冷冻保存精子,把“根”留住
超低温冷冻技术应用于鱼精子保存的研究进展
超低温冷冻技术应用于鱼精子保存的研究进展鱼类是重要的水产资源之一，但其精子保存和利用面临着很多挑战。
传统的鱼精子保存技术主要是低温保存，但此方法存在精子损伤或死亡的问题。
近年来，超低温冷冻技术在鱼精子保存方面的应用成为了研究的热点，在提高精子储存质量方面取得了重要进展。
超低温冷冻技术是一种物理方法，采用低温存储方式将细胞或组织冷冻在极低温度下，从而达到保存和利用的目的。
该技术在人类和动物领域都有广泛应用，并逐渐在水产领域得到应用。
超低温冷冻技术可以减缓细胞代谢，防止细胞死亡，延长细胞储存寿命，同时保持细胞的完整性和功能。
超低温冷冻技术的成功应用离不开冷冻介质的选择和调控。
常用的冷冻介质有甘油、乳糖、蔗糖、酪蛋白和胆固醇等。
此外，添加不同的物质，如抗氧化剂、防抱死剂和增粘剂等，也可以改善鱼精子的冷冻质量。
超低温冷冻技术对鱼类精子保存的影响主要包括以下几个方面。
首先，超低温冷冻技术可以改善鱼精子的贮存稳定性。
通过优选冷冻介质和添加辅助物质，冷冻鱼精子可以达到长期储存的目的。
研究表明，用7.5%甘油作为冷冻介质可以明显提高鲤鱼、鳕鱼和金枪鱼等鱼类精子的存活率。
其次，超低温冷冻技术可以提高鱼精子的存活率。
研究表明，将鱼精子冷冻在极低温度下，保持其形态和活力，有望达到高存活率的目的。
以贤雄鱼为例，使用增粘剂和胆固醇为助剂，将鱼精子以极低温度（-196℃）保存5天，细胞存活率达到了80%以上。
第三，超低温冷冻技术可以保持鱼精子的生殖功能。
研究表明，细胞冷冻后，即使没有死亡，生殖功能也可能受到损害。
但通过超低温冷冻技术，可以在一定程度上恢复受损的生殖功能。
比如，经过良好保存的鳕鱼精子，在完成冷冻、解冻等程序后，仍可以在水中进行有效的受精作用。
总的来说，超低温冷冻技术在鱼精子保存方面的应用展现出了广泛的前景。
但是，仍需进一步探索该技术在不同鱼类的保存效果和规模化应用方面、冷冻介质和辅助物质的选择以及细胞死亡原因等方面的问题。
为什么精子和卵子冷冻多年而不失效？
为什么精子和卵子冷冻多年而不失效？我们知道，胎儿是从一枚男性的精子与一枚女性的卵子结合成受精卵后发育而来。
在现代医学中，卵子和精子实际上可以冷冻多年，并在需要时再使用它们。
那么，这要如何操作呢？由于精子和卵子从本质上来说是细胞，长时间冷冻会不会影响它们的“有效性”？如果没有，那么同样的原理和技术是否可以用来“保存”整个人体，即冷冻身体并多年后使他们复活？冷冻保存：冷冻精子和卵子无论人的身体以及生活方式多么健康，无论是男性还是女性，人的生育率都会随着年龄的增长而下降，特别是会在35-45岁的年龄时会急剧下降。
一些人可能很早就会出现这样的情况，其他人则可能晚一些。
卵子质量的下降使得染色体异常的婴儿增加，流产的风险也在增加。
这种情况的解决方法就是冷冻保存卵母细胞。
简而言之，冷冻保存是将组织冻结起来，在将来可以使用。
由于冷冻的精子细胞、卵子和胚胎不会老化，无论出现了医学问题还是其他问题，都可以维持个体的生育能力。
此外，这不是只能冷冻几年，卵子可以被长期冷冻。
这就是为什么一个女人可以冻结她的卵子，作为维持她以后生育能力的有效手段。
除此之外，当女性变老且不像她年轻时那样有活力时，冷冻多余的胚胎可以降低随后人工辅助受孕的成本。
为什么人们会选择冷冻她们的卵子？如前文所述，冷冻卵子的最大优势在于它有助于保持女性生育能力。
现在，这是优势。
但为什么人们首先选择冷冻卵子/精子？其中有这么几个原因。
第一，一些人可能因为医学原因而想推迟生育。
例如，如果一个人即将要开始化疗，他们可能想冻结他们的卵子/精子，那么将来就可以使用，因为癌症治疗可能会降低生育能力。
第二，许多人因为个人原因推迟生育。
有一个有趣的现象，在第一批“卵子冷冻”女性（从2005年到2011年）中，超过80%的人没有伴侣。
这背后也有一些原因，其中之一就是现代女性想要在生育孩子之前，更加关注于自己的事业。
卵子如何长期保持冷冻而不失其有效性？人们可能会想知道卵子/精子细胞如何能长时间冷冻而不失“有效性”。
冷冻精子：能把“根”留住么
有了冷冻精子孕育孩子现实的成功，网上盛传，可能会有一批人将从丁克一族走到冷冻一族。
因为，一些丁克，为防止年老后想要孩子时，精子质量不好，或根本就达不到授孕的精子数量了，年轻时想把自己的精子冷冻“存”起来，留条后路。
然而，采访中发现，无论是医学专家，还是伦理学家，都不赞成这种做法，因为，冷冻精子只是一种辅助生育手段，为不孕不育患者提供最后的帮助。
在精子健康时，把它们冷冻起来，以备不时之需，如同给生育买了份保险。
那这份保险靠谱吗？冷冻会不会伤害精子？带着这样的疑问，本报记者走访了北京大学人民医院相关专家。
/上海不孕不育专科医院冷冻精子不会变质？在一些人眼中，精子冷冻复苏就像自己家中冰箱中的冻肉化冻一样，而且会变质。
但事实上并非如此。
“目前精子冷冻技术已相当成熟，加入保护剂的精子一旦冷冻保存起来，它的生物活性就停止了，这意味着精子并不变质。
”北京大学人民医院生殖医学中心助理研究员梁蓉说。
临床上，将通过手淫射出的精液收集，取少量做抽样检查后，剩下的加入保护剂，超低温(零下100多℃)冷冻起来。
需要使用的时候，将储存精子的样品管于室温下浸在自来水或双蒸水中或仅仅暴露于空气之中(两者均在室温下22℃ 左右进行)进行解冻。
“加入保护剂，可防止精子细胞内水分结冰后，体积增大撑破细胞膜。
”梁蓉说，但在解冻过程中，有一半左右的精子细胞会死亡，原因很多，如精子细胞内冰晶融化时，胞内液体会和胞外保存液发生交换，如果进入细胞内的液体过多、过快，会破坏精子细胞。
“但是剩下的精子，如果活力良好，足够进行辅助生育技术。
”北京大学人民医院生殖中心主任医师沈浣说：“理论上，一个受精卵只需要一个精子，如果健康精子数量过少，可以选用显微注射法，将精子一个一个注入卵细胞中。
”理论上可无限期保存“精子冷冻后，生物活性停止，理论上可长期保存。
”梁蓉说。
伊恩·莫里斯的精子就是最典型的例子。
而且，他还不是时间最长的，2004年，英国曼彻斯特的圣玛丽医院宣布一条令医学界轰动的消息：一名32岁的母亲利用试管婴儿技术于2002年顺利生下一名男婴，而她所使用的精子，竟是已被冷冻21年——1979年当她的丈夫接受睾丸癌手术治疗前所冷藏的精子。
猪精液冷冻保存技术.
冷冻速率：30～50℃/min。解冻速率：1200～1800℃/min 冷冻 0.25mL微型细管：50℃/min、1.5％甘油浓度；
0.5mL小型细管：30℃/min、3％甘油浓度； 5mL大型细管：16℃/min 、3.3％甘油浓度。 解冻 0.25mL、0.5mL细管：50℃，12s或37℃，20s； 5mL细管：50℃，40s 5mL塑料袋：50℃，13s
初始温度为5℃，以3℃／min从5℃降到-5℃，再于-5℃条件下保持1min结晶，然后 以50℃／min从-5℃降到-140℃，然后投入液氮保存。
5)液氮熏蒸冷冻：
在广口液氮罐内，与液氮面距离5cm处，熏蒸20分钟，然后投入液氮保存。
影响猪精液冷冻效果的因素
个体的影响
个体对精液冻后效果影响极大。应用限制性片断长度多态(AFLP)分析控制 精子冷冻能力的基因，没有发现差异。差异的机制仍需要继续研究
猪精液冷冻技术操作流程
精液采集 质量检测 第一次稀释 降温、平衡
（15℃， 5℃ ）
第二次稀释 平衡 冷冻 保存
猪精液冷冻技术操作流程
颗粒法冻精的冷冻程序
1)新鲜精液在常温、等温条件下，用不含甘油的I液稀释，然后平衡0.5～2h; 2)缓慢降温至15℃维持4h，再从15℃经1h降至5℃; 3)用等温的含甘油的II液进行稀释。 4)稀释后用液氮熏蒸法制作冻精颗粒。
（用颗粒状冷冻精液给23头青年母猪输精, 48h后剖检11头,有5头受孕; 25-30d后剖检另外12头,有10头怀孕）
猪精液冷冻技术研究概况
我国从70年代初期开始对猪精液冷冻技术进行探索。 1975年西安市草滩农场试配了8头母猪 。 1977年成立了全国猪冻精协作组。 1986年冷冻精液累计配种母猪6万余头， 近几年： 甘肃农业大学 张兆旺教授 南京农业大学 芮荣教授 西北农林科技大学 李青旺教授 四川农业大学 马恒东教授 东北农业大学 刘娣教授 上海农科院 张德福研究员
实验十五精液的冷冻保存
实验十五精液的冷冻保存一.实验特点实验类型：综合型实验实验类别：专业基础课计划学时：2学时每组人数：3～4人二、实验目的要求精子具有受温度变化直接影响本身活动力和代谢能力力的生物学特性。
利用这一特性，将精液特殊处理后，保存在超低温下，精子代谢活动完全受到抑制，停止能量消耗，处于生命静止状态，长期保存下来。
一旦升温精子又能复苏并维持其原来的受精能力。
要求同学们了解精液冷冻保存的技术操作过程和精液冷冻保存原理，初步学会冷冻保存方法。
三．实验原理冰晶化是水在降温过程中的一定温度下，水分子重新按几何图形排列形成冰晶。
冰晶可造成精细胞（精子）内外的溶质浓度和渗透压增高，引起细胞内脱水、原生质变干、酸碱失去平衡、细胞膜和顶体以及整个组织和结构破坏等致死性伤害，最后导致精子发生不可逆的变化而死亡。
一般精液内含85%～95%的水分，精子内也含有及少量的水分，这些水分在降温过程中在-0.6～-60℃温度区内缓慢降温能形成冰晶。
降温速率越慢，所形成的冰晶越大，其中特别以-15～-25℃时冰晶形成最多。
在冷冻精液过程中只有避开这个有害温度区，才能得以长期保存。
快速升降温度的办法，难以达到完全玻璃化冻结条件。
为此，在制作冷冻精液的稀释液内，要加入一定量的甘油等抗冻害物质。
甘油具有极强的亲水性，可限制水分子形成冰晶而处于过冷状态，降低水形成冰晶的温度，即缩小精子的有害温度的上限。
此外甘油容易渗透精子内，可降低渗透压改变的不良影响及营养作用等，增强精子的抗冻害能力和无冻害生存环境。
精液在冷冻过程中不可避免地要形成冰晶，精子能否生存的关键在于冰晶的大小，冰晶越大对精液伤害越大，反之冰晶越小，伤害越小甚至无损伤。
因此，只要避免大冰晶形成，并使精子稳定在微晶的状态下，一旦升温精子又能复苏并维持其原来的受精能力。
四．实验材料和仪器精液、2.9%的柠檬酸钠溶液、50～100ml烧杯、滴管、10 ml试管、低温温度计、20～80目纱网、漏勺、灭菌纱布袋、液氮罐、液氮、载玻片、盖玻片、显微镜、保温箱。
对室温下储存野生动物精子的研究
对室温下储存野生动物精子的研究近年来，随着人类对于野生动物保护意识的不断提高，越来越多的科学家开始关注野生动物精子的储存技术，以期将这种宝贵的资源充分利用起来。
在与此相关的各种研究领域中，对室温下储存野生动物精子的研究也引起了广泛的关注。
野生动物种群的数量逐年减少，这是现代人类面临的一个严峻问题。
虽然采取一系列措施，如加强保护、减少猎杀等，依然难以遏止野生动物数量的下降。
因此，如何有效地保存野生动物的生殖系统是非常重要的。
传统储存方式在以前，储存野生动物精子的方法主要有两种：一种是低温冷冻，另一种是低温液氮保存。
低温冷冻是目前应用最广泛的一种保存方式。
将采集到的野生动物精子与用适当浓度的冻精液冻结在-196度的液氮中，可保存数十年甚至数百年。
其缺点是保存过程非常复杂，需要高科技的低温保存设备和昂贵的液氮。
低温液氮保存则是新一代储存方式。
采用低温液氮保存，能够更有效地保护野生动物精子的质量和数量。
虽然对设备要求更高，但应用前景更广泛。
室温储存方式然而，随着科技的发展，对室温储存野生动物精子的研究也越来越多。
很多人认为，野生动物精子的保存还可以通过室温储存等方法来完成，从而大大降低保存成本。
在室温储存野生动物精子的过程中，最主要的技术手段是防干燥。
只要能够保证防干燥，在适当的情况下，野生动物精子依然可以很好地保存。
比如，它可以被保存数个小时，或者是几天，整个过程保持在室温下。
但是，室温环境下精子的寿命通常只有数小时，即使有一些特殊例外。
室温储存技术的应用室温储存野生动物精子的技术应用存在几个局限性。
首先，它不能不用移植同时储存多个物种的野生动物精子，因为不同物种需要不同的室温或湿度要求。
其次，野生动物精子部分的储存时间很短，因此适用于一些突发事件的情况，如研究中心的紧急物资缺乏，或者是传染病爆发等。
室温保存野生动物精子也有一些优点。
比如，它能够更有效地保护野生动物精子的质量和数量。
同时，由于不需要动用冷冻或液氮设备，所以它的成本相对较低。
精子冷冻贮存
精子冷冻贮存6.1 引言精子冷冻保存是男科实验室工作中的一个重要组成部分，特别对不孕不育门诊的男科实验室来说。
从19世纪40年代末起，人类就开始研究精子低温生物学。
发现甘油能保护精子免受冷冻损伤，可以将人类精子冷藏在–79℃的干冰上(Polge et al., 1949; Bunge &herman, 1953; Bunge et al., 1954)。
随着液氮广泛应用，人类精子冷冻贮存技术取得快速发展，在许多国家建立起商业用途的精子库和国际间合作服务项目(Perloff et al., 1964; David et al., 1980; Clarke et al., 1997; Leibo et al., 2002)。
由于采用不同的冷冻保护剂和不同冷冻程序，出现许多冷冻贮存实验设计方案。
冻融后细胞存活率主要取决于细胞内冰晶形成量能降低至何种程度，通过选择恰当的冷冻保护剂和采用最适冷冻速率和复融速率来减少细胞内水形成冰晶提高细胞的存活率(Sherman, 1990; Keel & Webster, 1993; Watson, 1995)。
特别在复融过程中，当精子处于–130℃（玻璃化转化状态的关键温度）以上时间太长，细胞内有害的冰晶增多发生重结晶。
人类精子能够耐受一定范围内的冷冻和复融率。
它们对快速冷冻（冷体克）产生损伤不敏感，主要原因可能是精子细胞膜中脂质双分子层结构的不饱和脂肪酸增加细胞膜流动性。
而且因为细胞内水分含量少（约为50%），精子比其它细胞更能耐受低温导致损伤。
但是低温仍对精子功能仍产生不良影响，特别是对精子活力影响比较大。
一般而言，只有大约50%的活动精子能在冻存后复苏保持活力(Keel & Webster, 1993)。
优化精子冷冻保存方法减低对活动精子的损害从而提高妊娠率(Woodset al., 2004)。
影响供精人工授精的妊娠率的因素包括复融后精子质量、人工授精的时机，而最为关键的是受方因素如年龄，前次供精妊娠情况以及与排卵、子宫输卵管相关疾病(Le Lannou & Lansac, 1993)。
精液的冷冻保存word版本
Y为每ml原精液中呈直线前进运动总精子数 M为冷冻精液解冻后预测精子活力 Z为每头份冷冻精液要求最低应含有直线前进运动精子数 V为冷冻精液剂型容量
由于细管型冷冻精液的容量为0.25或0.5ml，因此稀释倍数较低。而颗粒型冷冻精液 前后需经两次稀释(冷冻稀释和解冻稀释)，每头份剂量为1.5～2.0ml，因此稀释倍数也 就较高。
精液的冷精液冷冻保存的方法，
要求学会： • 1、稀释液和解冻液的配制方法； • 2、精液的稀释、降温、平衡及制冻的技术； • 3、冷冻精液的解冻技术。
• 二、实验材料：公猪精液、公牛精液、新鲜牛奶、新
鲜鸡蛋、葡萄糖、蔗糖、甘油、柠檬酸钠（二水）、蒸馏 水、量筒、玻璃注射器、烧杯、三角烧瓶、滴管、冰壶、 保温杯或小液氮罐或泡沫盒、冰、液氮、0.25mL塑料吸管、 冷冻架、温度计、水盆、纱布、棉花，抹镜纸、75%精棉 球、镊子、捞筛、液氮罐、载玻片、小玻棒、石腊油、显 微镜、水浴锅、铝锅、电炉、标记笔等。
• 4、制冻
• （1）将保温杯或冰壶用小量液氮预冷2min，然后装入液 氮约7成满，并将制冻用的吊盆平稳地固定于离液氮面约 1～1.5cm处，加盖预冷2min。
• （2）揭开壶盖，用滴管吸取平衡过的稀释精液，迅速滴 在吊盆的凹槽内，每滴约lmL。滴完，加盖l～2min，然后 揭开壶盖，当精液完全冻结，并发出“喳喳”声时，即可 铲脱并倒入液氮内进行冷冻保存。
THANK YOU FOR YOUR
（2）解冻液的配制 用天秤分别称取葡萄糖1.5g、柠檬酸钠（二水）0.75g置于
干净的烧杯中，再加蒸馏水50mL，加盖隔水煮沸消毒10min， 取出冷却后，加入安那咖注射液1ml便成解冻液。
• 2、精液的稀释
精子保存操作规程
精子保存操作规程
《精子保存操作规程》
一、目的
为了确保精子保存工作的顺利进行，保证精子质量，制定本规程。
二、适用范围
本规程适用于所有精子保存工作。
三、工作流程
1. 取样：精子保存前，需先进行取样，确保精子的质量和数量。
2. 加工：将取样得到的精子进行加工处理，包括冷冻、保存、标注等操作。
3. 存储：存储精子时，需保证存储环境的稳定和温度的恒定。
4. 管理：对存储精子的信息进行记录和管理，确保精子的跟踪和管理。
5. 检测：定期对存储的精子进行检测，保证其质量。
四、责任分工
1. 取样负责人：负责取样工作，确保取得高质量的精子样本。
2. 加工负责人：负责精子加工处理工作，确保精子的存储质量。
3. 存储负责人：负责存储环境的维护和管理，保证其稳定性。
4. 管理负责人：负责精子信息的记录和管理，确保其跟踪和管理。
5. 检测负责人：负责定期检测存储的精子样本，确保其质量。
五、注意事项
1. 对精子的取样、加工、存储等操作均需在无菌条件下进行，避免外界污染。
2. 存储精子时，需保证存储温度的稳定，避免因温度变化而影响精子质量。
3. 对存储的精子信息需进行详细记录，包括取样时间、处理方法、存储温度等。
4. 如发现存储的精子质量出现异常，需要及时通知相关负责人进行处理。
六、附则
本规程自发布之日起生效，如有需要修改，需经过相关负责人和主管部门的审批。
以上为《精子保存操作规程》，希望所有工作人员能严格按照规程进行操作，确保精子保存工作的顺利进行。
冷冻精子、卵子，提前保存生育力
冷冻精子、卵子，提前保存生育力阳光一生，将陪你度过你健康、阳光、快乐人生的每一天前不久，据外媒报道，Facebook宣布，为公司女性员工增加一项新的福利，免费冷冻卵子，旨在帮助那些有意把精力放在工作上而又想不影响今后生育孩子的女性。
同时，苹果也计划向女员工提供该福利。
这就涉及到一个问题，即生育力的保存。
卵子冷冻刚刚开始，技术还不成熟人的生育能力是有限的，尤其是对于女性而言。
在某些意外的情况下，生育力还可能会被无情的缩短或终止。
卵子或精子的冷冻即是生育力保存的一种方法。
世界上第一家卵子库已经在美国芝加哥威斯康辛大学医学院建立。
我国目前虽然还没有卵子库，但卵子冷冻技术却并不落后于国外同行的脚步。
除在试管婴儿治疗中的卵子冷冻外，各大生殖中心也已开展，或准备开展自卵冷冻“业务”。
卵子冷冻无疑为那些有可能遭遇生育障碍的人提供了一份“平安”保险。
事实上，卵子冷冻在许多胚胎冷冻被禁止的国家成为生育能力保存的手段之一。
尽管这份保险姗姗来迟，尽管还有许多不尽人意的地方。
卵母细胞脆弱冷冻及复苏伤害较大任何医疗措施都是有风险的，冷冻卵子同样不能例外。
相对于胚胎冷冻技术，卵子冻存技术还不理想，这主要是由于人类卵母细胞较大且脆弱，冷冻与复苏都会对其带来很大伤害，从而降低了受孕成功率。
另外，用冷冻卵子获得的后代的健康，尚缺乏远期观察。
卵子不像精子那样容易获得，需要经阴道穿刺取卵，这就存在一定的手术风险。
为获得较多的卵子，取卵前还需要超促排卵治疗，用药过程中有可能发生与促排卵有关的并发症，如卵巢过度刺激综合征等等。
如上所述，卵子冷冻尽管是女性生育力保存的重要手段，但与我们的期望还有差距。
尤其是对于那些想推迟生育年龄，盲目将卵冷冻，以为想用时就能心想事成的女性朋友。
如果说，冷冻卵子可以规避以后不能生育的风险，那这种风险的规避也是有限的。
因此辅助生殖专家不提倡那种没有任何医疗指征，仅仅为了暂时不生育就盲目将卵冷冻的做法。
什么年龄干什么事，这句话是有一定道理的，最起码没有违背人类发展的自然规律。
鸡精液冷冻技术操作规程
鸡精液冷冻技术规程1范围本文件规定了鸡精液冷冻的器具清洗与消毒，精液采集、稀释（I液）与质量检测，冷冻保护液（11液）添加与细管精液制作，细管冷冻，细管解冻及活力检测，离心去甘油（11I液、IV液），输精和冷冻精液受精率检测，细管冷冻精液的保存等内容。
本文件适用于长期超低温冷冻保存的鸡精液细管精液制作。
2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。
其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
牛冷冻精液包装、标签、储存和运输GB/T30396牛冷冻精液生产技术规程NY/T1234家禽精液品质检测方法NY/T40473术语和定义下列术语和定义适用于本文件。
4器具清洗与消毒重复使用的器皿，使用后立即用清水浸泡，其它操作按NY/T1234的规定执行。
5精液采集、稀释（I液）与质量检测5.1提前2h将用到的稀释液，从冷冻室置入冷藏室。
5.2采用背腹部联合按摩双人或单人采精法，手握预热含有0.2mL左右第一步稀释液（简称“液”）的5mL离心管采集单只公鸡精液，轻轻混匀后，置于2°C~5°C冷藏箱中（可以用冰水混合物）。
依次采集完所有公鸡精液后，立即运输到实验室。
5.3将稀释后精液转移至2C~5°C冷藏箱，从第一步稀释后冷藏计时约30min。
同时取10μL精液在32℃视屏恒温显微镜下观察，活力≥0∙7（评定依据见附录C）,密度≥1.5χl0t7mL用于精液冷冻，眼观密度评定见附录C。
一般稀释比例为原精与稀释液1：1,如果密度太高则再利用等温I液进行适当稀释。
5.4如果远距离运输原精制作冻精，用I液等比稀释后存放于2C~5C冷藏箱，应在4h内进行冻精制作。
6冷冻保护液（11液）添加与细管精液制作6.1将已预冷或现配的第二步稀释液即冷冻保护液（简称“II”液），按精液与稀释液比例1：1（含甘油浓度为12%）或者1：0.5（含甘油浓度为18%）,加入到第一次稀释平衡后的精液中，甘油终浓度为6%,并在2C~5C条件下平衡IOmin。
精液冷冻技术
Wolley等人的研究显示，超微结构的变化是发 生在融化期间或融化之后
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精液冷冻的原理（四）
三、精液冷冻的基本原理
冷冻损伤是肯定的 在两种损伤之间寻找平衡点，即最佳的降温速率 使两种损伤的总和达到最小，得到最大的冷冻生存率 实现起来非常困难 冷冻保护剂的出现是一大突破
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5.6
8.0
754
338
6.4
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影响精液冷冻质量的因素
关键因素：冷冻程序、冷冻保护剂 其他因素：
禁欲时间：３-５天 精液取出至冷冻时间：１小时之内 冷冻保护剂的添加方式：室温，缓慢添加 复温方式与时间：３７ ℃水浴１０分钟 精液分析的标准化
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精液冷冻技术的新进展 ---玻璃化冷冻（一）
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冷冻保护剂的种类与配制（二）
二、甘油-卵黄-枸橼酸钠型冷冻保护剂的配制
冷冻保护剂配方(总量=20ml)
CPM：SEMEN 甘油(ml) 卵黄(ml) 枸椽酸钠(mg) 葡萄糖(mg) 纯水(ml)
1：1
2.8
4.0 377
169
13.2
1：2
4.2
6.0 565
250
9.8
1：3
研究方向： 寻找容易实现玻璃化且对精子损伤小的保护剂
设法提高冷却速率
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玻璃化：液体转变为非晶态（玻璃态）的固化过程 优点：快速冷冻，不形成冰晶 实现玻璃化的途径：极大提高冷却速率、增加溶液浓度 技术上的难点：
很难达到实现玻璃化的高冷却速率 添加高浓度冷冻保护剂可降低玻璃化所需的冷却速率， 伴随对精子损害的增加
猪精液冷冻技术
猪精液冷冻技术广东畜牧兽医科技2010年(第35卷)第4期畜牧技术?21?猪精液冷冻技术李志鹏,陈兴宏,张静(广东宝兴农牧科技有限公司,广东兴宁514571)中图分类号:S814.3文献标识码:A文章编号:1005—8567(2010)04—0021—03 精液冷冻保存技术(Semenfreezing)是将精液特殊处理后,通过液氮(-196℃),干冰(-79℃)或其它冷源冷冻,超低温保存,使精液达到长期保存.精液冷冻保存技术的主要原理是精子在冷冻状态下,代谢几乎停止,生命保持相对静止状态,升温后又能复苏而不失去受精能力.精液冷冻保存技术解决了精液难以长期保存的问题,其优点为:①使精液不受时间,地域和种畜生命限制,便于开展省际,国际间运输和品种交流,极大地提高优良公畜利用率,加速品种育成和改良;②引进国外高性能公猪冻精取代引进活体公猪,可节省外汇支出;③对优良种畜在短期进行后裔测定,保留和恢复某一品种或个体优良遗传特性;④冷冻精液通过后裔测定或疾病检测,保障遗传进展的稳定和生物安全;⑤建立基因库,保护地方品种和珍稀濒危品种资源.因此具有重要的应用潜力和广阔的应用前景[].1猪精液冷冻保存技术研究简况Ivanov在1926—1927年首次尝试进行猪冷冻精液保存技术研究及冻精人工授精,之后,Milo—vanov等在1930—1936年进行同样试验,并最早成功地配制了猪精液冷冻的稀释液(葡萄糖一硫酸盐和葡萄糖～酒石酸盐).早期的猪精液冷冻试验结果表明,冷冻后的精液中,只有一部分精子能够存活,并且冷冻保存比液态保存对猪精子的损伤更严重,因为温度下降对猪精子质膜,超微结构和生化组成造成损伤.1949年,甘油对精子的抗冻保护作用被发现,推动了猪精液冷冻保存技术发展.1956 年,Polge[31首次报道成功得到冻精人工授精出生的仔猪.1975年,Pursel发明简便的猪精液冷冻和解冻方法,并在同年报道通过对23头青年母猪进行颗粒状冷冻精液解冻后人工授精,1l头于配种后48h后剖检,配种受胎率为45.45%,另外12头于配种后25～30d后剖检,配种受胎率为收稿日期:2010—03—1683.33%.但由于受胎率和产仔数都明显低于本交,直到2000年,全世界冻精的应用估计还不到猪人工授精总量的1%[5].从外国进口的冷冻精液大多用于扩大本国猪品种的遗传资源和进行杂交改良同. 虽然猪精液冷冻保存技术发展缓慢,但国内外有关专家始终在不懈探索.随着各种新的检测手段的建立,可检测到精子细胞质膜化学组成变化,通透性改变,表面基因的不同以及各种冷冻损伤,为分析各种因素的影响提供了更确凿的科学依据. 2002年,Thurston等m分析了质膜表面基因限制性片段多态性,发现其中16个片段对冷冻结果影响较大.从而可看出个体差异对冷冻效果的影响. 2006年,Ricker等[8]用傅氏转换红外光谱仪QIR)和扫描电镜(SE检测到在低温下质膜膜相的变化.由于膜相变化,引起了膜通透性改变,活力下降,信号通路改变,直至引起细胞死亡.Brouwer等[9]监测和定位了脂质过氧化物的代谢;Fraser等[10]用改良的中性彗星实验评价DNA的损伤.DNA 的完整对于自然受精和人工授精的受精率,胚胎的正常发育,胎儿和后代的生长至关重要.2猪精子冷冻特点和冷冻机理2.1猪精子冷冻特点猪的精液与其他哺乳动物存在较大差异,其精液量大,精子对冷休克特别敏感.影响精子质膜流动性和抗冷休克能力的因素包括:精子膜上胆固醇和磷脂的比例,烃链的饱和程度,蛋白质和磷脂的比例等[11].牛精子对冷休克不敏感而猪精子对冷休克敏感,主要原因:第一,精子膜上磷脂组分,主要调节膜流动性稳态的磷脂～磷脂酰胆碱在猪精子中的含量低于牛精子:第二,精子膜上胆固醇/磷脂及胆固醇分布,猪精子胆固醇/磷脂较低,胆固醇分布量外膜大于内膜.内膜对冷休克敏感,降温过程中,膜磷脂的侧移受到限制,使膜磷脂从液晶相转为凝胶相;同时,由于膜上磷脂相变温度不同,导致膜成份侧22?畜牧技术猪精液冷冻技术一李志鹏,等移和重排,膜表面脂质分离,蛋白质不可逆凝集;另外,精子膜状态的改变导致游离Caz+从细胞外流入细胞内,刺激依赖Caz的细胞提前获能(也称假成熟)『1.此外,受猪精子遗传特点影响,冻精的体外活力和解冻后受精等能力存在个体差异性.2.2猪精子冷冻机制冷冻过程是精细胞脱水过程,此过程中细胞受到化学性和物理性损伤:第一,化学性损伤:冷冻过程中细胞外溶液形成部分冰晶,使未结冰部分形成高渗溶液,精子内水分向外渗透,导致精子脱水,淹渍而失去活力;第二,物理性损伤:冰晶对细胞膜及细胞内部结构产生机械性损伤,导致细胞死亡.冷冻过程中,细胞内形成的冰晶的大小和数量影响细胞受损伤程度,微晶状态的冰晶不会损伤细胞,而对精细胞造成物理性损伤的大冰晶会导致细胞损伤或死亡『1.3影响猪冷冻精液因素3.1稀释液和冷冻保护剂在温度变化过程中,精液对精子的保护能力是有限的.为此,进行精液冷冻保存时要配合稀释液.稀释液是精子的营养剂和保护剂,通常由能量物质(糖类),低温保护剂(蛋白质,脂蛋白等),防冻保护剂(甘油,二甲基亚砜等),添加剂(十二烷基硫酸酯等),维持渗透压物质(柠檬酸钠,Tris等)和抗菌素(青霉素,链霉素等)组成.(1)糖类和缓冲物质:稀释液中使用的糖类主要有葡萄糖,果糖,乳糖.胡健宏等n4发现,在传统Tris一柠檬酸一葡萄糖稀释液基础上添加25%海藻糖,能显着(P<O.05)改善和提高猪精液的冷冻效果,解冻后猪精子活力,活率,线粒体活性,质膜以及顶体完整性分别提高41.38%,46.34%,44.56%,43.51%和64.09%.(2)卵黄:卵黄中保护精予的有效成分是低密度脂蛋白(LDL).保护作用机制存在三组假说.一种假说认为LDL与精子膜结合通过稳定膜而起保护作用.另一种假说认为LDL中的磷脂通过在精子表面形成一层保护膜或者替换在冷冻过程中丢失的膜磷脂保护精子.第三种假想是LDL与精浆中的有害阳离子肽类竞争结合精子膜而发挥保护作用[15].(3)甘油:是精液冷冻过程中最重要和最常用的冷冻保护剂,冷冻过程中,精细胞主要受到冰晶的物理和化学损伤使精细胞处于脱水状态,导致细胞死亡,甘油的理化特性使其能减少冰晶对细胞的损伤.但甘油对精子有毒害作用,所以甘油添加浓度,添加温度和平衡时间直接影响猪精子冷冻后的存活率.2006年,姜兴刚等[1圈研究表明添加2%和4%甘油对猪精子冷冻保护作用显着(P<0.05) 高于添加6%和8%甘油组.1996年,Fiser等?刀对保存在0.5mL细管中的猪精液用不同甘油浓度(0～6%)和不同平衡时间进行研究,结果表明:在5℃下平衡4h后进行冷冻,解冻后精子活率和活动精子的顶体完整率最高.(4)其他添加物质:为了提高猪精液的冷冻效果,研究者尝试在稀释液中添加各类物质以改善精子外环境的理化特性,提高冻精解冻后受精率.常用的添加物有十二烷基硫酸酯及其类似物,2一羟脯氨酰一一环化糊精,透明质酸,N一乙酰基-D-葡糖胺,a一维生素等.李青旺等踟在猪精液冷冻稀释液中添加400mg/L安钠咖,精子冻后活率和生存指数显着高于对照和添加VC两组(P<O.01). 3-2精液平衡2006年,姜兴刚等[16]研究表明平衡时间为60min和90min时,精子活力显着[1高于平衡时间为0,30min和120min组,且60min组精子活力最高.3.3冷冻目前,猪精液冷冻的方法基本有两种,即Beltsville和Westendorf法.前者是将富含精子的部分采集后与精清持留2h,然后离心, 降温3h后在干冰上制成0.15～0.20mL的颗粒冻精;后者是将精液按1:2稀释,然后在稀释液中降温,最后制备成细管冻精.后来研究者根据研究结果对细管冻精进行了改进,如2mL细管冻精,5 mL塑料袋和5mL大管等剂型.Fiser等n1996年对猪精液的研究中表明甘油浓度和冷冻速度之间的相互影响非常重要.他们对冷冻速度从1℃/min到1500℃/min的范围对猪精子存活曲线进行了研究,发现降低甘油浓度可获得较好的冷冻速度.有效的冷冻需达到三个因素的最佳组合:甘油浓度,冷冻速率和解冻速率,而这三个因素都与冷冻分装的细管型号有关. 1995,PurselV等[1町研究表明,不同剂型最佳组合分别为:0.25mL细管采用50℃/min,1.5%甘油浓度;0.5mL细管采用3O℃/min,3%甘油浓度;5 mL大型细管采用16℃/min,3.3%甘油浓度.3.4解冻解冻操作程序与冷冻过程是相对应的,解冻效果受冷冻速率影响.理论上讲,快冻应该快融,其程度视不同类型细胞而略有差异.精子的冷冻损伤主要是因冷冻过程中未达到最佳冷冻猪精液冷冻技术一李志鹏,等畜牧技术?23?速率引起.以最佳冷冻速率冷冻精子,而后提高解冻速率可增加解冻后精子活率和顶体完整率.C6rdova—Izquierdo等[删研究5mL细管冷冻猪精液,两种不同解冻温度42℃,50℃经40s解冻后的精子质量.结果表明,42"C解冻后精子活率显着(P<O.05)低于50℃,二者的顶体完整率,穿卵率,单精入卵率和多精入卵率相似.3.5冷冻剂型在猪精液冷冻保存研究中,分装型号有:颗粒,5mL大型细管,5IIlL平管或平胶袋,4-5mL铝袋等.Wongtawan等]将猪精液分别用0.5mL细管,2.8mL多聚平管(4个0.7mL平管组成)冷冻猪精液,解冻后精子活力分别为0.428,0.443.5mL细管,平管和塑料袋冻精含有1头份精子数量,可减少精液分装和解冻时间,使输精操作更简便,省时,因此,值得更深入研究.3.6保存猪冷冻精液的保存必须使其全部浸入液氮中,使用过程中为了缩短冷冻精液离开液氮时间,将液氮罐放在距离解冻设备或水浴锅最近的位置.冷冻精液暴露于空气中超过5s导致精液品质下降,因此,整个过程控制在5s内.4发展前景随着分子生物学,细胞生物学及低温生物学的不断渗透与结合,猪冷冻精液保存技术将日趋成熟,生产实践中,提高优良公猪利用率,减少疾病传播,保护地方优良品种和珍稀濒危品种资源,加快育种进程,提高母猪受胎率和增加产仔数等方面具有重要意义,因此具有重要的研究价值和广阔的市场前景.参考文献:[1]周佳勃,岳奎忠,孙兴参,等.猪精液冷冻技术的研究进展[J].中国兽医,2002,22(3):295-299.[2]禚艳书,王坚,刘铁铮.猪精液冷冻保存研究进展[J].江苏农业科学,2006,(3):136-140.[3]PolgeC.Artificialinseminationinpigs[J].V etPec,1956,68:62—76.【4]PurselVG.JohnsonLA.Freezingofboarspermatozoa: Ferti1izingcapacitywithc0ncentratedsemenanda newthawingProcedure[J].JAnimalSci,1975,40,99-102. 【5]ThibierM.WagnerHG.Worldstatisticsforartifi—cialinseminationincattle[C].Proc14thIntCongr AnimReprod,2000,22:76.[6]SoedeNM.Oestrusexpressionandtimingofovulati—oninpigs[J].BritishPigScience,1998.39:187—194. 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精子冷冻贮存
精子冷冻贮存6.1 引言精子冷冻保存是男科实验室工作中的一个重要组成部分，特别对不孕不育门诊的男科实验室来说。
从19世纪40年代末起，人类就开始研究精子低温生物学。
发现甘油能保护精子免受冷冻损伤，可以将人类精子冷藏在–79℃的干冰上(Polge et al., 1949; Bunge &herman, 1953; Bunge et al., 1954)。
随着液氮广泛应用，人类精子冷冻贮存技术取得快速发展，在许多国家建立起商业用途的精子库和国际间合作服务项目(Perloff et al., 1964; David et al., 1980; Clarke et al., 1997; Leibo et al., 2002)。
由于采用不同的冷冻保护剂和不同冷冻程序，出现许多冷冻贮存实验设计方案。
冻融后细胞存活率主要取决于细胞内冰晶形成量能降低至何种程度，通过选择恰当的冷冻保护剂和采用最适冷冻速率和复融速率来减少细胞内水形成冰晶提高细胞的存活率(Sherman, 1990; Keel & Webster, 1993; Watson, 1995)。
特别在复融过程中，当精子处于–130℃（玻璃化转化状态的关键温度）以上时间太长，细胞内有害的冰晶增多发生重结晶。
人类精子能够耐受一定范围内的冷冻和复融率。
它们对快速冷冻（冷体克）产生损伤不敏感，主要原因可能是精子细胞膜中脂质双分子层结构的不饱和脂肪酸增加细胞膜流动性。
而且因为细胞内水分含量少（约为50%），精子比其它细胞更能耐受低温导致损伤。
但是低温仍对精子功能仍产生不良影响，特别是对精子活力影响比较大。
一般而言，只有大约50%的活动精子能在冻存后复苏保持活力(Keel & Webster, 1993)。
优化精子冷冻保存方法减低对活动精子的损害从而提高妊娠率(Woodset al., 2004)。
影响供精人工授精的妊娠率的因素包括复融后精子质量、人工授精的时机，而最为关键的是受方因素如年龄，前次供精妊娠情况以及与排卵、子宫输卵管相关疾病(Le Lannou & Lansac, 1993)。
猪精液保存的一些方法
140猪业科学 SWINE INDUSTRY SCIENCE 2020年37卷第1期养猪一点通EASY SKILL猪精液的保存对精液的质量维持至关重要，目前猪液态精液的保存还是主流，但在国际贸易中冻精是较受欢迎的，而近些年猪冻精发展迅速，其中的保存方法也有了一些新的尝试。
1 冻精的保存猪精子对低温比较敏感，单次用量大，而常温保存也能满足用量需求，随着牛等冻精的发展，对优良品种的需求、跨国运输的成本以及生物安全的内在要求，使得猪冻精得到一定发展。
目前，精液冷冻保存的方法有液氮保存、干冰保存。
陈明明（2016）等介绍-80 ℃超低温冰箱中冷冻保存猪精，通过添加甘氨酸7.5 mg/mL ，柠檬酸含量1.3%，甘油浓度3%为基础液进行冻存，在61 ℃解冻，存活率达到61%。
在精液的解冻与冷冻过程中，都会使精子质膜受到损伤，因此，需要在解冻过程中快速越过-60 ℃ 的和-15 ℃的的两个临界温度区。
如果解冻的温度达到69 ℃，解冻后的精子存活率会下降。
2 液态精液的保存我国规模化猪场95%以上使用液态保存精液，少部分使用冷冻精液。
在猪商品化生产中，精液液态保存的条件、保存后的使用效果是确保人工授精成功的关键技术，相对而言越新鲜的精液受胎率越高，保存2 d 的精液受胎率一般为60%～70%，到第5 d 时，分娩率降至50%（孙梦等，2019）。
研究发现，精子内钙离子浓度升高，猪精液保存的一些方法李和进1，冯佩平2（1.安徽省休宁县兽医站，安徽 黄山 242700；2.齐鲁动物保健品有限公司，山东 济南 250100）使精子获能，进而使其老化死亡，加入螯合剂后可降低精子内钙离子浓度，减少精子的死亡，乙二胺四乙酸（EDTA ）与乙二醇双（2-氨基乙基醚）四乙酸（EGTA ）都可使钙离子浓度降低，孙梦等认为EGTA 更有优势，添加3 mmol/L 则对精液保存有促进作用，进而可提高精子的受精率及胚胎发育能力。
李琦等认为，在17 ℃恒温箱保存时，筛选正常大气压、-0.02 MPa 、-0.04 MPa 、-0.08 Mpa ，研究发现，-0.04 MPa 条件可降低超氧阴离子自由基（O 2-）、H 2O 2、羟自由基（OH -），对提高猪精子活率、减少精子的呼吸代谢和降低氧化有帮助，可延长保存时间。
牛冷冻精液的保存及解冻
牛冷冻精液的保存及解冻精液冷冻保存是将精液进行特殊处理，保存在超低温下，以达到长期保存的目的。
通常采用液氮（-196℃）保存。
其最大优点是可长期保存，使用不受时间、地域以及种用雄性动物寿命的限制。
可充分提高公牛的利用率。
现将冷冻精液保存和解冻的有关技术操作介绍如下。
一、稀释液的配方：１２％的蔗糖液７５毫升、甘油５毫升、卵黄液２０毫升。
二、稀释方法：将经过检查合格的精液（活力0.6以上、精子密度中等）按１：２-５倍稀释液进行稀释，其稀释原则应保证每个颗粒精液中所含精子数不少于3000-4000万个，解冻后呈直线前进运行的精子不少于15000万个。
三、冷冻：在装有液氮的容器上置一铜纱网，距液氮面２厘米左右，使温度维持在-80℃至-110℃。
将平衡后的精液用滴管按一定量(0.1ml/滴)滴于铜纱网上，滴完最后一滴精液后，在液氮蒸汽中平衡３-５分钟后，当精液颗粒颜色变白时，立即浸入液氮，并将全部颗粒取下，收集于贮精瓶或纱网布袋内，并做好标记，然后立即移入液氮罐中贮存。
四、解冻：取预先配制好的9%的柠檬酸溶液１毫升，放入干净的小试管中，再置于40℃左右的温水杯中，迅速取颗粒冷冻精液１粒放入试管，待颗粒三分之二融化后，从水杯中取出试管迅速摇动使颗粒完全融化，接着检查精液活力，不低于0.3即为合格品。
五、重视保精、快速解冻与镜检１、根据液氮罐的性能要求，定期添加液氮罐内盛装冻精的提筒不能露在液氮面外。
２、取精时，尽可能用长镊子，切勿将提筒或纱布袋提到临界线以上处（罐顶１０厘米左右）。
３、从液氮中取出细管冻精时，要轻轻甩１-２下，将塑料细管的棉塞端放入３５-４０℃的温水中，把封口端留在水外１-1.3厘米外，待管内精液融化一半时，立即取出备用。
４、解冻后的精液镜检时，精子的活力不低于0.3方可用于输精，才能确保正常受精。
５、解冻后的精液应立即输配，不宜停放时间过长，应做到现解冻、现输精。
介绍先现在的冷冻精子技术
介绍先现在的冷冻精子技术
电影时常出现一个情节，就是冷冻人体让生命得以延续，事实上，当今的冷冻精子技术与此情节有异曲同工之效。
什么是冷冻精子技术，为什么要冷冻精子，怎么样冷冻精子，通过以下关于当今的冷冻精子技术的介绍，相信大家会有一个比较直观的了解。
当今的冷冻精子技术其实并不神秘，与冷冻人体其他组织一样的，主要手段是通过精液暴露在低温的条件下，使精子降温的手段，让细胞代谢延缓，而处于一种休眠状态，达到低温冷冻精子的目的。
当今的冷冻精子技术具体操作：负压把精液和冷冻保护剂的混合物吸入冷冻管内，然后用聚乙烯醇胶粉的化学物质封口，再放入程序降温仪内按设定好的降温程序降温，最后封闭液氮罐，就可以让精子进入冬眠状态，达到延续其生命力的目的。
精子不会变质，那么是否可以永久保存呢？受孕是否成功，不在于冷冻时间，取决于解冻后精子的活力，所以从理论来看，精子冷冻后，生物活性停止，可无限期保存。
但当今的冷冻精子技术和法规规定令这个理论受到限制。
从伦理来说，精子冷冻时间过长，容易产生辈份问题，会令通过正常生育方式而出生的人无所适从，所以出于健康因素和伦理的考虑，在国外，精子冷冻时间都有规定，比如英国人工受精和胚胎组织规定，男性冷藏精子的最高年龄是55岁，而
且精子最长冷冻时间不得超过10年。
精子冷冻复苏难道不会变质吗？恐怕不少人把精子冷冻技术看成了像自己家中冰箱中的冻肉化冻一样了。
其实现今的精子冷冻技术已相当成熟，因为加入了保护剂，可防止精子细胞内水分结冰后，体积增大撑破细胞膜，在它冷冻的时候，其生物活性就停止了，这意味着精子并不变质。
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冷冻保存精子，把“根”留住
利用“精子银行”留“根”
“不等了，我们离婚吧!”在男科门诊常常能够听到这种无奈的话语。
结婚多年的夫妻，因为丈夫的精液质量问题(无精子、少精、弱精、畸形精子等)而最终导致劳燕分飞。
“精子荒”已经成为一个严峻的社会问题。
当代男人的精子和生育能力正在经受严峻的考验，许多男人不约而同地将自救措施瞄准了“精子银行”或“精子库”，希望将自己的生育种子寄存在那里，以备不时之需。
所谓“精子银行”或“精子库”，就是指超低温冷冻存放精子的地方和设备。
精液冷冻是保存生育能力的一个有效办法，在接受具有生殖毒性药物和仪器治疗前先保存精子，已成为一种选择。
目前认为，“精子银行”主要适合于下列几类人：
第一，对于那些还没有完成“传宗接代”任务，而又处在高危因素笼罩下的男人来说，“精子银行”可以起到储备生育能力的作用，防止因为某些损害因素，包括药物、手术、损伤等造成的生育能力的永久性丧失。
例如某些即将长期接触有害睾丸健康的特殊职业(辐射和放射线等)人群，因某些疾病(恶性肿瘤)不得不使用损害
睾丸的化疗药物，不得不手术切除睾丸(睾丸肿瘤)等的
人群，可以预先冷冻精液，起到“生殖储备”的作用。
这也是使用“精子银行”的主要人群。
第二，“精子银行”可作为用于治疗男性不育症的
手段，可以多次保存少精子症者的精液，起到积少成多
的作用，最后可以“集中优势兵力”，用于人工授精，
期望一举获得成功。
另外，“精子银行”也是计划生育
措施顺利实行的有力保证。
精子冷冻安全，并非人人需要
低温冷藏的精子具有较高的质量和安全性，在零下196摄氏度的低温下可以将精子良好保存达数十年之久，且这些精子仍然具有生育能力。
在低温保存过程中，还
可以淘汰许多发育异常的精子。
一些携带传染性病原体
的献精员，例如艾滋病病毒携带者，也可以在精子冷藏
保存过程被发现而淘汰其精液。
因此，采用“精子银行”的精子是比较安全且让人放心的，获得怀孕者自然流产
机会少，出生孩子畸形者少，后代素质高。
从理论上讲，所有男人的精子都可以保存在“精子
银行”里，从而使生育能力获得万无一失的保障。
以现
今的科学技术，保存精子已经是非常简单的常规手段，
费用(每年2000～3000元)也可以承受，但并不是所有的男人都需要“精子银行”的帮助。
“精子银行”保存精子，从理论上讲，可以安全地
保存几十年，甚至数百年，但也不是万无一失的，例如(尽管可能性很小)，一旦冷冻剂液氮没有及时得到补充，弱小的精子是难以逃生的;况且经过十几年或几十年而没使用的精子，势必也要接受环境中射线和辐射的影响，
难免会发生质的改变。
没有哪位专家敢担保精子保存过
程是完全没有问题的。
保存精子之前要做的事情
由于“精子银行”保存精子的主要目的是为男性生
殖能力作储备，故在保存精子之前，男人应该做到如下
几项：
1.检查身体是否健康。
患有疾病的男人可能更加担
心自己的生育能力，选择使用“精子银行”的机会更多，需要特别当心。
因为一些疾病(尤其是泌尿生殖系统的感染性疾病、精索静脉曲张、内分泌紊乱等)，在没有治愈之前可能会损害精子的生殖能力，应该在保存精子之前
加以治愈，或至少要得到有效控制。
2.验证精液是否达标，可进行精子的质量分析。
如
果精液质量很差，保存起来的精液仍然不能真正达到生
殖储备的作用(除了希望以后进行试管婴儿技术的男人)，那还有什么用呢。
3.培育良好的精子。
由于一代精子的发生周期是3
个月，因此在计划冻存精子时，应提前3个月作准备，
包括不酗酒，不吸烟，不接触农药、汽油、重金属等危
害睾丸的因素，避免睾丸外伤，避免睾丸接受热辐射(桑拿浴、穿紧身内裤和牛仔裤、热水坐浴、射频和微波等)，综合饮食(多食用肉类、海鲜、蔬菜和水果等)，避免偏食。
4.将最好的“根”留存下来。
在留取精液前应先禁
欲3～7天，避免身体过度疲劳，保持充沛的精力和良好的情绪，并在取精前彻底清洗外生殖器官。