nm
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血糖的来源和去路
食物糖 消化
吸收
肝糖原 分解
血 糖
糖异生
80~120 mg/dl
非糖物质
氧化 分解
CO2 + H2O
糖原合成 肝(肌)糖原 磷酸戊糖途径等其它糖
脂类、氨基酸合成代谢
脂肪、氨基酸
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血糖的平衡
血糖的去路 动态平衡血糖的来源
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交感神经(+) 肝糖原分解升高 迷走神经(+) 肝糖原合成增加
1.神经系统：下丘脑+自主NS
调 节 因
2.某些器官组织：主要为肝脏
1ห้องสมุดไป่ตู้肾上腺素
素
3.各种激素
一、升高血糖 2.胰高血糖素 3.糖皮质激素
二、降低血糖：胰岛素(体内唯一)
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血糖调节全过程示意图
血糖升高
下丘脑
某一区域
胰岛B 细胞
胰高血糖素 肾上腺素 分泌增多 分泌增多
－
胰岛素
分泌增多
+
胰岛A 细胞
肾脏在血糖调节中的作用
尿糖主要指尿中的葡萄 糖。正常情况下，肾小 管能将肾小球滤过的葡 萄糖全部重吸收回血液
当血糖>160-180 mg/dl , 超过肾小管的重吸收能 力,部分葡萄糖随尿排出, 这就是糖尿，这一血糖 水平称为——肾糖阈
血 浆
尿糖
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尿糖检测原理
糖还原实验：葡萄糖含有醛基在热碱性
某些药物的研究中，也涉及血糖的测定。
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测定血糖的方法及优缺点
特 血液量或试 易操 异 剂要求低 作
葡萄糖氧化酶法 ✓
✓
✓
Folin-Wu法
✓
邻－甲苯胺法 ✓
✓
超微量还原法 ✓
✓
己糖激酶法
✓
“真值” ※ ✓ ✓ ✓
※方法不是基于葡萄糖的还原性测定，不受血液中非糖还原物质
的影响，即“真值”。
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血糖易分解，故使含量降低。
酶酚混合液一般现用现配。
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26
6
实验四
血糖测定（葡萄糖氧化酶—过 氧化物酶法）及肾上腺素对血
糖浓度的影响
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实验目的
1、掌握葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血 糖的基本原理及方法
2、观察肾上腺素对血糖浓度的影响 3、熟悉尿糖的半定量检测
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血糖概念及意义：
血糖：指血液中的单糖：葡萄糖 血糖总维持在恒定水平： 3.89~6.11mmol/L 血糖生理意义：通过分解代谢保 证人体各种组织器官的能量供应。
四、血糖测定
表2 葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度
标准管
测定管 正常
空注白射管
后
血清(mL) －
－ 0.02 0.02
葡萄糖标准液(mL) 0.02 －
－
－
蒸混馏匀水→(m37L℃) 水浴15min → －冷却 →波－长→ 50－5nm比 色0.02 酶酚混合试剂(mL) 3.00 3.00 3.0019
试管 测
A
B
试管变化
结果符号
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计算
1、注射肾上腺素前后的血糖浓度 葡 = 萄糖含量(mol/L)测定标准管管吸吸光光度度 ×5
2、注射肾上腺后血糖浓度增高率
A肾－A正A正
×100 ％
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注意事项
抓取家兔操作规范，避免抓伤。 正确使用比色器皿：手拿比色皿的毛面；比色液
应占比色皿的2/3。
血糖测定应在取血后2小时内完成，放置太久，
肾上腺 下丘脑
髓质
另一区域
血糖降低 13
肾上腺素升血糖作用机制
肾上腺素+肝细胞膜受体
cAMP-蛋白激活系 统
无活性磷酸化酶b
糖原合酶
有活性磷酸化酶 a -
糖原合p酶
加速肝糖原分解，使血糖升高
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测定血糖的意义
➢临床：血糖检测是目前诊断糖代谢异常相关疾
病的主要依据。
➢科研：在代谢疾病的研究中，常测定血糖。在
实验七
血糖测定（葡萄糖氧化酶—过 氧化物酶法）及肾上腺素对血
糖浓度的影响
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实验安排
1.第一次取血(未施药) 血 2.皮下注射肾上腺素 糖 3.实验内容的讲解 测 4.第二次取血(注射药物后30 min) 定
5.血糖测定操作(比较注射肾上腺素前后血糖水平) 尿糖检测
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家兔抓取
实验动物：饥饿16小时家兔 采血部位：耳缘静脉
溶液中可将Cu2+还原为低价的氧化亚铜
表1 尿糖半定量检测
葡萄糖含量（g﹪）
试管变化
无糖
蓝灰色
―
﹤0.5 ＋
绿色
0.5~1 ＋＋
黄绿
结果
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五、尿糖检测步骤
20滴班氏剂
A尿液2滴 B尿液2滴
煮沸5min
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实验结果记录
表一 葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度
试管 射后
吸光度（A）
标准管
注射前 注
表二 尿糖变定量检
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4
一、采血
放血部位剪毛,酒精棉球擦拭
二甲苯擦拭兔耳,使血管充血
在放血部位涂一层凡士林
用三菱针刺破静脉放血
离心管收集,(3ml以上)
干棉球压迫止血。
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二.皮下注射肾上腺素
0.4 ml / kg
皮下注射
30 min后再采血！
选择皮肤较薄、皮下组织疏松 而血管较少的腹部，在注射局 部用消毒棉球将毛向四周分开， 以左手的拇指、食指和中指将 皮肤轻轻捏起，形成一个皱褶， 右手将注射器针头刺入皱褶皮 下，深约1.5-2厘米，药液注 完后，用酒精棉球按住进针部 皮肤，拔针，轻按进针部皮肤。