细胞生物学讲义

2.进一步掌握光学显微镜的使用方法。
3.初步掌握生物装片制作方法。
4.掌握生物绘图的基本方法。
三、材料和用品
1.光学显微镜，香柏油，擦镜纸。
2.兔小脑切片，蟾蜍皮切片，狗动脉切片，蟾蜍红细胞涂片，人精虫涂片，洋葱鳞茎表皮细胞装片，人口腔黏膜上皮细胞装片。
四、内容和方法
细胞（cell）是生命活动的基本结构和功能单位。构成人体和其他高等动植物体的细胞种类繁多、形态各异。细胞形态与其功能往往相适应，如具有收缩功能的肌细胞呈条形或长梭形；运输O2和CO2的人成熟红细胞为双凹圆盘状；具有感受刺激、传导冲动功能的神经细胞一般附有长短不一的树枝状突起；精子细胞具有一根长长的鞭毛以帮助其游动等。
虽然细胞的形态、大小和功能各不相同，但在普通光学显微镜下，一般可见人体及动物细胞的基本结构可分为细胞膜（cellmembrane）、细胞质（cytoplasm）和细胞核（nucleus）三个部分。但也有例外，如哺乳类红细胞成熟时细胞核消失。植物细胞的基本结构可分为细胞壁（cell wall）、细胞膜、细胞质和细胞核四个部分。
④载物台必须保持清洁，必要时亦可用擦镜纸蘸少量清洗液擦试载物台。聚光器上的污物的去除亦可采用类似的方法。
⑤使用完毕后，玻片一律取下，套上布袋.放回原处。本桌的显微镜一律不准搬离本实验桌。若需使用者，可到该桌使用，使用后务必保持该显微镜的清洁。
如若发现违章使用情况，必追究使用者责任，本次实验作零分计。
5、细胞器的观察
⑴高尔基体
a，观察脊神经节细胞；高尔基体银染成棕色，形状为网状或块状，分布在核周围的胞质中。
b，观察河蚌外套膜表皮细胞；高尔基体染成棕色，呈网状，分布在柱状上皮的远心端（有极性分布）。
⑵线粒体
a，观察兔肝细胞：线粒体呈兰色线、粒状，均匀地分布细胞质中。
b，观察兔小肠上皮细胞：线粒体呈兰色线、粒状。分布在柱状上皮细胞的细胞质中，分布呈两极状。即主要分布在细胞的顶部和基部。
（八）实验完毕后，须摆齐药品，洗净器皿，做好本桌清洁。整个实验室清洁由本班班长安排。离开前要关好门、窗、水、电。
实验一、细胞基本形态观察及临时装片制备目的
一、课前准备
1.熟悉细胞的基本特征及类型。
2.熟悉细胞的大小、形态和数量与细胞功能间的关系。
二、目的和要求
1.掌握光镜下动、植物细wenku.baidu.com的基本形态结构。
组织切片常用的染色方法为HE染色法，是用苏木精和伊红两种染料进行染色。HE是苏木精（hematoxylin）和伊红（eosin）的首个字母缩写。苏木精是碱性染料，使细胞核染色质和胞质内的核糖体呈紫蓝色；伊红是酸性染料，使细胞质和细胞外基质中带较强碱基的蛋白质成分着红色。
观察及测量
（1）多角形细胞：观察小白鼠肝细胞，细胞呈多角形，分界不太明显，以苏木精-伊红染色，细胞质染成红色，细胞核染成兰色，测量其细胞及细胞核的长短径。
②带光源的显微镜待电压稳定后，将电源的光亮度调节器调至最小，再打开显微镜的电源，缓慢调节光亮度适当进行量度观察，观察完毕后，则先将光亮度调节器调至最小，然后再关闭显微镜电源开关。
③镜头的清洗：实验完毕后，镜头的清洗很重要。用擦镜纸蘸取少量镜头清洗液，先从镜头的中央开始清洗，轻轻旋转擦至镜头的边缘部分，如此重复2－3次。
（2）柱状细胞：细胞是高柱状或低柱状，一苏木精-伊红染色，测量细胞及细胞核的长短径。
（3）梭形细胞：河蚌外套膜表皮以内，为结缔组织，其中有横肌和纵肌切面，细胞呈梭形，染色方法同上。
（4）树枝状细胞：观察兔脊髓运动神经元，分布在脊髓灰质中，细胞突起呈树枝状。
（5）卵园形细胞：观察人血细胞涂片中的红细胞、白细胞。
（二）实验时，实验室内，一律不准高声喧哗整洁，保持室内安静，认真操作，仔细做好各项观察与记录。
（三）实验室内的一切仪器、物品必须爱护。节约材料、药品，取用时不要过量。公用物品不得独自占用，用后归还原处。
（四）注意安全。使用有毒物品、强酸、强碱等，应严格按照操作规程。易燃物品远离火源。禁止湿手拿取电源开关或接触电源。如发生触电等事故，及时报告。
1.小脑神经细胞取兔小脑横切标本（硝酸银染色）置于显微镜下，低倍镜下观察可见有许多突起的小脑神经细胞；油镜下可观察见胞体被染成黒褐色，形态多样（枣核形、三角形）、突起长短不一，有些细胞内可看到被染成棕黄色的、大而圆的细胞核。
2.上皮细胞取蟾蜍皮横切片（HE染色）置于显微镜下，低倍镜下观察可见蟾蜍上皮是由排列紧密的多边形扁平细胞和多边形柱状细胞组成；油镜下观察可见颜色较浅的细胞外界，细胞核位于细胞的中央，呈圆形，被染成蓝紫色。在上皮细胞下方可见被染成粉红色的结缔组织和肌细胞。
3.平滑肌细胞取狗动脉切片（HE染色）置于显微镜下，低倍镜下观察可以看到许多被染成粉色的平滑肌纤维，平滑肌纤维是梭形的细胞，平滑肌细胞彼此镶嵌排列，细胞界限不明显，被染成蓝紫色的椭圆形的细胞核位于细胞的中央。
4.人精子细胞涂片取人精子细胞涂片（铁苏木素染色）置于显微镜下，低倍镜下观察可见许多细小的被染成黑灰色的人成熟精子细胞；高倍镜下观察可见精子细胞呈“蝌蚪形”，每个精子细胞都具有细长的尾丝。
5.蟾蜍红细胞取蟾蜍血细胞涂片（HE染色）置于显微镜下，低倍镜下观察可见蟾蜍红细胞为椭圆形，呈浅粉红色，细胞核位于中央，圆形或椭圆形，呈蓝紫色，高倍镜下观察隐约可见核仁。
（五）取用各种试剂，要用及时盖上瓶盖。按献宝取出所需之药品或溶液后，不得将原液倒回瓶内。滴管、玻棒、吸管不可混用。
（六）实验中如有丢失、损坏仪器设备及用具，及时登记并报告，凡违反操作规程造成不应有的损失者，视其情节轻重，态度好坏，按有关规定处理。
（七）本实验室欢迎各位实验者对每一实验本身提出新的看法与做法，至于能否采用，视具体情况而定。任何人未经老师许可，不得自作主张，改动任何实验步骤与操作方法。
细胞生物学
为获得较好的实验结果，避免发生差错与意外事故，特制定以下规则与要求，希望实验者能严格遵守。
（一）显微镜的使用及保护
1显微镜是细胞生物学实验的主要观察工具，使用时必须注意保持外观整洁、防湿、防高温、防药品侵蚀，使用时勿使染液或其它溶液沾污镜头，一旦沾污，及时用擦镜纸蘸上镜头清洗液（无水乙醚：无水乙醇＝7：3）轻轻擦拭干净。