实验 6 植物激素的ELISA测定

实验步骤
包被（每孔100μl包被液，37℃过夜） 洗涤 加DBⅡ封板（每孔100μl ，37℃ 30min）
洗涤
加IAA标准液或样液（每孔50μl ） 加IAA抗体（每孔50μl ， 37℃ 0.5h） 洗涤 加酶标二抗（每孔100μl ， 37℃ 0.5h ）
显色（每孔100μl OPD基质液， 37℃ 15-20min） 洗涤
实验 6 植物激素的ELISA测定
试剂与仪器
• • • • • • 1、试剂 稀释缓冲液（DBⅠ、DBⅡ） 包被缓冲液（CB） 基质缓冲液（MB） 硫酸（3M） IAA包被液、标准液、兔抗IAA抗体、辣根 过氧化物酶标记抗兔Ig抗体及邻苯二胺。
试剂与仪器
• 2、仪器 • 酶联免疫读数仪、微量加样器、96孔聚苯 乙烯微孔板。
0.4434 0.5871 0.7593 0.9766 1.2371 1.3943 1.9133
0.3944 0.566 0.7725 1.0554 1.3534 1.5439 1.6603
终止反应
Βιβλιοθήκη Baidu
读数（OD490）
数据计算
• 根据标注溶液作出标注曲线（以㏒[IAA]为 横坐标、以㏑[Bi/(B0-Bi)]为纵坐标），从中 找出样液的浓度，具体参照实验指导。
IAA 浓度(ng)
OD1
OD2
OD3
100 50 25 12.5 6.25 3.125 B0
0.3405 0.5714 0.9351 1.0546 1.225 1.3074 1.7124