地衣芽孢杆菌对有害微生物的拮抗作用

※基础研究
食品科学
2002,Vol.23,No.8 69
苹果梨中多酚氧化酶酶反应动力学和 反应进程的研究
程建军 东北农业大学食品学院 哈尔滨 １５００３０
摘 要 本实验研究了苹果梨在不同贮藏条件下，多酚氧化酶酶活性的变化；并以酶促反应中底物的消耗量和 产物的生成量为目标，对多酚氧化酶酶反应动力学进行了研究。 关 键 词 苹果梨 多酚氧化酶 动力学 反应进程 Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｓｔｕｄｉｅｄ ｔｈｅ ｃｏｕｒｓｅ ａｎｄ ｔｈｅ ｋｉｎｅｔｉｃｓ ｏｆ ｔｈｅ ｅｎｚｙｍａｔｉｃ ａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ Ｏｘｉｄａｓｅ （ＰＰＯ） ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｆｒｏｍ Ｐｉｎｇｇｕｏｌｉ Ｐｅａｒ（Ｐｙｒｕｓ Ｐｙｒｉｆｏｌｉａ Ｎａｋａｉ）． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ Ｐｉｎｇｇｕｏｌｉ Ｐｅａｒ Ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ Ｏｘｉｄａｓｅ （ＰＰＯ） Ｋｉｎｅｔｉｃｓ Ｃｏｕｒｓｅ
人体肠道中有几种微生物对维持人体肠道生态平衡是非常 杆菌目前还很少用于生产，把它与乳酸菌、双歧杆菌、大肠杆 有益的，被广泛应用的如：乳酸杆菌、双歧杆菌［１］，地衣芽孢 菌、痢疾杆菌的相互作用进行研究。探讨了这株芽孢杆菌的作
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食品科学
※基 础 研 究
用机理和维持人体微生态平衡、清除体内废物的作用。
１ 材 料 与 方 法
１ ．１ 菌种 地衣芽孢杆菌Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ 双歧杆菌Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ 乳酸杆菌Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｅｉｊｅｒｉｎｃｋ 大肠杆菌Ｅ．ｃｏｌｉ４４８１４ 痢疾志贺菌５１５７０ 变形杆菌４９０２７ 小肠结肠炎耶尔森氏菌５２３０２ 副溶血性弧菌２０００１ 金黄色葡萄球菌２６１１１ 伤寒沙门氏菌５００８７ 乙型副伤寒沙门氏菌３２２１０（均为北京生物制品所购）
１２８ ３３０ ８０ １３５ ２８５ ８７ ９１ ２０６ １７５ １６２．７
４４ ５７ ２０９ ２５１ １４６ ９８ ３５ １１７ ３７７ １２９．４
表 ２ 定 时 取 样 计 数 痢 疾 志 贺 菌 Ｃ ｆ ｕ 值（ 时 间：ｈ ）
２ 结 果 与 讨 论
时间（h） 2 4 8 12 16 20
尽管可食性薄膜和涂膜有安全、维持或改善食品的品质等 许多优点，但在商业上应用的成果不多。因此，对薄膜组分， 制作工艺条件等因素对薄膜性能的影响需做更深入的研究，制 作出适应不同商业需求的可食性薄膜。可以说，未来的食品包 装属于可食性薄膜。
参考文献
１ Ｇｅｎｎａｄｉｏｓ Ａ， Ｗｅｌｌｅｒ Ｃ Ｌ，Ｅｄｉｂｌｅ ｆｉｌｍｓ ａｎｄ ｃｏａｔｉｎｇｓ ｆｒｏｍ ｗｈｅａｔ ａｎｄ ｃｏｒｎ ｐｒｏｔｅｉｎｓ， Ｆｏｏｄ Ｔｅｃｈ．，１９９１，４４（１０）：６３～６８． ２ Ｃｏｎｃａ，Ｋ．Ｒ．ａｎｄ Ｙａｎｇ．Ｔ．Ｃ．Ｓ． Ｅｄｉｂｌｅ Ｆｏｏｄ Ｂａｒｒｉｅｒ Ｃｏａｔｉｎｇｓ．Ｕ．Ｓ． Ａｒｍｙ ＲＤ＆Ｅ Ｃｅｎｔｅｒ．１９９３． ４５：１． ３ Ｍｕｚｚａｒｅｌｌｉ．Ｒ．Ａ，Ｉｓｏｌａｔｉ．Ａ．ａｎｄ Ｆｅｒｒｅｒｏ．Ａ． Ｃｈｉｔｏｓａｎ ｍｅｍｂｒａｎｅｓ．
２
２
各组分别无菌接种双歧杆菌、乳酸杆菌２４ｈ 培养液 １ｍｌ，再厌
氧培养 ４８ｈ 后充分摇匀、取样 １００ μ ｌ 均匀涂布在 ＢＬｂ 平板上
厌氧培养计数菌落数如表４［３～５］ 。
表 ４ 厌 氧 菌 代 谢 物 对 双 歧 杆 菌 、乳 酸 杆 菌 的 作 用
序号
Ｔ１
Ｔ２
Ｔ３
Ｄ
１
３５９
１６４
１１０
菌５２３０２、副溶血性弧菌２０００１、 金黄色葡萄球菌２６１１１、伤寒 沙门氏菌 ５００８７、乙型副伤寒沙门氏菌 ３２２１０的１２ｈ培养液１ｍｌ 和 ２ｍｌ 地衣芽孢杆菌液（０．５ ×１０８Ｃｆｕ／ｍｌ）结果见表３。
表 ３ 定 时 取 样 计 数 各 种 致 病 菌 的 Ｃｆｕ值
Ｍ 变形杆菌 小肠结肠炎耶尔森氏菌 副溶血性弧菌 金黄色葡萄球菌 伤寒沙门氏菌 乙型副伤寒沙门氏菌
６０
表 １ 定 时 取 样 计 数 大 肠 杆 菌 的 Ｃ ｆ ｕ 值（ 时 间：ｈ ）
时间（h） 0 4 8 12 16 20
D
2.66×106 9.34×106 5.38×107 4.88×108 6.58×108 7.80×108
SH1
2.66×106 7.08×106 5.00×107 4.04×108 4.02×108 4.78×106
地衣芽孢杆菌对有害微生物的拮抗作用
全艳玲 鞍山科技大学化工学院 １１４０４４
摘 要 地衣芽孢杆菌与双歧杆菌、乳酸菌、病原菌进行混合培养，发现其对病原微生物有抑菌作用，而对双歧 杆菌、乳酸菌有促菌或共生作用。 关 键 词 地衣芽孢杆菌 双歧杆菌 乳酸菌 病原微生物 Ａ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ Ｄｕｒｉｎｇ ｔｈｅ ｍｉｘｅｄ ｏｆ ｃｕｌｔｕｒｅｄ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ， Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ ， Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ Ｂｅｉｊｅｒｉｎｃｋ ａｎｄ ｐａｔｈｏｇｅｎ， ｔｈｅ ａｎｔｉｂｉｏｓｉｓ ｒｅｓｔｒａｉｎｉｎｇ ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍ ｗａｓ ｄｉｓｃｏ ｅｒｅｄ ， ｂｕｔ ｔｈｅ ｓｙｍｂｉｏｓｉｓ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ ａｎｄ Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ Ｂｅｉｊｅｒｉｎｃｋ ｗｅｒｅ ａｌｓｏ ｆｏｕｎｄ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｅｉｊｅｒｉｎｃｋ Ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍ
２．１ 实验结果，见表１、２、３、４。 ２．２ 结论
从表 １、２、３、４可以看出地衣芽孢杆菌对大肠杆菌有抑制 作用，特别对某些肠道致病菌有拮抗作用，而对厌氧的有益菌 有促菌或共生作用。这是因为其代谢产物中含有大量有机酸［６］， 这些有机酸可对大肠杆菌等肠道腐败菌产生强烈抑制作用；如 此低的氧化还原电位对需氧菌和兼性厌氧菌生长会产生不利影 响。在一定程度上可以降低病原微生物代谢速率，使其生长缓 慢甚至死亡。而对双歧杆菌有促进生长作用。
１．３．３ 实验２组（ＳＨ２组） 每瓶培养液中接种痢疾志贺菌５１５７０的１２ｈ培养液１ｍｌ和２ｍｌ
地衣芽孢杆菌液（０．５ ×１０８Ｃｆｕ／ｍｌ）结果见表２。
２ ３ ４ ５ ６ ７ ８ ９ １０ 平均值
２３２ １７９ ２６７ ２２２ １３６ ３２４ ２６６ １６６ ３４２ ２５４．７
２８３ ２３９ ３６４ １９５ １１５ ２２１ ３７９ １７７ ２１８ ２２０．７
将地衣芽孢菌的７２ｈ培养液用Ｇ６ 漏斗无菌抽滤，用滤液配
制如下几组试验培养基，（Ｔ１）：１０ ｍｌ４＊ＶＬ液＋３０ｍｌ滤液、（Ｔ２）：
１０ ｍｌ４＊ＶＬ 液 ＋１０ｍｌＨ Ｏ＋２０ｍｌ 滤液、（Ｔ３）：１０ ｍｌ４＊ＶＬ 液 ２
＋２０ｍｌＨ Ｏ＋１０ｍｌ 滤液、对照组：１０ ｍｌ４＊ＶＬ 液 ＋３０ｍｌＨ Ｏ。以上
D
4.23×106 2.40×107 1.43×108 1.53×108 1.80×108 2.37×108
SH2
4.23×106 2.13×108 8.53×108 1.27×108 1.67×108 2.07×108
１．３．４ 实验３组（ＳＨ３组） 每瓶培养液中接种变形杆菌 ４９０２７、小肠结肠炎耶尔森氏
１ ．２ 培养基 ＶＬ 肉汤培养基［２］：胰蛋白胨，氯化钠，肉浸膏，酵母膏，
琼脂１５ｇ，水１０００ ｍｌ， ｐＨ７．２￣７．４，１５磅１０ｍｉｎ。 １．３ 实验方法 １．３．１ 对照组（Ｄ组）
每瓶培养液中接种各致病菌的１２ｈ培养液１ｍｌ。 １．３．２ 实验１组（ＳＨ１组）
每瓶培养液中接种大肠杆菌的１２ｈ培养液１ｍｌ和２ｍｌ地衣芽 孢杆菌液（０．５ ×１０８Ｃｆｕ／ｍｌ）结果见表１。
※基础研究
食品科学
2002,Vol.23,No.8 67
速上升，即在高湿度条件下，薄膜很容易吸潮，从而影响薄膜 的各种性能。所以，在保存薄膜时，应当保持环境的 ＲＨ＜８０％。 如何提高其阻湿性能，扩展其应用范围，有待进一步研究
３ 结 论 与 展 望
壳聚糖的成膜性能受其浓度、干燥温度、增塑剂浓度的影 响，通过实验测定研究可得到以下结论。 ３．１ １．５％壳聚糖浓度成膜较适宜。 ３．２ 成膜温度为５５℃时成的膜机械性能较好。 ３．３ 随着甘油浓度的增加，薄膜的抗张强度下降，而透湿系 数、透气系数随之上升。 ３．４ 随着薄膜厚度的增加，透湿系数也增加。
Ｄ ２．８３×１０８ ６．０３×１０６ １．８Βιβλιοθήκη Baidu×１０８ ２．１０×１０８ ２．３０×１０８ ２．７０×１０８
ＳＨ３ ２．３０×１０８ １０．３０×１０６ ９．４７×１０７ １．６０×１０８ １．４０×１０８ １．７０×１０８
１．３．５ 实验４组
与双歧杆菌Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ培养
Ｉｏｎ ｅｘｃｈａｎｇｅ ａｎｄ ｍｅｍｂｒａｎｅｓ，１９７４， １：１９３～１９６． ４Ｗ ｏｎｇ，Ｄ．Ｗ．Ｓ，Ｃａｓｔｉｎｅａｕ，Ｆ．Ａ．Ｇｒｅｇｏｒｓｋｉ．Ｋ．Ｓ．ｅｔａ ｌ，Ｃｈｉｔｏｓａｎｌ ｉｐｉｄ ｆｉｌｍｓ：ｍｉｃｒｏｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ａｎｄ ｓｕｒｆａｃｅ ｅｎｅｒｇｙ，Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ． １９９２，４０：５４０～５４４． ５ Ｂ．Ｌ．Ｂｕｔｌｅｒ，Ｐ．Ｊ．Ｖｅｒｇａｎｏ．ｅｔ ａｌ Ｍｅｃｈａｎｉｃａｌ ａｎｄ Ｂａｒｒｉｅｒ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ｅｄｉｂｌｅ ｃｈｉｔｏｓａｎ ｆｉｌｍｓ ａｓ ｅｆｆｅｃｔｅｄ ｂｙ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｓｔｏｒ－ ａｇｅ， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｆｏｏｄ ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９６，６１（５）９５３～９５６． ６ Ｃ．Ｃａｎｅｒ，Ｐ．Ｊ．Ｖｅｒｇａｎｏ，ａｎｄ Ｊ．Ｌ．Ｗｉｌｅｓ Ｃｈｉｔｏｓａｎ ｆｉｌｍ ｍｅｃｈａｎｉｃａｌ ａｎｄ ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ａｓ ｅｆｆｅｃｔｅｄ ｂｙ ａｃｉｄ， ｐｌａｓｔｉｃｉｚｅｒ，ａｎｄ ｓｔｏｒａｇｅ， Ｊ．Ｆｏｏｄ Ｓｃｉ，１９９８，６３：１０４９～１０５３． ７ Ｈｏｓｏｋａｗａ，Ｊ．Ｎｉｓｈｉｙａｍａ Ｍ．Ｙａｓｈｉｈｏｒａ，Ｋ．ａｎｄ Ｋｕｂａ Ｔ．Ｂｉｏｄｅｇｒａｄ ａｂｌｅ ｆｉｌｍ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ｃｈｉｔｏｓａｎ ａｎｄ ｈｏｍｏｇｅｎｉｚｅｄ ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ．Ｉｎｄ． Ｅｎｇ．Ｃｈｅｍ．Ｒｅｓ．１９９０，２９：８００～８０５． ８ 余家会等．乙酰化甲壳素膜的制备及表征．第二届甲壳素化 学与应用研讨会论文集，１９９９，７４～７７． ９ 郑化等．交联壳聚糖膜的制备及性能的研究．第二届甲壳素 化学与应用研讨会论文集，１９９９，１２３～１３０． １０ 曾名勇．关于壳聚糖制备条件的研究．水产科学，１９９２，１１ （ １０）：９～１３． １１ 盛以虞，马军等．壳聚糖在过氧化氢存在下的氧化降解．中 国药科大学学报，１９９２，２３（３）：１７３～１７６． １２ Ｇｈｏｂａｄ Ｇ．Ｍａｇｈａｍｉ，Ｇｅｏｒｇｅ Ａ．Ｆ．Ｒｏｂｅｒｔｓ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｖｉｓ ｃｏｍｅｔｒｉｃ ｃｏｎｓｔａｎｔａ ｆｏｒ ｃｈｉｔｏｓａｎ，Ｍａｋｒｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ，１９８８，１８９：１９５～２００． １３ 刘建． 赵宁阳等．硬脂酸——海藻酸钠复合薄膜用作方便 面调料包装袋的研究．食品科技，１９９９，４：４４～４６Ｅ． １４ 柯林斯．Ｊ．贝勒司等编． 聚合物科学实验，科学出版社，１９８５， １５ 陶坤译． 苏联化学手册． 科学出版社，１９６３．