草莓的组织培养

草莓的组织培养

草莓( Fr agaria ananassa Duch)是蔷薇科草莓属宿根性多年生草本植物,为世界性水果,其栽培面积和产量在世界浆果类水果生产中仅次于葡萄.草莓具有适应性广、栽培容易、结果早、产量高、收益好等优点,是一种经济价值较高的天然高档食品,除供鲜食外,还可加工成罐头、酱、酒、饮料等制品,并有较高的医疗保健作用.因此,全国各地都在积极引种.

一、茎尖组织培养

1.文章概述: 何欢乐, 阳静, 蔡润, 潘俊松等人以草莓匍匐茎为材料,截取3~4cm长的顶端.在双筒解剖镜下由外向内逐层剥去幼叶,直至闪亮半圆球的顶端分生组织充分暴露出来.切取 1.0mm的茎尖接种到MS培养基（3%蔗糖,8%琼脂,pH值为5.6）上,培养容器为100ml的玻璃瓶.培养基放30~40ml/瓶.茎尖培养通常先形成愈伤组织,再长出不定芽,经不定芽增殖形成植株.

2.结论

(1) 发生途径:选生长不久的草莓茎尖——材料处理及消毒——接种——培养——继代培养——生根.

(2) 灭菌方法:自田间选取健壮草莓母株上生长充实而小叶尚为展开的匍匐茎顶端约3~4cm长的顶芽,用自来水冲洗2~3h后,在超净台上进行灭菌处理,先用小镊子将匍匐茎的外部大叶摘除,再用70%酒精快速处理30s,用饱和漂白精液浸泡15min,然后用无菌水冲洗3~5遍.

(3) 培养基: 诱导草莓茎尖成活与生长的最适培养基为+BA 0.5mg/L.

丛生芽的增殖,最优的增殖培养基以MS+BA 0.5mg/L为好.

草莓是比较容易在培养基上生根的植物,其生根不需要任何激素

刺激,只需1/2 MS 就可达到最好的生根效果.

(4) 条件:光照31.25umol/m2/s,14 h/d,温度25±2℃.

二、草莓叶片培养

草莓品种改良多采用常规杂交育种技术,由于草莓的高杂合性和多倍性,使得杂交育种工作周期长、工作量大,而且目标性状常与不良性状连锁,造成育种效率低.生物技术作为现今植物改良的有效手段极大地推动了草莓育种工作的进程.自

1990年以来关于草莓基因的研究进展很快,草莓成为继核桃、苹果之后第3个获得转基因植株的果树.为了实现基因操作、获得转基因植株,最基础的研究就是建立高效、稳定的再生体系,为后续的草莓遗传转化研究和新品种选育工作提供技术支持.目前已在丰香、全明星等很多草莓品种上建立了叶片离体再生体系.

1. 文章概述: 董莉, 晁慧娟，董清华，金宝燕，高遐虹等人以草莓( Fragaria ×ananassa Duch‘Benihoppe’)组培苗为材料进行叶片离体再生研究,建立了一个高效的叶片再生体系.暗培养10天是叶片诱导愈伤组织最适合的暗培养时间.适宜的叶片诱导愈伤培养基为MS+TDZ

2.0 mg/L +NAA 0.1 mg/L,出愈率95.0%; 适宜的愈伤诱导分化培养基为MS+TDZ 1.0 mg/L +NAA 0.1 mg/L,分化率90.0%; 最适宜的生根培养基为1/2 MS,生根率为100%.

2. 结论

（1）发生途径: 叶片愈伤组织的诱导培养——暗培养对愈伤组织的诱导——叶片不定芽的分化培养——再生植株的生根培养.

（2）灭菌方法: 1. 用自来水反复冲洗5分钟.

2. 7 5 % 乙醇消毒l分钟.

3. 2 %次氯酸钠消毒1 0分钟.

4. 1 % 氯化汞消毒1分钟.

5. 无菌蒸馏水反复漂洗5次以上。

（3）培养基: 诱导愈伤培养基和分化培养基使用MS基本培养基附加不同植物生长调节剂,并附加3%蔗糖、6 g/L琼脂;生根培养基使用MS、1/2MS（大量元素减半）附加不同植物生长调节剂,附加2%蔗糖、 6 g/L琼脂,pH5.8.

(4) 条件:培养温度(25±2)℃，光照时数每天16 h，光照强度1500~2000 lx.

三、草莓花药培养技术

1.文章概述: 瞿宏杰采取田间未脱毒草莓花药.采用花粉发育至单核靠边期的花药.通常花粉单核靠边期的草莓花蕾形态是:花萼未开放,花蕾略长于花冠或花冠刚露白,花冠白色或者淡绿且不松动,花药微黄而充实,他将采取的新鲜花药放在2－40℃的低温中储藏24小时.

2. 结论

（1）发生途径: 愈伤组织的诱导——丛芽的诱导与增殖——根的诱导——炼苗

——移栽.

（2）灭菌方法: 先用自来水将花药冲洗干净,用纱布轻轻擦干,然后用70%—75%的酒精浸润10－30 秒, 再用0.1%Hgcl浸泡15 分钟,最后用无菌水冲洗4－5 次.

（3）培养基: 诱导组织培养基:MS+BA (1.0mg/L)+NAA (0.5mg/L),MS+BA(1.0mg/L)+2,4-D(0.5mg/L)各加肌醇100mg/L,水解酪蛋白100mg/L,蔗糖30g/L,琼脂8g/L,PH5.8.

丛生增值培养基:MS+BA(0.5mg/L)+NAA(0.1mg/L). 诱导生根培养基:1/2MS+NAA((0.2mg/L),培养基各加0.3%蔗糖,0.8%琼脂, PH5.8.

(4) 条件: 培养温度25℃,光照强度1200LX,光照时间12h/d.

参考文献: 1. 草莓茎尖培养快繁体系研究.

2. 草莓叶片再生体系的建立.

3. 草莓花药培养技术.