促进剂组合对中国红豆杉细胞悬浮培养紫杉醇合成的影响2010

显,主要是因为Sb5子座普遍比Sb1的大。这可能是因为青山湖湿润的环境不但有利于多糖合成,也

有利于竹黄菌的生长,形成较大子座。2.9.3　不同采样点短穗竹上单个竹黄多糖的量比较:不同采样点短穗竹上生长的单个竹黄多糖与竹红菌甲素的量见表2。

表2　不同采样点短穗竹上单个竹黄多糖

与竹红菌甲素的量( x ±s ,n =3)

T able 2　Content of polysaccharide and hypocrellin A in each

S 1bambusicola strom a parasitizing at B 1densi f lo 2rum from different sampling areas ( x ±s ,n =3)编号

多糖/(mg ・个-1)

竹红菌甲素/(μg ・个-1)

Sb1 6.35±0.14Jj 310.62±0.16Cc Sb58.59±0.16Ee 9.23±0.21Ee Sb69.21±0.19Cc 8.40±0.18Ff Sb78.42±0.20Ff 9.23±0.25Ee Sb87.96±0.11Hh 10.30±0.13Dd Sb9 6.89±0.14Ii 2.62±0.05Ll Sb10 4.50±0.05Kk 6.47±0.10Ii Sb117.88±0.12Hh 6.77±0.13Hh Sb12 6.92±0.08Ii 5.31±0.10Jj Sb139.07±0.09Dd 3.22±0.07Kk Sb148.16±0.18Gg 16.60±0.29Aa Sb1512.43±0.21Aa 7.48±0.17Gg Sb16

10.25±0.23Bb 11.22±0.24Bb

3不同大写字母标注的数字表示在0.01水平差异极显著,不同小写字母标注的数字表示在0.05水平差异显著

3Data marked wit h different capital letters mean very significant

difference at 0.01level ,data marked wit h different small letters mean significant difference at 0.05level

由表2可见,除个别差异性不显著外,大多数不同采样点短穗竹上寄生的竹黄在同一时期不论是多糖还是竹红菌甲素的量均存在极显著的差异,可见

竹黄中这2种主要有效成分的量受环境的影响较大。那么不同采样点短穗竹上单个竹黄多糖与竹红菌甲素的量之间是否存在相关性,分析结果表明相关性系数R =0.143

经查阅国内外文献,未见有关竹黄菌子座多糖

量的报道。本实验分析比较了不同来源竹黄的多糖量,并进行了差异性与相关性分析,不但初步揭示了竹黄多糖的变化规律,而且为中药材竹黄的开发利用提供了一定的理论依据与指导。

在竹黄多糖的测定中,多糖的提取工艺与测定方法对结果的准确性至关重要,而对于竹黄多糖的提取与分析,很少有现成的文献可供参考,本实验经过试验摸索,筛选出了以上的工艺与方法,经验证其精密度、重现性、稳定性、回收率等均较理想,证明试验方法稳定可行。

参考文献:

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促进剂组合对中国红豆杉细胞悬浮培养紫杉醇合成的影响

李干雄1,2,张京维1,2,骆雪兰1,2,侯云屏1,2,黄巧明1,2

3

(11梅州市杉维生物医药工程研究有限公司,广东梅州　514031;21紫杉醇产业工程技术研究开发中心,广东梅州　514031)

摘　要:目的　研究中国红豆杉Tax us chinensis 细胞悬浮培养中蔗糖、柠檬酸三铵、水杨酸和氨基酸前体组合对细

胞生长和紫杉醇(taxol )积累的影响。方法　采用L 9(34

)设计试验,考察了第9天添加蔗糖(10、16、22g/L )、柠檬酸三铵(0、154、1540mg/L ),第21天添加蔗糖(20、26、0g/L )和不同时间组合添加水杨酸及氨基酸前体4个因素对红豆杉细胞悬浮培养和紫杉醇合成的影响。结果　当在细胞培养的第0天添加1167mg/L 硝酸银,第9天添加10g/L 蔗糖,第9天添加1540mg/L 柠檬酸三铵,紫杉醇达到最高,在此最优组合处理时紫杉醇质量浓度达到3912mg/L ,相对于最差组合处理的(211mg/L )时提高1817倍。结论　促进剂组合对中国红豆杉细胞悬浮培养的生长和紫杉醇的合成都有很明显的影响。

3收稿日期:2009211204

基金项目:中小企业创新基金(国防科发计字[2008]434号);山区及东西两翼技术创新项目(2007915226)

作者简介:李干雄(1972—

),男,广东省五华人,1994毕业于四川大学生物工程系微生物专业,生物技术工程师,主要从事红豆杉植物细胞大量培养生产紫杉醇的研究。Tel :(0753)2183210　Fax :(0753)2183269　E 2mail :ganxiongli @hot mail 1com