SPF级鸡胚成纤维细胞(CEF)的制备

SPF级鸡胚成纤维细胞（CEF）的制备

1，鸡胚应将气室放置在顶部，用镊子将鸡胚打破，撕去表皮，取出鸡胚，挑取脖子部位，放在呈有Hanks培养基的平皿中，去

掉头和内脏

2，用剪刀剪组织块，组织块＜5mm，2-3min，时间太短剪不开，时间太长会形成很多死细胞。15ml Hanks冲洗吸取组织，沉降

5min后小心倒掉上层液体。

3，加入10ml胰酶/10只鸡胚，37度消化20min，

4，加入20ml MEM完全培养基，反复吹洗50次，加入100ml三角瓶，放置5min沉降，等待中处理纱布，用Hanks润湿纱布，过滤，用完全培养基冲洗纱布，计数，铺板子，浓度为T150

培养瓶=4*107,，六孔板=3*106/孔