9微生物检验质量控制.pptx
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
粪便标本
接种SS平板、麦康凯平板或中国蓝平板
血液培养
在血液增菌培养期间，应至少在24h∽48h盲目翻种一 次，以后有可疑细菌生长即刻翻种，尽早发现病原菌。
病原菌的鉴定
菌落形态观察--涂片染色镜检--生化鉴定--血清学试验 ---氧化酶试验不应在糖类发酵选择性平板上进行，
以免假阴性结果出现。 ---在肠道选择性平板上应挑取菌落进行生化反应，
试剂、培养基的质量控制
有效期 外观 性能测试 保存
各种试剂的监控菌种试剂
“x+v” 因子试剂 条
硝酸盐还原试剂 靛基质试剂 甲基红试剂 V-P试剂
流感嗜血杆菌 副流感嗜血杆 菌 嗜沫嗜血杆菌
大肠埃希菌 大肠埃希菌
大肠埃希菌
产气肠杆菌
醋酸钙不动杆菌 产气肠杆菌 产气肠杆菌 大肠埃希菌
每批，以后每次 每批，以后每天 每批，以后每周 每批，以后每周
室间质量控制评价是由实验室外部的组织或机 构对实验室进行的质量评价。
检验前的质量保证
检验前程序：又叫分析前期。
指从临床医生开医嘱开始，到分析检验程序 启动时终止的步骤。
包括
检验申请 标本的采集、运送与接收
微生物检验中的质量保证
• 人员的组织与管理 • 规范的操作规程 • 试剂 • 培养基 • 设备 • 检验过程
测定各种培养基性能的菌种
麦康凯平板 大肠埃希菌生长， 伤寒沙门菌生长，
中国蓝琼脂 大肠埃希菌 伤寒沙门菌
营养琼脂 金黄色葡萄球菌 福志贺菌
厌氧血平板 脆弱拟杆菌 产气荚膜梭菌
碱性蛋白胨水 霍乱弧菌 大肠埃希菌
红色混浊菌落 无色透明菌落 生长，蓝色菌落 生长，无色菌落 大量生长 大量生长 生长 生长，β溶血 大量生长 抑制生长
冰箱
4 ±2℃
定期清洁内部
CO2箱 厌氧箱
5-10%
淋病奈瑟氏菌检测效果
美兰或铜绿假单胞菌测试厌氧条件
生物安全柜 更换滤网，紫外线消毒性能检测（每三个月）
血液培养仪 培养瓶进行少量生长试验；瓶位定期校正
微生物鉴定仪 探测部位定期清洁；鉴定卡、条、板测试
标本检验过程的质量控制
选择合理的检验项目 选择适当的标本 正确书写检验申清单
生长
各种鉴别培养基的测试菌种
培养基
阳性对照菌
赖氨酸脱羧酶
迟缓爱德华菌
鸟氨酸脱羧酶
产气肠杆菌
精氨酸双水解酶
阴沟肠杆菌
蛋白胨水（靛基质） 大肠埃希菌
阴性对照菌
费枸橼酸杆菌 费枸橼酸杆菌 普通变形杆菌 阴沟肠杆菌
各种鉴别培养基的测试菌种
培养基
阳性对照菌
阴性对照菌
MR
大肠埃希菌
阴沟肠杆菌
V-P
阴沟肠杆菌
测定各种培养基性能的菌种
培养基
质控菌株
判定标准
羊血琼脂平板
金黄色葡萄球菌ATCC25923 生长
生长试验
大肠埃希菌ATCC25922
生长
溶血反应
肺炎链球菌ATCC19615
生长， α溶血
化脓性链球菌ATCC6305 生长，β溶血
杆菌肽敏感（纸片法） 化脓性链球菌ATCC6305
>10mm，敏感
B群链球菌
微生物检验的质量控制
温州医学院检验医学院 温州医学院附属第一医院
周铁丽
微生物检验的质量控制
质量控制（Quality control） 是临床微生物学实验室为了保证检验结果实事
求是地反映客观存在而建立的操作程序体系。 室内质量控制
室内质量控制是由实验室内部制定并实施的， 是质量保证的核心和基础。 室间质量控制评价
直接诊断
直接发现病原体
---脓、脑脊液、胸腹水等无菌部位标本
确定标本是否合格，并推测病原体
---痰液标本
发现病原体并进行初步计数
---尿液标本
为培养基和培养方法的选择提供信息
病原菌的分离培养
呼吸道标本
接种血琼脂平板、巧克力平板、麦康复凯平板和沙保弱 琼脂，并将巧克力血平板置5%-10%CO2 35℃环境中培养。
表皮葡萄球菌
氰化钾肉汤
产气肠杆菌
迟缓爱德华菌
丙二酸盐
产气肠杆菌
迟缓爱德华菌
尿素琼脂
雷极变形杆菌（快）大肠埃希菌
肺炎克雷白菌（慢）
半固体琼脂动力试验 大肠埃希菌
肺炎克雷白菌
仪器设备的质量控制
设备
控制范围
备注
高压灭菌器 121℃
定期用嗜热芽胞杆菌测试（每月）
孵育箱
35 ±1℃ 定期加水
水浴箱
37±0.5℃ 定期加水、清洁内壁
生化反应符合，血清学凝集阳性者可确认报告。
不能从选择性平板上挑取菌落进行血清学凝集，会因为交叉抗原 的存在或抗原的丢失而导致假阳性或假阴性。
每次血清凝集试验时，应用生理盐水作对照。防止粗糙型菌落造 成的假凝集
药敏试验的质量控制要点
培养基 纸片 菌量 操作 孵育：时间、温度、平板放置 结果判断 质控菌株
<10mm，耐药
Optochin敏感（纸片法） 肺炎链球菌
15∽18mm，敏感
涎链球菌
<15mm，耐药
测定各种培养基性能的菌种
巧克平板 淋病奈瑟菌
生长试验
脑膜炎奈瑟菌 流感嗜血杆菌
生长
肺炎链球菌
SS平板
鼠伤寒沙门菌 伤寒沙门菌 福志贺菌 大肠埃希菌
肠球菌
生长，黑色菌落中心 生长，无色透明菌落 生长，无色透明菌落 部分抑制生长，红色混浊菌落 部分抑制生长
常用试验、染液的推荐菌株
试验名称 阳性对照菌 阴性对照菌
血浆凝固酶试验 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌
触酶试验
金黄色葡萄球菌 肺炎链球菌
氧化酶试验
铜绿假单胞菌
大肠埃希菌
杆菌肽试验
Fra Baidu bibliotek
A群链球菌
B群链球菌
奥普托欣试验
肺炎链球菌
草绿色链球菌
革兰染液
金黄色葡萄球菌 大肠埃希菌
抗酸染液
结核分枝杆菌 混合非抗酸菌
纸片扩散法的质控菌株
–金黄色葡萄球菌ATCC25923 –大肠埃希菌ATCC25922 –大肠埃希菌ATCC35218（用于β内酰胺酶抑制剂复合制剂） –铜绿假单胞菌ATCC27853 –粪肠球菌ATCC29212 –流感嗜血杆菌（用于HTM培养基）ATCC49247、49766 –淋病奈瑟菌（用于GC琼脂）ATCC49226 –肺炎链球菌（用于5%羊血MH琼脂）ATCC49619
测定各种培养基性能的菌种
弯曲菌琼脂 TCBS平板
沙保弱琼脂 需氧血液增菌液
厌氧血液增菌液
空肠弯曲菌 大肠埃希菌 霍乱弧菌 副溶血性弧菌 白色念珠菌 大肠埃希菌 肺炎链球菌 化脓性链球菌 铜绿假单胞菌 白色念珠菌 脆弱拟杆菌
生长 部分抑制 生长，黄色菌落 生长，蓝绿色菌落 生长 部分或完全抑制 生长
大肠埃希菌
枸橼酸盐（西蒙氏）产气肠杆菌
迟缓爱德华菌
苯丙氨酸脱氨酶 雷极变形杆菌
费枸橼酸杆菌
O-F试验管
铜绿假单胞菌（氧化型）洛菲不动杆菌（不利用）
大肠埃希菌（发酵型）
硝酸盐还原
大肠埃希菌
洛菲不动杆菌
各种鉴别培养基的测试菌种
培养基
阳性对照菌
阴性对照菌
胆汁-七叶苷
粪肠球菌
化脓性链球菌
脱氧核糖核酸琼脂 粘质沙雷菌
接种SS平板、麦康凯平板或中国蓝平板
血液培养
在血液增菌培养期间，应至少在24h∽48h盲目翻种一 次，以后有可疑细菌生长即刻翻种，尽早发现病原菌。
病原菌的鉴定
菌落形态观察--涂片染色镜检--生化鉴定--血清学试验 ---氧化酶试验不应在糖类发酵选择性平板上进行，
以免假阴性结果出现。 ---在肠道选择性平板上应挑取菌落进行生化反应，
试剂、培养基的质量控制
有效期 外观 性能测试 保存
各种试剂的监控菌种试剂
“x+v” 因子试剂 条
硝酸盐还原试剂 靛基质试剂 甲基红试剂 V-P试剂
流感嗜血杆菌 副流感嗜血杆 菌 嗜沫嗜血杆菌
大肠埃希菌 大肠埃希菌
大肠埃希菌
产气肠杆菌
醋酸钙不动杆菌 产气肠杆菌 产气肠杆菌 大肠埃希菌
每批，以后每次 每批，以后每天 每批，以后每周 每批，以后每周
室间质量控制评价是由实验室外部的组织或机 构对实验室进行的质量评价。
检验前的质量保证
检验前程序：又叫分析前期。
指从临床医生开医嘱开始，到分析检验程序 启动时终止的步骤。
包括
检验申请 标本的采集、运送与接收
微生物检验中的质量保证
• 人员的组织与管理 • 规范的操作规程 • 试剂 • 培养基 • 设备 • 检验过程
测定各种培养基性能的菌种
麦康凯平板 大肠埃希菌生长， 伤寒沙门菌生长，
中国蓝琼脂 大肠埃希菌 伤寒沙门菌
营养琼脂 金黄色葡萄球菌 福志贺菌
厌氧血平板 脆弱拟杆菌 产气荚膜梭菌
碱性蛋白胨水 霍乱弧菌 大肠埃希菌
红色混浊菌落 无色透明菌落 生长，蓝色菌落 生长，无色菌落 大量生长 大量生长 生长 生长，β溶血 大量生长 抑制生长
冰箱
4 ±2℃
定期清洁内部
CO2箱 厌氧箱
5-10%
淋病奈瑟氏菌检测效果
美兰或铜绿假单胞菌测试厌氧条件
生物安全柜 更换滤网，紫外线消毒性能检测（每三个月）
血液培养仪 培养瓶进行少量生长试验；瓶位定期校正
微生物鉴定仪 探测部位定期清洁；鉴定卡、条、板测试
标本检验过程的质量控制
选择合理的检验项目 选择适当的标本 正确书写检验申清单
生长
各种鉴别培养基的测试菌种
培养基
阳性对照菌
赖氨酸脱羧酶
迟缓爱德华菌
鸟氨酸脱羧酶
产气肠杆菌
精氨酸双水解酶
阴沟肠杆菌
蛋白胨水（靛基质） 大肠埃希菌
阴性对照菌
费枸橼酸杆菌 费枸橼酸杆菌 普通变形杆菌 阴沟肠杆菌
各种鉴别培养基的测试菌种
培养基
阳性对照菌
阴性对照菌
MR
大肠埃希菌
阴沟肠杆菌
V-P
阴沟肠杆菌
测定各种培养基性能的菌种
培养基
质控菌株
判定标准
羊血琼脂平板
金黄色葡萄球菌ATCC25923 生长
生长试验
大肠埃希菌ATCC25922
生长
溶血反应
肺炎链球菌ATCC19615
生长， α溶血
化脓性链球菌ATCC6305 生长，β溶血
杆菌肽敏感（纸片法） 化脓性链球菌ATCC6305
>10mm，敏感
B群链球菌
微生物检验的质量控制
温州医学院检验医学院 温州医学院附属第一医院
周铁丽
微生物检验的质量控制
质量控制（Quality control） 是临床微生物学实验室为了保证检验结果实事
求是地反映客观存在而建立的操作程序体系。 室内质量控制
室内质量控制是由实验室内部制定并实施的， 是质量保证的核心和基础。 室间质量控制评价
直接诊断
直接发现病原体
---脓、脑脊液、胸腹水等无菌部位标本
确定标本是否合格，并推测病原体
---痰液标本
发现病原体并进行初步计数
---尿液标本
为培养基和培养方法的选择提供信息
病原菌的分离培养
呼吸道标本
接种血琼脂平板、巧克力平板、麦康复凯平板和沙保弱 琼脂，并将巧克力血平板置5%-10%CO2 35℃环境中培养。
表皮葡萄球菌
氰化钾肉汤
产气肠杆菌
迟缓爱德华菌
丙二酸盐
产气肠杆菌
迟缓爱德华菌
尿素琼脂
雷极变形杆菌（快）大肠埃希菌
肺炎克雷白菌（慢）
半固体琼脂动力试验 大肠埃希菌
肺炎克雷白菌
仪器设备的质量控制
设备
控制范围
备注
高压灭菌器 121℃
定期用嗜热芽胞杆菌测试（每月）
孵育箱
35 ±1℃ 定期加水
水浴箱
37±0.5℃ 定期加水、清洁内壁
生化反应符合，血清学凝集阳性者可确认报告。
不能从选择性平板上挑取菌落进行血清学凝集，会因为交叉抗原 的存在或抗原的丢失而导致假阳性或假阴性。
每次血清凝集试验时，应用生理盐水作对照。防止粗糙型菌落造 成的假凝集
药敏试验的质量控制要点
培养基 纸片 菌量 操作 孵育：时间、温度、平板放置 结果判断 质控菌株
<10mm，耐药
Optochin敏感（纸片法） 肺炎链球菌
15∽18mm，敏感
涎链球菌
<15mm，耐药
测定各种培养基性能的菌种
巧克平板 淋病奈瑟菌
生长试验
脑膜炎奈瑟菌 流感嗜血杆菌
生长
肺炎链球菌
SS平板
鼠伤寒沙门菌 伤寒沙门菌 福志贺菌 大肠埃希菌
肠球菌
生长，黑色菌落中心 生长，无色透明菌落 生长，无色透明菌落 部分抑制生长，红色混浊菌落 部分抑制生长
常用试验、染液的推荐菌株
试验名称 阳性对照菌 阴性对照菌
血浆凝固酶试验 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌
触酶试验
金黄色葡萄球菌 肺炎链球菌
氧化酶试验
铜绿假单胞菌
大肠埃希菌
杆菌肽试验
Fra Baidu bibliotek
A群链球菌
B群链球菌
奥普托欣试验
肺炎链球菌
草绿色链球菌
革兰染液
金黄色葡萄球菌 大肠埃希菌
抗酸染液
结核分枝杆菌 混合非抗酸菌
纸片扩散法的质控菌株
–金黄色葡萄球菌ATCC25923 –大肠埃希菌ATCC25922 –大肠埃希菌ATCC35218（用于β内酰胺酶抑制剂复合制剂） –铜绿假单胞菌ATCC27853 –粪肠球菌ATCC29212 –流感嗜血杆菌（用于HTM培养基）ATCC49247、49766 –淋病奈瑟菌（用于GC琼脂）ATCC49226 –肺炎链球菌（用于5%羊血MH琼脂）ATCC49619
测定各种培养基性能的菌种
弯曲菌琼脂 TCBS平板
沙保弱琼脂 需氧血液增菌液
厌氧血液增菌液
空肠弯曲菌 大肠埃希菌 霍乱弧菌 副溶血性弧菌 白色念珠菌 大肠埃希菌 肺炎链球菌 化脓性链球菌 铜绿假单胞菌 白色念珠菌 脆弱拟杆菌
生长 部分抑制 生长，黄色菌落 生长，蓝绿色菌落 生长 部分或完全抑制 生长
大肠埃希菌
枸橼酸盐（西蒙氏）产气肠杆菌
迟缓爱德华菌
苯丙氨酸脱氨酶 雷极变形杆菌
费枸橼酸杆菌
O-F试验管
铜绿假单胞菌（氧化型）洛菲不动杆菌（不利用）
大肠埃希菌（发酵型）
硝酸盐还原
大肠埃希菌
洛菲不动杆菌
各种鉴别培养基的测试菌种
培养基
阳性对照菌
阴性对照菌
胆汁-七叶苷
粪肠球菌
化脓性链球菌
脱氧核糖核酸琼脂 粘质沙雷菌