高效液相色谱法测定奶粉中三聚氰胺的含量
高效液相色谱法检测乳制品中的三聚氰胺
高效液相色谱法检测乳制品中的三聚氰胺三聚氰胺（Melamine）是一种重要的三嗪类含氮杂环有机化工原料，主要用于生产三聚氰胺-甲醛树脂，广泛用于木材加工、塑料、涂料、造纸、纺织、皮革等行业，为白色晶体。
三鹿奶粉事件引发了对三聚氰胺检测的广泛关注，国家质量监督检验检疫总局和国家标准化管理委员会相继发布了《原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》（GB/T22388-2008）和《原料乳中三聚氰胺快速检测液相色谱法》（GB/T22400-2008）的国家标准。
本文参考了以上标准并进行配制条件优化，建立了液相色谱检测法，前处理简单，检测限、精密度、重现性以及回收率均符合国家标准。
1 实验部分1.1 仪器与试剂LC1600高效液相色谱仪（含UV1600紫外-可见检测器1台，P1600高压恒流泵1台，上海舜宇恒平科学仪器有限公司）；AT-330色谱柱温箱（天津奥特赛恩斯仪器有限公司）；FA2004分析天平（上海舜宇恒平科学仪器有限公司）；TGL-16G-A离心机（上海安亭科学仪器厂）；三聚氰胺标准品(>99%，上海安谱)；辛烷磺酸钠(色谱纯，北京百灵威)；磷酸(分析纯)、乙腈(色谱纯，美国Tedia)、纯净水(杭州娃哈哈)。
1.2 标准品溶液配制精密称取三聚氰胺标准品，溶于50％的甲醇水溶液，配制称1.422mg/ml的标准储备液，于4℃避光保存。
根据实验需要，用流动相逐级稀释成适当浓度的标准工作液。
1.3 样品前处理称取2g酸奶样品与50ml具塞离心管中，加入乙腈：水＝50：50混合溶液15ml，充分混匀后超声提取15min。
取提取液250ul，加入0.1mol/l盐酸750ul，混匀，以12000r/min离心5min，取上清液，0.22um滤膜过滤，作为HPLC 测定溶液。
1.4 色谱条件：色谱柱：Globalsil C18 5μm(ID4.6mm×250mm)流动相：乙腈/缓冲盐=15/85（缓冲盐：10mM辛烷磺酸钠水溶液，含0.1％磷酸）流速：1.0ml/min波长：240nm温度：40℃进样量：20μl2 实验结果2.1 精密度实验取浓度为0.569μg/ml三聚氰胺标准工作液，按上述色谱条件，连续进样5次，以各成分峰面积计算RSD(%)，所得结果如表1所示：保留时间相对标准偏差（RSD）为0.23％，峰面积RSD为0.57％。
高效液相色谱内标法测定奶粉中三聚氰胺
高效液相色谱内标法测定奶粉中三聚氰胺邸万山【摘要】以双氰胺为内标物,采用高效液相色谱内标法测定奶粉中三聚氰胺的含量,通过对色谱条件的优化,最后确立了有效的检测方法.样品经20 mL 50℃热水,0.5g 无水硫酸镁,10 mL乙腈提取后,采用Nova-PakC18色谱柱(3.9 mm×15 mm×5 μm)分离,以0.01 mol/L乙酸铵∶乙腈=90∶10 (V∶V)作为流动相,218nm为检测波长.结果表明,双氰胺在该条件下能够与三聚氰胺完全分离,可以作为测定三聚氰胺的内标物.在0.500～1.500 mg/kg的添加范围内,三聚氰胺的回收率为98.2％～100.5％.精密度实验结果相对标准偏差为0.44％.所测定奶粉样品中三聚氰胺为0.223 mg/kg.此法处理样品处理简便易行,回收率、准确度高,分析速度快,具有良好的重复性和再现性,适于测定奶粉中的三聚氰胺.【期刊名称】《中国酿造》【年(卷),期】2016(035)003【总页数】3页(P145-147)【关键词】三聚氰胺;高效液相色谱法;奶粉【作者】邸万山【作者单位】辽宁石化职业技术学院应用化学系,辽宁锦州121001【正文语种】中文【中图分类】TS207.3三聚氰胺作为一种价格低廉的有机化工原料，其最大的特点就是含氮量高（质量分数为66.6%），掺假增氮效果明显，成本低。
因此，在技术上和经济上存在奶粉中掺加三聚氰胺的可能。
研究表明，三聚氰胺长期累计摄入会导致肾、输尿管和膀胱结石，并有生殖系统损伤的可能性［1］。
因此有必要对奶粉中的三聚氰胺进行监测，明确其实际含量，防患于未然。
奶粉中总氮质量分数测定国家标准中使用凯氏定氮法，该方法对设备要求低，操作相对简单，但精度差。
国家规定奶粉中残留三聚氰胺限量＜1 mg/kg。
液态奶（包括原料乳）、奶粉、其他配方乳粉中三聚氰胺的限量值为2.5 mg/kg，高于2.5 mg/kg的产品一律不得销售。
HPLC法测定奶粉中三聚氰胺含量的测量不确定度评定
确 定度 的数 学模型 ，对整个测量过程 中所产生的不确 定度分量进行分析和 计算。结果表 明 ，当奶粉 中三聚氰胺含
量 为 ２ ６６ｍｇ ｋ 时 ，其 扩展 不 确 定 度 为 １． ｍ ・ｇ 。此 方 法 适 用 于 评 定 ＨＰ Ｃ 法 测 定 奶 粉 中三 聚 氰 胺 含 量 的 ６． ・ｇ ６１ ｇ ｋ～ Ｌ
Ａｂ ｔ ａ ｔ ｈ ｔ ｅ ｔ ａ ｍｏ ｅ ｗａ ｏ ｓ ｒ ｃｅ ｏ ｅ ｔ ｔ ｈ ｎ ｅ ｔ ｉｔ ｎ ｍｅ ｓ ｒ ｇ ｔ ｅ ｓ ｒ ｃ ：Ｔ ｅ ｍａ ｈ ｍａ ｉ Ｉ ｄ ｌ ｓ ｃ ｎ ｔ ｔ ｄ ｔ ｓ ｉ ｅ ｔ ｅ ｕ ｃ ｒ ｎｙ ｉ ａ ｕ ｉ ｈ ｃ ｕ ｍａ ａ ｎ
ｑ ｅ Ｃ ｎ ｒ ｏ ｎ ｐ ｃｉｎ ａ ｄ Ｑｕ ｒｎｉｅ ｅｌｎ ｊ ｎ Ｅ ｔ －ｘ Ｉ ｐ ｃｉ ｎ ａａ ｔ ｅ ｕ ｅ ｔ ｆ Ｉｓ ｅ ｔ ｎ ａａ ｔ 。Ｈ ｉ ｇｉ ｇ ｎｒ Ｅ ｉ ｎ ｅ ｔ ｎ ａ ｄ Ｑｕ ｒｎｉ ｅ ｏ ｎ ｏ ａ ｙ ｔ ｓ ｏ ｎ
ｒ ｓｄ ａ ｕ ｎ ｉ ｆ ｅａｍｉｅ ｉ ｉ ｏ ｅ ｙ Ｈｉｈ Ｐｅ ｆ ｒ ｅ ｉｕ ｌ ａ ｔｙ ｏ ｌ ｎ ｍ ｌ ｐ ｗｄ ｒｂ ｇ ｒｏ ｍａｎ ｅ Ｌｑ ｄ Ｃｈ ｏｍａ ｏ ｒ ｐｈ ｈｉ ａ ｅ ． ｙ ｑ ｔ ｍ ｎ ｋ ｃ ｉｕｉ ｒ ｔｇａ ｙｉ ｔ ｓｐ ｐ ｒ Ｂ ｎ ａ ａｙ ｉｇ ａ ｄ ｑ ａ ｔｙｉｇ ｔ ｅ ｃ ｍ ｐ ｎ ｔ ｆｕ ｃ ｒａｎ ｙｉ ｈ ｏｅ ｍｅａ ｕ ｉｇ ｐ ｏ ｅ ｓ ｔ ｎ ｌｚｎ ｎ ｕ ｎ ｉ ｎ ｈ ｏ ｆ ｏ ｅｎｓｏ ｎ ｅ ｉｔ ｎｔ ｅ ｗｈ ｌ ｔ ｓ ｒ ｒ ｃ ｓ ，ｉｗａｓｃ ｃｕ ｅ ｎ ｏｎ ｌｄ ｄ ｔａ ｈ ｘ ａｎ ｅ ｎ ｅ ａｎ ｙ ｗａ ． ｈ ｔｔ ｅ ｅ ｐ ｄ ｄ ｕ ｃ ｒ ｉｔ ｓ １ １ ｇ・ ｇ ｗｈ ｌ ｈ ｏｎｅｎ ｆｍ ｅａｍ ｉ ｓ ２ ６６ ｍ ｇ ‘ｇ～ ｔ ６ ｍ ｋ～ ｉ ｔ ｅ ｃ ｔ ｔｏ ｌ ｎｅ ｗａ ６ ． ｅ ｋ ．Ｔｈ ｅ
原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法
ICS 67.100C 53中华人民共和国国家标准GB/T 22388—2008 原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法Determination of melamine in raw milk and dairy products2008-10-07 发布2008-10-07 实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会发布前言本标准包括三个方法：第一法高效液相色谱法，第二法液相色谱-质谱/质谱法，第三法气相色谱-质谱联用法，检测时，应根据检测对象及其限量的规定，选用与其相适应的检测方法。
本标准的附录A 为资料性附录。
本标准由全国食品安全应急标准化工作组、全国质量监管重点产品检验方法标准化技术委员会提出并归口。
本标准第一法起草单位：中国检验检疫科学研究院、中国疾病预防控制中心、国家食品质量安全监督检验中心、北京市疾病预防控制中心、国家乳制品质量监督检验中心、浙江省质量技术监督检测研究院、国家加工食品质量监督检验中心（广州）。
本标准第一法主要起草人：宋书锋、鲁杰、安娟、杨大进、李淑娟、张晶、刘艳琴、杨红梅、杨金宝、鄂来明、廖上富、陈小珍、蔡依军、郭新东、吴玉銮。
本标准第二法起草单位：中国检验检疫科学研究院、北京市疾病预防控制中心、国家食品质量安全监督检验中心、中国疾病预防控制中心、中华人民共和国江苏出入境检验检疫局。
本标准第二法主要起草人：彭涛、吴永宁、邵兵、王浩、李晓娟、郭启雷、苗虹、赵云峰、丁涛、李立、蒋原。
本标准第三法起草单位：上海市质量监督检验技术研究院、国家食品质量安全监督检验中心、中国检验检疫科学研究院。
本标准第三法主要起草人：巢强国、常宇文、雷涛、陈冬东、赵玉琪、周耀斌、穆同娜、葛宇、曹程明、张辉、麦成华、曹红。
原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法1 范围本标准规定了原料乳、乳制品以及含乳制品中三聚氰胺的三种测定方法，即高效液相色谱法（HPLC）、液相色谱-质谱/质谱法（LC-MS/MS）和气相色谱-质谱联用法[包括气相色谱-质谱法（GC-MS），气相色谱-质谱/质谱法（GC-MS/MS）]。
三聚氰胺奶粉检测方法
三聚氰胺奶粉检测方法
三聚氰胺奶粉检测方法如下：
1. 离子色谱法：该方法基于三聚氰胺在水中形成氢氧化铵和靛酚蓝络合物的反应，在离子色谱柱中用硫酸为流动相进行分离，再通过紫外检测器进行检测。
2. 高效液相色谱法：该方法使用高效液相色谱柱进行分离，以甲醇和水为流动相，以紫外检测器和荧光检测器进行检测三聚氰胺。
3. 液质联用法：该方法是高效液相色谱法和质谱法的结合，可以同时分离和定量三聚氰胺及其代谢产物。
4. 岛式红外光谱法：该方法利用不同样品的红外光谱图谱的差异性来鉴别含三聚氰胺的奶粉。
5. 快速检测法：该方法使用荧光和拉曼光谱等技术，可以在几秒钟内快速、准确地检测奶粉中的三聚氰胺。
以上是常用的几种三聚氰胺奶粉检测方法。
不同的方法具有不同的优点和适用范围，可以根据实际需求选择合适的检测方法。
高效液相色谱法测定乳制品中三聚氰胺的含量
第 １ 期
胡 阳，等 ：高效液相色谱法测定乳制品中三聚氰胺 的含量
・ ７・ ３
配制 比例为 ９ ０％Ａ＋１ Ｏ％Ｂ；流 速 １０ｍＬ ｍ ｎ ． ／ ｉ ；柱 温 ３ Ｏｏ Ｃ；进 样量 ２ Ｌ；检测 波长 ２ ０ｎ ０ ４ ｍ．
１４ 样 品 的制备 ．
参照 Ｎ ／ ７－２ ０ 标准的方法 ，准确称取试样 ５ｇ Ｙ Ｔ１ ２ ０ ７ ３ ，加入 ｌ Ｌ的三氯乙酸溶液 ５ Ｌ和 Ｏ ０ｍ
净化 ，结合高效液相 色谱进行 样品测定 ．色 谱条件 ：Ｅ ｌ ｓ Ｘ ＢＣ。 （ ｍ，４ ６Ｉｎ×１０ｍ ｃｐｅ Ｄ — 柱 ５ ｉ ． ｌ Ｔ ／ ５ ｍ，Ａ ｉ Ｓ －
ｌ ｔ ；流动相 ：Ａ为离子对缓冲液 （．５ｇ ｅ） ｎ １０ 柠檬 酸和 １０ ． １ｇ辛烷磺酸钠定容至 ５ ０ｍ ，ｐ ０ Ｌ Ｈ值为 ２ ６ ，Ｂ ．） 为乙腈，配制 比例为 ９ ０％Ａ＋１ ０％Ｂ ，流速 １０ｍ ／ ｎ ． Ｌ ｍｉ，柱温 ３ ０℃ ，进样量 ２ ，检测波长 ２ ｌ．结 ０ ０ ｎ ４ ｎ
磺 酸钠离子对试 剂 （．５ｇ １０ 柠檬 酸和 １０ ． １ｇ辛烷磺 酸钠定容 至 ５０ｍ ，ｐ ０ Ｌ Ｈ值 为 ２６ ，Ｂ为 乙腈 ， ．）
［ 收稿 日期 ］２０ ０ ８—１ — ７ １ ０ ［ 回日期］２０ —１ ２ 修 ０ ８ ２— ２ ［ 作者简介］胡 阳 （９ １ ，女，助理实验师 ，从事食品微生物发酵方 向研究．通讯作者 ：蔡慧农 （９ ７ ） １８ 一） １５ 一 ， 男 ，教 授 ，从 事 生 物 工程 方 向研究 ．Ｅｍａ ：ｅ — ｉ ｌ ｍ ． ｄ ．ｎ ｌ ｍ＠ｊ ｕ ｅｕ ｃ．
８．６％ （ Ｓ ７ ２ ） ０ ．９％ （ Ｓ ４８ Ｒ Ｄ＝ ． １ 、１４ ２ Ｒ Ｄ＝７ ６ ） 和 ９ ． １％ （ Ｓ ．３ ５３ Ｒ Ｄ＝４３ ） ９ ２ ．９ 、８． ５％ （ Ｓ ＝３ ８ ） ＲＤ ．８ 、
固相萃取一高效液相色谱法测定液态奶中三聚氰胺含量
固相萃取一高效液相色谱法测定液态奶中三聚氰胺含量一、引言三聚氰胺是一种无机化合物，常用于工业制造和农业生产中，然而高浓度的三聚氰胺会对人体造成严重危害，特别是对婴儿和幼儿的影响更为严重。
由于近年来液态奶中三聚氰胺事件的频繁发生，因此对液态奶中三聚氰胺含量的检测显得尤为重要。
固相萃取一高效液相色谱法是目前常用的一种高效、准确的检测方法。
本文将介绍使用固相萃取一高效液相色谱法测定液态奶中三聚氰胺含量的方法和结果。
二、实验材料和仪器1. 实验材料：液态奶样品、甲醇、乙腈、乙酸、二氯甲烷、硅胶2. 仪器：高效液相色谱仪、固相萃取柱、离心机、显微天平、pH计、紫外可见分光光度计等三、实验方法1. 样品处理：首先将液态奶样品样瓶放在冰箱中冷藏，取出一定量的样品后使用显微天平称取出适量样品，并将其加入样品离心管内。
然后加入适量的甲醇，进行振荡混合，最后使用离心机离心沉淀，得到混合物的过滤液。
2. 固相萃取：将得到的过滤液加入到固相萃取柱中，使用甲醇等洗脱混合物，得到固相萃取柱的萃取液。
3. 色谱分析：将获取到的固相萃取液置于高效液相色谱仪中进行色谱分析，根据三聚氰胺的特征峰进行定性和定量分析。
四、实验结果经过实验验证，使用固相萃取一高效液相色谱法测定液态奶中三聚氰胺含量的结果显示，样品中三聚氰胺的含量为xmg/kg，达到了食品卫生安全标准。
五、实验结论通过该实验结果可以得出结论：固相萃取一高效液相色谱法是一种准确可靠的测定液态奶中三聚氰胺含量的方法。
该方法操作简便，结果准确，可以满足食品安全检测的需求。
六、实验改进尽管该方法已经得到了实验结果的验证，但在实际操作中还是存在一些可以改进的地方。
例如固相萃取柱的选择、色谱分析条件的优化等方面可以进行进一步的改进，以提高该方法的灵敏度和稳定性。
高效液相色谱HPLC法测定三聚氰胺成分含量
高效液相色谱法测定奶制品中三聚氰胺1引用标准按照国家标准GB/T 22388-2008，三聚氰胺简称三胺，是一种重要的氮杂环有机化工原料。
因三聚氰胺分子中含有大量氮元素，一些不法厂商通过添加这种化工原料，提高产品中蛋白质含量。
2方法原理：采用HPLC法测定三聚氰胺，成本低，不需要衍生，简便易行。
采用外标法进行定量分析。
本方法采用南京科捷LC-600二元高压梯度，按照国家标准GB/T 22388-2008对牛奶中三聚氰胺进行检测。
该方法稳定可靠，检测范围广泛。
3. 仪器和试剂LC-600二元高压梯度系统：输液泵，配梯度单元和在线脱气装置；LC-600紫外检测器；手动进样器7725i，色谱工作站N2000P,离心机1台（转头6*50ml）；固相萃取小柱和萃取装置；氮吹仪；三聚氰胺对照品购自sigma公司，样品液态奶购买于超市，实验中用到的其他试剂如三氯乙酸、氢氧化钠、柠檬酸和辛烷磺酸钠均为分析级。
4. 色谱条件色谱柱：V enusil ASB-C18 4.6×250mm （也可选用C8柱）缓冲液：10mM柠檬酸, 10mM辛烷磺酸钠流动相：缓冲溶液:乙腈=90：10进样量：20uL流速：1.0mL/min柱温：40℃5. 样品制备按照GB/T 22388-2008中3.4节进行：称取2g（精确到0.01g）试样（液态纯牛奶）于50mL 具塞塑料离心管中，加入15ml 1%三氯乙酸提取液和5mL乙腈，充分混匀，超声提取20min，再振荡提取10min后，以4000r/min离心10min。
上清液经三氯乙酸溶液润湿的滤纸过滤后，用三氯乙酸溶液定容至25mL，移取5mL滤液，过混合型阳离子固相萃取小柱(PCX)。
洗脱液于50℃下氮气吹干，残留物用20%甲醇的水溶液定容至1mL。
6. 定性分析称取三聚氰胺标准品适量，流动相溶解，按照上述色谱条件，进入色谱仪分析。
保留时间分别为4.75min。
7. 样品测试按照上述样品处理方法和色谱条件，对样品进行测定，得到色谱图如图1所示。
超高效液相色谱_串联质谱法测定原料乳和奶粉中三聚氰胺的含量
需要选择合适的色谱柱。 该试验在研究过程中， 考察了 Waters 公司的 ACQUITY UPLCTM BEH HILIC 柱（2.1 mm× 50 mm i.d.，1.7 μm）和日本资生堂的 CAPCELL PAK CR1∶4 柱（2.0 mm×100 mm i.d.，5 μm）。 Waters 公司的 HILIC 柱采 用乙腈和纯水作为流动相标准溶液能够获得较好的色谱 峰，信噪比较高，而流动相中加入甲酸、乙酸、乙酸铵都会使 响应值降低，这与文献 ［4］报道一致，但是用于样品分析时， 离子抑制很严重， 这可能是由于三聚氰胺在HILIC 柱几乎 无保留，与杂质同时流出，离子受到抑制有关。 日本资生堂 的 CAPCELL PAK CR 1∶4 柱的填料是 C18 填料和阳离子交 换填料按照 1∶4 混合而成，由于三聚氰胺是强极性化合物， 在该柱上的保留主要与阳离子交换填料有关，因此，流动相 的酸碱度跟三聚氰胺在该柱上的保留时间密切相关。 该研 究过程中， 使用 CAPCELL PAK CR 1∶4 柱， 用乙腈和 0.01 mol/L 乙酸铵溶液（等体积混合）作为流动相，流速为 0.3 ml/ min，调整流动相的酸碱度，得到三聚氰胺的保留时间与 pH 值的关系（见表 3）。 由于加大流动相中有机相的比例会加 速三聚氰胺的洗脱， 该研究最终选择了 pH 值=4.4 乙酸铵 溶液和乙腈进行梯度洗脱 （见表 1），即保证了目标峰不受 杂质峰的干扰，而且能够出峰较快、节约分析时间。
0.01 mol/L 乙 酸 铵 溶 液 （pH 值=4.4），梯 度 洗 脱 ，洗 脱 程 序 用。
见表 1。 柱温 30℃，进样量 10 μl。
1.4.2 奶粉的提取方法 准确称取 2 g 奶粉于 50 ml 圆底
表 1 梯度洗脱程序
高效液相色谱法测定奶粉和液态奶中的三聚氰胺
。
图 1
聚氰胺 的结构 式
以 往 常 见 报道 的是 关 于 饲 料 中三 聚 氰胺 的检测
实验部分
．
方法 主要 有 高效液 相 色谱 质 谱 法
．
卜
川
、
，
高效 液 相
。
1
1
仪 器 材 料 与试 剂
、
色谱法 ( H P L C )
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引
、
气相色谱 质谱法
．
…
关于奶
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公司
2695
型 高效液相 色谱仪 ( 带二 极
to gra p hy
(HPLC )
；
m e
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il k p
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三 聚氰 胺俗称 蜜胺
，
分子 式 为
c
，
N 。H
。
，
结构式
液 态 奶 的基 质 与饲 料 不 同 干 扰 因 素 的差 异 较 大 饲
，
，
见图
，
1
。
三 聚氰胺是
一
种重 要 的氮杂环 有 机 化工 原
一
料 中三 聚 氰 胺 的 测 定 方 法 不 适 用 于 奶 制 品 的 测 定
因此 有 必 要 建 立 的检 测 方法
。
一
，
料 主要 用 于 生 产三 聚氰胺 甲醛树脂 广 泛 应 用 于
，
套 针 对 奶 粉 和 液 态 奶 中三 聚 氰 胺
、
木材加 工 塑 料 涂 料 造 纸 纺 织 皮革 电气 医 药
、 、
、
、
、
、
三聚氰胺 检测方法
中华人民共和国质量监督检验检疫ICS 67.100.10 X 82中华人民共和国国家标准中华人民共和国质量监督检验检疫总局 乳与乳制品中三聚氰胺残留的测定—高效液相色谱法Milk and Milk Product Detection ofMelamine Residues —HPLCA.1乳与乳制品中三聚氰胺残留的测定—高效液相色谱法1 范围本方法规定了用HPLC与GC-MS测定三聚氰胺的方法。
本方法适用于乳与乳制品中三聚氰胺含量的测定。
本方法三聚氰胺的最低检出限为1.0mg/kg。
1 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。
凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
NY/T 1372-2007 饲料中三聚氰胺的测定GB5009.1 食品卫生检验方法理化部分总则GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法2 原理试样中的三聚氰胺用乙腈、水的混合溶液萃取，乙酸锌溶液沉淀蛋白质后，提取液经混合型阳离子交换固相萃取柱净化，净化液用高效液相色谱进行测定，外标法定量。
3 试剂与材料：除另有规定外，试剂为分析纯，水符合GB/T6682规定的三级水，色谱用水符合一级水的规定。
3.1 乙腈：色谱纯3.2 甲醇：色谱纯3.3 氨水：浓度25%～28%3.4混合型阳离子交换固相萃取小柱：60mg/3mL3.5 三氯乙酸溶液10g/L ：称取10g三氯乙酸加水至1000mL。
3.6 乙腈水溶液：乙腈:水为50：503.7 盐酸溶液：0.1mol/L3.8 氨水-甲醇溶液：量取5mL 氨水，溶解于100mL 甲醇中。
3.9 乙酸锌溶液219 g/L：取219g乙酸锌用300mL 水溶解后，定溶至1L。
3.10 20%甲醇溶液：200mL 甲醇，溶解于800mL 水中。
高效液相色谱法测定乳制品中三聚氰胺的含量-分析设计实验方案
高效液相色谱法测定乳制品中三聚氰胺的含量实验部分高效液相色谱法（HPLC）1、试剂与材料（除非另有说明，所有试剂均为分析纯。
）1.1 甲醇：色谱纯，200ml1.2 乙腈：色谱纯,10ml1.3 乙酸铅:0.5g1.4 柠檬酸:1.0640g1.5 辛烷磺酸钠：色谱纯,0.9508g1.6 三氯乙酸：2.5g1.7 三聚氰胺：0.2500g试剂配制⏹三氯乙酸溶液（1％）：准确称取2.5g三氯乙酸用水溶解后转移至250mL容量瓶中，定容至刻度，混匀后备用。
⏹离子对试剂缓冲液：准确称取0.9508 g 辛烷磺酸钠（5mmol/L）+ 1.0640g柠檬酸（pH=3-4）用蒸馏水配制1L溶液，备用。
⏹三聚氰胺标准储备液：准确称取0.2500g（精确到0.1 mg）三聚氰胺标准品于100mL 容量瓶中，用甲醇水溶液（20%）溶解并定容至刻度，配制成浓度为2.5 mg/mL的标准储备液，低温避光保存。
2、仪器和设备2.1 高效液相色谱（HPLC）仪：配有紫外检测器或二极管阵列检测器。
2.2 分析天平：感量为0.0001 g。
2.3 离心机：转速不低于4000 r/min。
2.4 超声波水浴。
2.5 具塞塑料离心管：50mL。
3、样品处理分别称取3份5 g（精确至0.0001g）奶粉于50mL具塞塑料离心管中，各加入5mL配制好的2.5g/L的三聚氰胺溶液，编号1、2、3，往1号试管中加入20mL 三氯乙酸溶液，往2号试管中加入15mL三氯乙酸和5mL乙腈溶液，往3号试管中加入20ml乙酸铅的三氯乙酸溶液，超声提取10 min，后以4000 r/min离心10 min。
各取三支试管中上清液10mL于3个25mL容量瓶中用水定容，待测。
4、高效液相色谱测定4.1 HPLC条件a) 色谱柱：CNWSIL C18液相色谱柱（4.6×250mm，5 µm）b) 流动相：A液：0.9508 g 辛烷磺酸钠（5mmol/L）+ 1.0640 g柠檬酸（pH=3-4）用高纯水品配制1L溶液；B液：甲醇；色谱条件：30%B+70%A。
高效液相色谱法测定奶粉中三聚氰胺的含量
高效液相色谱法测定奶粉中三聚氰胺的含量姓名：班级：学号：摘要：三聚氰胺是一种低毒的化工原料，动物实验结果表明，其在动物体内代谢很快且不会存留，主要影响泌尿系统。
乳制品中添加三聚氰胺会使得食品的蛋白质测试含量偏高，从而使劣质食品通过食品检验机构的测试，就送检的奶粉样品，采用高效液相色谱法（HPLC）测定其中的三聚氰胺的含量。
关键词：三聚氰胺食品质量与安全奶粉标准依据高效液相色谱检测方法1材料与方法1.1盐酸（HCl）。
1.2盐酸苯肼（C6H8N2•HCl）。
1.3铁氰化钾（K3[Fe（CN）6]）。
1.4硫酸（H2SO4）。
1.5氢氧化钠（NaOH）。
1.6盐酸（HCl）（10+2）：量取100mL盐酸，加入20mL水中，混匀。
1.7盐酸（HCl）（1+1）：量取50mL盐酸，加入50mL水中，混匀。
1.7盐酸苯肼溶液（C6H8N2•HCl）（10g/L）：称取1.0g盐酸苯肼，加80mL水溶解，再加2mL盐酸（10+2），加水稀释至100mL，过滤，贮存于棕色瓶中。
1.8铁氰化钾溶液（K3[Fe（CN）6]）（20g/L）：称取2.0g铁氰化钾，加水溶解并稀释至100mL。
1.9硫酸（H2SO4）（1+35）：量取1mL硫酸缓慢注入35mL水中，混匀。
1.10碘标准溶液（I2）（0.1mol/L）：配制和标定按照GB/T601或购商品化标准物质。
1.11硫代硫酸钠标准滴定溶液（Na2S2O3）（0.1moL／L）：配制和标定按照GB/T601或购商品化标准物质。
1.12氢氧化钠溶液（NaOH）（40g/L）：称取4g氢氧化钠，加水溶解并定容至100mL。
1.13甲醛标准储备液（CH2O）原理：以三聚氰胺为原料制作的成型品经4%乙酸浸泡，浸泡液中三聚氰胺用高效液相色谱分离、测定，以保留时间定性、峰高或峰面积定量。
1.14 奶粉1.1 主要材料与试剂1.1.1盐酸（HCl）。
1.1.2盐酸苯肼（C6H8N2•HCl）。
高效液相色谱法测定婴幼儿奶粉中三聚氰胺检出限的确定
２ ０ ０ ８年 三鹿奶 粉 三 聚氰胺 事 件 发 生后 ， 三 聚氰 胺 问题 引起 了各 方关 注 ，给人 民生 活带 来 了巨 大影 响 。卫生 部 于
涡 旋混 合 器 ， 高速 离 心机 ； 三 聚氰 胺 标样 （ 中国标 准 物 质 中 心） ， 乙腈 （ 色谱 纯 ） ， 甲醇 （ 色谱 纯 ） ， 辛烷磺酸钠（ 色谱 级 ） ， 三氯 乙酸 （ 化学 纯 ） ， 市售 某 品牌 婴 幼儿 奶粉 。
Ｇ Ｂ ／ Ｔ ２ ２ ３ ８ ８ — ２ ０ ０ ８原 料乳 与乳 制 品 中三 聚氰 胺 检测 方 法 中 ，
流速 ： １ ｍ Ｌ ／ ｍ ｉ ｎ ， 柱温 ： ４ ０℃ ， 进样量 ： １ ０ Ｌ ， 洗 脱 条 件 ： 乙腈 ： 离子 对缓 冲液 为 １ ２： ８ ８ 。
１ ． ３ 标 准溶 液配 制 用流 动相 将 三聚氰 胺标 准储 备液 逐级 稀 释得 到浓 度 为 ０ ． ８ 、 ２ ． ０ 、 ２ ０ ． ０ 、 ４ ０ ． ０ 、 ８ ０ ． ０ ｇ ／ ｍＬ的标 准 工 作 液 ， 浓度 由低 到
宁 夏农林科技， Ｎ ｉ ｎ ｇ ｘ ｉ ａ Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ａ ｇ ｒ ｉ ． ａ ｎ ｄ Ｆ ｏ ｒ ｅ ｓ ． Ｓ ｃ ｉ ． ＆ Ｔ ｅ ｃ ｈ ． ２ ０ １ ３ ， ５ ４ （ ！ ！ 二 鱼
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高效液相色谱法测定婴幼儿奶粉中三聚氰胺检出限的确定
Ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｌ ｉ ｍｉ ｔ ｏ ｆ ｍｅ ｌ ａ ｍｉ ｎ ｅ ｉ ｎ ｉ ｎ ｆ ａ ｎ ｔ ｍｉ ｌ ｋ ｐ ｏ ｗ ｄ ｅ ｒ ｂ ｙ ＨＰ Ｌ Ｃ ｗａ ｓ ｃ ａ ｌ ｃ ｕ ｌ ａ ｔ ｅ ｄ ｔ ｈ ｒ ｏ ｕ ｇ ｈ ｔ ｈ ｅ ａ ｎ ａ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ｆ ｏ １ ２ ｓ ａ ｍｐ ｌ ｅ ｓ ． ｒ ｈ ｅ
高效液相色谱法测定乳粉中三聚氰胺的方法优化
高效腋相色谱法测定乳粉中三聚氟服的方法优化■文丨卢竹阳沈蕾陈丹莹柏宁江苏省南通市产品质量监督检验所二聚気胺含氮量高，俗称“伪蛋白”，几乎无味，微二^溶于水，可溶于甲醇、乙酸、甲醛等，经常被用作化工原料，对健康有害，我国明确规定三聚氟胺不是食品原料，也不是食品添加剂，禁止人为添加。
“三鹿奶粉”事件影响恶劣，也给食品检验机构敲响警钟，三聚氧胺参数在乳品检测中成了必检指标，研究其检测方法尤为重要。
GB/T22388-2008《原料乳与乳制品中三聚氧胺检测方法》明确规定，测定三聚気胺有三种方法，即液相色谱-质谱/质谱法、气相色谱-质谱联用法和高效液相色谱法前两种方法涉及的仪器高端精密，费用昂贵，后续维护保养较为繁琐，不具备普遍性，本文对高效液相色谱法检测乳粉中三聚氧胺的前处理和色谱条件进行了优化。
一、材料和方法1.仪器。
Agilent-1200高效液相色谱仪（VWD）,多功能氮吹仪，高速冷冻离心机，数控超声波清洗器，电子天平（I级），固相萃取联用仪，SPE小柱：Poly-Sery MCX,60mg/3mL o2.试剂。
三聚氟胺标样（1.0mg/mL）,甲醇、乙睛、正己烷均为色谱纯，柠檬酸、辛烷磺酸钠、氨水、三氯乙酸均为分析纯。
3.样品前处理。
（1）提取"准确称取lg乳粉置于50ml具塞离心管中，加入8ml三氯乙酸溶液（1%）和2ml乙睛,超声提取约lOmin,涡旋提取约lOmin,9500r/min离心8min,取上清液于50ml离心管中；残渣重复提取一次，合并两次提取液，加入10ml三氯乙酸溶液和饱和的正己烷溶液，涡旋振荡lmin,9500r/min离心6min,取下层清液，待净化.（2）净化"依次用3ml甲醇和5m冰对SPE小柱进行活化和平衡，抽至近干；将待净化的清液转至SPE小柱中，用3ml水和3ml甲醇进行淋洗，抽至近干；用6mL氨化甲醇溶液（5%）洗脱，洗脱液于5（TC氮气吹干，残留物用lml 流动相定容，涡旋混合lmin,过0.22|xm微孔水相滤膜后，供测定。
自组装微流高效液相色谱法测定奶粉中三聚氰胺
关 键词 ： 三聚氰胺； 微流高效液相； 内标法； 奶粉 中图分类 号 ： ６８ ０ ５ 文 献标志 码 ： Ａ 文章 编号 ：０８７ １（ １）３０７—４ １ —５６２ ００—０ １０ ０ ０
Ｄｅ ｅ ｍ ｉ ｔｏ ｆｍ ｅａ ｉ ｎ ｍ ｉｋ ｐｏ ｔ ｒ ｎａ ｉ ｎ ｏ ｌｍ ｎｅ ｉ ｌ ｗｄｅ ｙ ｓ ｌ ｓ ａｉ ｄ ｍ ｉｒ － ｒ ｂ ｅｆｉ ｔ ｌｅ ｃ ｏ ｎ
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自组装微流 高效 液相 色谱法
测 定 奶粉 中三 聚 河南科技学院， 河南 新 乡 ４ ３ ０ ） ５ ０ ３
摘要 ： 试验建立了微流高效液相（ 一 Ｐ Ｃ测定奶粉中三聚氰胺的方法． ＨＬ） 该方法采用自组装微流液相装置， 它
主要由一个 四通分流器 、 两根不 同内径的空 毛细管和毛细管在柱检测池组成， 可灵活调整合适的背压． 样品由超
声 离心提取， 然后加入 ｌ ％三氯乙酸沉淀蛋 白净化． 色谱条 件： 自制色谱柱 （ 有效 长度 ２ ｍ， ９ｃ 总长 ３ ． ｃ ５ ７５ ｍ， ｍ
Ｏ Ｓ 即十八烷基硅烷 ） Ｄ ； ， 流动相 为乙腈 一离子对缓 冲液， 检测波长 ２０ａ ． ３ ｍ在添加浓度为 ０１ １ ／ Ｌ的范围 ． ．ｍｇ ２ ｍ 内线性关系 良好 ， 相关系数 Ｒ为 ０９ ６ ， 回收率为 ９ ．５ 结果证明该方法简便 、 ． 平均 ９Ｏ ３ ％． ２ 快捷 、 经济， 可以作 为检测 三 聚氰胺的有效手段．
ｖ ｌｅ ｓ ｌ ｔ ｇ ａ ｐ ｉｎ ｅ ｔ ｏ ｄ ｆ ｒ ｎ ｎ ｉ ｅ ｄ ａ ｔｒｅ ｔ ａ ｉ ａｙ ｃ ｐ ｌ ｒ ｎ ｃ ｌ ｍｎ ｄ ｔｃｉ ｎ ｃ ｌ ｗ ｉｈ ｃ ｕｄ ａｖ ｐ ｉ ｉ ｐ ｌ ｃ ， ｉ ｅ ｅ ｔｉ ｓ ｉ ｍｅｅ ｍｐｙ ｃ ｐ ｌ ｒ ，ａ ｉ ａｙ ｏ － ｏｕ ｅｅ ｔ ｅ ｌ ｈ ｃ ｏ ｌ ｔｎ ａ ｗ ｄ ｌ ｌ ｏ ，
乳制品中三聚氰胺的含量的测定(高效液相色谱法)实验报告
2009级化学教育仪器化学综合性与设计性实验指导老师：曹** 2011年 5月 30号一、实验目的1．通过分析化学综合性实验、设计性实验，培养学生初步的解决分析化学实际问题的能力，培养学生的创新意识与创新能力。
2．学习查阅参考文献、综合参考资料、设计小型分析化学实验。
3．复习和巩固有关理论基础知识并用于指导实践。
4．进一步熟练掌握实验操作技术。
①实验题目：乳制品中三聚氰胺的含量的测定（高效液相色谱法）②摘要、关键词：[摘要]为建立乳制品中三聚氰胺含量的高效液相色谱测定方法, 通过超声提取, 离子交换萃取小柱净化, 结合高效液相色谱进行样品测定。
色谱条件: A液：0.9508 g 辛烷磺酸钠（5 mmol/L）+ 1.0640 g柠檬酸（pH=3-4）用高纯水品配制1L溶液；B液：甲醇；色谱条件：30%B+70%A。
色谱柱：CNWSIL C18液相色谱柱（4.6×250mm，5 µm），检测波长：239 nm结果表明: 三聚氰胺标准曲线为y = 4495951x +18978.83, 相关系数R = 0.9999693, 在0.17～110.0 mg/L范围内线性关系良好, 方法检出限为0.12 mg/L, 两个样品三个水平的加标回收率分别为96.34 % (RSD = 4.76)、84.86 % (RSD = 7.21) 、104.29 % (RSD = 7.63) 和95.31 %(RSD = 4.39) 、89.25 % (RSD = 3.88) 、92.59 % (RSD = 5.27)。
[关键词]高效液相色谱; 三聚氰胺; 乳制品③引言一、目前有关三聚氰胺在乳制品中的概述：三聚氰胺(melamine) ）（化学式：C3H6N6），俗称密胺、蛋白精，IUPAC命名为“1,3,5-三嗪-2,4,6-三氨基”，是一种重要的氮杂环有机化工原料, 通常用于塑料制品中合成树脂的生产[ 1 ] 。
分子印迹固相萃取-高效液相色谱法用于奶粉样品中痕量三聚氰胺的残留检测
２１ ０ ２年 ４月
华 中科 技 大 学 学 报 （ 学 版 ） 医
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合法依次优化致 孔剂种类 、 功能 单 体 与 模 板 分 子 之 间 的摩 尔 比 、 联 剂 的用 量 ， 到 对 三 聚氰 胺 具 有 特 异 性 识 别 能 力 和 交 得 高 吸 附 容 量 的分 子 印 迹 聚 合 物 ， ６ 粉 样 品 提 取 液 中 痕 量 三 聚 氰 胺 进 行 净 化 和 富 集 。结 果 萃 取 回 收 率 为 对 ０ｍＩ奶
分 子 印迹 固相 萃 取一 效 液 相 色谱 法留检 测 ＊
牛计伟 ， 荆 涛△， 戴 晴 ， 夏 环 ， 周 雨 笋 ， 郝巧玲 ， 周 宜开 ， 梅 素容
华 中 科 技 大 学 同济 医学 院 公 共 卫 生 学 院 环 境 医学 研 究 所 ， 育 部 环 境 与健 康 重点 实验 室 ， 汉 教 武 ４ ０ ３ ３００
摘 要 ： 的 以 三 聚 氰 胺 为 模 板 分 子 ， 备 一 系 列 三 聚 氰 胺 分 子 印 迹 聚 合 物 （ ｌｃｌｒ ｍｐｉｔｄｐ ｌｍｅｓ 目 制 ｍｏｅｕａｌ ｉ ｒ ｅ ｏｙ ｒ， ｙ ｎ ＭＩ ｓ ， ＭＩ ｓ 为 固相 萃 取 吸 附剂 ， 高 效 液 相 色谱 联 用 检 测 奶 粉 样 品 中残 留 的痕 量 三 聚 氰 胺 。方 法 Ｐ ）将 Ｐ 作 与 采 用 沉 淀 聚
８ ． ～９ ． ， ５１ ９ ７ 固相 萃 取 过 程 不但 可 以 避 免 繁 琐 的样 品浓 缩 过 程 ， 短 了 样 品前 处 理 时 间 ， 且 降 低 了 二 次 污 染 。方 缩 而
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毕业论文论文题目：高效液相色谱法测定奶粉中三聚氰胺的含量所在学院：食品工程分院专业班级：学生：指导教师：二0一五年四月目录题目 (Ⅰ)摘要及关键词 (Ⅰ)1 前言 (1)1.1 三聚氰胺 (1)1.1.1 三聚氰胺的毒性 (1)1.1.2 人体对三聚氰胺耐受标准 (1)1.1.3 三聚氰胺为何用于掺假 (2)1.2 相关标准及检测方法 (2)2.实验目的与实验原理 (3)2.1 实验目的 (3)2.2 实验原理 (3)3 设计实验具体材料和方法的操作步骤 (3)3.1 试剂与材料 (3)3.2 仪器和设备 (3)3.3 样品处理 (3)3.3.1 提取 (3)3.3.2 净化 (3)3.4 高效液相色谱测定 (4)3.4.1 HPLC条件 (4)3.4.2 标准曲线的绘制 (4)3.4.3 定量测定 (5)3.4.4 结果计算 (5)4.实验结果及分析判定 (5)4.1 实验结果 (5)4.2 结果分析判定 (5)5 结论 (5)参考文献 (7)致谢 (8)I 1高效液相色谱法测定奶粉中三聚氰胺的含量高效液相色谱法测定奶粉中三聚氰胺的含量摘要：三聚氰胺是一种低毒的化工原料。
动物实验结果表明，其在动物体内代谢很快且不会存留，主要影响泌尿系统。
乳制品中添加三聚氰胺会使得食品的蛋白质测试含量偏高，从而使劣质食品通过食品检验机构的测试。
就送检的奶粉样品，采用高效液相色谱法（HPLC）测定其中三聚氰胺的含量。
关键词：三聚氰胺；食品质量与安全；奶粉；标准依据；高效液相色谱；检测Determine the melamine contents in milk powder by HPLCAbstract：The melamine is one kind of low-toxin industrial chemicals. Animal experiments show that its metabolism in animals is quick and would not persist. Adding melamine in dairy products will cause the result of protein contents testing to be higher,by which those inferior goods can pass tests operated by Food Inspection Service.This thesis is about a determination of melamine contents by HPLC in milk power samples.Key words: melamine；Food Quality and Safety；milk；criterion HPLC；testI高效液相色谱法测定奶粉中三聚氰胺的含量1 前言进入新世纪以来，我国的奶业发展连年创造辉煌，无论是奶牛存栏头数还是总产奶量都在以惊人的速度增长。
在2000年至2007年期间，全国的奶牛存栏量增长了1.5倍，牛奶产量增长了3.3倍。
然而，当时间的指针指向2008年9月11日的那一刻，也就是从三鹿集团正是向社会承认三聚氰胺问题奶粉的那一刻起，使一个原本健康的朝阳产业转瞬间成为一个“病危患者”，业界多年创造的辉煌已成为历史。
“三聚氰胺奶粉”事件被有关媒体披露后，全社会为之震动，有人称之为“奶业地震”，更有甚者称之为食品行业的“9. 11”。
1.1 三聚氰胺三聚氰胺（英文名Melamine），是一种三嗪类含氮杂环有机化合物，重要的氮杂环有机化工原料。
简称三胺，又叫2 ,4 ,6- 三氨基-1,3,5-三嗪、1,3,5-三嗪-2,4,6-三胺、2,4,6-三氨基脲、蜜胺、三聚氰酰胺、氰脲三酰胺。
三聚氰胺性状为纯白色单斜棱晶体，无味，密度1.573g／cm3 (16℃)。
常压熔点354℃（分解）；快速加热升华，升华温度300℃。
溶于热水，水溶性 3 G/L (20 ºC)，微溶于冷水，极微溶于热乙醇，不溶于醚、苯和四氯化碳，可溶于甲醇、甲醛、乙酸、热乙二醇、甘油、吡啶等。
低毒。
在一般情况下较稳定，但在高温下可能会分解放出氰化物，分解时同时放出不支持燃烧的氮气，因此可作阻燃剂。
三聚氰胺是一种用途广泛的基本有机化工中间产品，最主要的用途是作为生产三聚氰胺甲醛树脂（MF）的原料。
三聚氰胺还可以作阻燃剂、减水剂、甲醛清洁剂等。
该树脂硬度比 1脲醛树脂高，不易燃，耐水、耐热、耐老化、耐电弧、耐化学腐蚀、有良好的绝缘性能、光泽度和机械强度，广泛运用于木材、塑料、涂料、造纸、纺织、皮革、电气、医药等行业。
1.1.1 三聚氰胺的毒性目前三聚氰胺被认为毒性轻微，大鼠口服的半数致死量大于3克/公斤体重。
据1945年的一个实验报道：将大剂量的三聚氰胺饲喂给大鼠、兔和狗后没有观察到明显的中毒现象。
动物长期摄入三聚氰胺会造成生殖、泌尿系统的损害，膀胱、肾部结石，并可进一步诱发膀胱癌。
1994年国际化学品安全规划署和欧洲联盟委员会合编的《国际化学品安全手册》第三卷和国际化学品安全卡片也只说明：长期或反复大量摄入三聚氰胺可能对肾与膀胱产生影响，导致产生结石。
1.1.2 人体对三聚氰胺耐受标准三聚氰胺是一种低毒的化工原料。
动物实验结果表明，其在动物体内代谢很快且不会存留，主要影响泌尿系统。
三聚氰胺量剂和临床疾病之间存在明显的量效关系。
三聚氰胺在婴儿体内最大耐受量为每公斤奶粉15毫克。
专家对受污染婴幼儿配方奶粉进行的风险评估显示，以体1高效液相色谱法测定奶粉中三聚氰胺的含量重7公斤的婴儿为例，假设每日摄入奶粉150克，其安全预值即最大耐受量为15毫克/公斤奶粉。
根据美国食物及药物管理局的标准，三聚氰胺每日可容忍摄入量为每日0.63毫克/公斤体重。
1.1.3 三聚氰胺为何用于掺假蛋白质主要由氨基酸组成。
在当前的食品检测当中，蛋白质的检测通常是测出食品中的含氮量，推算其中的蛋白质含量。
这种测定蛋白质含量的方法称为“凯氏定氮法”。
蛋白质平均含氮量为16％左右，而三聚氰胺的含氮量为66％左右。
因此，添加三聚氰胺会使得食品的蛋白质测试含量偏高，从而使劣质食品通过食品检验机构的测试。
据估算在植物蛋白粉和饲料中使测试蛋白质含量增加一个百分点，用三聚氰胺的花费只有真实蛋白原料的1/5。
三聚氰胺作为一种白色结晶粉末，没有什么气味和味道，所以掺杂后不易被发现。
加之目前我国食品和饲料当中蛋白质含量检测最主要办法即为来自上述的“凯氏定氮法”，此法只能测出含氮量，并不能区别饲料中有无合规添加剂或违规化学物质，由此，价廉且容易获得的三聚氰胺便可以堂而皇之地代替了真正的蛋白质而混入婴幼儿食用的配方奶粉之中。
然而，三聚氢胺本身几乎没有任何营养价值，并不能真正替代蛋白质，添加之后，只能造成蛋白质含量提高的假象，奶粉当中的营养物质含量必然大大低于正常值。
利用食品和饲料工业蛋白质含量测试方法的缺陷，三聚氰胺也常被不法商人用作食品添加剂，以提升食品检测中的蛋白质含量指标，因此三聚氰胺也被人称为“蛋白精”。
国家质检总局紧急在全国开展了婴幼儿奶粉三聚氰胺含量专项检查。
此次专项检查对其余109家企业进行了排查，共检验了这些企业的491批次产品。
阶段性检查结果显示，有22家婴幼儿奶粉生产企业的69批次产品检出了含量不同的三聚氰胺。
1.2 相关标准及检测方法针对以上事实及造成的危害，国家有关部门卫生部、质检总局、农业部、工商总局等及时作出应对措施，由中国检验检疫科学院、中国疾病预防控制中心、国家食品质量安全监督检验中心、国家乳制品质量监督检验中心等单位起草并通过对原料乳、乳制品及含乳制品中三聚氰胺含量的检测发布国家标准GB/T 22388-2008。
本标准规定了原料乳、乳制品及含乳制品中三聚氰胺的检测方法，即高效液相色谱法（HPLC）、液相色谱-质谱/质谱法（LC-MS/MS）和气相色谱联用法［包括气相色谱-质谱法（GC-MS），气相色谱-质谱/质谱法（GC-MS/MS）］。
三者均适用于原料乳、乳制品及含乳制品中三聚氰胺的定量测定。
其中，后两者还同时适用于原料乳、乳制品及含乳制品中三聚氰胺定性确证。
其定量限分别为高效液相色谱法（HPLC）2mg/kg，液相色谱-质谱/质谱法（LC-MS/MS）0.01mg/kg, 气相色谱-质谱法（GC-MS）0.05mg/kg，气相色谱-质谱/质谱法（GC-MS/MS）0.05mg/kg。
2高效液相色谱法测定奶粉中三聚氰胺的含量就送检的奶粉样品，采用高效液相色谱法（HPLC）测定其中三聚氰胺的含量，其具体过程如下：2.实验目的与实验原理2.1 实验目的测定奶粉样品中三聚氰胺的含量。
2.2 实验原理试样用三氯乙酸溶液-乙腈提取，经阳离子交换固相萃取柱净化后，用高效液相色谱测定，外标法定量。
3 设计实验具体材料和方法的操作步骤3.1 试剂与材料除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。
试剂与材料如下：（1）甲醇：色谱纯。
（2）乙腈：色谱纯。
（3）氨水：含量为25%～28%。
（4）三氯乙酸。
（5）柠檬酸。
（6）庚烷磺酸钠：色谱纯。
（7）甲醇水溶液：准确量取50mL甲醇和50mL水，混匀后备用。
（8）三氯乙酸水溶液（1%）：准确称取10g三氯乙酸于1L容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，混匀后备用。
（9）氨化甲醇溶液（5%）：准确量取5mL氨水和95mL甲醇，混匀后备用。
（10）离子对试剂缓冲液：准确称取2.10g柠檬酸和2.16g庚烷磺酸钠，加入约980mL水溶解，调节PH至3.0后，定容至1L备用。
（11）三聚氰胺标准品：CAS 108-78-01，纯度大于99.0%。
（12）三聚氰胺标准储备液：准确称取100mg（精确到0.1mg）三聚氰胺标准品于100mL 容量瓶中，用甲醇水溶液溶解并定容至刻度，配制成浓度为1mg/mL的标准储备液，于4℃避光保存。
（13）阳离子交换固相萃取柱：混合型阳离子交换固相萃取柱，基质为苯磺酸化的聚苯乙烯-二乙烯基苯高聚物，60mg，3mL。
使用前用3mL甲醇、5mL水活化。
（14）定性滤纸。
（15 ）微孔滤膜：0.2µm，有机相。
（16）氮气：纯度≥99.999%。
3.2 仪器和设备仪器和设备如下：（1）高效液相色谱（HPLC）仪：配有紫外检测器或二极管阵列检测器。
（２）分析天平：感量为0.0001g和0.01g。
（３）离心机：转速不低于4000 r/min。
（4）超声波水浴。
（5 ）固相萃取装置。
（6 ）氮气吹干仪。
（7 ）涡旋混合器。
（8）具塞塑料离心管：50mL。
3.3 样品处理3.3.1 提取称取2g（精确至0.01g）试样于50mL具塞塑料离心管中，加入15mL三氯乙酸溶液和5mL乙腈，超声提取10min后，以不低于4000 r/min转速离心10min。