花生壳生产大球盖菇菌种研究

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安徽农业科学
2011 年
丝的生长情况见表 1。
表 1 不同培养基配方大球盖菇菌丝生长情况 Table 1 The growth condition of each formula spawn of Stropharia rugoso-annulata in different culture mediums
配方编号 Formula code
1 2 3 4 5
定植时间 满肩时间 满袋时间 Planting- Shoulder Bag full stock time∥d time∥d time∥d
3
8
52
3
7
43
3
8
40
3
7
38
3来自百度文库
6
36
感染率 Infection rate∥%
0 0 10 0 0
6
3
8
36
疏松，弹性较差
疏松，弹性较差
较紧实，有弹性
菌丝老化情况 Hyphae aging condition
均匀一致，无明显老化 均匀一致，无明显老化 均匀一致，无明显老化 均匀一致，无明显老化 菌袋肩处有 0 ～ 1 cm 菌丝开始发黄老化 菌袋肩处有 0 ～ 1 cm 菌丝开始发黄老化 菌袋肩处有 1 ～ 3 m 菌丝开始发黄老化 均匀一致，无明显老化
况与对照组均比较接近，感染率比对照组低，满袋时间比对 照组缩短 13 ～ 18 d，故选择 2、3、4 号 3 个配方和对照组配方 组合进入中试。 2． 2 中试 2． 2． 1 制种。中试制种情况见表 2。综合分析表 1、2 可以 看出，中试制种时大球盖菇菌丝长速、长势、老化情况和感染 率等各项指标与培养基筛选时的结果基本一致。其中 3 号 培养基 39 d 即 可 满 袋，比 对 照 短 17 d，菌 丝 日 均 长 速 达 3． 64 mm / d； 感染率只有 6% ，比对照低 17 个百分点，而且长 势较好还不易老化。所以初步确定 3 号培养基为生产大球 盖菇菌种的较优培养基。4 号培养基各项指标也较为理想， 其菌丝日均长速达 3． 75 mm / d，但物理状态稍差，容易破袋， 导致感染率较高。
作者简介 收稿日期
王怡（ 1972 － ） ，女，四川宜宾人，实验师，从事生物技术 研究，E-mail： asdfgwt@ yahoo． com． cn。* 通讯作者，副 教授，从事微生物技术与应用研究。 2011-03-21
培养基［1］为对照： 木屑 63% ，棉籽壳 20% ，麦麸 15% ，石膏粉 1% ，蔗糖 1% 。 1． 2． 2 培养基的筛选。采用 14 cm × 28 cm × 0． 05 cm 的聚 丙烯塑料袋，每个配方重复 10 袋。常规方法拌料、装袋，含 水量控制在 65% 左右，pH 自然。在 0． 145 MPa 下灭菌2． 5 h， 冷却后接种，培养箱中 25 ℃ 避光培养。 1． 2． 3 中试制种。筛选出 3 个较优培养基及对照培养基配 方按“1． 2． 2”相同的方法装袋、灭菌、接种，每个配方及对照 制备 100 袋。 1． 2． 4 发 菌。发 菌 室 内 保 持 黑 暗、通 风，发 菌 温 度 24 ～ 26 ℃ ，相对湿度 60% ～ 65% 。 ［7 －8］ 1． 2． 5 播种出菇。菌种长满后按大球盖菇常规大田阳畦栽 培进行播种出菇试验［2］，每个配方种植 50 m2 。 1． 2． 6 菌丝日均长速、感染率、菌种成活率及公顷产量的计 算。菌丝日均生长平均速度测定： 袋高 / 满肩至满袋的时间， 取平 均 值。感 染 率 测 定： 各 组 感 染 袋 数 / 各 组 总 袋 数 × 100% 。菌种成活率测定： 在每 1 m2 内随机挑选 1 个接种穴观 察是否成活，在 50 m2 中成活个数 /50 × 100% 。公顷产量测 定： 各组 50 m2 的总产量 × 140（ 在大球盖菇实际生产中每公 顷的有效种植出菇面积约为 7 000 m2 ） 。 2 结果与分析 2． 1 大球盖菇菌丝生长培养基 设计的 7 个培养基配方 中，均没有容易感染杂菌的麦麸、棉籽壳等材料。作为主要 碳、氮源的花生壳粉含量在 70% ～ 98% ，除配方 1 以外，每个 配方中均含有一定量的谷壳来增加菌袋的透气性，以满足大 球盖菇菌丝生长对较高氧气的需求。花生壳富含纤维素和 其他营养物质，其中粗蛋白 4． 8% ～ 7． 2% 、粗纤维 65． 7% ～ 79． 3% 、粗脂肪 1． 2% ～ 2． 7% 、碳水化合物 10． 6% ～ 21． 2% 、 矿物质 3． 0% ～ 4． 0% 、粗灰分 1． 9% ～ 4． 6%［5，6 －9］。所以采 用花生壳作为主要培养料也能为大球盖菇菌丝生长提供充 足的碳、氮源，同时还减少了污染的可能性。7 种培养基中菌
10
7
3
7
35
10
对照 Control
3
8
56
20
日均长速 Average daily
growth speed∥mm / d
2． 86 3． 33 3． 75 3． 87 4． 00
4． 28
4． 28
2． 50
菌袋物理状态 Physical state of bacteria bag
较紧实，有弹性 较紧实，有弹性 较紧实，有弹性 稍松，弹性一般 稍松，弹性一般
菌丝生长势 Hyphae growth potential
白色，生长良好 浓白、细密、健壮 浓白、细密、健壮 浓白、细密、健壮 白色，生长良好
白色，生长良好
浅白色，生长较弱
浓白、细密、健壮
由表 1 可知，大球盖菇菌丝在 7 种培养基内均可生长， 而且对照组生长情况正常，表明试验所用的培养条件是适 宜的。7 个培养基配方和对照组无明显差异。随着花生壳比 例的减少，菌丝日均长速增快，满袋时间缩短。其原因很可 能是大球盖菇菌丝生长对氧气的需求较高，花生壳颗粒太 小，花生壳用量太大导致培养基透气性差，而谷壳能有效地 增加培养基的透气性。对照组感染率明显高于设计的 7 个 配方，由于只做了 10 个重复，可能存在较大的偶然因素，故 不作详细分析。随着谷壳比例的增加、花生壳比例的减少， 菌丝越容易老化，菌丝长势变差。当谷壳比例超过 18% 时， 菌丝长势明显下降，也容易老化； 菌袋物理状态越差，可能是 因为粉碎过的花生壳物理性质较好，而谷壳的空隙太大，不 利于菌袋装得紧实富有弹性。综上，2、3、4 号 3 个配方菌丝 日均长速快于对照，菌丝长势、菌袋物理性状和菌丝老化情
川宜宾 644000； 3． 发酵资源与应用四川省高校重点实验室，四川宜宾 644000； 4． 五粮液集团有限公司，四川宜宾 644000）
摘要 ［目的］探讨花生壳制备大球盖菇菌种的可能性。［方法］以菌丝生长情况及菌种生产性能为评价指标，筛选以花生壳作为主要 培养料生产大球盖菇菌种的培养基。［结果］综合评价各指标，筛选到 1 种较优培养基（ 花生壳 90% 、谷壳 8% 、1% 的蔗糖、1% 的石膏 粉） 。用该培养基生产菌种，其菌丝满袋时间比国内生产最为常用的培养基缩短 19 d，感染率低 17 个百分点； 萌发定植时间、菌丝出土 时间、现蕾时间和产量均与国内最常用培养基相差不大。［结论］花生壳可以作为制备大球盖菇菌种的优良材料。 关键词 花生壳； 培养基； 大球盖菇； 菌种 中图分类号 S 646． 9 文献标识码 A 文章编号 0517 － 6611（ 2011） 20 － 12049 － 03
安徽农业科学，Journal of Anhui Agri． Sci． 2011，39（20） ：12049 － 12051
责任编辑 张扬林 责任校对 况玲玲
花生壳生产大球盖菇菌种研究
王 怡1 ，邱 芳2 ，祝晓波2 ，王 涛2，3* ，李 涛4 （ 1． 宜宾学院实验与教学资源管理中心，四川宜宾 644000； 2． 宜宾学院生工学院，四
Study on the Stropharia rugoso-annulata Spawn Cultured in Peanut Shell WANG Yi et al （ Administration Center of Experiment and teaching Resource，Yibin University ，Yibin，Sichuan 644000） Abstract ［Objective］The feasibility of the production of Stropharia rugoso-annulata spawn by means of peanut shell as basic medium was experimented．［Method］The indicators of growth and productive performance of Stropharia rugoso-annulata was synthetically evaluated for the selection of the peanut shell as main raw materials its medium．［Result］The results indicated that the optimal medium consisting of peanut shell of 80% ，hull of 16% ，wheat bran of 3% and gypsum powder of 1% was the preferable medium，under which condition，the peanut － medium，the time of full bag’s hyphae growth was shortened by 19 day and the infectious rate of it was reduced by 17% ，respectively，compared with other media in domestic production practices． However，there were no obvious differences in the time of germination，the emergence of the hyphae and the appearance of bud and yield．［Conclusion］The peanut shell could be used as good raw material in its production． Key words Peanut shell； Medium； Stropharia rugoso-annulata； Spawn
大球盖菇（ Stropharia rugoso-annulata） 是联合国粮农组 织（ FAO） 向发展中国家推荐栽培的菇类之一，其适应性强、 栽培技术简便粗放，我国南北各地均可栽培［1 －2］。但大球盖 菇制种周期过长，原种 2 ～ 3 个月也不能长满［3］，导致菌种容 易老化； 而且大球盖菇制种感染率较高，在高温高湿条件下 甚至会出现全部报废的情况［4］。上述情况严重阻碍了大球 盖菇的推广应用。我国是花生生产大国，花生产量和出口量 均居世界首位。花生壳是花生脱粒加工后的废弃物，其营养 物质非常丰富，各项物理指标和化学性能优于棉籽壳和锯木 屑［5］。同时，花生壳还可以为食用菌菌丝提供稳定而丰富的 碳、氮源，加上其容易吸收和不易感染的特点，花生壳被广泛 地用来生产多种食用菌 ［6］，但未见利用花生壳生产大球盖 菇菌种的报道。笔者开展了以花生壳为主要材料生产大球 盖菇菌种培养基的设计和筛选工作，旨在为大球盖菇菌种的 科学生产提供参考。 1 材料与方法 1． 1 材料 菌种： 大球盖菇 St0128（ 引自福建省三明真菌研 究所） 。花生壳为宜宾某花生壳加工厂粉碎的直径约 3 mm 的花生壳粉。谷壳、麦麸、棉籽壳、木屑均为市售优质产品。 1． 2 方法 1． 2． 1 培养基的设计。根据花生壳和谷壳的碳氮含量、物理 性状、化学性质和生产大球盖菇菌种常用培养基的物质组成 情况，设 计 了 7 个 培 养 基 配 方： ① 花 生 壳 98% ； ② 花 生 壳 95% ，谷壳 3% ； ③花生壳 90% ，谷壳 8% ； ④花生壳 85% ，谷 壳 13% ； ⑤ 花 生 壳 80% ，谷 壳 18% ； ⑥ 花 生 壳 72% ，谷 壳 23% ； ⑦花生壳 70% ，谷壳 28% 。每个配方另含 1% 石膏粉， 1% 蔗糖。斜面培养基为加富 PDA。以福建等省普遍采用的